酶的應(yīng)用和生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用 - 副本

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1、　酶的應(yīng)用和生物技術(shù)在其他方面的應(yīng)用 直擊考綱1.酶的存在與簡(jiǎn)單制作方法。2.酶活力測(cè)定的一般原理和方法。3.酶在食品制造和洗滌等方面的應(yīng)用。4.制備和應(yīng)用固相化酶。5.植物的組織培養(yǎng)。6.蛋白質(zhì)的提取和分離。7.PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用。 1．判斷下列有關(guān)酶的研究與應(yīng)用的敘述 (1)多酶片中的胃蛋白酶位于片劑的核心層 (2011·江蘇，15D)(　×　) (2)嫩肉粉是以蛋白酶為主要成分的食品添加劑。就酶的作用特點(diǎn)而言，室溫下先與肉片混勻放置一段時(shí)間再炒熟的使用方法最佳 (2009·廣東文基，72D改編)(　√　) (3)用含蛋白酶的洗衣粉去除油漬，效果比其他類型的

2、加酶洗衣粉好 (2010·江蘇，3D)(　×　) (4)棉織物不能使用添加纖維素酶的洗衣粉進(jìn)行洗滌 (2011·江蘇，15C)(　×　) (5)CaCl2溶液的作用是使海藻酸鈉形成凝膠珠 (2010·江蘇，25B改編)(　√　) (6)利用固定化酶降解水體中有機(jī)磷農(nóng)藥，需提供適宜的營養(yǎng)條件 (2009·江蘇，3C)(　×　) (7)利用固定化酵母細(xì)胞進(jìn)行發(fā)酵，糖類的作用只是作為反應(yīng)底物 (2009·江蘇，3D)(　×　) (8)固定化細(xì)胞技術(shù)在多步連續(xù)催化反應(yīng)方面優(yōu)勢(shì)明顯 (2009·江蘇，3A)(　√　) 2．判斷下列有關(guān)植物的組織培養(yǎng)技術(shù)的敘述 (1)

3、外植體可以來自于植物的任何細(xì)胞 (2011·上海，22A)(　×　) (2)愈傷組織是一團(tuán)有特定結(jié)構(gòu)和功能的薄壁細(xì)胞 (2011·江蘇，16A)(　×　) (3)二倍體植株的花粉經(jīng)脫分化與再分化后得到穩(wěn)定遺傳的植株 (2011·江蘇，16B)(　×　) (4)以花粉作為外植體可得到單倍體植株 (2011·上海，22C)(　√　) (5)用人工薄膜將胚狀體、愈傷組織等分別包裝可制成人工種子 (2011·江蘇，16C)(　×　) (6)植物耐鹽突變體可通過添加適量NaCl的培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選而獲得 (2011·江蘇，16D)(　√　) (7)不同階段的培養(yǎng)基中細(xì)

4、胞分裂素和生長素的比例不同 (2011·上海，22D)(　√　) 3．判斷下列有關(guān)DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)的敘述 (1)提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需用蒸餾水漲破細(xì)胞 (2009·江蘇，23A)(　×　) (2)用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”，其實(shí)驗(yàn)操作步驟相同 (2011·江蘇，19D改編)(　×　) (3)用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA可去除蛋白質(zhì) (2009·江蘇，23B)(　√　) (4)蛋白質(zhì)提取和分離過程中進(jìn)行透析可去除溶液中的DNA (2009·江蘇，23C)(　×　) (5)利用雞血進(jìn)行“DNA的粗提取與鑒定”的實(shí)驗(yàn)中，將絲狀物溶

5、解在2 mol/L NaCl溶液中，加入二苯胺試劑即呈藍(lán)色 (2011·江蘇，19C)(　×　) (6)蛋白質(zhì)和DNA都可以用電泳的方法進(jìn)行分離純化 (2009·江蘇，23D)(　√　) (7)利用透析法純化蛋白酶時(shí)，應(yīng)以蒸餾水作為透析液 (2010·江蘇，3C)(　×　) 重點(diǎn)一　酶的應(yīng)用 1．纖維素酶和果膠酶的組成與作用 組成 作用 纖維素酶 C1酶CX酶葡萄糖苷酶 纖維素在C1酶、CX酶的作用下分解成纖維二糖，再在葡萄糖苷酶的作用下將纖維二糖分解為葡萄糖 果膠酶 多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶、果膠酯酶 都能將不溶性果膠分解成可溶性半

6、乳糖醛酸 2.加酶洗衣粉的洗滌原理 種類 洗滌原理 洗滌的物質(zhì)種類 蛋白酶 蛋白質(zhì)小分子的肽＋氨基酸 血漬、奶漬及各種食品類的蛋白質(zhì)污垢 脂肪酶 脂肪甘油＋脂肪酸 食品的油漬、人體皮脂、口紅 淀粉酶 淀粉麥芽糖＋葡萄糖 來自面條、巧克力等的污垢 纖維素酶 使纖維的結(jié)構(gòu)變得蓬松，從而使?jié)B入到纖維深處的塵土和污垢能夠與洗衣粉充分接觸，達(dá)到更好的去污效果 棉紡織品的表面浮毛 3.直接使用酶、固定化酶和固定化細(xì)胞的差異 直接使用酶 固定化酶 固定化細(xì)胞 酶的種類 一種或幾種 一種 一系列酶 常用載體 氧化鋁、高嶺土、硅膠、二氧化鈦、硅藻土等

7、 明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素、聚丙烯酰胺等 常用方法 包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法 包埋法 營養(yǎng)物質(zhì) 不需要 不需要 需要 化學(xué)反應(yīng) 一種或幾種 一種 一系列 底物 各種物質(zhì) 各種物質(zhì) 能進(jìn)入載體的小分子物質(zhì) 優(yōu)點(diǎn) 效率高、耗能低、無污染 可回收反復(fù)使用 成本低、易操作，可催化一系列化學(xué)反應(yīng) 缺點(diǎn) 環(huán)境因素影響大，酶難以回收利用 不利于催化一系列化學(xué)反應(yīng) 反應(yīng)物與細(xì)胞內(nèi)的酶不容易接觸，催化效率下降 技能點(diǎn)撥　影響酶活性的因素、酶的用量及應(yīng)用實(shí)驗(yàn)探究時(shí)注意的問題 (1)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)要遵循單一變量和對(duì)照兩大原則，嚴(yán)格控制無關(guān)變量。 (

