三年高考(2017-2019)高考生物真題分項(xiàng)匯編 專題15 現(xiàn)代生物科技專題(含解析)

上傳人:Sc****h 文檔編號(hào):105073142 上傳時(shí)間:2022-06-11 格式:DOC 頁(yè)數(shù):29 大小:2.50MB
收藏 版權(quán)申訴 舉報(bào) 下載
三年高考(2017-2019)高考生物真題分項(xiàng)匯編 專題15 現(xiàn)代生物科技專題(含解析)_第1頁(yè)
第1頁(yè) / 共29頁(yè)
三年高考(2017-2019)高考生物真題分項(xiàng)匯編 專題15 現(xiàn)代生物科技專題(含解析)_第2頁(yè)
第2頁(yè) / 共29頁(yè)
三年高考(2017-2019)高考生物真題分項(xiàng)匯編 專題15 現(xiàn)代生物科技專題(含解析)_第3頁(yè)
第3頁(yè) / 共29頁(yè)

下載文檔到電腦,查找使用更方便

26 積分

下載資源

還剩頁(yè)未讀,繼續(xù)閱讀

資源描述:

《三年高考(2017-2019)高考生物真題分項(xiàng)匯編 專題15 現(xiàn)代生物科技專題(含解析)》由會(huì)員分享,可在線閱讀,更多相關(guān)《三年高考(2017-2019)高考生物真題分項(xiàng)匯編 專題15 現(xiàn)代生物科技專題(含解析)(29頁(yè)珍藏版)》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。

1、專題15 現(xiàn)代生物科技專題 1.(2019北京卷·4)甲、乙是嚴(yán)重危害某二倍體觀賞植物的病害。研究者先分別獲得抗甲、乙的轉(zhuǎn)基因植株。再將二者雜交后得到F1,結(jié)合單倍體育種技術(shù),培育出同時(shí)抗甲、乙的植物新品種,以下對(duì)相關(guān)操作及結(jié)果的敘述,錯(cuò)誤的是 A.將含有目的基因和標(biāo)記基因的載體導(dǎo)入受體細(xì)胞 B.通過接種病原體對(duì)轉(zhuǎn)基因的植株進(jìn)行抗病性鑒定 C.調(diào)整培養(yǎng)基中植物激素比例獲得F1花粉再生植株 D.經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的若干再生植株均為二倍體 【答案】D 【解析】 【分析】由題意可知,同時(shí)抗甲、乙的植物新品種的培養(yǎng)過程為:把含抗甲的目的基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞,獲得抗甲植株,同時(shí)把

2、含抗乙的目的基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞,獲得抗乙植株,通過雜交獲得F1(二倍體植株),取F1的花粉經(jīng)花藥離體培養(yǎng)獲得單倍體植株,用秋水仙素處理單倍體植株獲得純合的同時(shí)抗甲、乙的植物新品種(二倍體)。 【詳解】要獲得轉(zhuǎn)基因的抗甲或抗乙植株,需要構(gòu)建基因表達(dá)載體(含目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn)),再把基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞中,A正確;對(duì)轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行檢測(cè)時(shí),可以通過抗病接種實(shí)驗(yàn)進(jìn)行個(gè)體水平的檢測(cè),B正確;對(duì)F1的花粉進(jìn)行組織培養(yǎng)時(shí),需要經(jīng)過脫分化和再分化過程,其中生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素比例高時(shí)利于根的分化,比例低時(shí)利于芽的分化,C正確;經(jīng)花粉離體培養(yǎng)獲得的植株是單倍體,D錯(cuò)誤。因此

3、,本題答案選D。 2.(2019江蘇卷·16)下列生物技術(shù)操作對(duì)遺傳物質(zhì)的改造,不會(huì)遺傳給子代的是 A.將胰島素基因表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌,篩選獲得基因工程菌 B.將花青素代謝基因?qū)胫参矬w細(xì)胞,經(jīng)組培獲得花色變異植株 C.將腸乳糖酶基因?qū)肽膛J芫?,培育出產(chǎn)低乳糖牛乳的奶牛 D.將腺苷酸脫氨酶基因轉(zhuǎn)入淋巴細(xì)胞后回輸患者,進(jìn)行基因治療 【答案】D 【解析】 【分析】轉(zhuǎn)基因技術(shù)的原理是基因重組。基因重組和基因突變、染色體變異均屬于可遺傳的變異。 基因治療:指把正常基因?qū)氩∪梭w內(nèi),使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能,從而達(dá)到治療疾病的目的,這是治療遺傳病的最有效的手段。 【詳解】將含

4、胰島素基因表達(dá)載體的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入大腸桿菌獲得的轉(zhuǎn)基因菌,可以通過二分裂將胰島素基因傳給后代,A不符合題意;將花青素代謝基因?qū)胫参矬w細(xì)胞,再經(jīng)植物組織培養(yǎng)獲得的植株所有細(xì)胞均含有花青素代謝基因,花青素代謝基因會(huì)隨該植物傳給后代,B不符合題意;將腸乳糖酶基因?qū)肽膛J芫?,培育出產(chǎn)低乳糖牛乳的奶牛所有細(xì)胞均含有腸乳糖酶基因,可以遺傳給后代,C不符合題意;該患者進(jìn)行基因治療時(shí),只有淋巴細(xì)胞含有該腺苷酸脫氨酶基因,性原細(xì)胞不含該基因,故不能遺傳給后代,D符合題意。 3.(2019江蘇卷·23)下圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT-),在HAT篩選培養(yǎng)液中

5、不能正常合成DNA,無法生長(zhǎng)。下列敘述正確的是 A.可用滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合 B.兩兩融合的細(xì)胞都能在HAT培養(yǎng)液中生長(zhǎng) C.雜交瘤細(xì)胞需進(jìn)一步篩選才能用于生產(chǎn) D.細(xì)胞膜的流動(dòng)性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ) 【答案】ACD 【解析】 【分析】(1)動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞的增殖,誘導(dǎo)手段有電激、聚乙二醇、滅活的病毒等,結(jié)果產(chǎn)生雜交細(xì)胞,主要用于制備單克隆抗體。 (2)單克隆抗體制備的原理包括:①免疫理:B淋巴細(xì)胞能產(chǎn)生特異性抗體;②細(xì)胞融合原理:利用病毒對(duì)宿主細(xì)胞的穿透性使B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合;③動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù):對(duì)雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行體內(nèi)、體外培養(yǎng)。 (3)

6、制備單克隆抗體過程中的幾種細(xì)胞:①免疫B細(xì)胞(漿細(xì)胞):能產(chǎn)生單一抗體,但不能無限增殖;②骨髓瘤細(xì)胞:能無限增殖,但不能產(chǎn)生抗體;③雜交瘤細(xì)胞:既能產(chǎn)生單一抗體,又能在體外培養(yǎng)條件下無限增殖。 【詳解】誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法有電激、聚乙二醇、滅活的病毒(如滅活的仙臺(tái)病毒)等,A正確; 兩兩融合的細(xì)胞包括免疫B細(xì)胞與免疫B細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的具有同種核的細(xì)胞、免疫B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞,骨髓瘤細(xì)胞雖然能無限增殖,但缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,免疫B細(xì)胞雖然有次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,但不具有無限增殖的本領(lǐng),所以在HAT篩選培養(yǎng)液中,兩兩融合的具有

7、同種核的細(xì)胞都無法生長(zhǎng),只有雜交瘤細(xì)胞才能生長(zhǎng),B錯(cuò)誤;因每個(gè)免疫B細(xì)胞只分泌一種特異性抗體,因此在HAT篩選培養(yǎng)液中篩選出來的眾多的雜交瘤細(xì)胞所分泌的抗體,不一定都是人類所需要的,還需要進(jìn)一步把能分泌人類所需要抗體的雜交瘤細(xì)胞篩選出來,C正確;動(dòng)物細(xì)胞融合是以細(xì)胞膜的流動(dòng)性為基礎(chǔ)的,D正確。 4.(2018江蘇卷·10)下列關(guān)于采用胚胎工程技術(shù)實(shí)現(xiàn)某良種肉用牛快速繁殖的敘述,正確的是( ?。? A.采取激素注射等方法對(duì)良種母牛作超數(shù)排卵處理 B.體外培養(yǎng)發(fā)育到原腸胚期的胚胎即可進(jìn)行移植 C.使用免疫抑制劑以避免代孕牛對(duì)植入胚胎的排斥反應(yīng) D.利用胚胎分割技術(shù),同卵多胎較同卵雙胎成功率

