《中國(guó)藥典衛(wèi)生學(xué)檢驗(yàn)培訓(xùn)版《中國(guó)藥典》微生物檢查法.ppt》由會(huì)員分享，可在線閱讀，更多相關(guān)《中國(guó)藥典衛(wèi)生學(xué)檢驗(yàn)培訓(xùn)版《中國(guó)藥典》微生物檢查法.ppt（43頁(yè)珍藏版）》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。
1、1,2010年版中國(guó)藥典微生物檢查法,別小琳 四川省食品藥品檢驗(yàn)所 2010年4月,主要內(nèi)容,一、中國(guó)藥典2010年版微生物限度檢查法增修訂內(nèi)容簡(jiǎn)介 二、培養(yǎng)基適用性實(shí)驗(yàn)的實(shí)施與操作 三、白色念珠菌的檢查 四、微生物限度檢查方法驗(yàn)證試驗(yàn) 五、微生物限度檢查面臨的問(wèn)題,3,(一)中國(guó)藥典2010年版微生物限度檢查法增修訂內(nèi)容簡(jiǎn)介,,4,中國(guó)藥典2010年版框架(衛(wèi)),中國(guó)藥典2010年版框架(衛(wèi)) 無(wú)菌檢查法 微生物限度檢查法 滅菌法 抑菌效力檢查法指導(dǎo)原則 藥品微生物檢驗(yàn)替代方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則 微生物限度檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原則 藥品微生物實(shí)驗(yàn)室規(guī)范指導(dǎo)原則,5,2010年版微生物限度檢查法修訂,20
2、10年版中國(guó)藥典微生物限度檢查法 附錄XIII C（一部） 附錄XI J （二部） 引入培養(yǎng)基適用性實(shí)驗(yàn) 增加白色念珠菌檢查法 貼膏劑檢查方法的改進(jìn) 限度標(biāo)準(zhǔn)表示方法改變,6,2010年版微生物限度檢查法修訂,1、附錄107頁(yè)，微生物限度檢查法 供試品檢查時(shí)，如果使用了表面活性劑、中和劑或滅活劑，應(yīng)證明其有效性及對(duì)微生物（的生長(zhǎng)和存活無(wú)影響）無(wú)毒性。 除另有規(guī)定外，本檢查法中細(xì)菌及控制菌培養(yǎng)溫度為3035；霉菌、酵母菌培養(yǎng)溫度為2328（；控制菌培養(yǎng)溫度為3537）。 檢驗(yàn)結(jié)果以1g、1ml、10g、10ml、10cm2 為單位報(bào)告，特殊品種可以最小包裝單位報(bào)告。,7,2010年版微生物限
3、度檢查法修訂,2、附錄107頁(yè)，檢驗(yàn)量 除另有規(guī)定外，一般供試品的檢驗(yàn)量為10g或10ml；（中藥）膜劑為（50）100cm2；貴重藥品、微量包裝藥品的檢驗(yàn)量可以酌減。要求檢查沙門(mén)菌的供試品，其檢驗(yàn)量應(yīng)增加20g或20ml（其中10g或10ml用于陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn) ）。,8,2010年版微生物限度檢查法修訂,3、附錄107頁(yè)，膜劑供試品 取供試品（50）100cm2，剪碎，加（50ml或）100ml的pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液（必要時(shí)可增加稀釋液），浸泡，振搖，作為110（或120）的供試液。,9,2010年版微生物限度檢查法修訂,4、附錄108頁(yè)，新增：貼膏劑供試品 取規(guī)定量供試品，去掉
4、貼劑的保護(hù)層，放置在無(wú)菌玻璃或塑料片上，粘貼面朝上。用適宜的無(wú)菌多孔材料（如無(wú)菌紗布）覆蓋貼劑的粘貼面以避免貼劑粘貼在一起。然后將其置于適宜體積并含有滅活劑（如聚山梨酯80或卵磷脂）的稀釋劑中，用力振蕩至少30分鐘，或以其他方法制備成供試液。 5、附錄108頁(yè)，修訂：離心沉淀法 取一定量供試液，500轉(zhuǎn)/分離心3分鐘，取全部上清液混合。用于細(xì)菌檢查。 6、附錄108頁(yè)，增加：計(jì)數(shù)培養(yǎng)基的適用性檢查,10,2010年版微生物限度檢查法修訂,7、附錄109頁(yè)，增加：表1常見(jiàn)干擾物的中和劑或滅活方法,11,2010年版微生物限度檢查法修訂,8、附錄109頁(yè)，增加： 若沒(méi)有適宜的方法消除供試品中的抑菌
