免疫真題大題考試復(fù)習(xí)重點總結(jié)

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1、本文格式為Word版,下載可任意編輯 免疫真題大題考試復(fù)習(xí)重點總結(jié)  2021 年 年 10 月 免疫 26、簡述抗原自身因素是如何影響抗原抗體反應(yīng)的  P22 抗原的理化性狀、抗原表位的種類和數(shù)目均可影響抗原抗體反應(yīng)的結(jié)果。如顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后形成凝集現(xiàn)象;可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后形成沉淀現(xiàn)象;粗糙型細(xì)菌在生理鹽水中易消失自凝;血細(xì)胞同 IgG 類抗體反應(yīng)可不消失凝集現(xiàn)象;單價抗原(半抗原)與相應(yīng)抗體結(jié)合后不消失沉淀現(xiàn)象。  27、簡述免疫濁度測定的基本原理  P89 抗原、抗體在特別緩沖液中反應(yīng)而又比例合適(抗體過量)時,形成的小分子可溶性免疫復(fù)合

2、物在增濁劑的作用下,快速形成免疫復(fù)合物微粒,使反應(yīng)液消失濁度。在抗體過量且固定的條件下,形成的免疫復(fù)合物量隨抗原量增加而增加,反應(yīng)液的濁度亦隨之增加,即待測抗原量與反應(yīng)后溶液的濁度呈正相關(guān)。用系列已知濃度的抗原標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行試驗,制備劑量反應(yīng)曲線,即可求出標(biāo)本中抗原含量。  28、簡述凝集反應(yīng)的影響因素  P97 (1)電解質(zhì):顆粒性抗原都帶負(fù)電荷,有相互排斥的作用,電解質(zhì)可降低抗原的電荷,使其易于凝集。一般用 0.85%的氯化鈉溶液稀釋血清與菌液。 ?。?)pH:一般凝集反應(yīng)合適的 pH 為 6-8. (3)溫度:除冷凝集素,一般溫度凹凸與血清學(xué)反應(yīng)速度正相關(guān)。但超過 6

3、0℃反而會破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),故凝集反應(yīng)通常以室溫或 37℃中進(jìn)行為宜 (4)抗體與抗原的比例:凝集反應(yīng)中多數(shù)狀況下,抗體濃度越高則反應(yīng)越強(前帶現(xiàn)象:抗體濃度過高,反而不消失明顯凝集)  29、什么叫血清???簡述其發(fā)生的機制  P249 (1)血清病屬于 III 型超敏反應(yīng)的全身性免疫復(fù)合物病。是指初次注射大量異種抗毒素血清1-2 周后,可消失發(fā)熱、皮疹,淋巴結(jié)腫大,關(guān)節(jié)腫痛和一過性蛋白尿等癥狀。 ?。?)發(fā)生氣制:一次大量注入異種抗毒素血清后,機體產(chǎn)生抗異種血清抗體,由于注入的異種血清尚未完全清除,兩者在抗原量多于抗體量的條件下結(jié)合,形成中等大小可溶性 IC,隨血流運行

4、至全身,沉積于腎小球基底膜、關(guān)節(jié)滑膜及皮下組織毛細(xì)血管壁中,引起一系列癥狀。 ?。?)血清病具有自限性停止注射抗毒素后癥狀可自行消退。有時應(yīng)用大劑量青霉素磺胺等藥物也可引起類似血清病樣的反應(yīng)。  30、簡述對疫苗平安問題的防范措施。  P271 疫苗都是用于健康人群,特殊是兒童的免疫制劑,其質(zhì)量的優(yōu)劣直接關(guān)系到千百萬人的健康和生命平安,因此在制作中應(yīng)特殊留意質(zhì)量管理。滅活疫苗菌種為致病性強的微生物,應(yīng)予徹底滅活;活疫苗的菌種要求遺傳性狀穩(wěn)定,無返祖,無致癌性;血液制品需對獻(xiàn)血員進(jìn)行嚴(yán)格檢查,確保血液不含病原體(如 HIV、HBV、HCV 等);應(yīng)盡可能削減各種疫苗接種后