8、更高 【答案】A 【解析】用促性腺激素對(duì)良種奶牛進(jìn)行注射處理,可促使其超數(shù)排卵,A正確;進(jìn)行移植的胚胎是桑椹胚或囊胚,B錯(cuò)誤;受體對(duì)移植的胚胎幾乎不發(fā)生免疫排斥反應(yīng),因此無需使用免疫抑制劑,C錯(cuò)誤;利用胚胎分割技術(shù),同卵雙胎較同卵多胎成功率更高,D錯(cuò)誤。 5.(2018北京卷·5)用XhoI和SalI兩種限制性核酸內(nèi)切酶分別處理同一DNA片段,酶切位點(diǎn)及酶切產(chǎn)物分離結(jié)果如圖。以下敘述不正確的是 A.如圖中兩種酶識(shí)別的核苷酸序列不同 B.如圖中酶切產(chǎn)物可用于構(gòu)建重組DNA C.泳道①中是用SalI處理得到的酶切產(chǎn)物 D.圖中被酶切的DNA片段是單鏈DNA 【答案】D 【解析

9、】限制酶識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列,不同的限制酶能識(shí)別不同的核苷酸序列,由電泳圖可知XhoI和SalI兩種酶分別切割時(shí),識(shí)別的序列不同,A正確;同種限制酶切割出的DNA片段,具有相同的粘性末端,再用DNA連接酶進(jìn)行連接,可以構(gòu)成重組DNA,B正確;SalI將DNA片段切成4段,XhoI將DNA片段切成3段,根據(jù)電泳結(jié)果可知泳道①為SalI,泳道②為XhoI,C正確;限制酶切割雙鏈DNA,酶切后的DNA片段仍然是雙鏈DNA,D錯(cuò)誤。 6.(2018江蘇卷·22)如圖為細(xì)胞融合的示意圖,下列敘述正確的是 A.若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞,需先去分化再誘導(dǎo)融合 B.a(chǎn)細(xì)胞和b細(xì)胞之間的融合需要

10、促融處理后才能實(shí)現(xiàn) C.c細(xì)胞的形成與a、b細(xì)胞膜的流動(dòng)性都有關(guān) D.c細(xì)胞將同時(shí)表達(dá)a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因 【答案】BC 【解析】若a細(xì)胞和b細(xì)胞是植物細(xì)胞,應(yīng)該先用酶解法去掉它們的細(xì)胞壁再誘導(dǎo)融合,A錯(cuò)誤;無論是動(dòng)物細(xì)胞還是植物細(xì)胞,兩個(gè)細(xì)胞的融合都需要促融處理后才能實(shí)現(xiàn),B正確;兩個(gè)細(xì)胞融合成一個(gè)細(xì)胞,利用了細(xì)胞膜的流動(dòng)性,C正確;c細(xì)胞同時(shí)具備了a細(xì)胞和b細(xì)胞中的所有基因,但是基因是選擇性表達(dá)的,因此c細(xì)胞中基因不一定都能夠表達(dá),D錯(cuò)誤。 7.(2017江蘇卷·11)牛雄性胚胎中存在特異性H-Y 抗原,可在牛早期胚胎培養(yǎng)液中添加H-Y 單克隆抗體,篩選胚胎進(jìn)行移植,以利用

11、乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥。下列相關(guān)敘述正確的是 A.H-Y 單克隆抗體由骨髓瘤細(xì)胞分泌 B.應(yīng)選用原腸胚做雌雄鑒別 C.鑒別后的雄性胚胎可直接做胚胎移植 D.用H-Y 抗原免疫母??色@得相應(yīng)抗體 【答案】D 【解析】單克隆抗體由雜交瘤細(xì)胞分泌,A錯(cuò)誤;做雌雄性別鑒別應(yīng)選擇囊胚期的滋養(yǎng)層細(xì)胞,B錯(cuò)誤;由于是利用乳腺生物反應(yīng)器進(jìn)行生物制藥,則鑒別后的雌性胚胎可直接做胚胎移植,雄性胚胎沒有意義,C錯(cuò)誤;H-Y抗原免疫母牛,使其體內(nèi)產(chǎn)生體液免疫,產(chǎn)生相應(yīng)的漿細(xì)胞,獲得相應(yīng)抗體,D正確。 【考點(diǎn)定位】單克隆抗體,雜交瘤細(xì)胞,體液免疫,乳腺生物反應(yīng)器。 【名師點(diǎn)睛】本題主要考查單

12、克隆抗體的制備,要求學(xué)生理解單克隆抗體制備的過程,理解乳腺生物反應(yīng)器的操作過程。 8.(2017江蘇卷·14)下列關(guān)于小鼠體外受精及胚胎發(fā)育的敘述,錯(cuò)誤的是 A.精子在獲能液中于37℃、5% CO2 條件下培養(yǎng)的目的是使精子獲能 B.小鼠在特定光控周期條件下飼養(yǎng),注射相關(guān)激素有促進(jìn)超數(shù)排卵的作用 C.分割的胚胎細(xì)胞有相同的遺傳物質(zhì),因此發(fā)育成的個(gè)體沒有形態(tài)學(xué)差異 D.注射到囊胚腔中的胚胎干細(xì)胞可以參與個(gè)體器官的發(fā)育 【答案】C 【解析】精子在獲能液中于37 ℃、5%CO2條件下培養(yǎng),可使精子獲能,A正確;給小鼠注射促性腺激素可促進(jìn)其超數(shù)排卵,B正確;分割的胚胎細(xì)胞具有相同的遺傳物

13、質(zhì),但發(fā)育過程中基因突變或環(huán)境因素影響等,最終發(fā)育成的個(gè)體可能會(huì)有形態(tài)學(xué)差異,C錯(cuò)誤;胚胎干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性,能分化成各種組織器官,D正確。 【考點(diǎn)定位】體外受精,胚胎發(fā)育。 【名師點(diǎn)睛】本題主要考查體外受精和胚胎發(fā)育的相關(guān)知識(shí),要求學(xué)生理解精子獲能和超數(shù)排卵、胚胎干細(xì)胞的功能特點(diǎn),難度中等。 9.(2017北京卷·5)為了增加菊花花色類型,研究者從其他植物中克隆出花色基因C(圖1),擬將其與質(zhì)粒(圖2)重組,再借助農(nóng)桿菌導(dǎo)入菊花中。 下列操作與實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟环氖? A.用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI和連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒 B.用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織,將C基因?qū)爰?xì)胞

14、 C.在培養(yǎng)基中添加卡那霉素,篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞 D.用分子雜交方法檢測(cè)C基因是否整合到菊花染色體上 【答案】C 【解析】用限制性核酸內(nèi)切酶EcoRI處理目的基因和質(zhì)粒,可以使目的基因兩側(cè)和質(zhì)粒產(chǎn)生相同的黏性末端,再用連接酶把切口連起來就能構(gòu)建成重組質(zhì)粒,A正確;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法適用于雙子葉植物或裸子植物,菊花屬于雙子葉植物,故可用含C基因的農(nóng)桿菌侵染菊花愈傷組織,將C基因?qū)爰?xì)胞,B正確;質(zhì)粒中只有潮霉素抗性基因,被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞只對(duì)潮霉素具有抗性,在培養(yǎng)基中添加卡那霉素,不能篩選被轉(zhuǎn)化的菊花細(xì)胞,C錯(cuò)誤;檢測(cè)目的基因是否整合到受體細(xì)胞的染色體上,可采用DNA分子雜交技術(shù),D正確。 【

15、考點(diǎn)定位】基因工程 【名師點(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí),掌握基因工程操作流程及各個(gè)操作依據(jù)的原理是正確解答該題的關(guān)鍵。 10.(2019全國(guó)卷Ⅰ·38) 基因工程中可以通過PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因?;卮鹣铝袉栴}。 (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得?;蛭膸?kù)包括________和________。 (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí),解開DNA雙鏈的酶是________。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是________。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的________。 (3)目前在