5、作用，那么驗(yàn)證試驗(yàn)中微生物回收的失敗可看成是因供試品的抗菌活性引起的，同時(shí)表明該供試品不能被試驗(yàn)菌污染。然而，供試品也可能僅對(duì)試驗(yàn)用菌株具有抑制作用，而對(duì)其他菌株沒(méi)有抑制作用。因此，根據(jù)供試品須符合的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)和菌數(shù)報(bào)告規(guī)則，在不影響檢驗(yàn)結(jié)果判斷的前提下，應(yīng)采用能使微生物生長(zhǎng)的更高稀釋級(jí)的供試液進(jìn)行方法驗(yàn)證試驗(yàn)。若驗(yàn)證試驗(yàn)符合要求，應(yīng)以該稀釋級(jí)供試液作為最低稀釋級(jí)的供試液進(jìn)行供試品檢驗(yàn)。 計(jì)數(shù)方法驗(yàn)證時(shí)，若采用上述計(jì)數(shù)方法總存在一株或多株試驗(yàn)菌的回收率達(dá)不到要求，那么選擇回收情況最接近要求的方法和試驗(yàn)條件進(jìn)行供試品的檢測(cè)。,12,2010年版微生物限度檢查法修訂,9、附錄109頁(yè)，修訂：供
6、試品檢查（法） （取按驗(yàn)證的方法制備的均勻供試液，）按計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證試驗(yàn)確認(rèn)的程序進(jìn)行供試液制備。用pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液稀釋成110、1102、1103等稀釋級(jí)。 1.平皿法 （采用平皿法進(jìn)行菌數(shù)測(cè)定時(shí)，應(yīng)取適宜的連續(xù)23個(gè)稀釋級(jí)的供試液。）,13,2010年版微生物限度檢查法修訂,10、附錄109頁(yè)，修訂：培養(yǎng)和計(jì)數(shù) 除另有規(guī)定外，細(xì)菌培養(yǎng)（48小時(shí)）3天，逐日點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)，一般以（48小時(shí)）3天的菌落數(shù)報(bào)告；霉菌、酵母菌培養(yǎng)（72小時(shí)）5天，逐日點(diǎn)計(jì)菌落數(shù)，一般以（72小時(shí)）5天的菌落數(shù)報(bào)告；必要時(shí)，可適當(dāng)延長(zhǎng)培養(yǎng)時(shí)間至（5）7天進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)并報(bào)告。,14,2010年版微生物限
7、度檢查法修訂,11、附錄109頁(yè)，修訂：菌數(shù)報(bào)告規(guī)則 細(xì)菌、酵母菌宜選取（細(xì)菌、酵母菌平均菌落數(shù)在30300之間）小于300cfu、霉菌宜選取平均菌落數(shù)（在30100之間）小于100cfu的稀釋級(jí)，作為菌數(shù)報(bào)告（取兩位有效數(shù)字）的依據(jù)。以最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)的值報(bào)告1g、1mL或10cm2供試品中所含的菌數(shù)。,15,2010年版微生物限度檢查法修訂,12、附錄109頁(yè)，修訂：薄膜過(guò)濾法 采用薄膜過(guò)濾法，濾膜孔徑應(yīng)不大于0.45m，直徑（約）一般為50mm，若采用其它直徑的濾膜，沖洗量應(yīng)進(jìn)行相應(yīng)的調(diào)整?？倹_洗量不得超過(guò)1000ml(每片濾膜的總過(guò)濾量不宜過(guò)大)，以避免濾膜上的微生物受損傷
8、。 13、附錄110頁(yè)，增加：控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查,16,2010年版微生物限度檢查法修訂,14、附錄111頁(yè)，修訂：控制菌檢查方法的驗(yàn)證 刪除陰性菌對(duì)照組 15、附錄113頁(yè)，修訂：梭菌 上述2份供試液直接或處理后分別接種至100ml的（0.1%新鮮庖肉）梭菌增菌培養(yǎng)基中，（各培養(yǎng)基管在）置厭氧條件下培養(yǎng)（7296）48小時(shí)。（如試驗(yàn)管不出現(xiàn)渾濁、產(chǎn)氣、消化碎肉、臭氣等現(xiàn)象，判供試品未檢出梭菌；否則，應(yīng)取上述每一培養(yǎng)物0.2ml，分別涂抹接種于含慶大霉素的哥倫比亞瓊脂培養(yǎng)基平板上，在置厭氧條件下培養(yǎng)4872小時(shí)。 16、附錄111頁(yè)，增加：白色念珠菌的檢查,17,二、培養(yǎng)基適用性實(shí)驗(yàn)
