高考生物大一輪復習 高考預測 生物技術(shù)實踐 1.2 微生物的培養(yǎng)與應用課件（選修1）

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1、第2課微生物的培養(yǎng)與應用考點一微生物的實驗室培養(yǎng)考點一微生物的實驗室培養(yǎng)核心知識回顧核心知識回顧1.1.培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：(1)(1)概念：人們按照微生物對概念：人們按照微生物對_的不同需求，的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。(2)(2)種類：液體培養(yǎng)基和種類：液體培養(yǎng)基和_培養(yǎng)基，二者的區(qū)別是培養(yǎng)基，二者的區(qū)別是是否添加是否添加_。營養(yǎng)物質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì)固體固體凝固劑凝固劑(3)(3)營養(yǎng)成分：營養(yǎng)成分：確定原則：根據(jù)微生物的確定原則：根據(jù)微生物的_。主要營養(yǎng)物質(zhì)：主要營養(yǎng)物質(zhì)：_、_、水和無機鹽。、水和無機鹽。其他條件：其他條件：pHpH、_和氧氣。和氧氣。需

2、要需要碳源碳源氮源氮源特殊營養(yǎng)特殊營養(yǎng)2.2.無菌技術(shù)：無菌技術(shù)：(1)(1)目的：獲得目的：獲得_。(2)(2)關(guān)鍵：防止關(guān)鍵：防止_的入侵。的入侵。(3)(3)常用方法：常用方法：_和和_。純凈的培養(yǎng)物純凈的培養(yǎng)物外來雜菌外來雜菌滅菌滅菌消毒消毒(4)(4)無菌技術(shù)的主要方法及適用對象無菌技術(shù)的主要方法及適用對象( (連一連連一連) )：3.3.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基：制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基： 一定體積一定體積稱量紙稱量紙稱量紙稱量紙蛋白胨蛋白胨瓊脂瓊脂pHpH高壓蒸汽高壓蒸汽1211211515303050504.4.純化大腸桿菌：純化大腸桿菌：(1)(1)原理：在培養(yǎng)基上將細菌

3、稀釋或分散成原理：在培養(yǎng)基上將細菌稀釋或分散成_細胞，細胞，使其長成單個的菌落，這個菌落就是純化的細菌菌落。使其長成單個的菌落，這個菌落就是純化的細菌菌落。單個單個(2)(2)主要方法及純化原理：主要方法及純化原理：主要方主要方法法_法法_法法平板示平板示意圖意圖純化純化原理原理通過通過_操作實現(xiàn)的操作實現(xiàn)的將菌液進行一系列的將菌液進行一系列的_和涂布平板和涂布平板操作實現(xiàn)的操作實現(xiàn)的平板劃線平板劃線稀釋涂布平板稀釋涂布平板連續(xù)劃線連續(xù)劃線梯度稀釋梯度稀釋5.5.菌種的保藏方法：菌種的保藏方法：(1)(1)臨時保藏法：對于臨時保藏法：對于_使用的菌種，先接種到試使用的菌種，先接種到試管的管的_

4、培養(yǎng)基上培養(yǎng)，然后放入培養(yǎng)基上培養(yǎng)，然后放入_的冰箱中的冰箱中保藏。保藏。(2)(2)甘油管藏法：對于需要甘油管藏法：對于需要_的菌種，先將菌的菌種，先將菌液轉(zhuǎn)入滅菌后的液轉(zhuǎn)入滅菌后的_中，混勻后放在中，混勻后放在_冷凍箱中冷凍箱中保存。保存。頻繁頻繁固體斜面固體斜面4 4長期保存長期保存甘油甘油-20-20【教材易漏邊角知識】選修【教材易漏邊角知識】選修1 P18“1 P18“旁欄小資料旁欄小資料”微生物的接種方法只有平板劃線法和稀釋涂布平板法微生物的接種方法只有平板劃線法和稀釋涂布平板法嗎？微生物接種的核心是什么？嗎？微生物接種的核心是什么？_。不是，微生物的接種技術(shù)還包括斜面接種、穿刺接

5、種不是，微生物的接種技術(shù)還包括斜面接種、穿刺接種等方法，其核心是防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度等方法，其核心是防止雜菌污染，保證培養(yǎng)物的純度【特別提醒【特別提醒】微生物培養(yǎng)的微生物培養(yǎng)的“三個提醒三個提醒”(1)(1)培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的確定方法。培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的確定方法。自養(yǎng)型微生物所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)是無機物，碳源自養(yǎng)型微生物所需的主要營養(yǎng)物質(zhì)是無機物，碳源可來自大氣中的可來自大氣中的COCO2 2，氮源可由含氮無機鹽提供。，氮源可由含氮無機鹽提供。異養(yǎng)型微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)主要是有機物，即碳異養(yǎng)型微生物所需的營養(yǎng)物質(zhì)主要是有機物，即碳源必須由含碳有機物提供，氮源也主要由有機物提供，源必須由

6、含碳有機物提供，氮源也主要由有機物提供，部分異養(yǎng)型微生物也可以利用無機氮源。部分異養(yǎng)型微生物也可以利用無機氮源。(2)(2)選擇無菌技術(shù)的原則。選擇無菌技術(shù)的原則?？紤]無菌技術(shù)的效果：滅菌的效果比消毒要好?？紤]無菌技術(shù)的效果：滅菌的效果比消毒要好?？紤]操作對象的承受能力：活體生物材料、操作者考慮操作對象的承受能力：活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒，而不能滅菌。的手等只能采用消毒，而不能滅菌。(3)(3)純化大腸桿菌的兩種方法的異同。純化大腸桿菌的兩種方法的異同。相同點：平板劃線法和稀釋涂布平板法都能獲得單相同點：平板劃線法和稀釋涂布平板法都能獲得單細胞菌落。細胞菌落。不同點：平板劃線法不

7、能對微生物計數(shù)，而稀釋涂不同點：平板劃線法不能對微生物計數(shù)，而稀釋涂布平板法能對微生物計數(shù)。布平板法能對微生物計數(shù)。高考角度全練高考角度全練角度角度1 1微生物的培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)1.(20161.(2016全國卷全國卷)空氣中的微生物在重力等作用下，空氣中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室可以一定程度地沉降。某研究小組欲用平板收集教室空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生空氣中的微生物，以了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況。實驗步驟如下：物的分布情況。實驗步驟如下：配制培養(yǎng)基配制培養(yǎng)基( (成分：牛肉膏、蛋白胨、成分：牛肉膏、蛋白胨、NaClN

8、aCl、X X、H H2 2O)O)；制作無菌平板；制作無菌平板；設(shè)置空白對照組和若干實驗組，進行相關(guān)操作；設(shè)置空白對照組和若干實驗組，進行相關(guān)操作；將各組平板置于將各組平板置于3737恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，統(tǒng)計恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，統(tǒng)計各組平板上菌落的平均數(shù)。各組平板上菌落的平均數(shù)?；卮鹣铝袉栴}：世紀金榜導學號回答下列問題：世紀金榜導學號7798221777982217回答下列問題：世紀金榜導學號回答下列問題：世紀金榜導學號7798221777982217(1)(1)該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于該培養(yǎng)基中微生物所需的氮來源于_。若要完成步驟若要完成步驟，該培養(yǎng)基中的成分，該培養(yǎng)基中的成分X

