實時熒光定量PCR技術詳解和總結

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2、PCR反應： Xn=X02n 非理想的PCR反應： Xn=X0(1+Ex)n 方程式兩邊同時取對數(shù)得: log Xn=log (X0 (1+Ex)n) 整理方程式得: log X0= (- log(1+Ex) )n+ log Xn 將C(t)和達到C(t)值時終產(chǎn)物的量Xc(t)帶入上式得： log X0= (- log(1+Ex) ) C(t)+ log Xc(t) 初始濃度的對數(shù)與循環(huán)數(shù)呈線性關系,n：擴增反應的循環(huán)次數(shù) Xn：第n次循環(huán)后的產(chǎn)物量 X0：初始模板量 Ex：擴增效率,初始模板量越多，C(t)值越小 C(t)與初始模板濃度的對數(shù)值成線性關系,實時定量PCR標準曲線,定量原理,濃度的對數(shù)值與循環(huán)數(shù)呈線性關系，根據(jù)樣品擴增達到域值的循環(huán)數(shù)（Ct值）就可分析樣品中起始模板量,定量PCR的實驗步驟,標準菌株DNA的提取 QPCR探針和引物的設計 陽性克隆質粒的構建 熒光定量PCR反應 定量標準曲線 重復性實驗 靈敏性實驗,實驗材料,