5、的副作用,推舉口服接種或盡量削減注射次數(shù)。  31、什么是放射免疫分析和免疫放射分析?試比較二者之間的區(qū)分  P161 (1)放射免疫分析(RIA):標(biāo)記抗原與非標(biāo)記抗原對特異性抗體的競爭,待測的抗原量與結(jié)合的標(biāo)記抗原-抗體復(fù)合物呈反比,與游離的標(biāo)記抗原呈正比。 ?。?)免疫放射分析(IRMA):非競爭性免疫結(jié)合反應(yīng)。過量的標(biāo)記抗體與待測抗原反應(yīng),充分反應(yīng)后去除游離的標(biāo)記抗體,抗原-標(biāo)記抗體復(fù)合物的放射強度與待測抗原量呈正比。 ?。?)比較   32、試述 I 型超敏反應(yīng)皮膚試驗與 IV 型超敏反應(yīng)皮膚試驗的原理  P252 (1)I 型超敏反應(yīng)

6、皮膚試驗: ?、僭恚寒?dāng)變應(yīng)原通過皮膚挑刺、劃痕、皮內(nèi)注射等方法進(jìn)人致敏者皮膚,與吸附在肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面的特異性 IgE 結(jié)合,導(dǎo)致肥大細(xì)胞或嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒,釋放生物活性介質(zhì)。在 20~30 分鐘內(nèi)局部皮膚消失紅暈、紅斑、風(fēng)團(tuán)及瘙癢感,數(shù)小時后消逝。 ?、趹?yīng)用:查找過敏原,預(yù)防藥物或疫苗過敏 (2)V 型超敏反應(yīng)皮膚試驗 ①原理:用皮內(nèi)注射、皮膚班貼等方法使變應(yīng)原進(jìn)入已致敏機體,體內(nèi)致敏 T 細(xì)胞再次接觸相同變應(yīng)原后,釋放多種細(xì)胞因子,造成局部以單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞浸潤為主的炎癥反應(yīng)。48~72 小時內(nèi)局部消失紅腫、硬結(jié)或水皰。  ②應(yīng)用:查找過敏原,推斷變

7、應(yīng)原是否引起機體 V 型超敏反應(yīng)或機體的細(xì)胞免疫功能狀態(tài)。   2021 年 年 10 月 免疫 27、簡述補體結(jié)合試驗(CFT)的主要成分及檢測原理  P115 (1)主要成分有 5 種。已知抗原(或抗體)、待測抗體(或抗原)、補體系統(tǒng)、綿羊紅細(xì)胞、相應(yīng)抗體 (2)原理 ①直接補體結(jié)合試驗:若反應(yīng)系統(tǒng)中抗原與抗體特異結(jié)合,形成的抗原抗體復(fù)合物能將同時加人的補體激活,消耗掉補體。當(dāng)再加入指示系統(tǒng)時,反應(yīng)液中已無游離補體,不消失溶血,為補體結(jié)合試驗陽性,待檢標(biāo)本中含有已知抗原(或抗體)相應(yīng)抗體(或抗原)。反之,為補體結(jié)合試驗陰性。 ?、陂g接補體結(jié)合試驗:某些禽類抗血清或某

8、些疾病患者血清中常含有所謂抑制性抗體,當(dāng)其與相應(yīng)抗原特異結(jié)合后,既不能結(jié)合補體,還能阻擋抗原與隨后加入的抗體結(jié)合,故不能發(fā)生補體激活反應(yīng),反應(yīng)液中仍有游離補體存在。此時加入指示系統(tǒng)會消失溶血反應(yīng),為補體結(jié)合試驗陽性。  28、簡述細(xì)胞因子的檢測方法及特點。  P213 (1)細(xì)胞因子:是由活化免疫細(xì)胞和某些基質(zhì)細(xì)胞分泌的,能介導(dǎo)和調(diào)整免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)的小分子多肽 (2)生物學(xué)測定法:是檢測細(xì)胞因子某種特定的生物學(xué)活性,而無生物活性的細(xì)胞因子前體分子、降解產(chǎn)物、聚合物以及與蛋白質(zhì)或可溶性受體結(jié)合的細(xì)胞因子均不能用此法檢出。 ?。?)免疫學(xué)測定法:是用免疫學(xué)檢測技術(shù),如酶