9、 X通常是通常是_。(2)(2)步驟步驟中，實驗組的操作是中，實驗組的操作是_。(3)(3)若在某次調(diào)查中，某一實驗組平板上菌落平均數(shù)為若在某次調(diào)查中，某一實驗組平板上菌落平均數(shù)為3636個個/ /平板，而空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了平板，而空白對照組的一個平板上出現(xiàn)了6 6個菌個菌落，這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了落，這種結(jié)果說明在此次調(diào)查中出現(xiàn)了_現(xiàn)象?，F(xiàn)象。若將若將30(30(即即36-6)36-6)個個/ /平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該平板作為本組菌落數(shù)的平均值，該做法做法_(_(填填“正確正確”或或“不正確不正確”) )?！窘忸}指南【解題指南】解答本題需要注意兩點：解答本題需要注意

10、兩點：(1)(1)明確培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分的來源。明確培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分的來源。(2)(2)理解實驗目的與實驗操作的對應關(guān)系。理解實驗目的與實驗操作的對應關(guān)系?！窘馕觥窘馕觥勘绢}主要考查微生物培養(yǎng)。本題主要考查微生物培養(yǎng)。(1)(1)微生物的生長需要碳源、氮源等營養(yǎng)物質(zhì)，培養(yǎng)基微生物的生長需要碳源、氮源等營養(yǎng)物質(zhì)，培養(yǎng)基中的牛肉膏、蛋白胨為微生物的生長既提供了碳源，中的牛肉膏、蛋白胨為微生物的生長既提供了碳源，也提供了氮源。微生物培養(yǎng)通常采用的培養(yǎng)基是固體也提供了氮源。微生物培養(yǎng)通常采用的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基，故題中培養(yǎng)基，故題中X X應是瓊脂，在培養(yǎng)基中起凝固劑的作應是瓊脂，在培養(yǎng)基中起凝固劑的作用

11、。用。(2)(2)本實驗的目的是了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物本實驗的目的是了解教室內(nèi)不同高度空氣中微生物的分布情況，應選擇在不同的高度放置平板，使之暴的分布情況，應選擇在不同的高度放置平板，使之暴露在空氣中一段時間，以利于空氣中微生物的沉降。露在空氣中一段時間，以利于空氣中微生物的沉降。(3)(3)空白對照實驗組不應出現(xiàn)菌落。產(chǎn)生了菌落說明在空白對照實驗組不應出現(xiàn)菌落。產(chǎn)生了菌落說明在此次實驗中平板被污染。用實驗組獲取的菌落數(shù)的平此次實驗中平板被污染。用實驗組獲取的菌落數(shù)的平均值減去污染產(chǎn)生的菌落數(shù)作為實驗的結(jié)果，這種做均值減去污染產(chǎn)生的菌落數(shù)作為實驗的結(jié)果，這種做法不正確，應在防止污染的情

12、況下重新實驗，以獲得法不正確，應在防止污染的情況下重新實驗，以獲得較準確的數(shù)據(jù)。較準確的數(shù)據(jù)。答案：答案：(1)(1)牛肉膏、蛋白胨瓊脂牛肉膏、蛋白胨瓊脂(2)(2)將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上，將各實驗組平板分別放置在教室不同高度的位置上，開蓋暴露一段時間開蓋暴露一段時間(3)(3)污染不正確污染不正確【知識總結(jié)【知識總結(jié)】培養(yǎng)基中的培養(yǎng)基中的“碳源和氮源碳源和氮源”比較比較比較比較項目項目概念概念來源來源碳源碳源能為微生物提能為微生物提供所需碳元素供所需碳元素的營養(yǎng)物質(zhì)的營養(yǎng)物質(zhì)無機碳源：無機碳源：COCO2 2、NaHCONaHCO3 3等；等；有機碳源：糖類、脂肪有機碳

13、源：糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等酸、花生粉餅、石油等比較比較項目項目概念概念來源來源氮源氮源能為微生物提能為微生物提供所需氮元素供所需氮元素的營養(yǎng)物質(zhì)的營養(yǎng)物質(zhì)無機氮源：無機氮源：N N2 2、氨、銨鹽、氨、銨鹽、硝酸鹽等；硝酸鹽等；有機氮源：尿素、牛肉有機氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等膏、蛋白胨、氨基酸等2.(20132.(2013全國卷全國卷)臨床使用抗生素前，有時需要做臨床使用抗生素前，有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時，首先要從病人身上獲取少量細菌耐藥實驗。實驗時，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實驗步驟操作，以確定某致病樣本，然后按照一定的實驗步驟操作，以確定某致病菌

14、對不同抗生素的敏感性。菌對不同抗生素的敏感性?；卮鹣铝袉栴}：世紀金榜導學號回答下列問題：世紀金榜導學號7798221877982218(1)(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用_法或法或_法將樣本接種法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)(2)取該單菌落適當稀釋，用取該單菌落適當稀釋，用_法接種于固體法接種于固體培養(yǎng)基表面，在培養(yǎng)基表面，在3737培養(yǎng)箱中培養(yǎng)培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h24 h，使其均勻生，使其均勻生長，布滿平板。長，布滿平板。(3)(3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感

15、性，將分別含為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性，將分別含有有A A、B B、C C、D D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時間后，含的不同位置，培養(yǎng)一段時間后，含A A的濾紙片周圍出現(xiàn)的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素透明圈，說明該致病菌對抗生素A_A_；含含B B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素生素B_B_；含；含C C的濾紙片周圍的透明圈比含的濾紙片周圍的透明圈比含A A的小，說明的小，說明_；含含D D的濾紙片周圍的透明圈也比含的濾紙片周圍的透明圈也比含A A的小

16、，且透明圈中的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落出現(xiàn)了一個菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素很可能是抗生素D D的的_。(4)(4)根據(jù)上述實驗結(jié)果，為達到抗菌目的，最好應選根據(jù)上述實驗結(jié)果，為達到抗菌目的，最好應選用抗生素用抗生素_?！窘忸}指南【解題指南】解答本題注意兩個方面：解答本題注意兩個方面：(1)(1)分離微生物方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。分離微生物方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。(2)(2)透明圈的大小表示此種抗生素抗菌能力的強弱。透明圈的大小表示此種抗生素抗菌能力的強弱。【解析【解析】本題考查微生物接種和抗生素抗菌能力判斷。本題考

17、查微生物接種和抗生素抗菌能力判斷。(1)(1)在微生物的培養(yǎng)過程中，常用來分離微生物的方法在微生物的培養(yǎng)過程中，常用來分離微生物的方法是稀釋涂布是稀釋涂布( (平板平板) )法或平板劃線法。法或平板劃線法。(2)(2)為了使微生物在培養(yǎng)基上能夠均勻分布，一般用涂為了使微生物在培養(yǎng)基上能夠均勻分布，一般用涂布法將微生物接種在培養(yǎng)基上。布法將微生物接種在培養(yǎng)基上。(3)(3)在抗藥性檢驗過程中，如果在抗生素周圍出現(xiàn)透明在抗藥性檢驗過程中，如果在抗生素周圍出現(xiàn)透明的圓圈，說明此種抗生素可抑制該細菌生長；透明圈的圓圈，說明此種抗生素可抑制該細菌生長；透明圈的大小表示此種抗生素抗菌能力的強弱，據(jù)此可判斷