8、2)探究不同溫度(或pH)對(duì)酶活性的影響時(shí)，溫度(或pH)作為自變量，通常通過設(shè)置合理的梯度來確定最適值。最適值是通過比較相同時(shí)間內(nèi)獲得的產(chǎn)量或效果來確定的。 (3)探究最適溫度時(shí)，pH為無關(guān)變量；探究最適pH時(shí)，溫度最好為最適溫度。 (4)探究果膠酶的最適用量時(shí)，所測(cè)出的最適用量指在本實(shí)驗(yàn)的溫度、pH等條件下測(cè)出的，因而果膠酶的最適用量應(yīng)標(biāo)明溫度和pH。 (5)探討加酶洗衣粉的最適溫度要根據(jù)生活中的實(shí)際情況，合理設(shè)置溫度梯度。 (6)在使用加酶洗衣粉時(shí)不但要考慮最佳洗滌效果條件，還要考慮到酶的專一性和洗滌成本的問題。 對(duì)位訓(xùn)練 1．某同學(xué)進(jìn)行蘋果汁制作實(shí)驗(yàn)，工藝流程如下圖所示：

9、 請(qǐng)回答： (1)圖中用KMnO4溶液浸泡蘋果的目的是________。黑曲霉提取液中含有的________可水解果膠，從而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通過________方式將酶固定化，酶液固定后用蒸餾水洗滌固定化柱是為了除去______________________。 (2)實(shí)驗(yàn)中，操作流程A和B的先后順序?yàn)開_______。在蘋果汁澄清過程中，如有渾濁的現(xiàn)象應(yīng)關(guān)閉的流速調(diào)節(jié)閥是______。要測(cè)定從固定化柱流出的蘋果汁中是否有果膠，可取一定量的果汁與等量的________混合，如果出現(xiàn)________現(xiàn)象，說明果膠還沒有被完全水解。為使果膠完全水解，應(yīng)將流速調(diào)______

10、__。 (3)實(shí)驗(yàn)后，將洗滌過的固定化柱在低溫環(huán)境中保存若干天，該固定化柱仍可用于蘋果汁制作實(shí)驗(yàn)，說明固定化酶可被________使用。 答案　(1)消毒　果膠酶　吸附　未被固定的酶等　(2)先A后B　閥2　乙醇　渾濁(沉淀)　慢　(3)重復(fù) 解析　(1)KMnO4具有殺菌消毒作用，可殺死蘋果表面的雜菌，蘋果汁中因含有果膠等使其渾濁，用果膠酶處理可使果膠水解，使果汁澄清。石英砂具有吸附作用，可通過吸附法將酶固定，用蒸餾水洗滌時(shí)未固定的酶可隨蒸餾水流走。(2)具體操作時(shí)，先提取果膠酶，再將果膠酶放入待處理的果汁中，使果汁澄清。因酶具有高效性和反應(yīng)前后化學(xué)性質(zhì)不發(fā)生改變的性質(zhì)，故果汁澄清的過

11、程中，不需要連續(xù)加酶。果膠中的果膠酸鈣能與乙醇形成沉淀，故可用乙醇鑒定果汁中的果膠。如有渾濁現(xiàn)象，說明果汁中仍有果膠存在，應(yīng)控制閥2的流速，減少果汁處理量。(3)酶固定化后，便于與反應(yīng)物和產(chǎn)物分離，可反復(fù)利用，提高利用率。 2．加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉。請(qǐng)回答下列問題： (1)由圖推知，該實(shí)驗(yàn)的目的是__________________________________________。 (2)下表是添加脂肪酶的加酶洗衣粉和普通洗衣粉洗滌效果的實(shí)驗(yàn)記錄，請(qǐng)據(jù)表回答： 臉盆編號(hào) 洗滌物(等量) 洗滌溫度 洗衣粉(等量) 水量 洗凈所需時(shí)間 1 油污布 45 ℃

12、 加酶 2 L 4 min 2 油污布 45 ℃ 普通 2 L 7 min 3 油污布 5 ℃ 加酶 2 L 9 min 4 油污布 5 ℃ 普通 2 L 8 min ①該實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)體現(xiàn)了____________________原則。 ②若實(shí)驗(yàn)組1號(hào)洗凈所需時(shí)間接近7分鐘，最可能的原因是________________。 (3)下列衣料不適宜用添加蛋白酶的加酶洗衣粉洗滌的有________。 ①棉織品 ②毛織品 ③腈綸織品 ④蠶絲織品 (4)根據(jù)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果，寫出兩項(xiàng)提高加酶洗衣粉效果的措施。________________________

13、________________________________________________ ________________________________________________________________________。 答案　(1)探究溫度、堿性蛋白酶含量對(duì)去污力的影響 (2)①對(duì)照、單一變量?、诿甘Щ睢?3)②④　(4)用溫水浸泡；延長浸泡時(shí)間；增加洗衣粉的用量等 解析　(1)分析曲線圖，橫坐標(biāo)是堿性蛋白酶含量，縱坐標(biāo)表示去污力，圖中的兩條曲線自變量除堿性蛋白酶含量外，還有溫度，故該實(shí)驗(yàn)的目的是探究溫度、堿性蛋白酶含量對(duì)去污力的影響。(2)分析表格，1與2、

14、3與4形成加酶與否的對(duì)照，1與3、2與4形成溫度不同的對(duì)照，體現(xiàn)了對(duì)照原則和單一變量原則。實(shí)驗(yàn)組1號(hào)為45 ℃加酶洗衣粉組，正常洗凈時(shí)間為4分鐘，若接近7分鐘則與實(shí)驗(yàn)組2號(hào)結(jié)果相同。2號(hào)是不加酶的普通洗衣粉組，所以原因很可能是酶失活。(3)毛織品和蠶絲織品均為蛋白質(zhì)類織品，不宜使用加蛋白酶的洗衣粉洗滌。(4)從實(shí)驗(yàn)記錄表中可看出，45 ℃時(shí)的效果比5 ℃時(shí)好，用溫水浸泡會(huì)提高酶的活性，延長浸泡時(shí)間可使酶與污物充分接觸，適當(dāng)增加酶濃度無疑會(huì)提高分解污物的速率。 重點(diǎn)二　植物組織培養(yǎng) 1．影響植物組織培養(yǎng)的因素 (1)內(nèi)因：材料的種類、年齡、保存時(shí)間長短等 (2)外因 2．植物組織培

