高考生物二輪復習 專題講練 第8單元 選修模塊 14 生物技術實踐課件

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1、專題十四生物技術實踐專題十四生物技術實踐專題十五現(xiàn)代生物科技專題專題十五現(xiàn)代生物科技專題 返回目錄返回目錄真真題題聚聚焦焦拓拓展展核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄教師知識必備教師知識必備【網絡構建網絡構建】返回目錄返回目錄教師知識必備教師知識必備1 1本專題通過果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作等生產實本專題通過果酒、果醋、腐乳、泡菜的制作等生產實例和大腸桿菌的分離、純化操作等過程，考查最基本的生例和大腸桿菌的分離、純化操作等過程，考查最基本的生物學知識。將果酒、果醋、腐乳與泡菜的制作及特定微生物學知識。將果酒、果醋、腐乳與泡菜的制作及特定微生物的分離、純化等實踐操作構建成過程模型，可以加深

2、對物的分離、純化等實踐操作構建成過程模型，可以加深對知識的記憶與理解。知識的記憶與理解。2 2應讓學生弄清楚植物組織培養(yǎng)的操作程序。讓學生聯(lián)應讓學生弄清楚植物組織培養(yǎng)的操作程序。讓學生聯(lián)系生長素和細胞分裂素的作用，分析二者在植物組織培養(yǎng)系生長素和細胞分裂素的作用，分析二者在植物組織培養(yǎng)中的作用。中的作用。3 3植物有效成分的提取常與生產、生活實際相聯(lián)系，或植物有效成分的提取常與生產、生活實際相聯(lián)系，或與實驗結合進行考查，難度不大。利用圖解分析法理解特與實驗結合進行考查，難度不大。利用圖解分析法理解特定植物成分的提取。定植物成分的提取。【考情分析考情分析】返回目錄返回目錄近年高考分析近年高考分析

3、20132013年年20142014年年20152015年年傳統(tǒng)發(fā)傳統(tǒng)發(fā)酵技術酵技術新課標全國卷新課標全國卷T39(非選擇非選擇)、廣、廣東卷東卷T29(非選擇非選擇)、江蘇卷江蘇卷T13/T14/T17(選擇選擇)山東卷山東卷T35(非選擇非選擇)、海南卷海南卷T30(非選擇非選擇)廣東卷廣東卷T29(非非選擇選擇)、江蘇、江蘇卷卷T17(選擇選擇)微生物微生物的的培養(yǎng)和培養(yǎng)和利用利用新課標全國卷新課標全國卷T39(非選擇非選擇)、安、安徽卷徽卷T6(選擇選擇)、四、四川卷川卷T10(非選擇非選擇)、山東卷山東卷T34(非選擇非選擇)、廣東卷廣東卷T6(選擇選擇)、江蘇卷江蘇卷T18(選擇選

4、擇)新課標全國卷新課標全國卷T39(非選擇非選擇)、新課標全國、新課標全國卷卷T39(非選擇非選擇)、安、安徽卷徽卷T29(非選擇非選擇)、山、山東卷東卷T35(非選擇非選擇)、四、四川卷川卷T10(非選擇非選擇)、浙、浙江卷江卷T17(非選擇非選擇)、江、江蘇卷蘇卷T24(選擇選擇)江蘇卷江蘇卷T19(選選擇擇)、全國卷、全國卷T39(非選非選擇擇)、江蘇卷、江蘇卷T31(非選擇非選擇)返回目錄返回目錄植物組織植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)江蘇卷江蘇卷T29(T29(非非選擇選擇) )植物有效植物有效成分的提取成分的提取山東卷山東卷T34(T34(非選非選擇擇) )、海南卷、海南卷T30(T30(非選擇非

5、選擇) )山東卷山東卷T35(T35(非非選擇選擇) )、江蘇卷、江蘇卷T30(T30(非選擇非選擇) )全國卷全國卷T39(T39(非選非選擇擇) )近年高考分析近年高考分析返回目錄返回目錄1.微生物的利用(1)微生物的分離和培養(yǎng)。(2)培養(yǎng)基對微生物的選擇作用。(3)利用微生物進行發(fā)酵來生產特定的產物。2.生物技術在食品加工及其他方面的應用(1)從生物材料中提取某些特定的成分。(2)運用發(fā)酵加工食品的基本方法。(3)植物的組織培養(yǎng)。3.實驗：DNA的粗提取與鑒定。 考綱要求考綱要求專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 12015全國卷全國卷 下列敘述錯誤的是下列敘述錯誤的是()已知微生