9、的實(shí)施與操作,1.計(jì)數(shù)培養(yǎng)基的適用性檢查 （一）應(yīng)用范圍;細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)用的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查，包括成品培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基或按培養(yǎng)基處方配制的培養(yǎng)基均應(yīng)檢查。 （二）菌種及菌液制備 驗(yàn)證試驗(yàn)所用的菌株傳代次數(shù)不得超過(guò)5代（從菌種保存中心獲得的冷凍干燥菌種為第0代），并采用適宜的菌種保藏技術(shù)，以保證試驗(yàn)菌株的生物學(xué)特性。 大腸埃希菌（Escherichia coli）CMCC（B） 44 102 金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）CMCC（B） 26 003 枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）CMCC（B） 63 501 白色念珠菌
10、（Candida albicans）CMCC（F） 98 001 黑曲霉（Aspergillus niger）CMCC（F） 98 003 菌液制備同微生物限度檢查方法學(xué)驗(yàn)證,18,二、培養(yǎng)基適用性實(shí)驗(yàn)的實(shí)施與操作,（三）操作 營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基 玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基 酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基 用相應(yīng)的對(duì)照培養(yǎng)基同法操作 對(duì)照培養(yǎng)基：由中檢所研制并分發(fā) （四)結(jié)果判定 被檢培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)不小于對(duì)照培養(yǎng)基上的菌落平均數(shù)的70%，且菌落大小形態(tài)一致,19,二、培養(yǎng)基適用性實(shí)驗(yàn)的實(shí)施與操作,2、控制菌檢查用培養(yǎng)基適用性檢查 控制菌檢查用的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查，成品培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基或
11、按培養(yǎng)基處方配制的培養(yǎng)基均應(yīng)檢查。檢查項(xiàng)目包括培養(yǎng)基的促生長(zhǎng)、指示和抑制特性能力。 菌種 對(duì)試驗(yàn)菌種的要求同計(jì)數(shù)培養(yǎng)基的適用性檢查。 大腸埃希菌（Escherichia coli）CMCC（B） 44 102 金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）CMCC（B） 26 003 乙型副傷寒沙門(mén)菌（Salmonella paratyphi B）CMCC（B） 50 094 銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）CMCC（B） 10 104 生孢梭菌（Clostridium sporogenes）CMCC（B） 64 941 白色念珠菌（Candida a
12、lbicans）CMCC（F） 98 001,20,二、培養(yǎng)基適用性實(shí)驗(yàn)的實(shí)施與操作,增菌培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力檢查：分別接種不大于100cfu的試驗(yàn)菌（見(jiàn)表2）于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基中，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及最短培養(yǎng)時(shí)間下培養(yǎng)。與對(duì)照培養(yǎng)基管比較，被檢培養(yǎng)基管試驗(yàn)菌應(yīng)生長(zhǎng)良好。 固體培養(yǎng)基促生長(zhǎng)能力檢查：取試驗(yàn)菌各0.1ml（50100cfu）分別涂布于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基平板中，每種培養(yǎng)基平行制備2個(gè)平皿，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度及最短培養(yǎng)時(shí)間下培養(yǎng)，計(jì)數(shù)。被檢培養(yǎng)基的菌落數(shù)與對(duì)照培養(yǎng)基菌落數(shù)相比應(yīng)不小于70%，且生長(zhǎng)的菌落形態(tài)應(yīng)一致。 培養(yǎng)基抑制能力檢查：劃線接種試驗(yàn)菌（見(jiàn)