18、的大小表示此種抗生素抗菌能力的強弱，據(jù)此可判斷A A、B B、C C抗菌能力強弱依次是抗菌能力強弱依次是A A、C C、B B；D D的透明圈中出現(xiàn)的透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，說明該菌落對此種抗生素具有耐藥性。了一個菌落，說明該菌落對此種抗生素具有耐藥性。(4)(4)實驗結(jié)果表明抗生素實驗結(jié)果表明抗生素A A對該致病菌的抗菌效果最好。對該致病菌的抗菌效果最好。答案：答案：(1)(1)平板劃線稀釋涂布平板劃線稀釋涂布( (平板平板)()(或涂布或涂布) )(2)(2)涂布涂布(3)(3)敏感不敏感該致病菌對敏感不敏感該致病菌對C C的敏感性比對的敏感性比對A A的弱的弱耐藥菌耐藥菌(4)A(4)A

19、角度角度2 2無菌技術(shù)無菌技術(shù)3.(20173.(2017臨川模擬臨川模擬) )牛奶中富含蛋白質(zhì)，長期飲用有牛奶中富含蛋白質(zhì)，長期飲用有助于增強體質(zhì)，但牛奶同時也是多種疾病的傳播載體。助于增強體質(zhì)，但牛奶同時也是多種疾病的傳播載體。國家標準是每毫升牛奶中細菌數(shù)小于國家標準是每毫升牛奶中細菌數(shù)小于30 00030 000個。以下個。以下是牛奶消毒及細菌檢測實驗。分析回答：是牛奶消毒及細菌檢測實驗。分析回答：(1)(1)圖中步驟圖中步驟稱為稱為_消毒法。步驟消毒法。步驟是是_。(2)(2)培養(yǎng)基中的蛋白胨可以為微生物提供培養(yǎng)基中的蛋白胨可以為微生物提供_。進。進行步驟行步驟操作時，應選用下列中的哪

20、種工具？操作時，應選用下列中的哪種工具？_。為了避免雜菌污染，。為了避免雜菌污染，此步驟應在此步驟應在_附近進行。附近進行。(3)(3)為了判斷牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基制作是否合格，應該為了判斷牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基制作是否合格，應該_?！窘馕觥窘馕觥?1)(1)題圖中步驟題圖中步驟對牛奶進行消毒采用了對牛奶進行消毒采用了8080、15 min15 min恒溫水浴加熱，這種消毒法稱為巴氏消毒法。恒溫水浴加熱，這種消毒法稱為巴氏消毒法。根據(jù)題圖提供的信息可知，步驟根據(jù)題圖提供的信息可知，步驟是系列稀釋或梯度是系列稀釋或梯度稀釋。稀釋。(2)(2)微生物的營養(yǎng)物質(zhì)主要有碳源、氮源、水和無機鹽微生物的營養(yǎng)物質(zhì)

21、主要有碳源、氮源、水和無機鹽等，有的微生物還需要特殊的營養(yǎng)物質(zhì)，如生長因子等，有的微生物還需要特殊的營養(yǎng)物質(zhì)，如生長因子和維生素等，蛋白胨主要為微生物提供碳源、氮源和維和維生素等，蛋白胨主要為微生物提供碳源、氮源和維生素。進行步驟生素。進行步驟操作后需培養(yǎng)計數(shù)，因此該接種操作操作后需培養(yǎng)計數(shù)，因此該接種操作的方法是稀釋涂布平板法，應選用的方法是稀釋涂布平板法，應選用B(B(涂布器涂布器) )作為接種作為接種工具。為了避免雜菌污染，步驟工具。為了避免雜菌污染，步驟應在酒精燈火焰附近應在酒精燈火焰附近進行。進行。(3)(3)為了判斷牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基制作是否合格，應該為了判斷牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基制作

22、是否合格，應該將一個未接種的培養(yǎng)基作為對照組，與接種后的培養(yǎng)將一個未接種的培養(yǎng)基作為對照組，與接種后的培養(yǎng)基共同培養(yǎng)?；餐囵B(yǎng)。答案：答案：(1)(1)巴氏梯度稀釋巴氏梯度稀釋(2)(2)碳源、氮源和維生素碳源、氮源和維生素B B酒精燈火焰酒精燈火焰(3)(3)將一個未接種的培養(yǎng)基與接種后將一個未接種的培養(yǎng)基與接種后的培養(yǎng)基共同培養(yǎng)的培養(yǎng)基共同培養(yǎng)【易錯提醒【易錯提醒】平板劃線法和稀釋涂布平板法是微生物接種的常用方平板劃線法和稀釋涂布平板法是微生物接種的常用方法，但是平板劃線法只能純化微生物，而不能進行微法，但是平板劃線法只能純化微生物，而不能進行微生物計數(shù)。生物計數(shù)。【加固訓練【加固訓練】

23、1.(20171.(2017西安模擬西安模擬) )某小組同學為了調(diào)查湖水中細菌某小組同學為了調(diào)查湖水中細菌的污染情況而進行了實驗。實驗包括制備培養(yǎng)基、滅的污染情況而進行了實驗。實驗包括制備培養(yǎng)基、滅菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計數(shù)。請回答與此實驗相菌、接種及培養(yǎng)、菌落觀察計數(shù)。請回答與此實驗相關(guān)的問題。關(guān)的問題。(1)(1)培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉為細菌培養(yǎng)提供了碳培養(yǎng)基中含有的蛋白胨、淀粉為細菌培養(yǎng)提供了碳源和氮源。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分源和氮源。除此之外，培養(yǎng)基還必須含有的基本成分是是_和和_。(2)(2)為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗結(jié)果，應將接種了為了盡快觀察到細菌培養(yǎng)的實驗

24、結(jié)果，應將接種了湖水樣品的平板置于湖水樣品的平板置于_中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)中培養(yǎng)，培養(yǎng)的溫度設(shè)定在定在3737。要使該實驗所得結(jié)果可靠，還應該同時在。要使該實驗所得結(jié)果可靠，還應該同時在另一平板上接種另一平板上接種_作為對照實驗。作為對照實驗。(3)(3)培養(yǎng)培養(yǎng)2020小時后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的小時后，觀察到平板上有形態(tài)和顏色不同的_，這說明湖水樣品中有多種細菌。一般來說，這說明湖水樣品中有多種細菌。一般來說，菌落總數(shù)越多，湖水遭受細菌污染的程度越菌落總數(shù)越多，湖水遭受細菌污染的程度越_(_(填填“高高”或或“低低”) )。(4)(4)某同學在純化土壤中的細菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌

25、某同學在純化土壤中的細菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是落連成一片，最可能的原因是_，應，應當怎樣操作？當怎樣操作？_?！窘忸}指南【解題指南】(1)(1)題干關(guān)鍵詞：培養(yǎng)基的題干關(guān)鍵詞：培養(yǎng)基的“基本成基本成分分”“”“形態(tài)和顏色形態(tài)和顏色”。(2)(2)關(guān)鍵方法：接種無菌水的空白對照可以判斷培養(yǎng)基關(guān)鍵方法：接種無菌水的空白對照可以判斷培養(yǎng)基制作是否合格。制作是否合格?！窘馕觥窘馕觥?1)(1)蛋白胨富含蛋白質(zhì)，主要為微生物提供氮蛋白胨富含蛋白質(zhì)，主要為微生物提供氮源；淀粉主要為微生物提供碳源，培養(yǎng)基中還應含有源；淀粉主要為微生物提供碳源，培養(yǎng)基中還應含有水和無機鹽。水和無機鹽。