16、PCR反應(yīng)中使用Taq酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要原因是________。 【答案】(1)基因組文庫(kù) cDNA文庫(kù) (2)解旋酶 加熱至90~95 ℃ 氫鍵 (3)Taq酶熱穩(wěn)定性高,而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會(huì)失活 【解析】 【分析】基因工程的操作步驟:目的基因的獲?。ɑ蛭膸?kù)獲取、PCR、人工合成);構(gòu)建基因表達(dá)載體(含目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子、復(fù)制原點(diǎn));把目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞(顯微注射法、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、鈣離子處理法);目的基因的檢測(cè)和鑒定(分子水平—DNA分子雜交法、分子雜交法、抗原抗體雜交法和個(gè)體水平—抗蟲、抗病接種實(shí)驗(yàn)等)。 【詳

17、解】(1)基因文庫(kù)包括基因組文庫(kù)和部分基因文庫(kù)(CDNA文庫(kù)),前者包括一種生物的全部基因,后者只包括一種生物的部分基因。 (2)體內(nèi)進(jìn)行DNA復(fù)制時(shí),需要解旋酶和DNA聚合酶,解旋酶可以打開雙鏈之間的氫鍵, DNA聚合酶可以催化磷酸二酯鍵的形成。在體外進(jìn)行PCR擴(kuò)增時(shí),利用高溫變性即加熱至90-95℃,破壞雙鏈之間的氫鍵,使DNA成為單鏈。解旋酶和高溫處理都破壞了DNA雙鏈中堿基對(duì)之間的氫鍵。 (3)由于在PCR過程中,需要不斷的改變溫度,該過程中涉及較高溫度處理變性,大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)的DNA聚合酶在高溫處理下會(huì)變性失活,因此PCR過程中需要用耐高溫的Taq DNA聚合酶催化。 【點(diǎn)睛】

18、PCR的原理是DNA雙鏈的復(fù)制,故類似于細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程,需要模板、原料等條件。由于該過程中特殊的高溫條件,需要用耐高溫的DNA聚合酶。 11.(2019全國(guó)卷II·38)植物組織培養(yǎng)技術(shù)在科學(xué)研究和生產(chǎn)實(shí)踐中得到了廣泛的應(yīng)用?;卮鹣铝袉栴}。 (1)植物微型繁殖是植物繁殖的一種途徑。與常規(guī)的種子繁殖方法相比,這種微型繁殖技術(shù)的特點(diǎn)有______________________(答出2點(diǎn)即可)。 (2)通過組織培養(yǎng)技術(shù),可把植物組織細(xì)胞培養(yǎng)成胚狀體,再通過人工種皮(人工薄膜)包裝得到人工種子(如圖所示),這種人工種子在適宜條件下可萌發(fā)生長(zhǎng)。人工種皮具備透氣性的作用是_______

19、________________________。人工胚乳能夠?yàn)榕郀铙w生長(zhǎng)提供所需的物質(zhì),因此應(yīng)含有植物激素、___________和___________等幾類物質(zhì) (3)用脫毒苗進(jìn)行繁殖,可以減少作物感染病毒。為了獲得脫毒苗,可以選取植物的___________進(jìn)行組織培養(yǎng)。 (4)植物組織培養(yǎng)技術(shù)可與基因工程技術(shù)相結(jié)合獲得轉(zhuǎn)基因植株。將含有目的基因的細(xì)胞培養(yǎng)成一個(gè)完整植株的基本程序是_________________________________________________(用流程圖表示)。 【答案】(1)能保持植物原有的遺傳特性,繁殖速度快 (2)有利于胚狀體進(jìn)行呼吸作用

20、 礦質(zhì)元素 糖 (3)莖尖 (4)含目的基因的細(xì)胞愈傷組織小植株 【解析】 【分析】植物組織培養(yǎng)的流程是:離體的植物器官、組織或細(xì)胞經(jīng)脫分化形成愈傷組織,經(jīng)再分化形成芽、根或胚狀體,進(jìn)而形成完整植株。植物組織培養(yǎng)技術(shù)在微型繁殖、制造人工種子、作物脫毒等方面具有廣泛的應(yīng)用。微型繁殖屬于無性生殖的范疇,能夠保持親本的優(yōu)良特性,實(shí)現(xiàn)種苗的快速大量繁殖。人工種子是以通過植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料,經(jīng)過人工薄膜包裝得到的種子,其中的如果胚乳可為“種子”的萌發(fā)提所需的供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。以無病毒或病毒極少的莖尖為材料進(jìn)行組織培養(yǎng)可獲得高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的無病毒植株。 【詳解】

21、(1)植物微型繁殖是指用于快速繁殖優(yōu)良品種的植物組織培養(yǎng)技術(shù),與常規(guī)的種子繁殖方法相比,這種微型繁殖技術(shù)的特點(diǎn)有:保持優(yōu)良品種的遺傳特性;高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖。 (2)人工種子的胚狀體在進(jìn)行細(xì)胞呼吸時(shí),需要從外界環(huán)境吸收O2,并將產(chǎn)生的CO2釋放到外界環(huán)境中,因此人工種皮具備透氣性的作用是:有利于胚狀體進(jìn)行呼吸作用,以保持胚狀體的活力。人工胚乳的作用是為胚狀體的發(fā)育提供營(yíng)養(yǎng),因此應(yīng)含有植物激素、礦質(zhì)元素、糖等物質(zhì)。 (3)植物分生區(qū)附近(如莖尖)的病毒極少,甚至無病毒,因此為了獲得脫毒苗,可以選取植物的莖尖進(jìn)行組織培養(yǎng)。 (4)將含有目的基因的植物細(xì)胞培養(yǎng)為一個(gè)完整的轉(zhuǎn)基因植物

22、,需借助植物組織培養(yǎng)技術(shù)才能實(shí)現(xiàn),其基本程序是:。 【點(diǎn)睛】解題的關(guān)鍵是識(shí)記并理解植物組織培養(yǎng)的過程和植物組織培養(yǎng)技術(shù)在微型繁殖、制造人工種子、作物脫毒等方面的實(shí)際應(yīng)用。在此基礎(chǔ)上,從題意中提取有效信息,進(jìn)而對(duì)各問題情境進(jìn)行分析解答。 12.(2019全國(guó)卷III·38)培養(yǎng)胡蘿卜根組織可獲得試管苗,獲得試管苗的過程如圖所示。 回答下列問題。 (1)利用胡蘿卜根段進(jìn)行組織培養(yǎng)可以形成試管苗。用分化的植物細(xì)胞可以培養(yǎng)成完整的植株,這是因?yàn)橹参锛?xì)胞具有__________。 (2)步驟③切取的組織塊中要帶有形成層,原因是____________。 (3)從步驟⑤到步驟⑥需要更換新的

23、培養(yǎng)基,其原因是____________。在新的培養(yǎng)基上愈傷組織通過細(xì)胞的____________過程,最終可形成試管苗。 (4)步驟⑥要進(jìn)行照光培養(yǎng),其作用是____________。 (5)經(jīng)組織培養(yǎng)得到的植株,一般可保持原品種的__________,這種繁殖方式屬于____________繁殖。 【答案】(1)全能性(或答:形成完整植株所需的全部基因) (2)形成層容易誘導(dǎo)形成愈傷組織 (3)誘導(dǎo)愈傷組織形成和誘導(dǎo)愈傷組織分化形成試管苗所需的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的比例不同 分化(或答:再分化) (4)誘導(dǎo)葉綠素的形成,使試管苗能夠進(jìn)行光合作用 (5)遺傳特性 無性

24、 【解析】 【分析】根據(jù)題干信息分析,培養(yǎng)胡蘿卜組織獲得試管苗的過程利用了植物組織培養(yǎng)技術(shù),該技術(shù)的原理是植物細(xì)胞的全能性;該過程中離體的組織塊脫分化形成愈傷組織,愈傷組織再分化形成胚狀體,最終培育成試管苗。 【詳解】(1)根據(jù)題意分析,用胡蘿卜的組織細(xì)胞可以培育成完整的植株,其原理是植物細(xì)胞的全能性。 (2)形成層細(xì)胞具有分裂能力,分化程度低,易形成愈傷組織,因此步驟③中切取胡蘿卜塊時(shí)強(qiáng)調(diào)要切取含有形成層的部分。 (3)步驟⑤為脫分化過程,步驟⑥為再分化過程,由于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗以及兩個(gè)過程需要激素的比例要求等有所不同,因此由步驟⑤到步驟⑥的過程需要更換新的培養(yǎng)基;愈傷組織形成試管苗