15、養(yǎng)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的比較 項(xiàng)目 內(nèi)容　　 植物組織培養(yǎng) 花藥培養(yǎng)技術(shù) 理論依據(jù) 細(xì)胞的全能性 基本過程 脫分化→再分化 外植體細(xì)胞類型 體細(xì)胞 生殖細(xì)胞 操作流程 制備MS固體培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→培養(yǎng)→移栽→栽培 選材→消毒→接種、培養(yǎng)→篩選和誘導(dǎo)→移栽→栽培選育 培養(yǎng)結(jié)果 正常植株 單倍體植株 可育性 可育 高度不育，秋水仙素處理，染色體加倍后可育 技能點(diǎn)撥 1．菊花的組織培養(yǎng)時(shí)每日用日光燈照射12 h，月季的花藥培養(yǎng)過程中開始不需光照，幼小植株形成后才需光照。 2．植物組織培養(yǎng)過程中植物激素的使用順序?qū)?shí)驗(yàn)結(jié)果的影響： 激素使

16、用 實(shí)驗(yàn)結(jié)果 使用順序 先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素 有利于細(xì)胞分裂，但細(xì)胞不分化 先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長素 細(xì)胞既分裂也分化 同時(shí)使用 分化頻率提高 對(duì)位訓(xùn)練 3．如圖為菊花組織培養(yǎng)的大致過程，請(qǐng)思考回答： (1)圖中B、C依次表示________________過程(填名稱)，添加的關(guān)鍵激素是________________。該實(shí)驗(yàn)操作成功的關(guān)鍵是______________，要對(duì)外植體、超凈工作臺(tái)等消毒，對(duì)________等滅菌。 (2)若選用菊花的莖段組織培養(yǎng)時(shí) ①由于菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易，故在配制MS固體培養(yǎng)基時(shí)，________(必需添加、

17、不必添加)植物激素。培養(yǎng)基配制完畢后，還需進(jìn)行________滅菌。 ②應(yīng)選用生理狀況好的菊花嫩枝莖段作為________，這是因?yàn)槠涓菀妆徽T導(dǎo)________________。 ③菊花莖段在接種前要用適當(dāng)濃度的________________溶液進(jìn)行表面消毒。 ④接種前，工作臺(tái)要用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精擦拭一遍。之后，所有的接種操作都必須在________旁進(jìn)行，并且每次使用器械后，都需要用______________滅菌。 ⑤接種后的錐形瓶最好放在________中培養(yǎng)。培養(yǎng)期間應(yīng)注意的事項(xiàng)主要有：定期_ _______、控制好________，并每日給予適當(dāng)時(shí)間光照。 答案　

18、(1)脫分化、再分化　細(xì)胞分裂素、生長素　無菌操作(或無菌技術(shù))　培養(yǎng)基(或培養(yǎng)器具)　(2)①不必添加　高壓蒸汽?、谕庵搀w　脫分化和再分化?、劬凭吐然、芫凭珶簟』鹧孀茻、轃o菌箱　消毒　培養(yǎng)溫度 解析　(1)植物組織培養(yǎng)中B表示脫分化形成愈傷組織，C表示再分化形成試管幼苗，添加的關(guān)鍵激素是細(xì)胞分裂素、生長素，二者濃度的配比調(diào)節(jié)分化過程。該實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵是無菌操作，要對(duì)外植體、超凈工作臺(tái)等消毒，對(duì)培養(yǎng)基(或培養(yǎng)器具)等滅菌。 (2)①菊花莖段自身能合成植物激素，因此培養(yǎng)基中不必添加植物激素，培養(yǎng)基配制完畢需進(jìn)行高壓蒸汽滅菌。②外植體的選擇直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗，因此應(yīng)選擇容易被誘導(dǎo)脫分

19、化和再分化的菊花嫩枝作為外植體。③為防止微生物污染，菊花莖段在接種前要用適當(dāng)濃度的酒精和氯化汞溶液進(jìn)行表面消毒。④接種前，工作臺(tái)要用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精擦拭一遍，之后所有的接種操作都必須在酒精燈旁進(jìn)行，并且每次使用器械后，都需要用火焰灼燒滅菌。⑤接種后的錐形瓶最好放在無菌箱中培養(yǎng)，定期消毒，控制好溫度，并給予適當(dāng)光照。 4．下圖為利用胡蘿卜韌皮部組織細(xì)胞在一定的條件下培育形成胡蘿卜幼苗的過程示意圖，其中字母代表過程或結(jié)構(gòu)。請(qǐng)據(jù)圖回答： (1)該技術(shù)過程的原理是____________________，a、b分別代表________________；采用的胡蘿卜韌皮部細(xì)胞必須處于___

20、_____狀態(tài)，培養(yǎng)基中除加入一定的營養(yǎng)成分外，還需要加入__________________。 (2)c代表________，其優(yōu)點(diǎn)是 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)利用該項(xiàng)技術(shù)可以生產(chǎn)脫毒苗，原因是 __________________________________________________________

21、______________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 答案　(1)植物細(xì)胞具有全能性　脫分化和再分化　離體　植物激素(生長素和細(xì)胞分裂素)　(2)人工種子　可以保持優(yōu)良品種的遺傳特性，生產(chǎn)上也不受季節(jié)的限制　(3)植物的莖尖、根尖還沒有來得及被病毒侵染，利用植物的莖尖和根尖進(jìn)行植物組織培養(yǎng)可以培育無病毒植株 解析　植物組

22、織培養(yǎng)技術(shù)的原理是植物細(xì)胞具有全能性，植物組織培養(yǎng)技術(shù)主要包括兩個(gè)步驟，分別是脫分化和再分化，所采用的材料必須是處于離體狀態(tài)，而且需要提供一定的營養(yǎng)和植物激素。人工種子的優(yōu)點(diǎn)是可以保持優(yōu)良品種的遺傳特性，生產(chǎn)上也不受季節(jié)的限制。利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)脫毒苗的原因是植物的莖尖和根尖屬于剛剛產(chǎn)生的組織，沒有被病毒侵染，可以利用這部分組織培育無病毒植株。 重點(diǎn)三　DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) 1．DNA的粗提取與鑒定 (1)實(shí)驗(yàn)原理 ①DNA在不同濃度的NaCl溶液中的溶解度不同，其中在物質(zhì)的量濃度為0.14_mol/L時(shí)最低。 ②DNA不溶于酒精，但是細(xì)胞中的一些有機(jī)物如某些蛋白質(zhì)則溶于酒精，因