26、(2)(2)微生物的培養(yǎng)在恒溫培養(yǎng)箱中進行。要使該實驗所微生物的培養(yǎng)在恒溫培養(yǎng)箱中進行。要使該實驗所得結(jié)果可靠，還應設(shè)置對照實驗，即同時在另一平板得結(jié)果可靠，還應設(shè)置對照實驗，即同時在另一平板上接種無菌水作為對照實驗，以判斷培養(yǎng)基制作是否上接種無菌水作為對照實驗，以判斷培養(yǎng)基制作是否合格。合格。(3)(3)培養(yǎng)培養(yǎng)2020小時后，不同微生物在平板培養(yǎng)基上會形成小時后，不同微生物在平板培養(yǎng)基上會形成形態(tài)和顏色不同的菌落。菌落總數(shù)越多，說明湖水中形態(tài)和顏色不同的菌落。菌落總數(shù)越多，說明湖水中的微生物數(shù)量越多，即湖水遭受細菌污染的程度越高。的微生物數(shù)量越多，即湖水遭受細菌污染的程度越高。(4)(4)

27、培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是菌液濃度過高或培養(yǎng)過程被雜菌污染，可以通過增大稀釋倍度過高或培養(yǎng)過程被雜菌污染，可以通過增大稀釋倍數(shù)或嚴格無菌操作解決。數(shù)或嚴格無菌操作解決。答案：答案：(1)(1)無機鹽水無機鹽水(2)(2)恒溫培養(yǎng)箱無菌水恒溫培養(yǎng)箱無菌水(3)(3)菌落高菌落高(4)(4)菌液濃度過高菌液濃度過高( (或培養(yǎng)過程中被雜菌污染或培養(yǎng)過程中被雜菌污染) )增大稀增大稀釋倍數(shù)釋倍數(shù)( (或嚴格無菌操作，原因與操作要對應或嚴格無菌操作，原因與操作要對應) )2.(20172.(2017安慶模擬安慶模擬) )據(jù)報道，從部分企業(yè)生產(chǎn)的速

28、凍據(jù)報道，從部分企業(yè)生產(chǎn)的速凍食品中檢出葡萄球菌超標，食品中檢出葡萄球菌超標，“細菌門細菌門”事件引起公眾事件引起公眾普遍關(guān)注。葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵普遍關(guān)注。葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會出現(xiàn)特有的乳白黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。某興趣小組欲檢測某果汁類食品中是否色的乳濁環(huán)。某興趣小組欲檢測某果汁類食品中是否含有葡萄球菌，進行了如下實驗?；卮鹣铝袉栴}：含有葡萄球菌，進行了如下實驗?；卮鹣铝袉栴}：(1)(1)配制培養(yǎng)基：稱取適量的牛肉膏、蛋白胨、配制培養(yǎng)基：稱取適量的牛肉膏、蛋白胨、NaClNaCl、瓊脂等，加入

29、蒸餾水，攪拌加熱至完全溶解后調(diào)節(jié)瓊脂等，加入蒸餾水，攪拌加熱至完全溶解后調(diào)節(jié)pHpH，分裝到錐形瓶后進行，分裝到錐形瓶后進行_，在無菌狀態(tài)，在無菌狀態(tài)下加入卵黃液搖勻后立即倒平板。培養(yǎng)基中的牛肉膏下加入卵黃液搖勻后立即倒平板。培養(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨為葡萄球菌生長和繁殖提供和蛋白胨為葡萄球菌生長和繁殖提供_。葡萄球菌能耐受高濃度的葡萄球菌能耐受高濃度的NaClNaCl溶液，所以在配制培養(yǎng)溶液，所以在配制培養(yǎng)基時加入高濃度的基時加入高濃度的NaClNaCl溶液可以將它分離出來，此培溶液可以將它分離出來，此培養(yǎng)基屬于養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。(2)(2)接種：取待檢測果汁接種：取待檢測果汁2.5

30、mL2.5 mL加入加入22.5 mL22.5 mL滅菌生理滅菌生理鹽水中，制成接種樣液。鹽水中，制成接種樣液。實驗組：將接種樣液用平板劃線法接種在含卵黃的實驗組：將接種樣液用平板劃線法接種在含卵黃的固體培養(yǎng)基上。固體培養(yǎng)基上。對照組：將對照組：將_用平板劃線法接種在用平板劃線法接種在含卵黃的固體培養(yǎng)基上或不接種作為含卵黃的固體培養(yǎng)基上或不接種作為_對照。對照。(3)(3)培養(yǎng)：將上述接種后的培養(yǎng)皿同時放在培養(yǎng)：將上述接種后的培養(yǎng)皿同時放在3636的恒溫的恒溫箱中培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48 h48 h。(4)(4)觀察：培養(yǎng)基表面觀察：培養(yǎng)基表面_。(5)(5)結(jié)論。結(jié)論。若培養(yǎng)基上若培養(yǎng)基上_，則該果

31、汁類食品，則該果汁類食品中含有葡萄球菌。中含有葡萄球菌。若培養(yǎng)基上若培養(yǎng)基上_，則該果汁類食品，則該果汁類食品中不含有葡萄球菌。中不含有葡萄球菌。【解題指南【解題指南】(1)(1)關(guān)鍵信息：關(guān)鍵信息：葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)。環(huán)。接種樣液是用滅菌生理鹽水稀釋的。接種樣液是用滅菌生理鹽水稀釋的。對照組用平板劃線法接種無菌生理鹽水。對照組用平板劃線法接種無菌生理鹽水。(2)(2)必備知識：對照實驗除自變量不同，其他均相同。必備知識：對照實驗除

32、自變量不同，其他均相同。【解析【解析】(1)(1)培養(yǎng)基的制備流程：計算培養(yǎng)基的制備流程：計算稱量稱量溶化溶化滅菌滅菌倒平板。培養(yǎng)基中的牛肉膏可以為葡萄球菌生倒平板。培養(yǎng)基中的牛肉膏可以為葡萄球菌生長和繁殖提供氮源、磷酸鹽和維生素，蛋白胨可以為長和繁殖提供氮源、磷酸鹽和維生素，蛋白胨可以為葡萄球菌生長和繁殖提供碳源、氮源和維生素。加入葡萄球菌生長和繁殖提供碳源、氮源和維生素。加入高濃度的高濃度的NaClNaCl溶液的培養(yǎng)基可以抑制大多數(shù)微生物的溶液的培養(yǎng)基可以抑制大多數(shù)微生物的生長繁殖，因此該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。生長繁殖，因此該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。(2)(2)比較實驗組和對照組可知，實驗的

