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1、知識點17 生物技術(shù)實踐
1.(2018·江蘇高考·T14)下列關(guān)于酵母細胞固定化實驗的敘述,正確的是 ( )
A.用溫水使海藻酸鈉迅速溶解,待其冷卻到室溫后用于包埋細胞
B.進行包埋時,用于懸浮細胞的CaCl2溶液濃度要適宜
C.注射器(或滴管)出口應盡量貼近液面以保證凝膠珠成為球狀
D.包埋酵母細胞的凝膠珠為淡黃色半透明狀,并具有一定的彈性
【解析】選D。溶解海藻酸鈉應將其加入水中,用酒精燈加熱,邊加熱邊攪拌,直至完全溶化,A項錯誤;進行包埋時,對凝膠珠進行處理的CaCl2溶液需要適宜的濃度,而不是用于懸浮細胞,B項錯誤;在制備凝膠珠時,注射器(或滴管)出口應與液面有一定的距
2、離,以保證凝膠珠成為球狀,C項錯誤。包埋酵母細胞的凝膠珠為淡黃色半透明狀,并有一定的彈性,D項正確。
2.(2018·江蘇高考·T16)某高校采用如圖所示的發(fā)酵罐進行葡萄酒主發(fā)酵過程的研究,下列敘述錯誤的是 ( )
A.夏季生產(chǎn)果酒時,常需對罐體進行降溫處理
B.乙醇為揮發(fā)性物質(zhì),故發(fā)酵過程中空氣的進氣量不宜太大
C.正常發(fā)酵過程中罐內(nèi)的壓力不會低于大氣壓
D.可以通過監(jiān)測發(fā)酵過程中殘余糖的濃度來決定何時終止發(fā)酵
【解析】選B。果酒發(fā)酵過程中會放出熱量使罐體溫度上升,故需對發(fā)酵罐進行降溫處理,A項正確;乙醇雖然為揮發(fā)性物質(zhì),但其能溶于水,而且酒精發(fā)酵為無氧呼吸,發(fā)酵過程中不需
3、進氣,B項錯誤;發(fā)酵過程中有CO2產(chǎn)生,所以罐內(nèi)壓力不會低于大氣壓,C項正確;發(fā)酵程度可以通過監(jiān)測發(fā)酵液中殘余糖的濃度來確定,D項正確。
3.(2018·江蘇高考·T21)下列關(guān)于加酶洗衣粉的敘述,錯誤的是(多選) ( )
A.洗衣粉中添加的酶通常是由微生物發(fā)酵生產(chǎn)而來
B.洗衣粉中的蛋白酶通常會將添加的其他酶迅速分解
C.在50 ℃熱水中用加酶洗衣粉洗衣時,其中的酶會迅速失活
D.加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存,不會影響其中酶的活性
【解析】選B、C、D。加酶洗衣粉中添加的酶通常是通過基因工程由微生物發(fā)酵生產(chǎn)而來,A項正確;洗衣粉中添加的酶通常是由特殊的化學物質(zhì)包裹,蛋白酶不會分
4、解其他酶,B項錯誤;加酶洗衣粉中的酶的最適溫度通常在50 ℃左右,所以在50 ℃的熱水中使用,酶不會迅速失活,C項錯誤;加酶洗衣粉要求保存在干燥、陰暗環(huán)境中,如果受潮后再晾干,其中的酶活性會下降,D項錯誤。
4.(2018·全國卷Ⅰ·T37)將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時間,過濾得到馬鈴薯浸出液,在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養(yǎng)基。
回答下列問題:
(1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選,則培養(yǎng)基中應加入鏈霉素以抑制__________的生長,加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。?
(2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì),營養(yǎng)
5、物質(zhì)類型除氮源外還有__________________________________(答出兩點即可),氮源進入細胞后,可參與合成的生物大分子有__________________________________(答出兩點即可)。?
(3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培養(yǎng)。平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是________________。該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是__?____________________。?
(4)甲、乙兩位同學用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果:
甲同學涂
6、布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133。
乙同學涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。
有人認為這兩位同學的結(jié)果中,乙同學的結(jié)果可信度低,其原因是_________。?
