高中生物 專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) 階段質(zhì)量檢測A卷 學(xué)業(yè)水平達(dá)標(biāo) 新人教版選修1
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1、 階段質(zhì)量檢測(五) DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) (A卷 學(xué)業(yè)水平達(dá)標(biāo)) (滿分:100分 時間:40分鐘) 一、選擇題(每小題4分,共48分) 1.在血紅蛋白的提取和分離實驗中,下列操作正確的是( ) A.分離紅細(xì)胞時需去除上層透明的黃色血漿 B.紅細(xì)胞釋放出血紅蛋白時只需加入蒸餾水 C.分離血紅蛋白溶液是低速短時間離心 D.洗脫時,待紅色蛋白質(zhì)下移即開始收集流出液 解析:選A 分離紅細(xì)胞時要及時除去血漿蛋白,紅細(xì)胞釋放血紅蛋白時需要加入蒸餾水和甲苯。分離血細(xì)胞時,要短時低速離心,即一般為500 r/min,離心2 min,否則白細(xì)胞會一同沉淀,達(dá)不到分離效果。分離血紅蛋白時要
2、高速長時間離心,以2 000 r/min的速度離心10 min。洗脫時待紅色的蛋白質(zhì)接近色譜柱底端時用試管收集流出液。 2.下列屬于PCR技術(shù)條件的是( ) ①單鏈的脫氧核苷酸序列引物 ②目的基因所在的DNA片段?、勖撗鹾塑账帷、芎颂呛塑账? ⑤DNA連接酶 ⑥D(zhuǎn)NA聚合酶?、逥NA限制性內(nèi)切酶 A.①②③⑤ B.①②③⑥ C.①②③⑤⑦ D.①②④⑤⑦ 解析:選B PCR技術(shù)需要DNA模板、分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種引物、四種脫氧核苷酸、耐熱的DNA聚合酶。 3.下列關(guān)于“DNA粗提取與鑒定”實驗的敘述,正確的是( ) A.洗滌劑能瓦解細(xì)胞膜并增加DNA在NaC
3、l溶液中的溶解度 B.將DNA絲狀物放入二苯胺試劑中沸水浴后冷卻變藍(lán) C.常溫下菜花勻漿中有些酶類會影響DNA的提取 D.用玻棒緩慢攪拌濾液會導(dǎo)致DNA獲得量減少 解析:選C 提取植物細(xì)胞中DNA時加入洗滌劑可瓦解植物細(xì)胞的細(xì)胞膜,利于DNA的釋放,但不能增加DNA在NaCl溶液中的溶解度;含DNA的絲狀物應(yīng)先溶解在物質(zhì)的量濃度為2 mol/L的NaCl溶液中,再加入二苯胺試劑在沸水浴條件下檢測,冷卻后觀察變成藍(lán)色;菜花勻漿中含有DNA水解酶,常溫下其活性較高,可催化DNA水解從而影響DNA的提??;用玻璃棒緩慢攪拌濾液不會使DNA分子斷裂,即不會減少DNA的提取量。 4.樣品的加入和
4、洗脫的操作錯誤的是( ) A.加樣前,打開色譜柱下端的流出口,使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到凝膠面的下面 B.加樣后,打開下端出口,使樣品滲入凝膠床內(nèi) C.等樣品完全進(jìn)入凝膠層后,關(guān)閉下端出口 D.用吸管小心地將1 mL透析后的樣品加到色譜柱的頂端,不要破壞凝膠面 解析:選A 加樣前,打開色譜柱下端的流出口,使柱內(nèi)凝膠面上的緩沖液緩慢下降到與凝膠面平齊。 5.關(guān)于DNA的實驗,敘述正確的是( ) A.用兔的成熟紅細(xì)胞可提取DNA B.PCR的每個循環(huán)一般依次經(jīng)過變性—延伸—復(fù)性三步 C.DNA溶液與二苯胺試劑混合,沸水浴后生成藍(lán)色產(chǎn)物 D.用甲基綠對人的口腔上皮細(xì)胞染
5、色,細(xì)胞核呈綠色,細(xì)胞質(zhì)呈紅色 解析:選C 兔屬于哺乳動物,其成熟的紅細(xì)胞中無細(xì)胞核,不適合作為提取DNA的材料。PCR技術(shù)的每個循環(huán)一般依次經(jīng)過變性—復(fù)性—延伸三步。DNA溶液在沸水浴條件下,遇二苯胺呈藍(lán)色。用甲基綠吡羅紅混合染色劑對細(xì)胞進(jìn)行染色時,細(xì)胞核(含DNA)呈綠色,細(xì)胞質(zhì)(含RNA)呈紅色,僅用甲基綠無法對細(xì)胞質(zhì)進(jìn)行染色。 6.下列關(guān)于有關(guān)實驗的敘述正確的是( ) A.最先從凝膠色譜柱中分離出來的是相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子 B.向初步純化的DNA中加入二苯胺溶液,可直接觀察到溶液呈藍(lán)色 C.加酶洗衣粉中常用的酶制劑包括堿性脂肪酶、酸性蛋白酶等 D.裝填凝膠色譜柱時