23、此可以用酒精提純。 ③DNA遇二苯胺(沸水浴)會(huì)被染成藍(lán)色，因此，二苯胺可用來鑒定DNA分子。 (2)實(shí)驗(yàn)流程 選取材料→破碎細(xì)胞，獲取含DNA的濾液→去除濾液中的雜質(zhì)→DNA的析出與鑒定。 2．PCR技術(shù)的基本操作和應(yīng)用 (1)目的：獲取大量的目的基因。 (2)原理：雙鏈DNA的復(fù)制。 (3)條件：需要DNA模板、引物、四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶，同時(shí)還要控制溫度。 (4)過程：變性、復(fù)性和延伸。 3．血紅蛋白的提取 步驟 操作 樣品處理 通過紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、分離血紅蛋白溶液等操作收集到血紅蛋白溶液 粗分離 通過透析法去除血紅蛋白溶液中相

24、對(duì)分子質(zhì)量較小的雜質(zhì) 純化 通過凝膠色譜法分離相對(duì)分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì) 純度鑒定 采用SDS—聚丙烯酰胺凝膠電泳判斷純化的蛋白質(zhì)是否達(dá)到要求 對(duì)位訓(xùn)練 5．下列關(guān)于DNA和蛋白質(zhì)提取與分離實(shí)驗(yàn)的敘述正確的有 (　　) A．提取細(xì)胞中的DNA和蛋白質(zhì)都需要用蒸餾水漲破細(xì)胞 B．用不同濃度NaCl溶液反復(fù)溶解與析出DNA，可去除蛋白質(zhì) C．蛋白質(zhì)提取和分離過程中進(jìn)行透析可去除溶液中的DNA D．蛋白質(zhì)和DNA中，只有蛋白質(zhì)可以用電泳的方法進(jìn)行分離純化 答案　B 解析　本題綜合考查DNA和蛋白質(zhì)的提取與分離實(shí)驗(yàn)。熟知這兩個(gè)實(shí)驗(yàn)的操作步驟是解題的關(guān)鍵。如果提取動(dòng)物細(xì)

25、胞中的DNA和蛋白質(zhì)，可以采用蒸餾水漲破細(xì)胞，但是如果用植物細(xì)胞來提取DNA，用蒸餾水就無法漲破細(xì)胞，所以應(yīng)根據(jù)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)選擇不同的方法(常用的有研磨法、超聲波法、酶解法等)破碎細(xì)胞，故A錯(cuò)誤。透析法可以將蛋白質(zhì)與其他小分子化合物，如無機(jī)鹽、單糖、二糖、氨基酸等分離，但是不能將蛋白質(zhì)與DNA分開，故C錯(cuò)誤。蛋白質(zhì)和DNA都是大分子物質(zhì)，都具有可解離的基團(tuán)，皆可以用電泳的方法進(jìn)行分離純化，故D錯(cuò)誤。DNA在NaCl溶液中的溶解度隨NaCl溶液濃度的不同而變化。當(dāng)NaCl溶液的物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L時(shí)，DNA的溶解度最低。利用這一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出，故B正

26、確。 6．下列關(guān)于DNA的粗提取實(shí)驗(yàn)和血紅蛋白的提取實(shí)驗(yàn)，敘述正確的是 (　　) A．前者選擇雞血細(xì)胞作為材料較好，后者選擇哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞作為實(shí)驗(yàn)材料較好 B．樣品預(yù)處理時(shí)，前者靜置1天處理除去上清液；后者需要加入清水，反復(fù)低速短時(shí)間離心洗滌，至上清液無黃色 C．在DNA粗提取實(shí)驗(yàn)中，往2 mol/L氯化鈉溶液中加入蒸餾水析出DNA時(shí)，應(yīng)該緩慢加入，直到出現(xiàn)黏稠物為止 D．洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿中的葡萄糖、無機(jī)鹽等 答案　A 解析　雞血細(xì)胞有細(xì)胞核，適于提取DNA；哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞無細(xì)胞核和眾多細(xì)胞器，適于提取血紅蛋白。提取血紅蛋白的實(shí)驗(yàn)中，洗滌紅細(xì)胞時(shí)，不能加

27、清水，應(yīng)該加入生理鹽水，否則細(xì)胞提早釋放出血紅蛋白與雜質(zhì)混合，加大提取難度。DNA初次析出時(shí)，加清水至黏稠物不再增加為止。洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白，以利于血紅蛋白的分離和純化。 絡(luò)小結(jié) 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 1．生物技術(shù)實(shí)踐與人們的生產(chǎn)和生活密切相關(guān)。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題。 (1)進(jìn)行菊花組織培養(yǎng)的基本操作步驟是制備MS固體培養(yǎng)基、______________、接種、培養(yǎng)、移栽、栽培?；ㄋ庪x體培養(yǎng)時(shí)，選擇合適發(fā)育時(shí)期的花粉能提高誘導(dǎo)成功率，確定花粉發(fā)育時(shí)期最常用的染色方法是________________?；ǚ劢?jīng)脫分化產(chǎn)生胚狀體還是愈傷組織主要取決于培養(yǎng)基中__

28、__________________。 (2)如圖一表示制備固定化酵母細(xì)胞的有關(guān)操作，圖中的X溶液為________，其作用是__________________________。用注射器滴加海藻酸鈉與酵母菌混合液時(shí)，應(yīng)將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，才能加入已活化的酵母菌，目的是防止________。 (3)為了探究某加酶洗衣粉中堿性蛋白酶含量與洗滌效果的關(guān)系，某同學(xué)通過實(shí)驗(yàn)獲得如圖二所示的結(jié)果。由圖可知，加酶洗衣粉中堿性蛋白酶的最適含量是________%，本實(shí)驗(yàn)的自變量是________________________。 答案　(1)外植體消毒　醋酸洋紅法　激素的種類及其濃度

29、配比　(2)CaCl2溶液　使海藻酸鈉形成凝膠珠　高溫殺死酵母菌　(3)0.6　堿性蛋白酶的含量 2．下表是“游離酵母菌與固定化酵母菌產(chǎn)酒精作用的比較研究”的部分實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)?；卮鹣铝袉栴}： 時(shí)間(d) 0 2 4 6 8 10 12 乙醇的體積分?jǐn)?shù)(%) 游離酵母菌 0 1.6 2.4 3.1 3.7 4.6 4.8 固定化酵母菌 0 2.7 4.1 5.2 5.4 6.1 6.1 產(chǎn)酸量(相對(duì)值) 游離酵母菌 4.86 5.01 5.53 6.41 6.94 7.65 8.57 固定化酵母菌 4.86 5.11 5.

