高中生物選修一DNA的粗提取與鑒定【青苗書苑】

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1、1公開課件2公開課件3公開課件4公開課件5公開課件6公開課件7公開課件8公開課件9公開課件10公開課件11公開課件12公開課件13公開課件14公開課件15公開課件16公開課件17公開課件 提取提取DNA的的第一步是材料的選取第一步是材料的選取,其目的是一,其目的是一定要選取定要選取DNA含量較高的生物材料,否則會由于實(shí)含量較高的生物材料,否則會由于實(shí)驗(yàn)過程中或多或少的損失而造成檢測的困難;驗(yàn)過程中或多或少的損失而造成檢測的困難;第二第二步是步是DNA的釋放和溶解,的釋放和溶解,這一步是實(shí)驗(yàn)成功與否的這一步是實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵,要盡可能使細(xì)胞內(nèi)的關(guān)鍵,要盡可能使細(xì)胞內(nèi)的DNA全部溶解;全部溶解;

2、第三步第三步是是DNA的純化,的純化,即根據(jù)即根據(jù)DNA的溶解特性、對酶及的溶解特性、對酶及高溫的耐受性的不同等特性,最大限度地將高溫的耐受性的不同等特性,最大限度地將DNA與與雜質(zhì)分開;雜質(zhì)分開;最后一步是對最后一步是對DNA進(jìn)行鑒定進(jìn)行鑒定,這是對整,這是對整個實(shí)驗(yàn)的結(jié)果的檢測。個實(shí)驗(yàn)的結(jié)果的檢測。1 1、請解釋提取、請解釋提取DNA的實(shí)驗(yàn)操作主要步驟的目的的實(shí)驗(yàn)操作主要步驟的目的練習(xí)練習(xí)18公開課件2 2、你認(rèn)為從細(xì)胞中提取某種特定的蛋、你認(rèn)為從細(xì)胞中提取某種特定的蛋白質(zhì)與提取白質(zhì)與提取DNADNA一樣容易嗎?一樣容易嗎?答:提取蛋白質(zhì)比提取答:提取蛋白質(zhì)比提取DNA的的難度大難度大。這

3、是因?yàn)?,。這是因?yàn)?,與與DNA相比,相比,蛋白質(zhì)對溫度、鹽濃度、蛋白質(zhì)對溫度、鹽濃度、pH等條件等條件要敏感得多要敏感得多,很容易失活;并且,很容易失活;并且蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)多種多樣,理化性質(zhì)各不相同多種多樣,理化性質(zhì)各不相同,使得蛋白質(zhì)的提取,使得蛋白質(zhì)的提取沒有一種統(tǒng)一的方法,只能根據(jù)特定蛋白質(zhì)的特性沒有一種統(tǒng)一的方法,只能根據(jù)特定蛋白質(zhì)的特性摸索提取的條件,設(shè)計(jì)特定的方法。摸索提取的條件,設(shè)計(jì)特定的方法。19公開課件2.實(shí)驗(yàn)中實(shí)驗(yàn)中NaCl的物質(zhì)的量濃度為的物質(zhì)的量濃度為2 molL和和0.14 molL對對DNA有何影響有何影響?1.在在DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)過程中,兩次向

4、燒杯的粗提取實(shí)驗(yàn)過程中,兩次向燒杯中加入蒸餾水的作用是中加入蒸餾水的作用是()。A.稀釋血液、沖洗樣品稀釋血液、沖洗樣品B.使血細(xì)胞破裂、降低使血細(xì)胞破裂、降低NaCl濃度使?jié)舛仁笵NA析出析出C.使血細(xì)胞破裂、增大使血細(xì)胞破裂、增大DNA溶解量溶解量 D.使血細(xì)胞破裂、提取含雜質(zhì)較少的使血細(xì)胞破裂、提取含雜質(zhì)較少的DNA答:答:B答:前者是溶解答:前者是溶解DNA,后者是使,后者是使DNA析出析出20公開課件3.DNA3.DNA遇二苯胺遇二苯胺(沸水浴沸水浴)會染成會染成()()A.A.磚紅色磚紅色 B.B.橘黃色橘黃色 C.C.紫色紫色 D.D.藍(lán)色藍(lán)色4.提取雞血中的提取雞血中的DNA時

5、,為什么要除去血液時,為什么要除去血液中的上清液中的上清液?答:答:DNA的提取,關(guān)鍵是對雜質(zhì)的去除,由于的提取,關(guān)鍵是對雜質(zhì)的去除,由于上清液是血液中的血漿部分,不含上清液是血液中的血漿部分,不含DNA,所以,所以要除去上清液要除去上清液(含有蛋白質(zhì)含有蛋白質(zhì))。答:答:D21公開課件22公開課件為什么反復(fù)地溶解與析出為什么反復(fù)地溶解與析出DNA,能夠去除雜質(zhì)?,能夠去除雜質(zhì)?1 1、用高鹽濃度的溶液溶解、用高鹽濃度的溶液溶解DNA,能除,能除去去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì)在高鹽中不能溶解的雜質(zhì);2 2、用低鹽濃度使、用低鹽濃度使DNA析出,能除去析出,能除去溶溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。解在低鹽溶