6、,下端的尼龍管應(yīng)先關(guān)閉后打開 解析:選A 采用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時,最先從凝膠色譜柱中分離出來的是相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)分子;用二苯胺鑒定DNA時需要水浴加熱;加酶洗衣粉中常用的酶制劑是堿性脂肪酶、堿性蛋白酶、淀粉酶和纖維素酶;裝填凝膠色譜柱時,下端的尼龍管應(yīng)始終處于開啟狀態(tài)。 7.PCR過程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相比,主要有兩點不同,它們是( ) ①PCR過程常用的引物是人工合成的DNA單鏈 ②PCR過程不需要DNA聚合酶?、跴CR過程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通過對反應(yīng)溫度的控制來實現(xiàn)的?、躊CR過程中,DNA不需要解旋,直接以雙鏈DNA為模板進(jìn)行復(fù)制 A.③④
7、B.①② C.①③ D.②④ 解析:選C PCR過程與細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制過程相比,主要有兩點不同。第一,PCR過程常用的引物是人工合成的DNA單鏈,其長度通常為20~30個脫氧核苷酸。第二,PCR過程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通過對反應(yīng)溫度的控制來實現(xiàn)的。 8.下列關(guān)于現(xiàn)代生物技術(shù)應(yīng)用的敘述,正確的有( ) ①在蛋白質(zhì)的提取和分離實驗中,凝膠色譜法可將不同相對分子質(zhì)量的蛋白質(zhì)分離出來?、谠赑CR中,引物的結(jié)構(gòu)和長度決定DNA子鏈從5′端向3′端延伸?、墼诘鞍踪|(zhì)的提取和分離實驗中,透析的目的是去除樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) ④在多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)中,TaqDNA聚合酶只能特異性地復(fù)
8、制整個DNA的部分序列 A.1項 B.2項 C.3項 D.4項 解析:選C DNA復(fù)制時,DNA的合成方向總是從子鏈的5′端向3′端延伸,和引物的結(jié)構(gòu)和長短沒有關(guān)系,故②錯誤。 9.DNA的粗提取與鑒定實驗中有三次過濾: (1)過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細(xì)胞液; (2)過濾含黏稠物的0.14 mol/L NaCl溶液; (3)過濾溶解有DNA的2 mol/L NaCl溶液。 以上三次過濾分別為了獲得( ) A.含核物質(zhì)的濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液 B.含核物質(zhì)的濾液、濾液中DNA黏稠物、含DNA的濾液 C.含核物質(zhì)的濾液、濾液中DNA黏稠物、紗布上的DNA
9、D.含較純的DNA濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液 解析:選A 用蒸餾水稀釋雞血細(xì)胞液,使血細(xì)胞的細(xì)胞膜、核膜破裂,釋放出核物質(zhì),此時過濾得到含核物質(zhì)的濾液。第二次過濾是因DNA在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最小,DNA析出成絲狀黏稠物,經(jīng)過濾留在紗布上。第三次,是將第二次獲得的黏稠物溶解在2 mol/L的NaCl溶液后,過濾除去雜質(zhì)獲得含DNA的濾液。 10.聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR技術(shù))是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,由高溫變性、低溫復(fù)性及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個周期,循環(huán)進(jìn)行,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增,其簡要過程如下圖所示。 下列關(guān)于PCR技術(shù)的敘述
10、,不正確的是( ) A.PCR技術(shù)是在實驗室中以少量DNA制備大量DNA的技術(shù) B.反應(yīng)中新合成的DNA又可以作為下一輪反應(yīng)的模板 C.PCR技術(shù)中以核糖核苷酸為原料,以指數(shù)方式擴(kuò)增 D.應(yīng)用PCR技術(shù)與探針雜交技術(shù)可以檢測基因突變 解析:選C PCR的原理就是DNA的復(fù)制,原料應(yīng)該是脫氧核糖核苷酸而不是核糖核苷酸。 11.下列關(guān)于DNA的粗提取實驗和血紅蛋白的提取實驗的敘述,正確的是( ) A.前者選擇雞血細(xì)胞作為材料較好,后者選擇哺乳動物成熟的紅細(xì)胞作為實驗材料較好 B.樣品預(yù)處理時,前者靜置1 d處理除去上清液;后者需要加入清水,反復(fù)低速短時間離心洗滌,至上清液無黃色