30、28 5.57 5.83 6.25 6.97 發(fā)酵液殘?zhí)橇?相對(duì)值) 游離酵母菌 135.6 131.2 118.3 105.5 98.1 85.2 72.2 固定化酵母菌 135.6 129.6 108.7 94.6 81.4 65.2 51.1 (1)多采用________法制備固定化酵母菌，固定化酵母菌固定的是________(填“一種”或“一系列”)酶。 (2)在配制海藻酸鈉溶液時(shí)，為了防止海藻酸鈉溶液發(fā)生焦糊，加熱時(shí)要用________或者_(dá)_______加熱。 (3)由表中數(shù)據(jù)可知，游離酵母菌和固定化酵母菌相比，___________

31、___(填“游離酵母菌”或“固定化酵母菌”)發(fā)酵產(chǎn)酒精的速率慢，原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)在發(fā)酵過程中，雜菌污染會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)酸量增多，表中數(shù)據(jù)說明抗菌能力較強(qiáng)的是______________發(fā)酵。工業(yè)生產(chǎn)中細(xì)胞的固定化及發(fā)酵是在嚴(yán)格的________條件下進(jìn)行的。 答案　(1)包埋　一系列　(2)小火　間斷　(3)游

32、離酵母菌　游離酵母菌發(fā)酵時(shí)，酵母菌隨發(fā)酵液流走，造成發(fā)酵罐中酵母菌細(xì)胞濃度不足　(4)固定化酵母菌　無菌 解析　因?yàn)榧?xì)胞比酶分子大，故固定化細(xì)胞時(shí)常采用包埋法。固定細(xì)胞是固定一系列酶。在配制海藻酸鈉溶液時(shí)，采用小火或間斷加熱的方法，可以防止海藻酸鈉溶液發(fā)生焦糊。由表中數(shù)據(jù)可知，游離酵母菌產(chǎn)生酒精的速率比固定化酵母菌慢；固定化酵母菌殘?zhí)橇枯^低，說明固定化酵母菌對(duì)發(fā)酵液中的糖的利用更充分，發(fā)酵得更徹底。 3．結(jié)合教材中有關(guān)生物技術(shù)實(shí)踐的知識(shí)回答下列問題： (1)月季的花藥培養(yǎng)過程中，材料的選擇對(duì)誘導(dǎo)花粉植株成功有重要影響，一般通過________來確定花粉是否處于適宜的發(fā)育期；確定花粉發(fā)育時(shí)

33、期的方法有醋酸洋紅法和________________。 (2)固定化酶、固定化細(xì)胞技術(shù)已經(jīng)廣泛地應(yīng)用于各個(gè)領(lǐng)域，制備固定化酶或固定化細(xì)胞的方法主要有包埋法、______________和______________等。 (3)植物組織培養(yǎng)過程中，在配制好的MS培養(yǎng)基中常需添加________，除此之外，________________(至少寫兩個(gè))等條件也是影響植物組織培養(yǎng)的重要因素。 (4)利用凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)時(shí)，相對(duì)分子質(zhì)量________的蛋白質(zhì)先分離出來；利用電泳法分離蛋白質(zhì)時(shí)，蛋白質(zhì)會(huì)向著與其所帶電荷________(填“相同”或“相反”)的電極移動(dòng)。 答案　(1)鏡檢

34、　焙花青—鉻礬法　(2)化學(xué)結(jié)合法　物理吸附法　(3)植物激素　pH、溫度、光照(寫出兩個(gè)即可)　(4)大　相反 4．多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction，PCR)，是一種DNA體外擴(kuò)增技術(shù)。請(qǐng)回答下列相關(guān)問題： (1)PCR技術(shù)的原理是______________________。在用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時(shí)，利用了DNA的________原理，通過控制溫度來控制雙鏈的________和________。 (2)PCR反應(yīng)體系要加入________種脫氧核苷酸的混合物。 (3)Mg2＋濃度對(duì)PCR擴(kuò)增效率影響很大，濃度過高可降低PCR擴(kuò)增的特異性，濃度過低

35、則影響產(chǎn)量。PCR實(shí)驗(yàn)不能使用自來水，而要使用至少蒸餾兩次的蒸餾水，原因是________________________________。 (4)PCR技術(shù)擴(kuò)增某目的基因所使用的引物有________種，引物之間或同一引物的堿基________(填“能”或“不能”)互補(bǔ)配對(duì)。 答案　(1)DNA的半保留復(fù)制　熱變性　解聚　結(jié)合 (2)4　(3)防止自來水中Mg2＋對(duì)反應(yīng)的影響　(4)2　不能 5．辣椒素是辣椒果實(shí)中普遍存在的一種生物堿，廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。辣椒素的獲得途徑如圖所示。請(qǐng)回答下列問題： (1)圖中①和②分別表示辣椒組織培養(yǎng)中細(xì)胞的________和__

36、______過程。 (2)圖中所用的MS培養(yǎng)基主要成分應(yīng)包括：大量元素、微量元素、有機(jī)物(如甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素以及________等)，還需要添加多種植物激素，如生長素和細(xì)胞分裂素。培養(yǎng)基中的生長素和細(xì)胞分裂素用量的比值________(填“高”或“低”)時(shí)，有利于芽的分化。所用的培養(yǎng)基必須徹底滅菌，一般應(yīng)采取的滅菌方法是______________。 (3)培養(yǎng)外植體的培養(yǎng)基一般是固體培養(yǎng)基，需要加入凝固劑________。并且在培養(yǎng)獲得辣椒脫毒苗的過程中，除無菌操作外，還需要注意pH、__________、__________等條件的控制。 (4)圖中第二條獲得辣椒素的途徑：