9、聯(lián)免疫吸附試驗、放射免疫分析、酶聯(lián)免疫斑點試驗和免疫印跡等,將細(xì)胞因子作為蛋白質(zhì)抗原,用相應(yīng)的特異性抗體進(jìn)行測定;此法所測定的是細(xì)胞因子的蛋白含量,與其生物活性并不肯定成正比。 ?。?)分子生物學(xué)測定法:是采納分子生物學(xué)技術(shù),檢測細(xì)胞因子相應(yīng)的 DNA、RNA,反映的是細(xì)胞因子基因及其表達(dá)狀況。  29、簡述 ELISA 雙抗體夾心法"一步法'的原理及優(yōu)點  P121 (1)原理:在雙抗體夾心法檢測抗原時,采納針對抗原分子兩個不同抗原打算族的單克隆抗體分別作為固相抗體和原標(biāo)抗體??蓪⒋郎y樣品與酶標(biāo)抗體并為一步加入。 ?。?)優(yōu)點:使用高親和力的

10、單克隆抗體,雙位點一步法不但操作簡潔、時間縮短,而且敏感性和特異性也得到顯著提高。  (3)特點:①單克隆抗體分別作為固定抗體和酶標(biāo)抗體;②采納高親和力單抗可提高測定的敏感性和特異性;③標(biāo)本中抗原過量時會消失鉤狀效應(yīng)。  30、試分析由于檢測試劑因素引起免疫濁度法檢測結(jié)果假性上升的緣由  P95 ①抗體效價低于 1:20 會增加偽濁度 ②抗血清滅活處理 ③抗血清含有交叉反應(yīng)性抗體 ④PEG 濃度過高引起血清中雜蛋白的非特異性共沉 ⑤試劑污染(如細(xì)菌、塵埃等)和變質(zhì)  31、患者小紅近來早晨消失"打噴嚏、流鼻涕、流眼淚'等癥狀最初賜予感冒藥治療半

11、個 月無效,反而時不時還伴有晚間咳嗽或氣緊,讓小紅迮覺也睡擔(dān)心穩(wěn)了。隨后又按氣管炎 用抗生素進(jìn)行治療,治療 6 個多月末見好轉(zhuǎn)。隨后進(jìn)入另一家醫(yī)院做了一些檢測項目,結(jié) 果見下: ?。?)請依據(jù)以上臨床表現(xiàn)及試驗室檢測結(jié)果分析該患者可能患何疾病? IgE 明顯上升,懷疑超敏反應(yīng) ?。?)假如要進(jìn)一步確定該疾病病因,你建議患者做哪些檢測?  P243  2021 年 年 10 月 免疫 28、簡述細(xì)胞因子的概念及其檢測方法  P213 (1)細(xì)胞因子:是由活化免疫細(xì)胞和某些基質(zhì)細(xì)胞分泌得而,能介導(dǎo)和調(diào)整免疫反應(yīng)、炎癥反應(yīng)的小分子多肽。 ?。?)檢測方

12、法分為三大類:  ①生物學(xué)測定法:是檢測細(xì)胞因子某種特定的生物學(xué)活性,而無生物活性的細(xì)胞因子前體分子、降解產(chǎn)物、聚合物以及與蛋白質(zhì)或可路性受體結(jié)合的細(xì)胞因子均不能用此法檢出 ②免疫學(xué)測定法:將細(xì)胞因子作為蛋白質(zhì)抗原,用相應(yīng)的特異性抗體進(jìn)行測定。此法所測定的是細(xì)胞因子的蛋白含量,與其生物活性并不肯定成正比; ③分子生物學(xué)測定法是采納分子生物學(xué)技術(shù),檢測細(xì)胞因子相應(yīng)的 DNA 、RNA,反映的是細(xì)跑因子基因及其表達(dá)狀況。  29、簡述帶現(xiàn)象及其在免疫學(xué)檢測中的意義  P21 (1)帶現(xiàn)象:抗原抗體分子比例最合適的范圍,稱為抗原抗體反應(yīng)的等價帶。在等價帶前后分別為抗體過剩或抗