25、的過程為再分化。 (4)步驟⑥為再分化過程,需要進(jìn)行光照,以利于葉綠素的合成。 (5)植物組織培養(yǎng)技術(shù)屬于無性繁殖,獲得的后代可以保持親本的優(yōu)良性狀。 【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握植物組織培養(yǎng)的詳細(xì)過程及其原理,明確離體的組織需要經(jīng)過脫分化和再分化過程才能發(fā)育為完整的植株,并能夠?qū)Σ煌^程進(jìn)行合理的分析。 13.(2019北京卷·31)光合作用是地球上最重要的化學(xué)反應(yīng),發(fā)生在高等植物、激類和光合細(xì)菌中。 (1)地球上生命活動(dòng)所需的能量主要來源于光反應(yīng)吸收的____________,在碳(暗)反應(yīng)中,RuBP羧化酶(R酶)催化CO2與RuBP(C5)結(jié)合,生成2分子C3,影響該反應(yīng)的外

26、部因素,除光照條件外還包括_________________________(寫出兩個(gè));內(nèi)部因素包括_____________(寫出兩個(gè))。 (2)R酶由8個(gè)大亞基蛋白(L)和8個(gè)小亞基蛋白(S)組成。高等植物細(xì)胞中L由葉綠體基因編碼并在葉綠體中合成,S由細(xì)胞核基因編碼并在___________中由核糖體合成后進(jìn)入葉綠體,在葉綠體的___________中與L組裝成有功能的酶。 (3)研究發(fā)現(xiàn),原核生物藍(lán)藻(藍(lán)細(xì)菌)R酶的活性高于高等植物,有人設(shè)想通過基因工程技術(shù)將藍(lán)藻R酶的S、L基因轉(zhuǎn)入高等植物,以提高后者的光合作用效率。研究人員將藍(lán)藻S、L基因轉(zhuǎn)入某高等植物(甲)的葉綠體DNA中,同

27、時(shí)去除甲的L基因。轉(zhuǎn)基因植株能夠存活并生長(zhǎng)。檢測(cè)結(jié)果表明,轉(zhuǎn)基因植株中的R酶活性高于未轉(zhuǎn)基因的正常植株。 ①由上述實(shí)驗(yàn)?zāi)芊竦贸觥稗D(zhuǎn)基因植株中有活性的R酶是由藍(lán)藻的S、L組裝而成”的推測(cè)?請(qǐng)說明理由。 ②基于上述實(shí)驗(yàn),下列敘述中能夠體現(xiàn)生物統(tǒng)一性的選項(xiàng)包括____________。 a.藍(lán)藻與甲都以DNA作為遺傳物質(zhì) b.藍(lán)藻與甲都以R酶催化CO2的固定 c.藍(lán)藻R酶大亞基蛋白可在甲的葉綠體中合成 d.在藍(lán)藻與甲的葉肉細(xì)胞中R酶組裝的位置不同 【答案】(1)光能 溫度、CO2濃度 R酶活性、R酶含量、C5含量、pH(其中兩個(gè)) (2)細(xì)胞質(zhì) 基質(zhì) (3

28、)①不能,轉(zhuǎn)入藍(lán)藻S、L基因的同時(shí)沒有去除甲的S基因,無法排除轉(zhuǎn)基因植株R酶中的S是甲的S基因的表達(dá)產(chǎn)物的可能性。 ②a、b、c 【解析】 【分析】本題主要考查光合作用、基因工程及基因?qū)π誀畹目刂频挠嘘P(guān)知識(shí)。影響光合作用的外界因素主要有光照、溫度、水、無機(jī)鹽和CO2濃度等,內(nèi)部因素主要有色素的含量和種類、酶的含量及活性;要將新的基因轉(zhuǎn)入,首先得將“原配”基因從受體植株的細(xì)胞核和它的葉綠體基因組中給敲除掉。然后導(dǎo)入目的基因,等待它們將老片段“替換”掉了之后,用專門的培養(yǎng)基篩選出只含有這種葉綠體的細(xì)胞,再通過組織培養(yǎng)最終獲得R酶活性很高的轉(zhuǎn)基因植株。 【詳解】(1)地球上生物生命活動(dòng)所需的

29、能量來自有機(jī)物,有機(jī)物主要來自植物的光合作用,光合作用合成有機(jī)物需要光反應(yīng)吸收光能,轉(zhuǎn)化為ATP的化學(xué)能,然后ATP為暗反應(yīng)中C3的還原提供能量,合成糖類。在暗反應(yīng)中,RuBP 羧化酶(R酶)催化CO2與RuBP(C5)結(jié)合,生成2分子C3,這是光合作用的暗反應(yīng)的二氧化碳的固定。暗反應(yīng)的進(jìn)行需要相關(guān)酶的催化,二氧化碳做原料,需要光反應(yīng)提供[H]和ATP,光反應(yīng)需要色素、酶、水、光照等,故影響該反應(yīng)的外部因素有光照、溫度、CO2濃度、水、無機(jī)鹽等;內(nèi)部因素包括色素含量及種類、酶的含量及活性等。 (2)高等植物細(xì)胞中L由葉綠體基因編碼并在葉綠體中合成,S由細(xì)胞核基因通過轉(zhuǎn)錄成mRNA ,mRNA

30、 進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)基質(zhì),與核糖體結(jié)合,合成為S蛋白;因R酶是催化CO2與C5結(jié)合的,在葉綠體基質(zhì)中進(jìn)行,故S蛋白要進(jìn)入葉綠體,在葉綠體的基質(zhì)中與L組裝成有功能的酶。 (3)①據(jù)題設(shè)條件可知,將藍(lán)藻S、L基因轉(zhuǎn)入某高等植物(甲)的葉綠體DNA中,只去除甲的L基因,沒有去除甲的S基因。因此,轉(zhuǎn)基因植株仍包含甲植株的S基因,不能排除轉(zhuǎn)基因植株中R酶是由藍(lán)藻的L蛋白和甲的S蛋白共同組成。故由上述實(shí)驗(yàn)不能得出“轉(zhuǎn)基因植株中有活性的R酶是由藍(lán)藻的S、L組裝而成”的推測(cè)。 ②根據(jù)上述實(shí)驗(yàn),可以看出藍(lán)藻的基因能導(dǎo)入到甲的DNA中,說明藍(lán)藻和甲植株都以DNA為遺傳物質(zhì);藍(lán)藻中 R酶的活性高于高等植物,說明兩者都以

31、R酶催化CO2的固定;由于藍(lán)藻S、L基因均轉(zhuǎn)入甲的葉綠體DNA中,且去除了甲的L基因,結(jié)果轉(zhuǎn)基因植株合成了R酶,說明藍(lán)藻R酶大亞基蛋白L在甲的葉綠體中合成,以上體現(xiàn)了生物界的統(tǒng)一性。在藍(lán)藻中R酶組裝是在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì),甲的葉肉細(xì)胞組裝R酶是在葉綠體基質(zhì),則說明了不同生物之間具有差異性。因此,選abc。 【點(diǎn)睛】解答本題關(guān)鍵抓住“將藍(lán)藻S、L基因轉(zhuǎn)入某高等植物(甲)的葉綠體DNA中,同時(shí)去除甲的L基因?!边@一條件,得知甲的S基因還在,可以合成S蛋白,推知轉(zhuǎn)基因植株中有活性的R酶并不完全是由藍(lán)藻的S、L組裝而成。 14.(2019天津卷·9)B基因存在于水稻基因組中,其僅在體細(xì)胞(2n)和精子中正

32、常表達(dá),但在卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄。為研究B基因表達(dá)對(duì)卵細(xì)胞的影響,設(shè)計(jì)了如下實(shí)驗(yàn)。 據(jù)圖回答: (1)B基因在水稻卵細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄,推測(cè)其可能的原因是卵細(xì)胞中 (單選)。 A.含B基因的染色體缺失 B.DNA聚合酶失活 C.B基因發(fā)生基因突變 D.B基因的啟動(dòng)子無法啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄 (2)從水稻體細(xì)胞或 中提取總RNA,構(gòu)建 文庫(kù),進(jìn)而獲得B基因編碼蛋白的序列。將該序列與Luc基因(表達(dá)的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光)連接成融合基因(表達(dá)的蛋白質(zhì)能保留兩種蛋白質(zhì)各自的功能),然后構(gòu)建重組表達(dá)載體。