6、物已知微生物A可以產生油脂，微生物可以產生油脂，微生物B可以產生脂肪酶。脂可以產生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生產?；卮鹩嘘P問題：肪酶和油脂可用于生物柴油的生產?；卮鹩嘘P問題：(1)顯微觀察時，微生物顯微觀察時，微生物A菌體中的油脂通常可用菌體中的油脂通?？捎胈染色。微生物染色。微生物A產生的油脂不易揮發(fā)，可選產生的油脂不易揮發(fā)，可選用用_(填填“萃取法萃取法”或或“水蒸氣蒸餾法水蒸氣蒸餾法”)從菌從菌體中提取。體中提取。(2)為了從自然界中獲得能產生脂肪酶的微生物為了從自然界中獲得能產生脂肪酶的微生物B的單菌落，的單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應選用以可從含有油料

7、作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應選用以_為碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。為碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。返回目錄返回目錄真真題題聚聚焦焦拓拓展展專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 (3)(3)若要測定培養(yǎng)液中微生物若要測定培養(yǎng)液中微生物B B的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用_直接計數(shù)；若要測定其活菌數(shù)量，可選用直接計數(shù)；若要測定其活菌數(shù)量，可選用_法進行計數(shù)。法進行計數(shù)。(4)(4)為了確定微生物為了確定微生物B B產生的脂肪酶的最適溫度，某同學測產生的脂肪酶的最適溫度，某同學測得相同時間內，在得相同時間內，在35 35 、40 40 、45 45 溫度下降解溫度下降解10 g1

8、0 g油脂所需酶量依次為油脂所需酶量依次為4 mg4 mg、1 mg1 mg、6 mg6 mg，則上述三個溫度，則上述三個溫度中，中，_條件下該酶活力最小。為了進一步確定該條件下該酶活力最小。為了進一步確定該酶的最適溫度，應圍繞酶的最適溫度，應圍繞_設計后續(xù)實驗。設計后續(xù)實驗。返回目錄返回目錄真真題題聚聚焦焦拓拓展展專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 答案答案 (1) (1)蘇丹蘇丹(或蘇丹或蘇丹)萃取法萃取法 (2)(2)油脂油脂 (3)(3)血細胞計數(shù)板稀釋涂布平板血細胞計數(shù)板稀釋涂布平板(4)45(4)454040解析解析 (1)油脂可被蘇丹油脂可被蘇丹染液染成橘黃色，或被蘇丹染液

9、染成橘黃色，或被蘇丹染染液染成紅色。由于微生物液染成紅色。由于微生物A產生的油脂不易揮發(fā)，故提取產生的油脂不易揮發(fā)，故提取時可選用萃取法，而不能用水蒸氣蒸餾法。時可選用萃取法，而不能用水蒸氣蒸餾法。(2)根據(jù)酶的專根據(jù)酶的專一性，為了從自然界中獲得能產生脂肪酶的微生物一性，為了從自然界中獲得能產生脂肪酶的微生物B的單的單菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應選用以油脂為碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，不產生脂肪酶選用以油脂為碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，不產生脂肪酶的微生物無法生存。的微生物無法生存。(3)測定培養(yǎng)液中微生物測定培養(yǎng)液中微生物

10、B的菌體數(shù)，的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)；若要測定其活菌可在顯微鏡下用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)；若要測定其活菌返回目錄返回目錄真真題題聚聚焦焦拓拓展展專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 數(shù)量，可選用稀釋涂布平板法進行計數(shù)。數(shù)量，可選用稀釋涂布平板法進行計數(shù)。(4)據(jù)題可知，在據(jù)題可知，在35 、40 、45 溫度下，溫度下，45 時降解時降解10 g油脂所需酶油脂所需酶量最大，故該溫度下酶活力最小。由于量最大，故該溫度下酶活力最小。由于40 時酶活性相對時酶活性相對較大，因此，為了進一步確定該酶的最適溫度，應圍繞該較大，因此，為了進一步確定該酶的最適溫度，應圍繞該溫度設計后續(xù)