13、表2）于被檢培養(yǎng)基平板上，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度和時(shí)間下培養(yǎng)，試驗(yàn)菌應(yīng)不得生長(zhǎng)。 培養(yǎng)基指示能力檢查：分別接種少量試驗(yàn)菌（見(jiàn)表2）于被檢培養(yǎng)基和對(duì)照培養(yǎng)基平板上，在相應(yīng)控制菌檢查規(guī)定的培養(yǎng)溫度和時(shí)間下培養(yǎng)。被檢培養(yǎng)基中試驗(yàn)菌生長(zhǎng)的菌落形態(tài)、大小、指示劑反應(yīng)情況等應(yīng)與對(duì)照培養(yǎng)基一致。,21,21,22,三、白色念珠菌的檢查,取供試液10ml（相當(dāng)于供試品1g、1ml、10cm2）直接或處理后接種至適量（不少于100ml）的沙氏葡萄糖肉湯培養(yǎng)基中，培養(yǎng)2448 小時(shí)。取上述培養(yǎng)物劃線接種于沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)2448小時(shí)（必要時(shí)延長(zhǎng)至72小時(shí)）。 白色念珠菌在沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)
14、基上生長(zhǎng)的菌落呈乳白色偶見(jiàn)淡黃色，表面光滑有濃酵母氣味，培養(yǎng)時(shí)間稍久則菌落增大，顏色變深、質(zhì)地變硬或有皺摺。若平板上無(wú)菌落生長(zhǎng)或生長(zhǎng)的菌落與上述菌落形態(tài)特征不符，判供試品未檢出白色念珠菌。如平板上生長(zhǎng)的菌落與上述菌落形態(tài)特征相符或疑似，應(yīng)挑選23個(gè)菌落分別接種至念珠菌顯色培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)2448小時(shí)（必要時(shí)延長(zhǎng)至72小時(shí)）。若平板上無(wú)綠色或翠綠色的菌落生長(zhǎng)，判供試品未檢出白色念珠菌。 若平板上生長(zhǎng)的菌落為綠色或翠綠色，挑取相符或疑似的菌落接種于1%吐溫80玉米瓊脂培養(yǎng)基上，培養(yǎng)2448小時(shí)。取培養(yǎng)物進(jìn)行染色，鏡檢及芽管試驗(yàn)。 芽管試驗(yàn)挑取1%吐溫80玉米瓊脂培養(yǎng)基上的培養(yǎng)物，接種于加有一滴血
15、清的載玻片上，蓋上蓋玻片，置濕潤(rùn)的平皿內(nèi)，置3537、13h，置顯微鏡下觀察，可見(jiàn)到由孢子長(zhǎng)出短小芽管。 若上述疑似菌為非革蘭陽(yáng)性菌，顯微鏡未見(jiàn)厚膜孢子、假菌絲、芽管，判供試品未檢出白色念珠菌。,23,四、微生物限度檢查方法驗(yàn)證試驗(yàn),,24,關(guān)于方法驗(yàn)證,中國(guó)藥典2005版首次引入方法驗(yàn)證要求； 中國(guó)藥典2010版無(wú)菌檢查法和微生物限度檢查法延續(xù)了2005版方法驗(yàn)證要求； 中國(guó)藥典2010版微生物限度檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原則（一部附錄XVIII F、二部附錄XIX P）第五條。,25,關(guān)于方法驗(yàn)證,為什么驗(yàn)證? 驗(yàn)證什么? 怎么驗(yàn)證? 何時(shí)驗(yàn)證？,26,什么時(shí)候驗(yàn)證？,當(dāng)建立藥品的方法時(shí)，應(yīng)進(jìn)行方法
16、的驗(yàn)證； 若藥品的組分或原檢驗(yàn)條件發(fā)生改變時(shí)，檢查方法應(yīng)重新驗(yàn)證。,27,怎么驗(yàn)證,1.驗(yàn)證思路 （1）選擇敏感菌株 間接方法文獻(xiàn)、技術(shù)資料（可靠） 直接方法預(yù)實(shí)驗(yàn)及體外抑菌實(shí)驗(yàn) 參考選擇： 一般中藥選擇枯草和金葡； 一般抗生素根據(jù)抗菌譜選擇。,28,選擇敏感菌株,,29,怎么驗(yàn)證,（2）驗(yàn)證方法的選擇 由簡(jiǎn)到繁、由易到難 根據(jù)藥品的理化性質(zhì)選擇適宜的方法,30,怎么驗(yàn)證,（3）驗(yàn)證盡可能做到標(biāo)準(zhǔn)化操作，使操作簡(jiǎn)便、結(jié)果重現(xiàn)性好。 菌液制備及放置時(shí)間 常規(guī)法和培養(yǎng)基稀釋法操作注意事項(xiàng) 薄膜過(guò)濾法操作注意事項(xiàng),31,驗(yàn)證以后怎么辦？,無(wú)菌檢查：進(jìn)行供試品無(wú)菌檢查時(shí)，所采用的檢查方法和檢驗(yàn)條件應(yīng)與