37、用酶解法將愈傷組織分離成單細(xì)胞，再選擇高產(chǎn)細(xì)胞系進(jìn)行培養(yǎng)。分散的細(xì)胞能快速增殖，提取的有效成分比從辣椒果實(shí)中提取更充分。酶解法用到的酶有________酶和________酶。 (5)辣椒素是一種斥水親脂、易溶于乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑的化合物?？梢圆捎胈_______法提取辣椒素，該方法需要對(duì)原材料進(jìn)行________，再用酒精、丙酮等浸泡，并利用________加熱的方法加熱，加熱瓶口安裝回流冷凝裝置，目的是____________________。通過過濾獲得濾液，若要獲得辣椒素結(jié)晶，還需再對(duì)濾液加熱蒸發(fā)出有機(jī)溶劑，這時(shí)可以直接使用________裝置進(jìn)行。 答案　(1)脫分化(去分化)

38、　再分化　(2)蔗糖　低　高壓蒸汽滅菌　(3)瓊脂　溫度　光照　(4)果膠　纖維素 (5)萃取　粉碎、干燥　水浴　防止有機(jī)溶劑的揮發(fā)　蒸餾 解析　(1)圖中的①②分別表示脫分化和再分化的過程。(2)對(duì)照所了解的MS培養(yǎng)基的成分，分析可知，除了題中提及的營養(yǎng)成分外，還應(yīng)該有蔗糖，作為培養(yǎng)過程中的碳源；當(dāng)培養(yǎng)基中生長素和細(xì)胞分裂素用量比值低時(shí)，有利于芽的分化；對(duì)培養(yǎng)基的滅菌通常采用高壓蒸汽滅菌法。(3)固體培養(yǎng)基中加入的凝固劑，通常是瓊脂；在形成脫毒苗的過程中需要注意pH、光照及溫度等條件的控制。(4)根據(jù)酶的專一性，分散細(xì)胞可以利用的酶有果膠酶和纖維素酶。(5)對(duì)于脂溶性的物質(zhì)，可采用萃取法

39、提取，該方法需要對(duì)原材料進(jìn)行粉碎、干燥，然后再用酒精、丙酮等有機(jī)溶劑浸泡，并利用水浴方法加熱，在加熱的瓶口安裝回流冷凝裝置，以防止有機(jī)溶劑的揮發(fā)；利用蒸餾法可以讓溶解辣椒素的有機(jī)溶劑蒸發(fā)，以獲得較純的辣椒素結(jié)晶。 1．脂肪酶在食品、醫(yī)藥、日化等領(lǐng)域具有廣泛應(yīng)用。工業(yè)用脂肪酶通常是通過微生物發(fā)酵 生產(chǎn)，其產(chǎn)生菌主要有霉菌、細(xì)菌和酵母菌等，生產(chǎn)流程如下圖所示。請(qǐng)據(jù)此分析回答： (1)為了更好地抑制其他微生物的生長，接種前要對(duì)原料和設(shè)備進(jìn)行________處理。圖中培養(yǎng)基A、B除了提供微生物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)之外，還具有________作用。 (2)接種1常用的方法是_______

40、_________。 (3)微生物的發(fā)酵產(chǎn)物中含有多種蛋白質(zhì)，請(qǐng)寫出一種純化得到脂肪酶的方法及依據(jù)。方法：______________。依據(jù)：____________________________________。酶在應(yīng)用前要進(jìn)行活性檢測(cè)，酶的活性可用________________________的量來表示。 (4)為了使分離純化得到的脂肪酶能夠反復(fù)利用，可采用____________技術(shù)。該技術(shù)常用的方法有____________(答一種)。 答案　(1)滅菌　篩選(能產(chǎn)生脂肪酶的微生物)　(2)稀釋涂布平板法(或平板劃線法)　(3)凝膠色譜法　根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小，吸附性質(zhì)等差異進(jìn)

41、行純化(或電泳法　根據(jù)蛋白質(zhì)帶電性質(zhì)，分子大小、形狀等差異進(jìn)行純化)　單位時(shí)間內(nèi)反應(yīng)物減少(或產(chǎn)物增加)　(4)固定化酶　物理吸附法(或化學(xué)結(jié)合法) 解析　獲得純培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵。微生物接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法；脂肪酶的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。純化得到脂肪酶，可用凝膠色譜法或電泳法；其依據(jù)是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的大小、吸附的性質(zhì)等差異進(jìn)行純化(或根據(jù)蛋白質(zhì)帶電的性質(zhì)、分子的大小、形狀等差異進(jìn)行純化)。 2．下圖為培養(yǎng)花粉植株的兩種途徑的示意圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題： (1)確定花粉發(fā)育時(shí)期的最常用方法是__________

42、____，取________期花粉較多的材料，花藥培養(yǎng)成功率較高。 (2)圖中的A是________，C指________。 (3)這兩種途徑之間沒有絕對(duì)的界限，主要取決于培養(yǎng)基中__________________。 (4)培養(yǎng)時(shí)，要控制溫度，且________(填“需要”或“不需要”)光照。 (5)在花藥培養(yǎng)中，由于____________的數(shù)目常常會(huì)發(fā)生改變，因此還需對(duì)培養(yǎng)出來的植株作進(jìn)一步的____________。 答案　(1)醋酸洋紅法　單核　(2)胚狀體　誘導(dǎo)　(3)激素的種類及其濃度配比　(4)不需要　(5)染色體組　鑒定和篩選 解析　單核期的花藥培養(yǎng)成功率高，選擇

43、花藥時(shí)，確定花藥發(fā)育時(shí)期最常用的方法是醋酸洋紅法；培養(yǎng)時(shí)溫度控制在25 ℃左右，不需要光照。在花藥培養(yǎng)中，由于染色體的數(shù)目常常會(huì)發(fā)生改變，因此還需對(duì)培養(yǎng)出來的植株作進(jìn)一步的鑒定和篩選。 3．櫻桃番茄又名小西紅柿、圣女果，不僅色澤艷麗、形態(tài)優(yōu)美，而且味道適口、營養(yǎng)豐富，特別是谷胱甘肽和番茄紅素含量較高。請(qǐng)回答下列相關(guān)的問題： (1)要分離谷胱甘肽常用的技術(shù)是________，假設(shè)櫻桃番茄中存在的3肽、27肽和56肽電性和形狀相同，則使用該技術(shù)時(shí)，處于最前端的是________。 (2)番茄紅素具有延緩衰老，抗癌的作用。提取番茄紅素的方法是________，由于該技術(shù)中用到的有機(jī)溶劑具有易燃