33、自變量為是否接比較實驗組和對照組可知，實驗的自變量為是否接種接種樣液。對照組接種無菌生理鹽水或不接種，為種接種樣液。對照組接種無菌生理鹽水或不接種，為空白對照?？瞻讓φ?。(4)(4)根據(jù)題干關(guān)鍵信息根據(jù)題干關(guān)鍵信息“葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷葡萄球菌能分解卵黃中的卵磷脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會出現(xiàn)脂，在含卵黃的固體培養(yǎng)基上形成的菌落周圍會出現(xiàn)特有的乳白色的乳濁環(huán)特有的乳白色的乳濁環(huán)”可知，觀察是否出現(xiàn)周圍有可知，觀察是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落可以判斷果汁中是否含有葡萄球菌。乳濁環(huán)的菌落可以判斷果汁中是否含有葡萄球菌。(5)(5)果汁中存在葡萄球菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)周圍有乳果汁中

34、存在葡萄球菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落；果汁中不存在葡萄球菌時，培養(yǎng)基上不濁環(huán)的菌落；果汁中不存在葡萄球菌時，培養(yǎng)基上不會出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落，因此可以根據(jù)是否出現(xiàn)會出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落，因此可以根據(jù)是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落判斷是否存在葡萄球菌。周圍有乳濁環(huán)的菌落判斷是否存在葡萄球菌。答案：答案：(1)(1)滅菌滅菌( (高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌) )碳源、氮源、磷酸鹽碳源、氮源、磷酸鹽和維生素選擇和維生素選擇(2)(2)無菌生理鹽水空白無菌生理鹽水空白(4)(4)是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落是否出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落(5)(5)出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落不出現(xiàn)

35、周圍有乳濁環(huán)的菌落不出現(xiàn)周圍有乳濁環(huán)的菌落【方法技巧【方法技巧】判斷培養(yǎng)基制作與接種操作是否合格的判斷培養(yǎng)基制作與接種操作是否合格的方法方法(1)(1)從培養(yǎng)基制作是否合格上判斷：如果未接種的培養(yǎng)從培養(yǎng)基制作是否合格上判斷：如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫基在恒溫箱中保溫1 12 d2 d后無菌落生長，說明培養(yǎng)基后無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。的制備是成功的，否則需要重新制備。(2)(2)從接種操作是否符合無菌要求上判斷：從接種操作是否符合無菌要求上判斷：如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色、形狀、大小基本如果培養(yǎng)基上生長的菌落的顏色、形狀、大小基本一致，并符合接種菌菌落的特

36、點，說明接種操作是符一致，并符合接種菌菌落的特點，說明接種操作是符合要求的；合要求的；如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中，如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落，則說明接種過程中，無菌操作還未達到要求，需要分析原因，重新操作。無菌操作還未達到要求，需要分析原因，重新操作。考點二土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)考點二土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)核心知識回顧核心知識回顧1.1.篩選菌株：篩選菌株：(1)(1)尋找目的菌株的原則：根據(jù)尋找目的菌株的原則：根據(jù)它對它對_的要求，的要求，到相應的環(huán)境中去尋找。到相應的環(huán)境中去尋找。生存環(huán)境生存環(huán)境(2)(2)實驗室篩選尿素分解菌的方法：使用以實驗室篩選

37、尿素分解菌的方法：使用以_為唯為唯一氮源的一氮源的_培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。(3)(3)選擇培養(yǎng)基：在微生物學中，將允許選擇培養(yǎng)基：在微生物學中，將允許_的的微生物生長，同時微生物生長，同時_其他種類微生物生長的其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。2.2.微生物的計數(shù)：微生物的計數(shù)：尿素尿素選擇選擇特定種類特定種類抑制或阻止抑制或阻止比較比較項目項目間接計數(shù)法間接計數(shù)法( (稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法) )直接計數(shù)法直接計數(shù)法( (顯微計數(shù)法顯微計數(shù)法) )原理原理樣品的稀釋度足夠高樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于的一個菌落，來源于樣品稀釋液中

38、的樣品稀釋液中的_活菌，通過統(tǒng)計平板活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有測出樣品中大約含有多少活菌多少活菌利用特定利用特定_或或_，在，在顯微鏡下計算一定容顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的積的樣品中微生物的數(shù)量數(shù)量一個一個細菌計數(shù)板細菌計數(shù)板血細胞計數(shù)板血細胞計數(shù)板比較比較項目項目間接計數(shù)法間接計數(shù)法( (稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法) )直接計數(shù)法直接計數(shù)法( (顯微計數(shù)法顯微計數(shù)法) )公式公式每克樣品中的菌株數(shù)每克樣品中的菌株數(shù)= _= _C C：某稀釋度下平板上：某稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)；生長的平均菌落數(shù)；V V：涂布平板時所用的：涂布平

39、板時所用的稀釋液的體積稀釋液的體積(mL(mL) )；M M：稀釋倍數(shù)：稀釋倍數(shù)每毫升原液所含細每毫升原液所含細菌數(shù)：每小格平均菌數(shù)：每小格平均細菌數(shù)細菌數(shù)40040010 00010 000稀釋倍稀釋倍數(shù)數(shù)(C(CV)V)M M比較比較項目項目間接計數(shù)法間接計數(shù)法( (稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法) )直接計數(shù)法直接計數(shù)法( (顯微計數(shù)法顯微計數(shù)法) )缺點缺點當兩個或多個細胞連在當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到一起時，平板上觀察到的只是一個菌落的只是一個菌落不能區(qū)分細胞死活不能區(qū)分細胞死活誤差誤差比實際值偏比實際值偏_比實際值偏比實際值偏_小小大大3.3.實驗流程及注意事項：實驗流

40、程及注意事項：表層表層 3030300300稀釋涂布平板稀釋涂布平板303037375 57 7252528283 34 4菌落菌落4.4.分解尿素的細菌的鑒別：分解尿素的細菌的鑒別：(1)(1)方法：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入方法：在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入_指示劑培養(yǎng)分解尿素的細菌。指示劑培養(yǎng)分解尿素的細菌。(2)(2)原理：原理：酚紅酚紅脲酶脲酶2NH2NH3 3(3)(3)實驗現(xiàn)象及結(jié)論：實驗現(xiàn)象及結(jié)論：培養(yǎng)基變紅：該種細菌培養(yǎng)基變紅：該種細菌_分解尿素。分解尿素。培養(yǎng)基不變紅：該種細菌培養(yǎng)基不變紅：該種細菌_分解尿素。分解尿素。能能不能不能5.5.設(shè)置對照和重復：設(shè)置對照

41、和重復：比較比較項目項目對照對照重復重復目的目的排除排除_對對實驗結(jié)果的影響實驗結(jié)果的影響排除排除_對實對實驗結(jié)果的影響驗結(jié)果的影響實例實例空白對照：確定培空白對照：確定培養(yǎng)基養(yǎng)基_同一稀釋度涂布至同一稀釋度涂布至少少_個平板個平板非測試因素非測試因素偶然因素偶然因素制作是否合格制作是否合格3 3【教材易漏邊角知識【教材易漏邊角知識】選修選修1P26“1P26“旁欄小資料旁欄小資料”細菌數(shù)目的測定還有哪些方法？舉例說明。細菌數(shù)目的測定還有哪些方法？舉例說明。_。濾膜法。測定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以采用濾濾膜法。測定飲用水中大腸桿菌的數(shù)目可以采用濾膜法膜法【思維診斷【思維診斷】(1)(1)從有