17、驗(yàn)證的方法相同。,微生物限度：檢查時(shí)，按已驗(yàn)證的計(jì)數(shù)方法進(jìn)行供試品的細(xì)菌、霉菌酵母菌菌數(shù)的測(cè)定；供試品的控制菌檢查應(yīng)按已驗(yàn)證的方法進(jìn)行，增菌培養(yǎng)基的實(shí)際用量同控制菌檢查方法的驗(yàn)證。,檢驗(yàn)方法的各論化！,32,方法驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)工作的完善和發(fā)展,一方面以驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)為手段和契機(jī)，充分完善和細(xì)化我國(guó)無(wú)菌和微生物限度檢查方法，建立起完備的SOP體系。 另一方面集中力量盡快完成我國(guó)數(shù)以千計(jì)的品種的檢驗(yàn)方法的初步驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，并收集、整理、分析已有驗(yàn)證資料，指出各品種驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的發(fā)展方向。 通過(guò)方法驗(yàn)證促進(jìn)我國(guó)藥品微生物檢驗(yàn)工作全面發(fā)展。,33,五、微生物限度檢查面臨的問(wèn)題,,34,1、技術(shù)現(xiàn)狀與標(biāo)準(zhǔn)化,1）培養(yǎng)基
18、培養(yǎng)基質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 固體培養(yǎng)基的靈敏度、專屬性,35,玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基的專屬性,當(dāng)染菌較多時(shí)，玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基生長(zhǎng)大量的細(xì)菌，給結(jié)果判斷帶來(lái)困難。,36,玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基的專屬性,以中檢所玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基（批號(hào)：050428 ）與營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基（批號(hào)：050523 ）比較，加入50100cfu陽(yáng)性菌在相同條件培養(yǎng)觀察，見(jiàn)下表9：,玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基專屬性實(shí)驗(yàn)結(jié)果,37,1、技術(shù)現(xiàn)狀與標(biāo)準(zhǔn)化,2）、自動(dòng)化程度低，仍然依賴大量的人工 以方法驗(yàn)證為基礎(chǔ)，引入更為便捷的供試品前處理技術(shù)，規(guī)范供試品前處理 有條件的地方可以考慮引入自動(dòng)稀釋、自動(dòng)接種、儀器判讀結(jié)果等設(shè)備和技術(shù) 3）、75mm薄膜過(guò)濾
19、器的研制 征對(duì)我國(guó)中成藥品種多、情況復(fù)雜,已開(kāi)發(fā)研制的75mm薄膜過(guò)濾器在目前的驗(yàn)證工作中發(fā)揮了重要作用。,38,3、微生物限度檢查的幾個(gè)問(wèn)題,原料藥的微生物標(biāo)準(zhǔn)問(wèn)題； 藥材原粉的界定問(wèn)題； 含豆豉、神曲等發(fā)酵成分的中成藥制劑標(biāo)準(zhǔn)問(wèn)題； 純化水微生物限度檢查問(wèn)題；,39,原料藥的微生物標(biāo)準(zhǔn)問(wèn)題,原料藥是藥品生產(chǎn)過(guò)程中引入微生物污染的重要來(lái)源之一，雖然一些藥品在生產(chǎn)過(guò)程或終產(chǎn)品階段可以采取一些滅菌措施殺滅污染微生物，但可能因?yàn)橛纱艘氲乃谰w、毒素等無(wú)法消除而危害患者，而原料藥過(guò)高的微生物荷載可能直接挑戰(zhàn)一些滅菌措施的有效性，造成滅菌失敗，使藥品存在更大的安全隱患。所以世界各國(guó)藥典均規(guī)定應(yīng)對(duì)原料