11、 C.在DNA粗提取實驗中,往2 mol/L 氯化鈉溶液中加入蒸餾水析出DNA時,應(yīng)該緩慢加入,直到出現(xiàn)黏稠物為止 D.洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無機(jī)鹽等 解析:選A 雞血細(xì)胞有細(xì)胞核,適于提取DNA;哺乳動物成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核和眾多細(xì)胞器,適用于提取血紅蛋白。提取血紅蛋白的實驗中,洗滌紅細(xì)胞時,不能加清水,應(yīng)該加入生理鹽水,否則細(xì)胞提早釋放出血紅蛋白與雜質(zhì)混合,加大提取難度。DNA初次析出時,加蒸餾水至黏稠物不再增加為止。洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜質(zhì)蛋白,以利于血紅蛋白的分離和純化。 12.已知某樣品中存在甲、乙、丙、丁、戊五種蛋白質(zhì)分子,其分子大小、電荷的性質(zhì)和數(shù)量情況如
12、右圖所示。下列有關(guān)蛋白質(zhì)分離的敘述正確的是( ) A.將樣品裝入透析袋中透析12 h,若分子乙保留在袋內(nèi),則分子丙也保留在袋內(nèi) B.若用凝膠色譜柱分離樣品中的蛋白質(zhì),則分子甲移動速度最快 C.若將樣品以2 000 r/min的速度離心10 min,分子戊存在于沉淀中,則分子甲也存在于沉淀中 D.若用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳分離樣品中的蛋白質(zhì)分子,則分子甲和分子戊形成的電泳帶相距最遠(yuǎn) 解析:選A 透析袋可使小分子物質(zhì)透過,而大分子物質(zhì)不能透過,丙的相對分子質(zhì)量大于乙,若乙留在袋內(nèi),則丙一定也留在袋內(nèi),故A項正確。B選項中甲相對分子質(zhì)量最小,在凝膠色譜柱中移動的速度應(yīng)最慢。C選項戊沉
13、淀,甲不一定沉淀。D選項利用分子大小的差異將其分離,故相距最遠(yuǎn)的應(yīng)為丙和甲。 二、非選擇題(共52分) 13.(18分)下圖為“DNA的粗提取與鑒定”實驗的相關(guān)操作。 (1)圖中實驗材料A可以是________等,研磨前加入的B應(yīng)該是________。 (2)通過上述所示步驟得到濾液C后,再向濾液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是____________________,再過濾得到濾液D,向濾液D中加入蒸餾水的目的是________________________________________________________________________。 (3)在“
14、DNA的粗提取與鑒定”實驗中,將含有一定雜質(zhì)的DNA絲狀物分別放入體積為2 mL的4種溶液中,經(jīng)攪拌后過濾,獲得如下表所示的4種濾液,含DNA最少的是濾液________。 1 B液中 攪拌研磨后過濾 濾液E 2 2 mol/L的NaCl溶液中 攪拌后過濾 濾液F 3 0.14 mol/L的NaCl溶液中 攪拌后過濾 濾液G 4 冷卻的95%的酒精溶液中 攪拌后過濾 濾液H (4)DNA鑒定的原理是_______________________________________________________ ________________________
15、________________________________________________。 解析:(1)用洋蔥、菜花等的破碎細(xì)胞作實驗材料時,加入一定量的洗滌劑和食鹽,洗滌劑可以溶解細(xì)胞膜,有利于DNA的釋放,食鹽主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。(2)在含有DNA的濾液中,加入2 mol/L的NaCl溶液,可以使DNA溶解而雜質(zhì)析出;在濾液D中加入蒸餾水,當(dāng)NaCl溶液濃度0.14 mol/L時,DNA溶解度最小而被析出。(3)在濾液E中,只是除去了部分雜質(zhì),則含DNA較多;在濾液F中,除去了較多的蛋白質(zhì)等,則含DNA最多;在濾液G中,因DNA析出,則含DNA較少;在濾液H中
16、,因DNA不溶于體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精,則含DNA最少。(4)DNA遇二苯胺(沸水浴)會被染成藍(lán)色。 答案:(1)洋蔥(菜花等) 洗滌劑和食鹽 (2)使DNA溶解 使DNA(溶解度下降而沉淀)析出 (3)H (4)在沸水浴條件下,DNA遇二苯胺會被染成藍(lán)色 14.(16分)PCR是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的方法,用于放大特定的DNA片段,數(shù)小時內(nèi)可使目的基因片段擴(kuò)增到數(shù)百萬個拷貝的分子生物學(xué)技術(shù)。PCR需要模板DNA、引物、脫氧核糖核苷酸和DNA聚合酶等條件。下圖為模板DNA分子及2種引物,請回答相關(guān)問題: (1)PCR的全稱是________。PCR與體內(nèi)DNA復(fù)制的不同之處