42、機廢水中分離分解有機物的微生物時，接種后從有機廢水中分離分解有機物的微生物時，接種后的培養(yǎng)皿需要放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。的培養(yǎng)皿需要放在光照培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。( )( )分析：分析：分解有機物的微生物為異養(yǎng)型，不需要光照。分解有機物的微生物為異養(yǎng)型，不需要光照。(2)(2)消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消消毒的原則是既殺死材料表面的微生物，又減少消毒劑對細胞的傷害。毒劑對細胞的傷害。( )( )分析：分析：選擇無菌技術(shù)方法時，既要考慮消毒效果，又選擇無菌技術(shù)方法時，既要考慮消毒效果，又要考慮被操作對象的承受能力，不能傷害細胞。要考慮被操作對象的承受能力，不能傷害細胞。(3)(3)培養(yǎng)基中

43、只要含有水、碳源、氮源和無機鹽四種成培養(yǎng)基中只要含有水、碳源、氮源和無機鹽四種成分就能滿足各種微生物的需要。分就能滿足各種微生物的需要。( )( )分析：分析：微生物生長需要水、無機鹽、氮源、碳源和生微生物生長需要水、無機鹽、氮源、碳源和生長因子等。長因子等。(4)(4)統(tǒng)計樣品中的活菌一般使用平板劃線法。統(tǒng)計樣品中的活菌一般使用平板劃線法。( )( )分析：分析：使用平板劃線法能分離微生物，但不能對微生使用平板劃線法能分離微生物，但不能對微生物進行計數(shù)。物進行計數(shù)。(5)(5)利用稀釋涂布平板法對微生物計數(shù)時，只要得到一利用稀釋涂布平板法對微生物計數(shù)時，只要得到一個菌落數(shù)在個菌落數(shù)在3030

44、300300的平板即可。的平板即可。( )( )分析：分析：只得到一個菌落數(shù)在只得到一個菌落數(shù)在3030300300的平板是錯誤的，的平板是錯誤的，原因是不符合實驗的重復原則，易受到偶然因素的影原因是不符合實驗的重復原則，易受到偶然因素的影響。響。高考角度全練高考角度全練角度角度1 1微生物的計數(shù)微生物的計數(shù)1.(20161.(2016四川高考四川高考) )圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細菌圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細菌的過程，圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的的過程，圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNAmRNA部分序列。部分序列。世紀金榜導學號世紀金榜導學號7798221977982219(1)(1)圖中選擇培養(yǎng)基應以圖

45、中選擇培養(yǎng)基應以_為唯一氮源；鑒為唯一氮源；鑒別培養(yǎng)基還需添加別培養(yǎng)基還需添加_作指示劑，產(chǎn)脲酶細作指示劑，產(chǎn)脲酶細菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示菌在該培養(yǎng)基上生長一段時間后，其菌落周圍的指示劑將變成劑將變成_色。色。(2)(2)在在5 5個細菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為個細菌培養(yǎng)基平板上，均接種稀釋倍數(shù)為10105 5的的土壤樣品溶液土壤樣品溶液0.1 mL0.1 mL，培養(yǎng)一段時間后，平板上長出，培養(yǎng)一段時間后，平板上長出的細菌菌落數(shù)分別為的細菌菌落數(shù)分別為1313、156156、462462、178178和和191191。該過程采取的接種方法是該過程采取的接種方法是_

46、，每克土壤樣，每克土壤樣品中的細菌數(shù)量為品中的細菌數(shù)量為_10108 8個；與血細胞計數(shù)個；與血細胞計數(shù)板相比，此計數(shù)方法測得的細菌數(shù)目較板相比，此計數(shù)方法測得的細菌數(shù)目較_。(3)(3)現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活，突變后基因轉(zhuǎn)錄的因轉(zhuǎn)錄的mRNAmRNA在圖乙箭頭所示的位置增加了在圖乙箭頭所示的位置增加了7070個核苷個核苷酸，使圖乙序列出現(xiàn)終止密碼酸，使圖乙序列出現(xiàn)終止密碼( (終止密碼有終止密碼有UAGUAG、UGAUGA和和UAA)UAA)。突變基因轉(zhuǎn)錄的。突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNAmRNA中，終止密碼為中，終止密碼為_，突變基因表達的蛋

47、白含突變基因表達的蛋白含_個氨基酸。個氨基酸?！窘忸}指南【解題指南】(1)(1)關(guān)鍵信息：關(guān)鍵信息：“篩選產(chǎn)脲酶細菌篩選產(chǎn)脲酶細菌”“”“接接種稀釋倍數(shù)為種稀釋倍數(shù)為10105 5的土壤樣品溶液的土壤樣品溶液”，使，使“圖乙序列圖乙序列”出現(xiàn)終止密碼。出現(xiàn)終止密碼。(2)(2)解題關(guān)鍵：區(qū)別選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基，掌握細解題關(guān)鍵：區(qū)別選擇培養(yǎng)基與鑒別培養(yǎng)基，掌握細菌計數(shù)的方法。菌計數(shù)的方法。【解析【解析】本題考查微生物的培養(yǎng)與分離方法及基因表本題考查微生物的培養(yǎng)與分離方法及基因表達。達。(1)(1)脲酶能夠催化尿素分解為氨，要從土壤中篩選出產(chǎn)脲酶能夠催化尿素分解為氨，要從土壤中篩選出產(chǎn)脲酶的細

48、菌，需用以尿素作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。脲酶的細菌，需用以尿素作為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。由于尿素被分解成了氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強，由于尿素被分解成了氨，氨會使培養(yǎng)基的堿性增強，pHpH升高，使酚紅指示劑變紅色。升高，使酚紅指示劑變紅色。(2)(2)將稀釋倍數(shù)為將稀釋倍數(shù)為10105 5的土壤樣品溶液接種在細菌培養(yǎng)的土壤樣品溶液接種在細菌培養(yǎng)基平板上，用于計數(shù)細菌菌落數(shù)的方法是稀釋涂布平基平板上，用于計數(shù)細菌菌落數(shù)的方法是稀釋涂布平板法。統(tǒng)計的菌落數(shù)應介于板法。統(tǒng)計的菌落數(shù)應介于3030300300，選擇細菌菌落數(shù)，選擇細菌菌落數(shù)為為156156、178178和和191191的平板計數(shù)，每克

49、土壤樣品中細菌數(shù)的平板計數(shù)，每克土壤樣品中細菌數(shù)量為量為(156+178+191)(156+178+191)3 30.10.110105 5=1.75=1.7510108 8。由于。由于兩個或多個細菌連接在一起時，往往統(tǒng)計的是一個菌兩個或多個細菌連接在一起時，往往統(tǒng)計的是一個菌落，用此方法測得的細菌數(shù)目偏少。落，用此方法測得的細菌數(shù)目偏少。(3)(3)密碼子由密碼子由3 3個相鄰的堿基組成，箭頭前面的堿基一個相鄰的堿基組成，箭頭前面的堿基一共構(gòu)成共構(gòu)成9191個密碼子；插入的個密碼子；插入的7070個核苷酸和后面?zhèn)€核苷酸和后面2 2個堿基個堿基一共構(gòu)成一共構(gòu)成2424個密碼子，后面是個密碼子，