13、原過剩,形成的沉淀物少或無,這種現(xiàn)象在免疫測定中稱為帶現(xiàn)象。 ?。?)意義:消失抗體過量時,稱為前帶。消失抗原過量時,稱為后帶。  30、簡述免疫佐劑的概念及在抗血清制備中應(yīng)用免疫佐劑的目的  P68 (1)同抗原一起或預(yù)先注射到機體內(nèi),能增加機體對該抗原的免疫應(yīng)答或轉(zhuǎn)變免疫應(yīng)答類型的非特異性免疫增加性物質(zhì),稱為免疫佐劑。 ?。?)目的:是為了提高抗原的免疫原性,從而增加體液免疫和細(xì)胞免疫的水平.獲得高效價抗體。  31、簡述直接熒光顯微技術(shù)的原理及評價  P144 (1)熒光顯微技術(shù)是通過觀看固定標(biāo)本上熒光抗體的染色結(jié)果,進(jìn)行抗原的鑒定和定位。

14、  (2)其基本過程是:在標(biāo)本切片上滴加抗體試劑,使熒光抗體與標(biāo)本切片中組織或細(xì)胞表面的抗原進(jìn)行結(jié)合反應(yīng),洗滌除去游離的熒光抗體后,置熒光顯微鏡下觀看熒光現(xiàn)象,在黑暗背景上可見光明的特異熒光。 ?。?)評價: ?、贌晒怙@微鏡所用光源的波長比傳統(tǒng)顯微鏡光源的波長短 1/2,因此熒光顯微鏡的辨別力量超出了傳統(tǒng)顯微鏡的辨別率的極限 ②熒光顯微鏡技術(shù)具有高度靈敏性和專一性。它所用染料的量是極其微小的,只相當(dāng)于傳統(tǒng)顯微技術(shù)中染料消耗量的幾千分之一. ③熒光顯微鏡能夠直接顯示細(xì)胞內(nèi)的生物化學(xué)成分,并且顯示的彩色效果很光明,極易觀看,極易進(jìn)行定量分析,而且能以極低濃度的染料檢測出含量

15、極微的物質(zhì). ④隨著新的熒光染料的創(chuàng)造,可不斷擴大被測物質(zhì)的范圍.  32、某試驗室購買 ELISA 試劑盒進(jìn)行乙肝三對檢測 (1)乙肝三對包括哪幾個項目? 乙肝表面抗原、乙肝表面抗體、乙肝 e 抗原、乙肝 e 抗體、乙肝核心抗體 (2)每個項目的檢測采納哪種反應(yīng)類型? ①乙肝表面抗原:雙抗體夾心法 ②乙肝表面抗體:雙抗原夾心法 ③乙肝 e 抗原:雙抗體夾心法 ④乙肝 e 抗體:競爭抑制法 ⑤乙肝核心抗體:競爭抑制法  2021 年 年 10 月 免疫  27、簡述免疫電泳的原理及用途  【先電泳后集中】P89 (1)定義:將蛋白質(zhì)區(qū)帶電泳和雙向免疫集中相結(jié)合