44、、易揮發(fā)等特點(diǎn)，所以該技術(shù)一般采用________加熱。 (3)我們可以選取根的________細(xì)胞作為外植體，通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)無病毒植株，這說明植物細(xì)胞具有______性。 (4)植物組織培養(yǎng)時(shí)用到的培養(yǎng)基從物理性質(zhì)上屬于______培養(yǎng)基，使用前應(yīng)該進(jìn)行________滅菌。 答案　(1)電泳法　3肽　(2)萃取法　水浴　(3)分生區(qū)　全能性　(4)固體　高壓蒸汽 4．生物技術(shù)的廣泛應(yīng)用，不僅給社會(huì)帶來了較大的經(jīng)濟(jì)效益，受到社會(huì)廣泛重視，更使人們的生活變得更加豐富多彩。請(qǐng)回答下列有關(guān)問題： (1)酸甜香脆的泡菜能令人胃口大開，但泡菜腌制過程中會(huì)產(chǎn)生亞硝酸鹽，測(cè)定亞硝酸鹽含

45、量的原理是：在________條件下，亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，再與N－1－萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成________色染料，最后根據(jù)染料顏色的深淺與標(biāo)準(zhǔn)比色定量。 (2)PCR和生物體內(nèi)DNA復(fù)制都需要引物的原因是________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (3)在香料工業(yè)提取的“液體黃金”玫瑰油中，要求不含有任何添加劑或化學(xué)原

46、料，其提取方法主要是________；玫瑰精油的提取需大量原料，通常采用____________________技術(shù)實(shí)現(xiàn)玫瑰的快速繁殖。 (4)在制備固定化酵母細(xì)胞過程中，溶化好的海藻酸鈉溶液要冷卻至室溫，才能加入已活化的酵母菌，原因是________________________。如果在CaCl2溶液中形成的凝膠珠顏色過淺，說明 ________________________________________________________________________。 (5)微生物培養(yǎng)中獲得純凈物的關(guān)鍵是________________。 答案　(1)鹽酸酸化　玫瑰紅　(2)

47、DNA聚合酶不能從頭開始復(fù)制DNA，只能從3′端延伸DNA鏈　(3)(水蒸氣)蒸餾法　植物組織培養(yǎng)　(4)防止高溫殺死酵母菌　海藻酸鈉溶液濃度低，固定化酵母細(xì)胞數(shù)目較少　(5)防止外來雜菌入侵 5．在20世紀(jì)50年代，酶已經(jīng)大規(guī)模地應(yīng)用于各個(gè)生產(chǎn)領(lǐng)域，到了70年代又發(fā)明了固定化酶與固定化細(xì)胞技術(shù)。 (1)在實(shí)際生產(chǎn)中，固定化酶技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是 ________________________________________________________________。與固定化酶技術(shù)相比，固定化細(xì)胞技術(shù)固定的是________________。 (2)制備固定化酵母細(xì)胞，常用的包埋材料是

48、________，使用了下圖中方法[　]________(填出號(hào)碼及名稱)。 (3)制作固定化酵母細(xì)胞時(shí)，充分混合均勻的酵母細(xì)胞溶液可在飽和________溶液中形成凝膠珠。部分同學(xué)實(shí)驗(yàn)制得的凝膠珠不是圓形或橢圓形，其主要原因是______________________________。 答案　(1)酶既能與反應(yīng)物接觸，又容易與產(chǎn)物分離，且固定在載體上的酶能反復(fù)使用　多酶系統(tǒng)(一系列、多種酶) (2)海藻酸鈉　③　包埋法　(3)CaCl2　海藻酸鈉濃度過高(或針筒離液面過近，高度不夠) 6．人們生產(chǎn)和生活與生物技術(shù)實(shí)踐密切相關(guān)。請(qǐng)回答下列問題： (1)生物技術(shù)實(shí)踐離不開無菌技術(shù)

49、，無菌技術(shù)主要通過消毒和滅菌過程來避免雜菌污染。常用的滅菌方法有________滅菌、干熱滅菌和________滅菌。 (2)在制作果醋過程中，若榨取的果汁非常渾濁，解決方法是______________________。 (3)為滿足廣大人民群眾的需要，科技工作者采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)在溫室大棚內(nèi)生產(chǎn)出大量質(zhì)優(yōu)價(jià)廉的各種花卉。如圖所示是郁金香芽尖通過特定操作接入試管后，在一定條件下形成試管苗的培育過程。 ①芽尖組織在接種至培養(yǎng)基之前，須進(jìn)行消毒處理，整個(gè)組織培養(yǎng)過程需在________條件下操作，并嚴(yán)格控制好各個(gè)時(shí)期的培養(yǎng)條件。 ②為促進(jìn)芽尖組織細(xì)胞分裂生長，所使用的培養(yǎng)基中應(yīng)有_

50、_______和細(xì)胞分裂素兩類植物激素。當(dāng)后者用量與前者用量的比值較________時(shí)，利于芽的分化，抑制根的形成。 ③再分化時(shí)，除必要的營養(yǎng)供應(yīng)和激素調(diào)節(jié)外，還需要的條件是______________________。 ④植物組織培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)是____________________。 答案　(1)灼燒　高壓蒸汽　(2)用果膠酶處理　(3)①無菌 ②生長素　高?、酃庹铡⑦m宜的溫度、pH　④快速繁殖，培育無病毒植株 解析　(1)常用的滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。(2)在制作果醋過程中，可以添加果膠酶，以提高榨取果汁的澄清度，并提高出汁率。(3)①植物組織培養(yǎng)過程中，為防

51、止微生物污染導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，整個(gè)過程需要在無菌條件下進(jìn)行；②植物組織培養(yǎng)需在培養(yǎng)基中添加生長素和細(xì)胞分裂素使植物細(xì)胞分裂分化，當(dāng)細(xì)胞分裂素濃度高于生長素濃度時(shí)，有利于芽的分化；當(dāng)細(xì)胞分裂素濃度低于生長素濃度時(shí)，有利于根的分化；③再分化時(shí)，除必要的營養(yǎng)供應(yīng)和激素調(diào)節(jié)外，還需要適宜的光照、溫度、pH；④植物組織培養(yǎng)具有快速繁殖，培育無病毒植株等優(yōu)點(diǎn)。 7．1958年，美國科學(xué)家利用胡蘿卜根的韌皮部細(xì)胞培育成了完整的新植株。請(qǐng)回答與植物組織培養(yǎng)和胡蘿卜素提取相關(guān)的問題： (1)在植物組織培養(yǎng)中，對(duì)培養(yǎng)基常用________________法進(jìn)行滅菌；對(duì)外植體要進(jìn)行________(填“滅菌”或“消