50、后面是UGAUGA，是終止密碼，翻譯，是終止密碼，翻譯結(jié)束后，表達的蛋白質(zhì)含有結(jié)束后，表達的蛋白質(zhì)含有115115個氨基酸。個氨基酸。答案：答案：(1)(1)尿素酚紅紅尿素酚紅紅(2)(2)稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法1.751.75少少(3)UGA(3)UGA115115角度角度2 2微生物的選擇培養(yǎng)微生物的選擇培養(yǎng)2.(20172.(2017濟南模擬濟南模擬) )在調(diào)查和分離湖水中耐鹽細菌的在調(diào)查和分離湖水中耐鹽細菌的實驗中，先將實驗中，先將1010升湖水水樣濃縮至升湖水水樣濃縮至1010毫升，然后各取毫升，然后各取濃縮水樣濃縮水樣1 1毫升，涂布到多個培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。請回答：毫升，涂布到多

51、個培養(yǎng)皿中培養(yǎng)。請回答：(1)(1)可以通過提高培養(yǎng)基中可以通過提高培養(yǎng)基中_的濃度，篩選被調(diào)的濃度，篩選被調(diào)查細菌，這種培養(yǎng)基被稱為查細菌，這種培養(yǎng)基被稱為_培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。(2)(2)要提高實驗結(jié)果的可靠性，排除培養(yǎng)基未徹底滅菌要提高實驗結(jié)果的可靠性，排除培養(yǎng)基未徹底滅菌的可能性，應該設(shè)置的對照組是的可能性，應該設(shè)置的對照組是_。為檢驗。為檢驗(1)(1)中篩選方法的效果，可以設(shè)置的對照組是中篩選方法的效果，可以設(shè)置的對照組是_。(3)(3)在微生物的培養(yǎng)過程中，實驗室對培養(yǎng)基滅菌常用在微生物的培養(yǎng)過程中，實驗室對培養(yǎng)基滅菌常用的方法是的方法是_。為防止冷凝水影響細菌的生長，。為防止冷凝水

52、影響細菌的生長，需將培養(yǎng)皿需將培養(yǎng)皿_培養(yǎng)。在培養(yǎng)基上產(chǎn)生的單個菌培養(yǎng)。在培養(yǎng)基上產(chǎn)生的單個菌落在生態(tài)學中可以被稱為落在生態(tài)學中可以被稱為_。【解析【解析】(1)(1)篩選耐鹽細菌，需在培養(yǎng)基中添加高濃度篩選耐鹽細菌，需在培養(yǎng)基中添加高濃度的的NaClNaCl，這種人為提供有利于目的菌株生長的條件，這種人為提供有利于目的菌株生長的條件，同時抑制或阻止其他微生物生長的培養(yǎng)基被稱為選擇同時抑制或阻止其他微生物生長的培養(yǎng)基被稱為選擇培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。(2)(2)要提高實驗結(jié)果的可靠性，排除培養(yǎng)基未徹底滅菌要提高實驗結(jié)果的可靠性，排除培養(yǎng)基未徹底滅菌的可能性，應該設(shè)置未接種的培養(yǎng)基作為對照組，若的可能性

53、，應該設(shè)置未接種的培養(yǎng)基作為對照組，若對照組產(chǎn)生菌落，則培養(yǎng)基未徹底滅菌，反之，滅菌對照組產(chǎn)生菌落，則培養(yǎng)基未徹底滅菌，反之，滅菌合格。為檢驗合格。為檢驗(1)(1)中篩選方法的效果，可以設(shè)置未加高中篩選方法的效果，可以設(shè)置未加高濃度鹽的培養(yǎng)基作為對照組，若對照組上菌落比實驗濃度鹽的培養(yǎng)基作為對照組，若對照組上菌落比實驗組多，則培養(yǎng)基有選擇作用，反之沒有。組多，則培養(yǎng)基有選擇作用，反之沒有。(3)(3)在微生物的培養(yǎng)過程中，實驗室對培養(yǎng)基滅菌常用在微生物的培養(yǎng)過程中，實驗室對培養(yǎng)基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌法。為防止冷凝水影響細菌的的方法是高壓蒸汽滅菌法。為防止冷凝水影響細菌的生長，需將培養(yǎng)

54、皿倒置培養(yǎng)。一定區(qū)域內(nèi)同種生物的生長，需將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)。一定區(qū)域內(nèi)同種生物的全部個體稱為一個種群。全部個體稱為一個種群。答案：答案：(1)(1)鹽鹽( (或或NaClNaCl) )選擇選擇(2)(2)未接種的培養(yǎng)基未接種的培養(yǎng)基未加高濃度鹽的培養(yǎng)基未加高濃度鹽的培養(yǎng)基(3)(3)高壓蒸汽滅菌倒置種高壓蒸汽滅菌倒置種群群3.(20153.(2015全國卷全國卷節(jié)選節(jié)選) )已知微生物已知微生物A A可以產(chǎn)生油脂，可以產(chǎn)生油脂，微生物微生物B B可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴可以產(chǎn)生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產(chǎn)?；卮鹩嘘P(guān)問題：油的生產(chǎn)?；卮鹩嘘P(guān)問題：(1)(1)顯微觀察時，

55、微生物顯微觀察時，微生物A A菌體中的油脂通?？捎镁w中的油脂通?？捎胈染色。微生物染色。微生物A A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，可選用選用_(_(填填“萃取法萃取法”或或“水蒸氣蒸餾法水蒸氣蒸餾法”) )從菌體中提取。從菌體中提取。(2)(2)為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物為了從自然界中獲得能產(chǎn)生脂肪酶的微生物B B的單的單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應選用以并應選用以_為碳源的固體培養(yǎng)基進行培為碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。養(yǎng)。(3)(3)為了確定微生物為了確定微生物B B產(chǎn)生的脂肪酶的最適溫度，某同產(chǎn)生的

56、脂肪酶的最適溫度，某同學測得相同時間內(nèi)，在學測得相同時間內(nèi)，在3535、4040、4545溫度下降解溫度下降解10 g10 g油脂所需酶量依次為油脂所需酶量依次為4 mg4 mg、1 mg1 mg、6 mg6 mg，則上述，則上述三個溫度中，三個溫度中，_條件下該酶活力最小。為了條件下該酶活力最小。為了進一步確定該酶的最適溫度，應圍繞進一步確定該酶的最適溫度，應圍繞_設(shè)計設(shè)計后續(xù)實驗。后續(xù)實驗?！窘馕觥窘馕觥?1)(1)脂肪可被蘇丹脂肪可被蘇丹()()染液染成橘黃色染液染成橘黃色( (紅紅色色) )，題干中說明微生物，題干中說明微生物A A產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，則可產(chǎn)生的油脂不易揮發(fā)，則可以采用

57、萃取法提取微生物以采用萃取法提取微生物A A中的油脂。中的油脂。(2)(2)油脂為有機化合物，富含碳元素，故為了從自然界油脂為有機化合物，富含碳元素，故為了從自然界獲得能夠分解油脂的單菌落，應以油脂為唯一碳源來獲得能夠分解油脂的單菌落，應以油脂為唯一碳源來配制培養(yǎng)基。在該培養(yǎng)基上，能分解油脂的微生物可配制培養(yǎng)基。在該培養(yǎng)基上，能分解油脂的微生物可以正常生長，其他微生物不能正常生長。以正常生長，其他微生物不能正常生長。(3)(3)在在4545下，降解下，降解10 g10 g油脂所需酶量最多，則該溫度油脂所需酶量最多，則該溫度下酶活性最低；由題干信息可知，下酶活性最低；由題干信息可知，4040下降