【解析】本題考查物質(zhì)的合成、淀粉的鑒定及微生物的培養(yǎng)和計數(shù)。
(1)鏈霉素屬于抗生素,作用是抑制細菌的生長??梢酝ㄟ^加入鏈霉素篩選出抗鏈霉素的細菌,屬于選擇培養(yǎng)基。
(2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì),營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有碳源、無機鹽、有機鹽、生長因子等,氮源進入細胞后,可參與合成的生物大分子有蛋白質(zhì)、核酸。
(3)淀粉
7、遇碘變藍,所以應加入的顯色劑是碘液。該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是淀粉遇碘液顯藍色,產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解,形成透明圈。
(4)正確稀釋涂布平板,平板上的菌落數(shù)應為30~300。而乙同學的結(jié)果中,1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊,結(jié)果的重復性差。
答案:(1)細菌 選擇 (2)碳源、無機鹽 蛋白質(zhì)、核酸
(3)碘液 淀粉遇碘液顯藍色,產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解,形成透明圈
(4)乙同學的結(jié)果中,1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊,結(jié)果的重復性差
5.(2018·全國卷Ⅱ·T37)[生物——選修1:生物技術(shù)實踐]
在生產(chǎn)、生活和科研實踐中,經(jīng)常通過消毒和滅菌來避免雜
8、菌的污染。
回答下列問題:
(1)在實驗室中,玻璃和金屬材質(zhì)的實驗器具__________(填“可以”或“不可以”)放入干熱滅菌箱中進行干熱滅菌。?
(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點是____________________________________________________。?
(3)密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒,其原因是紫外線能__________。在照射前,適量噴灑____________________________,可強化消毒效果。?
(4)水廠供應的自來水通常是經(jīng)過_________________
9、_(填“氯氣”“乙醇”或“高錳酸鉀”)消毒的。?
(5)某同學在使用高壓蒸汽滅菌鍋時,若壓力達到設定要求,而鍋內(nèi)并沒有達到相應溫度,最可能的原因是__________________________________________。?
【解析】(1)玻璃和金屬材質(zhì)的實驗器具可以通過干熱滅菌的方法來滅菌。
(2)巴氏消毒法是在70~75 ℃煮30 min或在80 ℃下煮15 min,可以殺死牛奶中的微生物,并使牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞;高溫瞬時消毒是在較短的時間內(nèi)利用高溫殺死微生物,由于時間較短,營養(yǎng)物質(zhì)損失較少。
(3)紫外線有消毒、滅菌的作用,在照射前,適量噴灑消毒液,可以強化消毒效果
10、。
(4)自來水消毒通常采用“氯氣”或“紫外線”等方法。
(5)使用高壓蒸汽滅菌鍋時,若壓力達到設定要求,但沒有達到相應溫度,最可能的原因是鍋內(nèi)冷空氣沒有排盡。
答案:(1)可以
(2)在達到消毒目的的同時,營養(yǎng)物質(zhì)損失較少
(3)破壞DNA結(jié)構(gòu) 消毒液
(4)氯氣 (5)未將鍋內(nèi)冷空氣排盡
6.(2018·全國卷Ⅲ·T37)回答下列與酵母菌有關(guān)的問題:
(1)分離培養(yǎng)酵母菌通常使用__________(填“牛肉膏蛋白胨”“MS”或“麥芽汁瓊脂”)培養(yǎng)基,該培養(yǎng)基應采用__________滅菌法滅菌。若將酵母菌劃線接種在平板上,培養(yǎng)一段時間后可觀察到菌落,菌落的含義是_____
11、_______。?
(2)酵母菌液體培養(yǎng)時,若通入氧氣,可促進________(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”);若進行厭氧培養(yǎng),可促進________(填“菌體快速增殖”“乙醇產(chǎn)生”或“乳酸產(chǎn)生”)。?
(3)制作面包時,為使面包松軟通常要在面粉中添加一定量的酵母菌,酵母菌引起面包松軟的原因是____________________________________。?