11、實驗。溫度設計后續(xù)實驗。返回目錄返回目錄真真題題聚聚焦焦拓拓展展專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 22014海南卷海南卷 已知泡菜中亞硝酸鹽含量與泡制時間有已知泡菜中亞硝酸鹽含量與泡制時間有關。為了測定不同泡制天數(shù)泡菜中亞硝酸鹽的含量，某同關。為了測定不同泡制天數(shù)泡菜中亞硝酸鹽的含量，某同學設計了一個實驗，實驗材料、試劑及用具包括：刻度移學設計了一個實驗，實驗材料、試劑及用具包括：刻度移液管、比色管、不同濃度的亞硝酸鈉標準溶液、亞硝酸鹽液管、比色管、不同濃度的亞硝酸鈉標準溶液、亞硝酸鹽的顯色劑、不同泡制天數(shù)的泡菜濾液等。的顯色劑、不同泡制天數(shù)的泡菜濾液等?；卮鹣嚓P問題：回答相關問題：(

12、1)請完善下列實驗步驟。請完善下列實驗步驟。標準管的制備：用標準管的制備：用_和顯色劑和顯色劑制成顏色深淺不同的系列標準管。制成顏色深淺不同的系列標準管。樣品管的制備：用刻度移液管分別吸取一定量的樣品管的制備：用刻度移液管分別吸取一定量的_，加到不同的比色管中，然后，加到不同的比色管中，然后在各個比色管中加入等量的顯色劑進行顯色，得到樣品管。在各個比色管中加入等量的顯色劑進行顯色，得到樣品管。返回目錄返回目錄真真題題聚聚焦焦拓拓展展將每個將每個_分別與系列標準管進行比較，找出與樣分別與系列標準管進行比較，找出與樣品管顏色深淺品管顏色深淺_的標準管，該管中亞硝酸鈉含量即的標準管，該管中亞硝酸鈉含

13、量即代表樣品管中亞硝酸鹽含量，記錄各樣品管亞硝酸鹽的含代表樣品管中亞硝酸鹽含量，記錄各樣品管亞硝酸鹽的含量。量。(2)(2)圖圖T141T141表示的是泡菜中表示的是泡菜中_趨勢。趨勢。(3)(3)泡菜制作過程中產酸的細菌主要是泡菜制作過程中產酸的細菌主要是_(_(填填“醋酸醋酸桿菌桿菌”或或“乳酸菌乳酸菌”)”)。返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 真真題題聚聚焦焦拓拓展展圖圖T141真真題題聚聚焦焦拓拓展展 答案答案 (1)亞硝酸鈉標準溶液亞硝酸鈉標準溶液 不同泡制天數(shù)的泡菜不同泡制天數(shù)的泡菜濾液濾液樣品管最相近樣品管最相近(其他合理答案也可其他合理答案也可)(2)亞

14、硝酸鹽含量隨泡制時間的變化亞硝酸鹽含量隨泡制時間的變化(其他合理答案也可其他合理答案也可)(3)乳酸菌乳酸菌解析解析 (1)在亞硝酸鹽的含量測定中，可利用亞硝酸鹽與顯在亞硝酸鹽的含量測定中，可利用亞硝酸鹽與顯色劑發(fā)生顏色反應，根據(jù)顏色的深淺可確定亞硝酸鹽含量色劑發(fā)生顏色反應，根據(jù)顏色的深淺可確定亞硝酸鹽含量的多少。用不同濃度的亞硝酸鈉標準溶液與顯色劑可制成的多少。用不同濃度的亞硝酸鈉標準溶液與顯色劑可制成顏色深淺不同的系列標準管，不同顏色深淺對應的亞硝酸顏色深淺不同的系列標準管，不同顏色深淺對應的亞硝酸鈉濃度是已知的；用不同泡制天數(shù)的泡菜濾液與顯色劑反鈉濃度是已知的；用不同泡制天數(shù)的泡菜濾液與

15、顯色劑反應，制備一系列的樣品管，將樣品管的顏色與標準管進行應，制備一系列的樣品管，將樣品管的顏色與標準管進行顏色比對，找到與樣品管顏色深淺最接近的標準管，所對顏色比對，找到與樣品管顏色深淺最接近的標準管，所對應的亞硝酸鈉濃度即可代表樣品管中的亞硝酸鹽含量。應的亞硝酸鈉濃度即可代表樣品管中的亞硝酸鹽含量。返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 真真題題聚聚焦焦拓拓展展(2)圖示曲線橫軸為時間，縱軸為亞硝酸鹽含量，則該曲線圖示曲線橫軸為時間，縱軸為亞硝酸鹽含量，則該曲線表示泡菜中亞硝酸鹽含量隨發(fā)酵時間的變化趨勢。表示泡菜中亞硝酸鹽含量隨發(fā)酵時間的變化趨勢。(3)泡菜制作的原理是乳