58、解下降解10 g10 g油油脂所需的酶量最少。應圍繞脂所需的酶量最少。應圍繞4040設(shè)置不同溫度梯度來設(shè)置不同溫度梯度來探究酶的最適溫度。探究酶的最適溫度。答案：答案：(1)(1)蘇丹蘇丹(或蘇丹或蘇丹)萃取法萃取法(2)(2)油脂油脂( (其他合理答案也可其他合理答案也可) )(3)45(3)4540404.(20144.(2014全國卷全國卷)為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某為了調(diào)查某河流的水質(zhì)狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}：細菌分離等工作?；卮鹣铝袉栴}：(1)(1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水

59、樣中細菌含量。該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細菌含量。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是養(yǎng)了一段時間，這樣做的目的是_；然后，將然后，將1 mL1 mL水樣稀釋水樣稀釋100100倍，在倍，在3 3個平板上用涂布法個平板上用涂布法分別接入分別接入0.1 mL0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3 3個平板上的個平板上的菌落數(shù)分別為菌落數(shù)分別為3939、3838和和3737，據(jù)此可得出每升水樣中的，據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為活菌數(shù)為_。(2)(2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌

60、。操作時，該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時，接種環(huán)通過接種環(huán)通過_滅菌，在第二次及以后的滅菌，在第二次及以后的劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是的目的是_。(3)(3)示意圖示意圖A A和和B B中，中，_表示的是用稀釋涂布平板表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。法接種培養(yǎng)后得到的結(jié)果。(4)(4)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的

61、細菌生長速度快。發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中_的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高_的利用率。的利用率。【解題指南【解題指南】(1)(1)題干關(guān)鍵詞：題干關(guān)鍵詞：“先行培養(yǎng)先行培養(yǎng)”“”“振蕩培振蕩培養(yǎng)養(yǎng)”。(2)(2)隱含信息：隱含信息：A A圖中菌落是采用平板劃線法接種培養(yǎng)圖中菌落是采用平板劃線法接種培養(yǎng)的結(jié)果，的結(jié)果，B B圖中菌落分布相對均勻，為稀釋涂布平板法圖中菌落分布相對均勻，為稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)的結(jié)果。接種培養(yǎng)的結(jié)果。(3)(3)關(guān)鍵知識

62、：稀釋涂布平板法檢測細菌含量、平板劃關(guān)鍵知識：稀釋涂布平板法檢測細菌含量、平板劃線法分離細菌。線法分離細菌?！窘馕觥窘馕觥勘绢}考查微生物培養(yǎng)、細菌分離及計數(shù)等相本題考查微生物培養(yǎng)、細菌分離及計數(shù)等相關(guān)知識。關(guān)知識。(1)(1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，微生物學實驗一為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，微生物學實驗一般會設(shè)置空白對照：隨機取若干滅菌后的空白平板培般會設(shè)置空白對照：隨機取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成；利用平養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成；利用平板菌落計數(shù)法的計算公式估算水樣中的活菌數(shù)：板菌落計數(shù)法的計算公式估算水樣中的活菌數(shù)：7C38M()10

63、03.8 10 / LV0.1 mL接種計數(shù)結(jié)果平均值稀釋倍數(shù)接種體積(2)(2)接種時接種環(huán)需要灼燒滅菌；在第二次及以后劃線接種時接種環(huán)需要灼燒滅菌；在第二次及以后劃線時，總是從上一次劃線的末端開始，這樣做的目的是時，總是從上一次劃線的末端開始，這樣做的目的是通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌體的數(shù)目逐漸通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌體的數(shù)目逐漸減少，以便得到單個菌落。減少，以便得到單個菌落。(3)(3)根據(jù)示意圖根據(jù)示意圖A A和和B B中生長的菌落形態(tài)，判定中生長的菌落形態(tài)，判定B B圖為稀圖為稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)的結(jié)果釋涂布平板法接種培養(yǎng)的結(jié)果( (菌落分布相對均勻菌落分布相對均

64、勻) )。(4)(4)振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基溶解氧的含量，促進振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基溶解氧的含量，促進好氧型微生物的生長；另外振蕩培養(yǎng)還可以使菌體與好氧型微生物的生長；另外振蕩培養(yǎng)還可以使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。培養(yǎng)液充分接觸，提高營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。答案：答案：(1)(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格3.83.810107 7(2)(2)灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落灼燒將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落(3)B(3)B(4)(4)溶解氧營養(yǎng)物質(zhì)溶解氧營養(yǎng)物質(zhì)【易錯提醒【易錯提醒】本題第本題第(1)(1)題第題第2 2空易錯答為空

65、易錯答為3.83.810104 4。出錯原因是忽視了單位，教材計算公式是每克樣品中出錯原因是忽視了單位，教材計算公式是每克樣品中的細菌數(shù)，而本題要計算每升水樣中的活菌數(shù)，應再的細菌數(shù)，而本題要計算每升水樣中的活菌數(shù)，應再乘以乘以10103 3。考點三分解纖維素的微生物的分離考點三分解纖維素的微生物的分離核心知識回顧核心知識回顧1.1.纖維素與纖維素酶：纖維素與纖維素酶：(1)(1)纖維素：一種由纖維素：一種由_首尾相連而成的高分子化首尾相連而成的高分子化合物，是地球上含量最豐富的合物，是地球上含量最豐富的_類物類物質(zhì)。質(zhì)。葡萄糖葡萄糖多糖多糖(2)(2)纖維素酶：纖維素酶：組成：纖維素酶是一種

66、組成：纖維素酶是一種_酶，包括酶，包括_酶、酶、_酶和酶和_酶三種組分。酶三種組分。作用：作用：復合復合C C1 1C CX X葡萄糖苷葡萄糖苷C C1 1C CX X葡萄糖苷葡萄糖苷2.2.纖維素分解菌的篩選：纖維素分解菌的篩選：(1)(1)方法：方法：_染色法。染色法。(2)(2)培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：_的選擇培養(yǎng)基。的選擇培養(yǎng)基。 剛果紅剛果紅富含纖維素富含纖維素(3)(3)篩選原理：篩選原理：(4)(4)菌落的挑選：挑選產(chǎn)生菌落的挑選：挑選產(chǎn)生_的菌落。的菌落。紅色復合物紅色復合物透明圈透明圈透明圈透明圈3.3.實驗流程及注意事項：實驗流程及注意事項：纖維素纖維素富含纖維素富含纖維素單個單個透明圈透明圈【思維診斷【思維診斷】(1)(1)土壤中纖維素分解菌的篩選流程中的土壤中纖維素分解菌的篩選流程中的“選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)”是必不可少的。是必不可少的。( )( )分析：分析：土壤中纖維素分解菌的篩選流程中的土壤中纖維素分解菌的篩選流程中的“選擇培選擇培養(yǎng)養(yǎng)”是否需要，應根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來是否需要，應根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定。確定。(2)(2)在富含纖維素的培養(yǎng)基中加入