16、的免疫化學(xué)分析技術(shù) (2)原理:先利用區(qū)帶電泳將樣品中不同的抗原蛋白質(zhì)分子在瓊脂凝膠內(nèi)分別成若干區(qū)帶,然后與電泳方向平行挖一小槽,加入相應(yīng)抗血清,與已分別的抗原在瓊脂凝膠內(nèi)作雙向免疫集中,各種抗原與抗體特異結(jié)合,在二者比例合適處形成弧形沉淀線。依據(jù)沉淀弧得而數(shù)量、形態(tài)、位置,對比已知標(biāo)準(zhǔn)抗原、抗體生成的,分析樣品中所含抗原成分及其性質(zhì)。  28、簡述免疫放射分析的優(yōu)點  P170 免疫放射分析(IRMA):非競爭性免疫結(jié)合反應(yīng)。過量的標(biāo)記抗體與待測抗原反應(yīng),充分反應(yīng)后去除游離的標(biāo)記抗體,抗原-標(biāo)記抗體復(fù)合物的放射強度與待測抗原量呈正比。  (1)敏感度高:①抗體分子含酪

17、氨酸多,可以結(jié)合多個放射性碘原子;②非競爭性免疫結(jié)合,抗體過量能與微少抗原充分結(jié)合。  (2)特異性高:要求待測物必需具有兩個結(jié)合位點,才能形成有效的雙抗體夾心復(fù)合物,交叉反應(yīng)低。  (3)標(biāo)記物穩(wěn)定,標(biāo)記簡單 (4)檢測范圍較寬:抗體量大,能結(jié)合較多的抗原 (5)穩(wěn)定性好:因標(biāo)記抗體和固相抗體均屬過量,不易受外界環(huán)境的影響;也不易受試驗操作的影響  29、HAT 培育基中英文 H、A 和 T 分別代表什么物質(zhì)及其作用  P72 【HAT 培育基:骨髓瘤細(xì)胞是一種缺陷型細(xì)胞,在 HAT 培育基上無法生長,所以骨髓瘤細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞也不能在該培育基上存活;脾

18、細(xì)胞和脾細(xì)胞自身融合的細(xì)胞能在 HAT培育基上正常生活,但不能增殖,所以經(jīng)過數(shù)代后,HAT 培育基上沒有脾細(xì)胞和脾細(xì)胞自身融合的細(xì)胞;骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞之間形成的融合細(xì)胞能在 HAT 培育基上正常生活,并無限增殖?!?  HAT (HHypoxanthine 次黃嘌呤,AAminopterin 氨基喋呤,TThymidine 胸腺嘧啶核苷) ?。?)氨基蝶吟(A)為葉酸拮抗物,用以阻斷細(xì)胞合成 DNA 的主要途徑 (2)次黃嘌呤(H)和胸腺嘧啶核苷(T)供應(yīng)核苷酸合成的前體,使細(xì)胞能通過替代途徑合成DNA。  30、時間辨別熒光免疫測定法具有較高的靈敏性和特異性,試分析其

19、標(biāo)記物-鑭系元素的熒光特點  P156 以鑭系元素鎮(zhèn)(Eu)鰲合劑作熒光標(biāo)記物,利用其長熒光壽命的特點,延長熒光測量時間,待短壽命的自然本底熒光完全衰退后再行測定,所得信號完全為長壽命鑭系螯合物的熒光,從而有效地消退非特異性本底熒光的干擾。  31、試述 I 型超敏反應(yīng)的發(fā)病機理及其主要的試驗室檢測方法  P243 (1)發(fā)病機理: ?、僦旅綦A段:變應(yīng)原進(jìn)入機體,激活 CD4+Th2 細(xì)胞和特異 B 細(xì)胞,誘導(dǎo)產(chǎn)生特異性 IgE 抗體。IgE 抗體吸附于肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面,使機體處于致敏狀態(tài)。 ?、诎l(fā)敏階段:已致敏機體再次遇到相同變應(yīng)原而發(fā)生超敏

20、反應(yīng)的過程。 ?。?)試驗室檢測方法I 型超敏反應(yīng)皮膚試驗: ?、僭恚寒?dāng)變應(yīng)原通過皮膚挑刺、劃痕、皮內(nèi)注射等方法進(jìn)人致敏者皮膚,與吸附在肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞表面的特異性 IgE 結(jié)合,導(dǎo)致肥大細(xì)胞或嗜堿性粒細(xì)胞脫顆粒,釋放生物  活性介質(zhì)。在 20~30 分鐘內(nèi)局部皮膚消失紅暈、紅斑、風(fēng)團(tuán)及瘙癢感,數(shù)小時后消逝。  ②應(yīng)用:查找過敏原,預(yù)防藥物或疫苗過敏  2021 年 年 10 月 免疫 27、簡述捕獲法 ELISA 的檢測原理及應(yīng)用  P122-123 (1)原理:將血清中全部的 IgM(特異性或非特異性)捕獲固定在固相上,去除 IgG