52、毒”)。 (2)植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基成分與微生物的培養(yǎng)基主要區(qū)別在于需要加入______________；又由于植物離體組織、細(xì)胞為異養(yǎng)型，因此需要在培養(yǎng)基中加入________，以滿足細(xì)胞生長的需要。 (3)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用萃取法，萃取胡蘿卜素的效率主要取決于________和______________，同時(shí)還受到原料顆粒的大小、緊密程度、________、萃取的________和時(shí)間等條件的影響。 (4)提取的胡蘿卜素可用________法進(jìn)行鑒定，在鑒定過程中需要用__________進(jìn)行對(duì)照。 答案　(1)高壓蒸汽滅菌　消毒　(2)植物激素　有機(jī)物　(3)萃取劑的性

53、質(zhì)　使用量　含水量　溫度　(4)紙層析　標(biāo)準(zhǔn)樣品 8．下面是將四倍體蘭花的葉片通過植物組織培養(yǎng)形成植株的示意圖，結(jié)合圖解回答相關(guān)問題： (1)選取四倍體蘭花葉片時(shí)，要選擇______________的葉片；外植體消毒后才可以__________，且此操作必須在酒精燈旁進(jìn)行。 (2)植物激素中________和________是啟動(dòng)細(xì)胞分裂的關(guān)鍵性激素；與①階段相比，②階段______________(填激素名稱)的作用呈現(xiàn)加強(qiáng)的趨勢(shì)。 (3)現(xiàn)代藥理研究表明，蘭花的芳香成分——芳香油使人心曠神怡，清除宿氣，解郁消悶，提神醒腦。實(shí)驗(yàn)室提取植物芳香油的方法有蒸餾、________和__

54、______等，根據(jù)蒸餾過程中原料放置的位置，可以將水蒸氣蒸餾法劃分為________、________和________。 答案　(1)生長旺盛(或幼嫩)　接種　(2)生長素　細(xì)胞分裂素　細(xì)胞分裂素　(3)壓榨　萃取　水中蒸餾　水上蒸餾　水氣蒸餾 9．科學(xué)工作者對(duì)矮叢藍(lán)莓葉片愈傷組織的培養(yǎng)進(jìn)行了研究。請(qǐng)利用所學(xué)知識(shí)回答下列相關(guān)問題： (1)因?qū)τ兹~滅菌相對(duì)容易，且外植體的采集對(duì)原母株傷害小，故幼葉成為矮叢藍(lán)莓組織培養(yǎng)時(shí)首選的接種材料。剪下幼葉后需要經(jīng)過一系列的消毒過程，一般先用流水沖洗20 min 左右，在無菌操作臺(tái)上用體積分?jǐn)?shù)為________的酒精消毒30 s，取出后在無菌水中清洗

55、，再用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1 %的________溶液滅菌1～2 min，最后用無菌水沖洗3次。 (2)植物組織培養(yǎng)包括________和________兩個(gè)重要過程，其中愈傷組織長出叢芽的過程的實(shí)質(zhì)是________________。 (3)離體植物組織培養(yǎng)常用MS培養(yǎng)基，其主要成分包括大量元素、微量元素、有機(jī)物(如甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素以及__________等)。在配制好的MS培養(yǎng)基中，常常需要添加________，其中生長素和細(xì)胞分裂素是啟動(dòng)________、脫分化和再分化的關(guān)鍵性激素。 (4)如果做月季的花藥培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)，確定花粉發(fā)育時(shí)期常用的方法是______________，某些

56、植物的花粉細(xì)胞核不易著色，需采用______________，這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色。 答案　(1)70%　氯化汞　(2)脫分化　再分化　基因的選擇性表達(dá)　(3)蔗糖　植物激素　細(xì)胞分裂　(4)醋酸洋紅法　焙花青—鉻礬法 10．某年我國某地由于柑橘大實(shí)蠅的危害，橘農(nóng)遭受到了很大的損失，當(dāng)?shù)卣氡M一切辦法幫助橘農(nóng)盡量減少損失。 (1)有人想提取橘皮精油獲取利潤，一般提取橘皮精油的方法是________法。 (2)橘皮精油的提取若采取水蒸氣蒸餾法，會(huì)出現(xiàn)原料________________和有效成分________________等問題。 (3)從橘皮中提取的橘皮精油的特點(diǎn)是

57、________________(色澤)，具有誘人的橘香味。 (4)某橘農(nóng)發(fā)現(xiàn)自家有一株橘樹具有抗蟲性狀，通?？蛇x取________________作材料進(jìn)行植物組織培養(yǎng)大量繁殖無病毒植株。若用花藥進(jìn)行離體培養(yǎng)，則選擇花粉發(fā)育至________________期的花藥培養(yǎng)成功率最高。確定花粉發(fā)育時(shí)期最常用的方法有________________法，某些植物的花粉不易著色，需采用________________法。 (5)在植物組織培養(yǎng)過程中，為了檢驗(yàn)制備的培養(yǎng)基是否合格，采取的措施是______________________________________________________

58、__________________ ________________________________________________________________________。 如果________________，說明培養(yǎng)基制備成功，否則需要重新制備。 (6)影響植物組織培養(yǎng)的因素很多，其中最關(guān)鍵的激素有________________________。請(qǐng)解釋橘樹上的細(xì)胞不離體便不能長成完整植株的根本原因： ________________________________________________________________________ ___________

59、_____________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 答案　(1)壓榨　(2)焦糊　水解　(3)無色透明　(4)莖尖或根尖　單核　醋酸洋紅　焙花青—鉻礬　(5)將未接種的培養(yǎng)基與接種的培養(yǎng)基放在相同環(huán)境條件下培養(yǎng)，觀察是否有雜菌生長　未被雜菌污染　(6)生長素、細(xì)胞分裂素　在柑橘個(gè)體發(fā)育過程中，植物體內(nèi)細(xì)胞的基因選擇性表達(dá)，細(xì)胞分化形成不同的組織和器官，且發(fā)育成完整植株的前提條件是細(xì)胞處于離體狀態(tài)