33、 (3) 在過程①、②轉(zhuǎn)化篩選時(shí),過程 中T-DNA整合到受體細(xì)胞染色體DNA上,過程 在培養(yǎng)基中應(yīng)加入卡那霉素。 (4) 獲得轉(zhuǎn)基因植株過程中,以下鑒定篩選方式正確的是 (多選)。 A.將隨機(jī)斷裂的B基因片段制備成探針進(jìn)行DNA分子雜交 B.以Luc基因?yàn)槟0逶O(shè)計(jì)探針進(jìn)行DNA分子雜交 C.以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計(jì)探針與從卵細(xì)胞提取的mRNA雜交 D.檢測(cè)加入熒光素的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光 (5)從轉(zhuǎn)基因植株未成熟種子中分離出胚,觀察到細(xì)胞內(nèi)僅含一個(gè)染色體組,判定該胚是由未受精的卵細(xì)胞發(fā)育形成的,而

34、一般情況下水稻卵細(xì)胞在未受精時(shí)不進(jìn)行發(fā)育,由此表明 。 【答案】(1)D (2)精子 cDNA (3)② ① (4)BCD (5)B基因表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚 【解析】 【分析】基因工程的基本操作程序: 1、目的基因的獲?。海?)目的基因是指: 編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。(2)獲取方法:①?gòu)幕蛭膸?kù)中獲??;②人工合成(反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法);③PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因。 2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建:(1)目的:使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳至下一代,使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。(2)組成:目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因

35、。①啟動(dòng)子:是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終獲得所需的蛋白質(zhì)。②終止子:也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段,位于基因的尾端。③標(biāo)記基因的作用:是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因,從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。常用的標(biāo)記基因是抗生素基因。(3)基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程: 3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:(1)轉(zhuǎn)化的概念:是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。(2)常用的轉(zhuǎn)化方法:常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、顯微注射技術(shù)、Ca2+處理法。(3)重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后,篩選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依據(jù)

36、是標(biāo)記基因是否表達(dá)。 4、目的基因的檢測(cè)和表達(dá):(1)首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因,方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。(2)其次還要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA,方法是用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交。(3)最后檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原--抗體雜交。(4)有時(shí)還需進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定。如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀。 【詳解】(1)通過題干信息可知,B基因可以在體細(xì)胞和精子中,說明含B基因的染色體未缺失,也沒有發(fā)生基因突變,AC錯(cuò)誤;基因表達(dá)過程中的轉(zhuǎn)錄需要RNA聚合酶,不是DNA聚合酶,B錯(cuò)誤;B

37、基因在卵細(xì)胞中不能轉(zhuǎn)錄,可能是B基因的啟動(dòng)子在卵細(xì)胞中不能啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄,D正確;故選D。 (2)通過題干信息可知,水稻的體細(xì)胞和精子中B基因可表達(dá),故可從水稻的體細(xì)胞和精子中提取RNA。通過逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生DNA,從而構(gòu)建CDNA文庫(kù),進(jìn)而獲得B基因編碼蛋白的序列。 (3)圖示中過程①表示篩選含有目的基因的重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌,圖示中質(zhì)粒有抗卡那霉素標(biāo)記基因和抗潮霉素標(biāo)記基因,如果選擇培養(yǎng)基中加入的是卡那霉素,起作用的是抗卡那霉素標(biāo)記基因。過程②表示將篩選出含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌,將其T-DNA整合到水稻細(xì)胞染色體DNA上。 (4)獲得轉(zhuǎn)基因植株,鑒定篩選方式有:①DNA分子雜交技術(shù),即以Luc基因?yàn)槟?/p>

38、板設(shè)計(jì)探針進(jìn)行DNA分子雜交,故A錯(cuò)誤;B正確;②用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交,即以B基因編碼蛋白的序列為模板設(shè)計(jì)探針與從卵細(xì)胞提取的mRNA雜交,C正確;③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),通過(2)可知B基因與Luc基因連接形成B-Luc融合基因,即可通過Luc基因表達(dá),檢測(cè)加入熒光素的卵細(xì)胞中是否發(fā)出熒光,D正確;故選BCD。 (5)當(dāng)從轉(zhuǎn)基因植株未成熟種子中分離出胚,觀察到細(xì)胞內(nèi)僅含有一個(gè)染色體組,推斷該胚是由未受精的卵細(xì)胞發(fā)育形成的,而一般情況下水稻卵細(xì)胞在未受精時(shí)不進(jìn)行發(fā)育,由此表明B基因表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精作用直接發(fā)育成胚。 【點(diǎn)睛】本題考查了基因工程的相關(guān)知識(shí),要求考

39、生能夠識(shí)記基因工程的操作步驟;明確農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法在植物基因工程中的應(yīng)用;并能夠掌握植物組織培養(yǎng)技術(shù)的過程等知識(shí)。 15.(2019江蘇卷·29)利用基因編輯技術(shù)將病毒外殼蛋白基因?qū)胴i細(xì)胞中,然后通過核移植技術(shù)培育基因編輯豬,可用于生產(chǎn)基因工程疫苗。下圖為基因編輯豬培育流程,請(qǐng)回答下列問題: (1)對(duì)1號(hào)豬使用_________處理,使其超數(shù)排卵,收集并選取處在__________時(shí)期的卵母細(xì)胞用于核移植。 (2)采集2號(hào)豬的組織塊,用__________處理獲得分散的成纖維細(xì)胞,放置于37 ℃的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),其中CO2的作用是________。 (3)為獲得更多基因編輯豬,可

40、在胚胎移植前對(duì)胚胎進(jìn)行__________。產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來自于_________號(hào)豬。 (4)為檢測(cè)病毒外殼蛋白基因是否被導(dǎo)入4號(hào)豬并正常表達(dá),可采用的方法有__________(填序號(hào))。 ①DNA測(cè)序 ②染色體倍性分析 ③體細(xì)胞結(jié)構(gòu)分析 ④抗原—抗體雜交 【答案】(1)促性腺激素 減數(shù)第二次分裂中期 (2)胰蛋白酶(膠原蛋白酶) 維持培養(yǎng)液的pH (3)分割 2 (4)①④ 【解析】 【分析】據(jù)圖分析,圖示基因編輯豬培育過程涉及的技術(shù)手段有轉(zhuǎn)基因技術(shù)、核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等,利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將病毒外殼蛋白基因(目的基

41、因)導(dǎo)入2號(hào)豬的體細(xì)胞核中,然后將2號(hào)豬的體細(xì)胞核移植到1號(hào)豬的去核卵母細(xì)胞中,再將重組細(xì)胞培養(yǎng)到囊胚并移植到3號(hào)豬的子宮中去,最后分娩產(chǎn)生了4號(hào)轉(zhuǎn)基因克隆豬。 【詳解】(1)據(jù)圖分析可知,1號(hào)豬提供的是卵母細(xì)胞,對(duì)其注射促性腺激素可使其超數(shù)排卵,獲得的卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才能進(jìn)行核移植。 (2)將2號(hào)豬的組織塊分散成單個(gè)的成纖維細(xì)胞需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,該細(xì)胞的培養(yǎng)應(yīng)在37℃含5%的CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行,其中CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。 (3)利用胚胎分割技術(shù)對(duì)圖示早期胚胎進(jìn)行分割,可以獲得更多的基因編輯豬;據(jù)圖分析可知,核移植的細(xì)胞核來自于2號(hào)豬

42、,因此產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來自于2號(hào)豬。 (4)檢測(cè)病毒外殼蛋白基因(目的基因)是否導(dǎo)入4號(hào)豬,可以采用DNA分子雜交法檢測(cè)目的基因的序列;目的基因表達(dá)的最終產(chǎn)物是蛋白質(zhì)(病毒外殼蛋白),可以利用抗原-抗體雜交法進(jìn)行檢測(cè),故選①④。 【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握轉(zhuǎn)基因技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、胚胎移植等過程,能夠弄清楚題圖中不同的豬提供的結(jié)構(gòu)和作用,明確核移植時(shí)的卵母細(xì)胞需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期,并能夠選擇正確的方法檢測(cè)目的基因是否表達(dá)。 16.(2019江蘇卷·31)(8分)圖1為T細(xì)胞通過表面受體(TCR)識(shí)別抗原遞呈細(xì)胞呈遞的腫瘤抗原后被激活,進(jìn)而攻擊腫瘤細(xì)胞的示意圖。圖2為腫