【解析】(1)麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基含糖量高,更適合酵母菌培養(yǎng);該培養(yǎng)基應采用高壓蒸汽滅菌法滅菌;若將酵母菌劃線接種在平板上,培養(yǎng)一段時間后可觀察到由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體,這就是菌落。
(2)
12、酵母菌液體培養(yǎng)時,若通入氧氣,進行有氧呼吸產(chǎn)生H2O和CO2,釋放能量多,菌體增殖快;若進行厭氧培養(yǎng),進行無氧呼吸,產(chǎn)生乙醇和CO2,釋放能量少,菌體增殖慢。
(3)制作面包時,在面粉中添加一定量的酵母菌,因酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖,產(chǎn)生CO2,CO2是氣體,遇熱膨脹而形成小孔,使得面包松軟多孔。
答案:(1)麥芽汁瓊脂 高壓蒸汽 由一個細胞繁殖而來的肉眼可見的子細胞群體 (2)菌體快速增殖 乙醇產(chǎn)生
(3)酵母菌分解葡萄糖會產(chǎn)生CO2,CO2使面包松軟
7.(2018·江蘇高考·T31)酵母的蛋白質(zhì)含量可達自身干重的一半,可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以利用工業(yè)廢甲醇作為碳源進
13、行培養(yǎng),這樣既可減少污染又可降低生產(chǎn)成本。研究人員擬從土壤樣品中分離該類酵母,并進行大量培養(yǎng)。如圖所示為操作流程,請回答下列問題:
(1)配制培養(yǎng)基時,按照培養(yǎng)基配方準確稱量各組分,將其溶解、定容后,調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的________,及時對培養(yǎng)基進行分裝,并進行________滅菌。?
(2)取步驟②中不同梯度的稀釋液加入標記好的無菌培養(yǎng)皿中,在步驟③中將溫度約________(在25 ℃、50 ℃或80 ℃中選擇)的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿混勻,冷凝后倒置培養(yǎng)。?
(3)挑取分離平板中長出的單菌落,按步驟④所示進行劃線。下列敘述合理的有________。?
a.為保證無菌操作,接種針、接種環(huán)
14、使用前都必須滅菌
b.劃線時應避免劃破培養(yǎng)基表面,以免不能形成正常菌落
c.挑取菌落時,應挑取多個菌落,分別測定酵母細胞中甲醇的含量
d.可以通過逐步提高培養(yǎng)基中甲醇的濃度,獲得甲醇高耐受株
(4)步驟⑤中,為使酵母數(shù)量迅速增加,培養(yǎng)過程中需保證充足的營養(yǎng)和________供應。為監(jiān)測酵母的活細胞密度,將發(fā)酵液稀釋1 000倍后,經(jīng)等體積臺盼藍染液染色,用25×16型血細胞計數(shù)板計數(shù)5個中格中的細胞數(shù),理論上________色細胞的個數(shù)應不少于____________,才能達到每毫升3×109個活細胞的預期密度。?
【解析】(1)不同種微生物生長所需的最適pH不同,所以,配制培養(yǎng)基時
15、,溶化后需調(diào)pH。分裝到試管中的培養(yǎng)基需進行高壓蒸汽滅菌。
(2)倒平板時,錐形瓶中的培養(yǎng)基溫度控制在50 ℃左右較適宜,溫度太低會凝固,太高會燙手。
(3)挑取分離平板中長出的單菌落用于平板劃線時需注意題干中a、b、d所敘述的要點,為了獲得專一酵母,只挑取效果最好的菌落就行,不需挑取多個菌落。
(4)酵母在有氧條件下繁殖快,所以除了營養(yǎng)物質(zhì)外,還需提供充足的氧氣。對于死酵母通常用臺盼藍進行染色,活酵母不會被染色。設5個中格中應有m個,據(jù)題意可得到等式:m×5×104×103=3×109,m=60個。但由于用等體積的臺盼藍染液進行了染色,也被染液稀釋了一倍,所以無色酵母數(shù)應不低于30個。
答案:(1)pH 高壓蒸汽(濕熱) (2)50 ℃
(3)a、b、d (4)氧氣 無 30
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