17、主要表現(xiàn)在溫度環(huán)境的不同,在PCR中先用95 ℃高溫處理的目的是________;而這一過程中在細(xì)胞內(nèi)是通過_______實現(xiàn)的。 (2)在PCR技術(shù)中所需要的引物實質(zhì)上是一種____________。請在圖中繪出引物結(jié)合的位置。 (3)若將1個DNA分子拷貝10次,則需要在緩沖液中至少加入________個引物。 (4)DNA子鏈復(fù)制的方向是________,這是由于___________________________。 解析:PCR技術(shù)又稱多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),在PCR中先用95 ℃高溫處理的目的是使DNA分子中的氫鍵斷裂,兩條鏈解開,即使DNA分子變性。引物是一種單鏈DNA或RNA分
18、子,它能與解開的DNA母鏈的3′端結(jié)合,為DNA聚合酶提供吸附位點,使DNA聚合酶從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸,從而決定了DNA子鏈復(fù)制的方向是5′端到3′端。在DNA分子擴(kuò)增時,需要2種引物,由于新合成的子鏈都需要引物作為復(fù)制的起點,故所需的引物數(shù)目等于新合成的DNA子鏈數(shù)目,即(2×210-2)=211-2(個)。 答案:(1)多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) 使DNA變性(使DNA的兩條鏈解開) 解旋酶的催化 (2)單鏈DNA或RNA分子 見右圖 (3)211-2 (4)5′端到3′端 DNA聚合酶只能從引物的3′端拼接單個脫氧核苷酸分子 15.(18分)某生物興趣小組在“蛋白質(zhì)的
19、提取和分離”實驗中,準(zhǔn)備從豬的血液中初步提取血紅蛋白,設(shè)計的“血紅蛋白提取、分離流程圖”如下: 試回答下列有關(guān)問題: (1)樣品處理中紅細(xì)胞的洗滌要用________反復(fù)沖洗、離心。向紅細(xì)胞懸液中加入一定量的低濃度pH=7.0的緩沖液并充分?jǐn)嚢?,可以破碎紅細(xì)胞,破碎細(xì)胞的原理是________________________________________________________________________。 (2)血紅蛋白粗分離階段,透析的目的是__________________________________,若要盡快達(dá)到理想的透析效果,可以________(寫出一
20、種方法)。 (3)電泳利用了待分離樣品中各種分子的____________等的差異,而產(chǎn)生不同遷移速度,實現(xiàn)各種分子的分離。 (4)一同學(xué)通過血紅蛋白醋酸纖維薄膜電泳,觀察到正常人和鐮刀型細(xì)胞貧血癥患者的血紅蛋白電泳結(jié)果如圖所示。由圖可知,攜帶者有________種血紅蛋白,從分子遺傳學(xué)的角度作出的解釋是________________ _______________________________________________________________________________________________________________________________
21、_。 解析:(1)洗滌紅細(xì)胞所用的溶液是生理鹽水;根據(jù)滲透作用原理,將紅細(xì)胞置于低滲溶液中,紅細(xì)胞會吸水漲破,釋放出血紅蛋白。(2)血紅蛋白粗分離階段,透析的目的是除去樣品中的小分子雜質(zhì);可通過增加緩沖液的量或及時更換緩沖液等 方法縮短透析時間,能盡快達(dá)到理想的透析效果。(3)由于各種分子帶電性質(zhì)以及分子大小、形狀等的差異,在電泳過程中產(chǎn)生了不同的遷移速度,實現(xiàn)各種分子的分離。(4)根據(jù)圖示可知,鐮刀型細(xì)胞貧血癥的攜帶者含有兩種血紅蛋白,原因是攜帶者具有(控制血紅蛋白的)一對等位基因,分別控制合成兩種不同的蛋白質(zhì)。 答案:(1)生理鹽水 滲透原理(當(dāng)外界溶液濃度低于動物細(xì)胞內(nèi)液濃度時,細(xì)胞吸水漲破) (2)除去小分子雜質(zhì) 增加緩沖液的量或及時更換緩沖液 (3)帶電性質(zhì)以及分子大小、形狀 (4)2 攜帶者具有(控制血紅蛋白的)一對等位基因,可以控制合成兩種不同的蛋白質(zhì) 6EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F3756EDBC3191F2351DD815FF33D4435F375
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