20、藥進(jìn)行微生物檢查，以消除或控制其對(duì)藥品引入的微生物污染。 在嚴(yán)格執(zhí)行藥品GMP的前提下，國(guó)外藥典更為重視原料藥的微生物檢查，尤其是對(duì)一些非滅菌制劑，甚至僅僅對(duì)原料藥有微生物限度控制要求，而對(duì)制劑沒(méi)有強(qiáng)制要求。中國(guó)藥典2005版參考了國(guó)外藥典的這一發(fā)展趨勢(shì)，對(duì)于化學(xué)藥品的片劑、膠囊劑、顆粒劑等6個(gè)主要口服制劑在各論和制劑通則中均未做微生物限度檢查的強(qiáng)制要求，僅在附錄中做出通用性要求，但很多企業(yè)不清楚這一變化的背景和兩個(gè)必要前提，即嚴(yán)格的原料藥微生物控制和嚴(yán)格的GMP管理，從而放松了對(duì)這些產(chǎn)品的微生物控制，可能會(huì)存在潛在風(fēng)險(xiǎn)。 中國(guó)藥典規(guī)定，對(duì)藥品原輔料藥的微生物檢查參照相應(yīng)用途的藥品進(jìn)行，即用于
21、非滅菌制劑生產(chǎn)的原料藥應(yīng)按相應(yīng)制劑的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行微生物限度控制；而用于滅菌制劑的原料藥一般應(yīng)符合無(wú)菌要求?？紤]到生產(chǎn)過(guò)程中污染微生物可能發(fā)生的變化，國(guó)外企業(yè)通常在生產(chǎn)上自覺(jué)執(zhí)行比制劑要求更為嚴(yán)格的原料藥微生物。,40,原料藥的微生物標(biāo)準(zhǔn)問(wèn)題,（1）重視不夠 目前一些企業(yè)對(duì)原料藥微生物控制的重要性和意義認(rèn)識(shí)不夠，對(duì)源頭上的問(wèn)題解決不好，加之GMP執(zhí)行流于形式，造成了頻繁的藥品微生物污染事故發(fā)生。 （2）標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)不清楚 目前中國(guó)藥典絕大多數(shù)藥品原輔料各論項(xiàng)下沒(méi)有明確的微生物檢查標(biāo)準(zhǔn)，而是需要根據(jù)實(shí)際用途去確定相應(yīng)的控制標(biāo)準(zhǔn)。 （3）抽樣不正確 原料藥微生物檢查的抽樣除了應(yīng)參照相應(yīng)的抽樣
22、原則，還應(yīng)強(qiáng)調(diào)的一點(diǎn)是抽樣的環(huán)境要求和無(wú)菌操作要求，不當(dāng)?shù)某闃臃椒ú粌H可以使得樣本對(duì)總體沒(méi)有代表意義、抽取的樣本被污染，甚至可因抽樣而污染原料。 （4）方法不合理 對(duì)于原料藥微生物檢查方法驗(yàn)證應(yīng)與藥品制劑微生物檢查方法驗(yàn)證同等重視，否則同樣存在檢驗(yàn)方法不合理、不科學(xué)，檢驗(yàn)結(jié)果沒(méi)有意義的問(wèn)題。,41,藥材原粉的界定問(wèn)題,生藥原粉；2010年版一部對(duì)動(dòng)物類原藥材粉作了明確規(guī)定，利于標(biāo)準(zhǔn)的正確理解和執(zhí)行。具體規(guī)定如下： 含動(dòng)物類原藥材粉的口服中藥制劑要求不得檢出沙門(mén)菌。其中的動(dòng)物類原藥材粉是指除蜂蜜、王漿、動(dòng)物角、阿膠外的所有動(dòng)物類原藥材粉，如牡蠣、珍珠等貝類，海蜇等水產(chǎn)品，冬蟲(chóng)夏草、人工牛黃等。,含豆豉、神曲等發(fā)酵成分的中成藥制劑標(biāo)準(zhǔn)問(wèn)題,,42,純化水問(wèn)題,2005版二部P303 2010版二部P412 純化水（Purified Water） 【檢查】微生物限度 取本品，采用薄膜過(guò)濾法處理后，依法檢查（附錄XI J），細(xì)菌、霉菌和酵母菌總數(shù)每1ml不得過(guò)100個(gè)。 這一標(biāo)準(zhǔn)源于國(guó)外，在其需氣菌培養(yǎng)基統(tǒng)一規(guī)定的情況下簡(jiǎn)單易行。但我國(guó)引入后，造成企業(yè)大量的意見(jiàn)。在藥典現(xiàn)有條件下實(shí)際采用2ml實(shí)驗(yàn)，1ml測(cè)定細(xì)菌數(shù)、1ml測(cè)定霉菌和酵母菌數(shù)，再加合起來(lái)作為一個(gè)檢驗(yàn)結(jié)果。 主要問(wèn)題還是培養(yǎng)基和檢驗(yàn)體系的差異。,43,謝謝大家！,,
中國(guó)藥典衛(wèi)生學(xué)檢驗(yàn)培訓(xùn)版《中國(guó)藥典》微生物檢查法.ppt