43、瘤細(xì)胞的一種免疫逃逸機(jī)制示意圖。腫瘤細(xì)胞大量表達(dá)PD-L1,與T細(xì)胞表面的PD-1結(jié)合,抑制T細(xì)胞活化,逃避T細(xì)胞的攻擊。請(qǐng)回答下列問題: (1)圖1中抗原遞呈細(xì)胞通過_________方式攝取腫瘤抗原。 (2)圖1中T細(xì)胞識(shí)別腫瘤抗原后被激活,增殖并__________形成效應(yīng)T細(xì)胞群和__________細(xì)胞群。 (3)圖1中效應(yīng)T細(xì)胞通過TCR只能識(shí)別帶有同樣抗原的腫瘤細(xì)胞,故發(fā)揮的免疫作用具有_________性,效應(yīng)T細(xì)胞分泌毒素,使腫瘤細(xì)胞__________死亡。 (4)為阻斷圖2中腫瘤細(xì)胞的免疫逃逸通路,利用單克隆抗體制備技術(shù),制備了抗PD-L1抗體。該抗體注入體內(nèi)

44、后通過__________傳送與__________結(jié)合,可解除T細(xì)胞的活化抑制。 (5)為應(yīng)用于腫瘤的臨床免疫治療,需對(duì)該抗體進(jìn)行人源化改造,除抗原結(jié)合區(qū)域外,其他部分都替換為人抗體區(qū)段,目的是__________。 【答案】(1)胞吞 (2)分化 記憶 (3)特異 裂解 (4)體液 腫瘤細(xì)胞表面的PD-L1 (5)降低免疫排斥 【解析】 【分析】由圖1可知,TCR是T細(xì)胞表面的特異性受體,可以識(shí)別腫瘤抗原。TCR識(shí)別吞噬細(xì)胞處理呈遞的腫瘤抗原后,可以增殖分化出記憶T細(xì)胞和效應(yīng)T細(xì)胞,效應(yīng)T細(xì)胞可以識(shí)別并攻擊腫瘤細(xì)胞,引起腫瘤細(xì)胞的裂解死

45、亡。 由圖2可知,腫瘤細(xì)胞表面的PD-L1通過與T細(xì)胞表面的PD-1蛋白特異性結(jié)合,抑制T細(xì)胞增殖分化,從而逃避免疫系統(tǒng)的攻擊。 【詳解】(1)抗原屬于大分子物質(zhì),抗原呈遞細(xì)胞通過胞吞攝取腫瘤抗原,處理后呈遞給T細(xì)胞,引起T細(xì)胞的增殖分化。 (2)圖1中,T細(xì)胞表面的TCR識(shí)別腫瘤抗原后,可以增殖分化出記憶T細(xì)胞和效應(yīng)T細(xì)胞。其中的效應(yīng)T細(xì)胞會(huì)攻擊腫瘤細(xì)胞,引起其裂解死亡。 (3)效應(yīng)T細(xì)胞通過TCR特異性識(shí)別攜帶同種腫瘤抗原的腫瘤細(xì)胞,該過程具有特異性。由圖可知,效應(yīng)T細(xì)胞可以分泌毒素,引起腫瘤細(xì)胞的裂解死亡。 (4)由圖2可知,腫瘤細(xì)胞表面的PD-L1通過與T細(xì)胞表面的PD-1蛋

46、白特異性結(jié)合,抑制T細(xì)胞增殖分化,從而逃避免疫系統(tǒng)的攻擊,故可以通過注射抗PD-L1抗體阻斷腫瘤細(xì)胞的逃逸通路??筆D-L1抗體進(jìn)入人體后,通過體液運(yùn)輸與腫瘤細(xì)胞表面的PD-1蛋白結(jié)合,從而接觸T細(xì)胞的活化抑制。 (5)由于單克隆抗體是利用鼠的骨髓瘤細(xì)胞與漿細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞分泌產(chǎn)生,對(duì)人來說是異物,為了降低免疫排斥,需要對(duì)單克隆抗體進(jìn)行改造,出抗原結(jié)合區(qū)域外,其他部分都替換成人抗體區(qū)段。 【點(diǎn)睛】由圖分析可知,腫瘤細(xì)胞的一種免疫逃逸機(jī)制即通過腫瘤細(xì)胞表面的PD-L1與T細(xì)胞表面的PD-1蛋白特異性結(jié)合,抑制T細(xì)胞增殖分化,從而逃避T細(xì)胞的攻擊,故可以用抗PD-L1蛋白或抗PD-1蛋白的

47、抗體進(jìn)行治療。 17.(2019江蘇卷·33)(8分)圖1是某基因工程中構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程示意圖,載體質(zhì)粒P0具有四環(huán)素抗性基因(tetr)和氨芐青霉素抗性基因(ampr)。請(qǐng)回答下列問題: (1)EcoR V酶切位點(diǎn)為,EcoR V酶切出來的線性載體P1為___________未端。 (2)用Taq?DNA聚合酶進(jìn)行PCR擴(kuò)增獲得的目的基因片段,其兩端各自帶有一個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸。載體P1用酶處理,在兩端各添加了一個(gè)堿基為___________的脫氧核苷酸,形成P2;P2和目的基因片段在__________酶作用下,形成重組質(zhì)粒P3。 (3)為篩選出含有重組質(zhì)粒P3的菌落,采用

48、含有不同抗生素的平板進(jìn)行篩選,得到A、B、C三類菌落,其生長(zhǎng)情況如下表(“+”代表生長(zhǎng),“﹣”代表不生長(zhǎng))。根據(jù)表中結(jié)果判斷,應(yīng)選擇的菌落是__________(填表中字母)類,另外兩類菌落質(zhì)粒導(dǎo)入情況分別是_____、________________。 菌落類型平板類型 A B C 無抗生素 ﹢ ﹢ ﹢ 氨芐青霉素 ﹢ ﹢ ﹣ 四環(huán)素 ﹢ ﹣ ﹣ 氨芐青霉素+四環(huán)素 ﹢ ﹣ ﹣ (4)為鑒定篩選出的菌落中是否含有正確插入目的基因的重組質(zhì)粒,擬設(shè)計(jì)引物進(jìn)行PCR鑒定。圖2所示為甲、乙、丙3條引物在正確重組質(zhì)粒中的相應(yīng)位置,PCR鑒定時(shí)應(yīng)選擇的一對(duì)引物是

49、__________。某學(xué)生嘗試用圖中另外一對(duì)引物從某一菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了400 bp片段,原因是_______________。 【答案】(1)平 (2)胸腺嘧啶(T) DNA連接 (3)B A類菌落含有P0 C類菌落未轉(zhuǎn)入質(zhì)粒 (4)乙丙 目的基因反向連接 【解析】 【分析】基因表達(dá)載體的基本結(jié)構(gòu)包括復(fù)制原點(diǎn)、目的基因、標(biāo)記基因、啟動(dòng)子、終止子等。根據(jù)題干信息和圖形分析,P0是載體質(zhì)粒,其含有的氨芐青霉素抗性基因(ampr)和四環(huán)素抗性基因(tetr)都屬于標(biāo)記基因,可以用檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞;EcoRV酶為限制酶,其切割質(zhì)粒后悔破

50、壞了四環(huán)素抗性基因(tetr)。 【詳解】(1)根據(jù)題意分析,EcoRV酶識(shí)別的序列是-GATATC-,并且兩條鏈都在中間的T與A之間進(jìn)行切割,因此其切出來的線性載體P1為平末端。 (2)據(jù)圖分析,目的基因兩側(cè)為粘性末端,且漏出的堿基為A,則在載體P1的兩端需要個(gè)加一個(gè)堿基T形成具有粘性末端的載體P2,再用DNA連接酶將P2與目的基因連接起來形成重組質(zhì)粒P3。 (3)根據(jù)以上分析已知,限制酶切割后破壞了四環(huán)素抗性基因,但是沒有破壞氨芐青霉素抗性基因,因此含有重組質(zhì)粒P3的菌落在四環(huán)素中應(yīng)該不能生長(zhǎng),而在氨芐青霉素的培養(yǎng)基中能生長(zhǎng),結(jié)合表格分析可知,應(yīng)該選擇B類菌落。根據(jù)表格分析,A類菌落