16、酸發(fā)酵，產酸的細菌主要是乳酸菌。泡菜制作的原理是乳酸發(fā)酵，產酸的細菌主要是乳酸菌。返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 真真題題聚聚焦焦拓拓展展專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 32014新課標全國卷新課標全國卷 植物秸稈中的纖維素可被某些植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}：微生物分解?；卮鹣铝袉栴}：(1)(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由由3 3種組分組成的復合酶，其中的葡萄糖苷酶可將種組分組成的復合酶，其中的葡萄糖苷酶可將_分解成分解成_。(2)(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅

17、在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)(CR)時，時，CRCR可與纖可與纖維素形成維素形成_色復合物。用含有色復合物。用含有CRCR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的纖維素分解菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的_。返回目錄返回目錄真真題題聚聚焦焦拓拓展展真真題題聚聚焦焦拓拓展展(3)(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學設計了甲、乙兩種培養(yǎng)基菌落，某同學設計了甲、乙兩種培養(yǎng)基( (成分見下表成分見下表) )：注：注：“”表示有，表示有，“”表示無。表示無。據(jù)表判斷，培養(yǎng)

18、基甲據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲_(_(填填“能能”或或“不能不能”)”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是_；培養(yǎng)基乙培養(yǎng)基乙_(_(填填“能能”或或“不能不能”)”)用于分離和鑒別用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是纖維素分解菌，原因是_。返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 酵母酵母膏膏無機鹽無機鹽淀粉淀粉纖維素纖維素粉粉瓊脂瓊脂CRCR溶液溶液水水培養(yǎng)基培養(yǎng)基甲甲培養(yǎng)基培養(yǎng)基乙乙真真題題聚聚焦焦拓拓展展 答案答案(1)纖維二糖葡萄糖纖維二糖葡萄糖(2)紅透明圈紅透明圈(3)不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能培養(yǎng)基不能液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌

19、落不能培養(yǎng)基中沒有纖維素，不會形成中沒有纖維素，不會形成CR纖維素紅色復合物，即使纖維素紅色復合物，即使出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌出現(xiàn)單菌落也不能確定其為纖維素分解菌 解析解析 (1)(1)纖維素酶是一種復合酶，該酶是由纖維素酶是一種復合酶，該酶是由C C1 1酶、酶、C CX酶酶和葡萄糖苷酶和葡萄糖苷酶3 3種組分組成，前兩種酶可將纖維素分解為種組分組成，前兩種酶可將纖維素分解為纖維二糖，葡萄糖苷酶可將纖維二糖分解為葡萄糖。纖維二糖，葡萄糖苷酶可將纖維二糖分解為葡萄糖。(2)(2)剛果紅可與纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維剛果紅可與纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解后

20、，紅色復合物便無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解素酶分解后，紅色復合物便無法形成，出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。我們可以通過是否產生透明圈來篩選菌為中心的透明圈。我們可以通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌。纖維素分解菌。返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐真真題題聚聚焦焦拓拓展展(3)(3)生物適應一定環(huán)境，環(huán)境對生物具有選擇作用，只有生物適應一定環(huán)境，環(huán)境對生物具有選擇作用，只有在纖維素含量豐富的環(huán)境中纖維素分解菌才會發(fā)揮作用。在纖維素含量豐富的環(huán)境中纖維素分解菌才會發(fā)揮作用。纖維素分解菌選擇培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基。纖維素分解菌纖維素分解菌選擇培養(yǎng)基屬于液體培養(yǎng)基。纖維素分解