6、液中的雜質(zhì)。因此,通過反復(fù)溶解與析出因此,通過反復(fù)溶解與析出DNA,就能,就能夠除去與夠除去與DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。溶解度不同的多種雜質(zhì)。23公開課件 過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細(xì)胞液過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細(xì)胞液 目的目的:獲得含核物質(zhì)的濾液獲得含核物質(zhì)的濾液 過濾含粘稠物的過濾含粘稠物的0.140.14mol/LNaCl溶液溶液 目的目的:獲取紗布上的粘稠物獲取紗布上的粘稠物 過濾溶解有過濾溶解有DNA的的2 2mol/LNaCl溶液溶液 目的目的:得到含得到含DNA的濾液的濾液 本實(shí)驗(yàn)中有三次過濾本實(shí)驗(yàn)中有三次過濾 ,分別有什么作用分別有什么作用?24公開課件 第一次攪拌加蒸餾水的雞

7、血細(xì)胞液第一次攪拌加蒸餾水的雞血細(xì)胞液 加速細(xì)胞的破裂加速細(xì)胞的破裂 第二次攪拌加第二次攪拌加2 2mol/LNaCl溶液的濾液溶液的濾液 使使DNA與溶液混合均勻與溶液混合均勻 第三次攪拌加蒸餾水至第三次攪拌加蒸餾水至0.140.14mol/LNaCl溶液溶液 稀釋稀釋NaCl溶液溶液,析出析出DNA 第四次攪拌放入第四次攪拌放入2 2mol/LNaCl溶液中紗布上的粘稠物溶液中紗布上的粘稠物 使使DNADNA盡可能多的溶于溶液中盡可能多的溶于溶液中 第五次攪拌體積分?jǐn)?shù)為第五次攪拌體積分?jǐn)?shù)為95%95%的酒精的酒精 提取含雜質(zhì)較少的提取含雜質(zhì)較少的DNA實(shí)驗(yàn)中有五次用玻璃棒攪拌實(shí)驗(yàn)中有五次用

8、玻璃棒攪拌?分別有什么作用分別有什么作用?25公開課件方法步驟方法步驟 加入物質(zhì)加入物質(zhì) 目的目的 1 1.制備雞血細(xì)胞液制備雞血細(xì)胞液 檸檬酸鈉溶液檸檬酸鈉溶液 2 2.提取雞血細(xì)胞細(xì)胞核物質(zhì)提取雞血細(xì)胞細(xì)胞核物質(zhì) 20 m120 m1蒸餾水蒸餾水 幻燈片 18 3 3.溶解細(xì)胞核內(nèi)的溶解細(xì)胞核內(nèi)的DNADNA 2 m12 m1L L 的的NaCINaCI溶液溶液4040mLmL 幻燈片 18 4 4.析出含析出含DNADNA的黏稠物的黏稠物 蒸餾水蒸餾水 5 5.濾取含濾取含DNADNA的黏稠物的黏稠物 6 6.將將DNADNA的黏稠物再溶解的黏稠物再溶解 2 mol2 molL L 的的

9、NaClNaCl溶液溶液20 mL20 mL 7 7.過濾含過濾含DNADNA的的NaCNaCl l 溶液溶液 8 8.提取含有雜質(zhì)較少的提取含有雜質(zhì)較少的 DNADNA 冷卻的冷卻的9595的酒精的酒精50 mL50 mL 幻燈片 18 A A:(1)1)向試管中加入向試管中加入0 0.015 mol015 molL L 的的NaClNaCl溶液溶液5 5mLmL(2)2)加入加入DNADNA(3)43)4 mLmL二苯胺試劑二苯胺試劑 9 9.DNADNA的鑒定的鑒定 B B:(1)(1)向試管中加入向試管中加入0 0.015mol015molL L 的的NaClNaCl溶液溶液5 5mLmL(2)4 m2)4 mL 二苯胺試劑二苯胺試劑 26公開課件加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加入檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝固加速血細(xì)胞破裂加速血細(xì)胞破裂 溶解溶解DNA 使使2mol/L的的NaCl溶液稀釋至溶液稀釋至0.14mol/L使得使得DNA最大限度地釋出最大限度地釋出 使含使含DNA的黏稠物被留在紗布上的黏稠物被留在紗布上使含使含DNA的黏稠物盡可能多的溶解于溶液中的黏稠物盡可能多的溶解于溶液中除去含除去含DNA的濾液中的雜質(zhì)的濾液中的雜質(zhì)提取提取DNA A出現(xiàn)藍(lán)色出現(xiàn)藍(lán)色 B無變化無變化27公開課件

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