51、在氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基中都能夠生長(zhǎng),說明其導(dǎo)入的是P0;C類菌落在任何抗生素的培養(yǎng)基中都不能生長(zhǎng),說明其沒有導(dǎo)入任何質(zhì)粒。 (4)據(jù)圖分析,根據(jù)目的基因插入的位置和PCR技術(shù)的原理分析,PCR鑒定時(shí)應(yīng)該選擇的一對(duì)引物是乙和丙;根據(jù)題意和圖形分析,某同學(xué)用圖中的另外一對(duì)引物(甲、乙)從某一菌落的質(zhì)粒中擴(kuò)增出了400bp的片段,說明其目的基因發(fā)生了反向連接。 【點(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是識(shí)記并理解基因工程的四個(gè)基本步驟,尤其是對(duì)核心步驟—構(gòu)建基因表達(dá)載體步驟的理解,明確基因表達(dá)載體的幾個(gè)必須的成分及其作用,進(jìn)而結(jié)合題干要求分析答題。 18.(2019浙江4月選考·32)回答下列(二)小

52、題: (二)回答與利用生物技術(shù)培育抗病品種有關(guān)的問題: (1)通過抗病性強(qiáng)的植株獲取抗病目的基因有多種方法。現(xiàn)已獲得純度高的抗病蛋白(可作為抗原),可通過______技術(shù)獲得特異性探針,并將______中所有基因進(jìn)行表達(dá),然后利用該探針,找出能與探針特異性結(jié)合的表達(dá)產(chǎn)物,進(jìn)而獲得與之對(duì)應(yīng)的目的基因。 (2)將上述抗病基因通過轉(zhuǎn)基因的方法導(dǎo)入植物的分生組織可獲得抗病性強(qiáng)的植株。若在試管苗期間用分子水平方法判斷抗病基因是否表達(dá),應(yīng)檢測(cè)______(A.質(zhì)粒載體 B.轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 C.抗性基因 D.病原微生物)。 (3)植物細(xì)胞在培養(yǎng)過程中往往會(huì)發(fā)生______,可利用這一特性篩選抗致病真

53、菌能力強(qiáng)的細(xì)胞。篩選時(shí)在培養(yǎng)基中加入______,并將存活的細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)至再生植株。若利用______培養(yǎng)建立的細(xì)胞系用于篩選,則可快速獲得穩(wěn)定遺傳的抗病植株。 (4)用抗病品種與高產(chǎn)品種進(jìn)行雜交育種過程中,有時(shí)會(huì)遇到因胚發(fā)育中止而得不到可育種子的情況。若要使該胚繼續(xù)發(fā)育獲得植株,可采用的方法是______。 【答案】(二)(1)單克隆抗體 基因文庫(kù) (2)B (3)變異 高濃度致病真菌 花粉離體 (4)胚的離體培養(yǎng) 【解析】 【分析】(二)目的基因表達(dá)產(chǎn)物在分子水平的檢測(cè)包括DNA分子雜交、DNA-RNA分子雜交和抗原抗體雜交;生物

54、變異在生產(chǎn)上應(yīng)用時(shí),可通過雜交育種、單倍體育種的方式獲得穩(wěn)定遺傳的植株,單倍體育種的速度更快,相對(duì)的操作更加復(fù)雜。 【詳解】(二)(1)抗病蛋白可作抗原,則特異性探針應(yīng)為抗體,則需要通過單克隆抗體技術(shù)獲得特異性探針;基因文庫(kù)包含了某個(gè)DNA分子的所有基因,故是將基因文庫(kù)中的所有基因進(jìn)行表達(dá),再利用探針獲得目的基因; (2)質(zhì)粒載體只能檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞,A選項(xiàng)錯(cuò)誤;轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為RNA,可以通過DNA-RNA分子雜交檢測(cè)抗病基因是否表達(dá),B選項(xiàng)正確;檢測(cè)抗性基因只能檢測(cè)抗性基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞,無法檢測(cè)該基因是否表達(dá),C選項(xiàng)錯(cuò)誤;檢測(cè)病原微生物是個(gè)體水平檢測(cè)目的基因是否表達(dá)的方式,D

55、選項(xiàng)錯(cuò)誤;故正確的選項(xiàng)選擇B; (3)抗致病真菌基因是原本植物細(xì)胞不含的基因,則需要利用植物細(xì)胞在培養(yǎng)過程中的變異來篩選抗致病真菌能力強(qiáng)的細(xì)胞;由于需要篩選抗致病真菌能力強(qiáng)的細(xì)胞,故需要在培養(yǎng)基中加入高濃度致病真菌;快速穩(wěn)定遺傳的抗病植株需要通過單倍體培養(yǎng)獲得,故需要利用花粉離體培養(yǎng)建立細(xì)胞系用于篩選; (4)要利用胚的發(fā)育獲得植株,可利用胚細(xì)胞的全能性,采用胚的離體培養(yǎng)獲得植株。 19.(2018全國(guó)Ⅰ卷·38)回答下列問題: (1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Coben)將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞中進(jìn)行了表達(dá),該研究除證明了質(zhì)??梢宰鳛檩d體外,還證明

56、了_________________(答出兩點(diǎn)即可)。 (2)體外重組的質(zhì)??赏ㄟ^Ca2+參與的__________方法導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞:而體外重組的噬菌體DNA通常需與__________組裝成完整噬菌體后,才能通過侵染的方法將重組的噬菌體DNA導(dǎo)入宿主細(xì)胞,在細(xì)菌、心肌細(xì)胞、葉肉細(xì)胞中,可作為重組噬菌體宿主細(xì)胞的是_____________。 (3)真核生物基因(目的基因)在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時(shí),表達(dá)出的蛋白質(zhì)可能會(huì)被降解。為防止蛋白質(zhì)被降解,在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)選用_______________________的大腸桿菌作為受體細(xì)胞,在蛋白質(zhì)純化的過程中應(yīng)添加____________的抑制劑。

57、 【答案】(1)體外重組的質(zhì)??梢赃M(jìn)入體細(xì)胞;真核生物基因可在原核細(xì)胞中表達(dá) (2)轉(zhuǎn)化  外殼蛋白(噬菌體蛋白)  細(xì)菌 (3)蛋白酶缺陷型  蛋白酶 【解析】(1)將非洲爪蟾核糖體蛋白基因與質(zhì)粒重組后導(dǎo)入大腸桿細(xì)胞中進(jìn)行了表達(dá),該過程證明了體外重組的質(zhì)粒可以進(jìn)入體細(xì)胞,真核生物基因可在原核細(xì)胞中表達(dá)等。 (2)體外重組的質(zhì)??赏ㄟ^Ca2+處理,目的是以增大細(xì)胞的通透性,使重組的質(zhì)粒能夠?qū)氲绞荏w細(xì)胞內(nèi),因此體外重組的質(zhì)??赏ㄟ^Ca2+參與的轉(zhuǎn)化方法導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞。體外重組的噬菌體DNA通常需與蛋白質(zhì)外殼組裝成完整的噬菌體后,才能通過侵染的方法將重組噬菌體DNA導(dǎo)入受體細(xì)胞,噬菌

58、體侵染的是細(xì)菌,而不能寄生在其它細(xì)胞中,因此可作為重組噬菌體宿主細(xì)胞的是細(xì)菌。 (3)真核生物基因(目的基因)在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時(shí),表達(dá)出的蛋白質(zhì)可能會(huì)被降解,為防止蛋白質(zhì)被降解,可以選用不能產(chǎn)生該蛋白酶的缺陷細(xì)菌以及使用能夠抑制蛋白酶活性的藥物,因此為防止蛋白質(zhì)被降解,在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)選用蛋白酶缺陷型的大腸桿菌作為受體細(xì)胞,在蛋白質(zhì)純化的過程中應(yīng)添加蛋白酶的抑制劑。 20.(2018全國(guó)Ⅱ卷·38)某種熒光蛋白(GFP)在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光,這一特性可用于檢測(cè)細(xì)胞中目的基因的表達(dá)。某科研團(tuán)隊(duì)將某種病毒的外殼蛋白(L1)基因連接在GFP基因的5′末端,獲得了L1-GFP融合基因(