21、后,再測定特異性 IgM ?。?)應(yīng)用:用于檢測特異性的 IgM 抗體  28、試分析皮膚試驗消失假陽性的常見緣由 P254 (1)試驗溶液配置不當(dāng),過酸或過堿都會對皮膚產(chǎn)生非特異性刺激; (2)被試者皮膚反應(yīng)性過強,如有皮膚劃痕癥; (3)試驗抗原變質(zhì)或試驗抗原不純; (4)濃度過大  29、以檢測尿液 HCG 為例,說明間接凝集抑制試驗的檢測原理及結(jié)果推斷  P101 (1)間接凝集抑制試驗:是指已知抗原致敏的顆粒載體及相應(yīng)的抗體為診斷試劑,檢測標(biāo)本中是否存在與致敏抗原相同的抗原。  (2)不發(fā)生凝集者表明待測樣品中含有相應(yīng)抗原(或抗體)為陽性;發(fā)生

22、凝集者說明樣品中無相應(yīng)抗原(或抗體),為陰性。  30、為保證酶免檢測結(jié)果的牢靠性,在采集及保存樣本時應(yīng)留意什么? (1)在血液采集和運輸過程時,應(yīng)留意避開溶血。否則,紅細(xì)胞溶解時會釋放出血紅蛋白,血紅蛋白中的亞鐵血紅素具有過氧化物酶活性的物質(zhì),在以HRP為標(biāo)記的ELISA試驗測定中,可能會增加非特異性顯色而消失假陽性結(jié)果。 ?。?)血清標(biāo)本相宜在新奇時檢測,若推遲檢制需將標(biāo)本低溫保存。一般說來,在 5d 內(nèi)檢測的血清標(biāo)本,可放置于 4℃,超過 1 周檢測的需低溫冰存。由于反復(fù)冰融會使抗體效價降低,所以,對需要保存做多次抗體測定的血清標(biāo)本,應(yīng)少量分裝并冰存。 ?。?)從

23、標(biāo)本采集開頭就應(yīng)往意無菌操作,避開標(biāo)本破污染。由于菌體中可能含有內(nèi)源性 HRP,會導(dǎo)致假陽性結(jié)果的消失。  31、某試驗室采納免疫比濁法對 C3 進(jìn)行定量檢測,某天對臨床標(biāo)本進(jìn)行檢測時發(fā)覺當(dāng)天的檢測結(jié)果均偏高。 ?。?)試述免疫比濁法檢測 C3 的原理  P89 抗原、抗體在特定的電解質(zhì)溶液中反應(yīng)而又比例合適時,形成的小分子可溶性免疫復(fù)合物在  增濁劑的作用下,快速形成免疫復(fù)合物微粒,使反應(yīng)液消失濁度。  (2)試述導(dǎo)致檢測結(jié)果偏高的可能緣由  P95 偽濁度:指非待測抗原抗體特異結(jié)合生成的免疫復(fù)合物形成的濁度 ①標(biāo)本:混濁、高血脂、長期保存或反復(fù)凍融、處理不當(dāng) ②試劑:抗體效價低于 1:20 會增加偽濁度;抗血清滅活處理;抗血清中含有交叉反應(yīng)性抗體;PEG 濃度過高引起血清中雜蛋白的非特異性共沉;試劑污染(如細(xì)菌、塵埃等)和變質(zhì)。 ?、燮鞑模翰粔蚯鍧?、灰塵污染等 ④其他:緩沖液的離子類型與強度、pH 及反應(yīng)溫度都對濁度形成影響 第 10 頁 共 10 頁

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