59、簡(jiǎn)稱為甲),并將其插入質(zhì)粒P0,構(gòu)建了真核表達(dá)載體P1,其部分結(jié)構(gòu)和酶切位點(diǎn)的示意圖如下,圖中E1~E4四種限制酶產(chǎn)生的黏性末端各不相同。 回答下列問題: (1)據(jù)圖推斷,該團(tuán)隊(duì)在將甲插入質(zhì)粒P0時(shí),使用了兩種限制酶,這兩種酶是_________。使用這兩種酶進(jìn)行酶切是為了保證_______________,也是為了保證__________________。 (2)將P1轉(zhuǎn)入體外培養(yǎng)的牛皮膚細(xì)胞后,若在該細(xì)胞中觀察到了綠色熒光,則說明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了________和_________過程。 (3)為了獲得含有甲的牛,該團(tuán)隊(duì)需要做的工作包括:將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的_

60、____________移入牛的____________中、體外培養(yǎng)、胚胎移植等。 (4)為了檢測(cè)甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中,某同學(xué)用PCR方法進(jìn)行鑒定。在鑒定時(shí)應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的____________(填“mRNA”“總RNA”或“核DNA”)作為PCR模板。 【答案】(1)E1和E4  甲的完整  甲與載體正確連接 (2)轉(zhuǎn)錄  翻譯 (3)細(xì)胞核  去核卵母細(xì)胞 (4)核DNA 【解析】(1)要保證目的基因在受體細(xì)胞中能夠正確表達(dá),目的基因的首端應(yīng)有啟動(dòng)子,尾端應(yīng)有終止子。甲是將某種病毒的外殼蛋白(L1)基因連接在GFP基因的5ˊ末端而獲得的L1-GFP融

61、合基因,據(jù)此結(jié)合題意并分析圖示可知:該團(tuán)隊(duì)在將甲插入質(zhì)粒P0時(shí),如果用E2或E3,則目的基因不完整,而使用E1和E4這兩種限制酶進(jìn)行酶切保證了甲的完整,而且也保證了甲與載體正確連接,因此,使用的兩種限制酶,是E1和E4。 (2)構(gòu)建的真核表達(dá)載體P1中含有GFP基因,而GFP基因的表達(dá)產(chǎn)物“某種熒光蛋白(GFP)”在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會(huì)發(fā)出綠色熒光。若在導(dǎo)入P1的牛皮膚細(xì)胞中觀察到了綠色熒光,則說明L1基因在牛的皮膚細(xì)胞中完成了表達(dá),基因的表達(dá)過程包括轉(zhuǎn)錄和翻譯。 (3)若要獲得含有甲的牛,可采用核移植技術(shù),即將能夠產(chǎn)生綠色熒光細(xì)胞的細(xì)胞核移入牛的去核卵母細(xì)胞中獲得重組細(xì)胞,并將該重組細(xì)胞

62、在體外培養(yǎng)成重組胚胎,再經(jīng)過胚胎移植等獲得含有甲的牛。 (4)PCR是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)的縮寫,是一種在生物體外復(fù)制特定DNA片斷的核酸合成技術(shù)。若利用PCR方法檢測(cè)甲是否存在于克隆牛的不同組織細(xì)胞中,則應(yīng)分別以該牛不同組織細(xì)胞中的核DNA作為PCR模板。 21.(2018全國(guó)Ⅲ卷·38)2018年《細(xì)胞》期刊報(bào)道,中國(guó)科學(xué)家率先成功地應(yīng)用體細(xì)胞對(duì)非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物進(jìn)行克隆,獲得兩只克隆猴——“中中”和“華華”?;卮鹣铝袉栴}: (1)“中中”和“華華”的獲得涉及核移植過程,核移植是指_____________。通過核移植方法獲得的克隆猴,與核供體相比,克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目_______(填“

63、減半”“加倍”或“不變”) (2)哺乳動(dòng)物的核移植可以分為胚胎細(xì)胞核移植和體細(xì)胞核移植,胚胎細(xì)胞核移植獲得克隆動(dòng)物的難度_________(填“大于”或“小于”)體細(xì)胞核移植,其原因是________________________________。 (3)在哺乳動(dòng)物核移植的過程中,若分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體,通常,所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目____________(填“相同”或“不相同”),性染色體組合____________(填“相同”或“不相同”)。 【答案】(1)將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞核,移入一個(gè)已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞  不變 (2)小于  胚胎細(xì)胞分

64、化程度低,恢復(fù)全能性相對(duì)容易 (3)相同  不同 【解析】(1)核移植是指將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核,移入一個(gè)已經(jīng)去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,這個(gè)胚胎最后發(fā)育成為動(dòng)物個(gè)體;通過核移植方法獲得的克隆猴的細(xì)胞核來自供體,因此克隆猴體細(xì)胞的染色體數(shù)目和供體一致。 (2)胚胎細(xì)胞核移植的難度小于體細(xì)胞核移植,其原因是動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)其全能性相對(duì)容易。 (3)哺乳動(dòng)物雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞染色體常染色體相同,性染色體前者是XX,后者是XY,因此分別以雌性個(gè)體和雄性個(gè)體的體細(xì)胞作為核供體,通常所得到的兩個(gè)克隆動(dòng)物體細(xì)胞的常染色體數(shù)目相同,性染色體組合不同。

65、 22.(2018江蘇卷·32)為生產(chǎn)具有特定性能的α-淀粉酶,研究人員從某種海洋細(xì)菌中克隆了α-淀粉酶基因(1656個(gè)堿基對(duì)),利用基因工程大量制備琢α-淀粉酶,實(shí)驗(yàn)流程見下圖。請(qǐng)回答下列問題: (1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增α-淀粉酶基因前,需先獲得細(xì)菌的______________________。 (2)為了便于擴(kuò)增的DNA片段與表達(dá)載體連接,需在引物的______________________端加上限制性酶切位點(diǎn),且常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制性酶切位點(diǎn),主要目的是____________________________________________。 (3)進(jìn)行擴(kuò)增時(shí),

66、反應(yīng)的溫度和時(shí)間需根據(jù)具體情況進(jìn)行設(shè)定,下列選項(xiàng)中______________________的設(shè)定與引物有關(guān),______________________的設(shè)定與擴(kuò)增片段的長(zhǎng)度有關(guān)。(填序號(hào)) ①變性溫度 ②退火溫度 ③延伸溫度 ④變性時(shí)間 ⑤退火時(shí)間 ⑥延伸時(shí)間 (4)下圖表示篩選獲得的工程菌中編碼α-淀粉酶的mRNA的部分堿基序列: 圖中虛線框內(nèi)mRNA片段包含______________________個(gè)密碼子,如虛線框后的序列未知,預(yù)測(cè)虛線框后的第一個(gè)密碼子最多有______________________種。 (5)獲得工程菌表達(dá)的α-淀粉酶后,為探究影響酶活性的因素,以濃度為1%的可溶性淀粉為底物測(cè)定酶活性,結(jié)果如下: 緩沖液 50mmol/LNa2HPO4-KH2PO4 50mmol/LTris-HCl 50mmol/LGly-NaOH pH 6.0 6.5 7.0 7.5 7.5 8.0 8.5 9.0 9.0 9.5 10.0 10.5 酶相對(duì)活性% 25.4 40.2 49.8 63.2

展開閱讀全文
溫馨提示:
1: 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
2: 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
3.本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
5. 裝配圖網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

相關(guān)資源

更多
正為您匹配相似的精品文檔
關(guān)于我們 - 網(wǎng)站聲明 - 網(wǎng)站地圖 - 資源地圖 - 友情鏈接 - 網(wǎng)站客服 - 聯(lián)系我們

copyright@ 2023-2025  zhuangpeitu.com 裝配圖網(wǎng)版權(quán)所有   聯(lián)系電話:18123376007

備案號(hào):ICP2024067431號(hào)-1 川公網(wǎng)安備51140202000466號(hào)


本站為文檔C2C交易模式,即用戶上傳的文檔直接被用戶下載,本站只是中間服務(wù)平臺(tái),本站所有文檔下載所得的收益歸上傳人(含作者)所有。裝配圖網(wǎng)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)上載內(nèi)容本身不做任何修改或編輯。若文檔所含內(nèi)容侵犯了您的版權(quán)或隱私,請(qǐng)立即通知裝配圖網(wǎng),我們立即給予刪除!

五月丁香婷婷狠狠色,亚洲日韩欧美精品久久久不卡,欧美日韩国产黄片三级,手机在线观看成人国产亚洲