21、菌鑒別培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，要分離和鑒別纖維素分解菌，鑒別培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，要分離和鑒別纖維素分解菌，都需要以纖維素為主要碳源的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基乙不具有選都需要以纖維素為主要碳源的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基乙不具有選擇的作用。擇的作用。返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐真真題題聚聚焦焦拓拓展展【備考指津備考指津】1本專題在高考中主要考查的內容有傳統(tǒng)發(fā)酵技術、微生物的培養(yǎng)與應用以及生物技術在其他方面的應用。2本專題的題目往往以微生物的培養(yǎng)與應用為核心，綜合傳統(tǒng)發(fā)酵技術和其他方面的應用進行考查。3備考時要將各種生物技術進行對比理解并牢記，要用生物學術語進行答題。返回目錄返回目錄專題十四

22、專題十四生物技術實踐生物技術實踐真真題題聚聚焦焦拓拓展展考點一果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的比較考點一果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的比較考例探究考例探究果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的比較果酒、果醋、腐乳和泡菜制作的比較 返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 項目項目內容內容果酒和果果酒和果醋的制作醋的制作腐乳的制作腐乳的制作制作泡菜并測定制作泡菜并測定亞硝酸鹽含量亞硝酸鹽含量作用作用菌種菌種果酒：酵母菌果酒：酵母菌果醋：醋酸菌果醋：醋酸菌以毛霉為主以毛霉為主乳酸菌乳酸菌原理原理酵母菌在無酵母菌在無氧條件下將葡萄氧條件下將葡萄糖氧化成乙醇糖氧化成乙醇醋酸菌在有醋酸菌在有氧條件下將乙

23、醇氧條件下將乙醇氧化為醋酸氧化為醋酸毛霉等微生毛霉等微生物產生的蛋白物產生的蛋白酶和脂肪酶分酶和脂肪酶分別將蛋白質、別將蛋白質、脂肪分解成小脂肪分解成小分子有機物分子有機物制作泡菜：乳酸菌將制作泡菜：乳酸菌將糖轉化為乳酸和醇類糖轉化為乳酸和醇類測定亞硝酸鹽含量：測定亞硝酸鹽含量：在鹽酸酸化條件下，亞硝在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后，與重氮化反應后，與N1萘萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料玫瑰紅色染料核核心心考考點點整整合合 返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 原料選擇原料選擇新鮮葡萄新鮮葡萄(或蘋或

24、蘋果果)豆腐豆腐大白菜、花椰菜等大白菜、花椰菜等新鮮干凈的蔬菜新鮮干凈的蔬菜實驗流程實驗流程挑選葡萄挑選葡萄 沖洗沖洗 榨汁榨汁 酒精酒精 醋酸醋酸 發(fā)酵發(fā)酵 發(fā)酵發(fā)酵 果酒果酒 果醋果醋 讓豆腐上長出讓豆腐上長出毛霉毛霉加鹽腌制加鹽腌制加鹵湯裝瓶加鹵湯裝瓶密封腌制密封腌制 制作泡菜：制作泡菜： 選材選材 配制鹽水配制鹽水 加入加入調味料，裝壇調味料，裝壇發(fā)酵發(fā)酵成品成品測定亞硝酸鹽含測定亞硝酸鹽含量：配制溶液量：配制溶液制備制備標準顯色液標準顯色液制備樣制備樣品處理液品處理液比色比色核核心心考考點點整整合合 返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 操作注操作注意事項意事項材

25、料的選擇材料的選擇與處理與處理防止發(fā)酵液防止發(fā)酵液被污染，控制好被污染，控制好發(fā)酵條件發(fā)酵條件材料用量材料用量防止雜菌污防止雜菌污染染控制溫度及控制溫度及酒精含量酒精含量泡菜壇的選擇泡菜壇的選擇腌制條件腌制條件(無氧無氧)測定亞硝酸鹽含測定亞硝酸鹽含量的操作量的操作共同點共同點都是天然的發(fā)酵過程，利用了微生物新陳代謝過程中代都是天然的發(fā)酵過程，利用了微生物新陳代謝過程中代謝產物的作用或直接獲取代謝產物謝產物的作用或直接獲取代謝產物核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄核核心心考考點點整整合合專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 例例1 某同學利用圖某同學利用圖1所示裝置制作蘋果酒和蘋果醋

26、，請分所示裝置制作蘋果酒和蘋果醋，請分析回答有關問題：析回答有關問題：圖圖T142(1)(1)(2)(2)核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 (1)可分別利用酵母菌和可分別利用酵母菌和_菌制作果酒和果醋，這菌制作果酒和果醋，這兩種微生物的區(qū)別是后者為兩種微生物的區(qū)別是后者為_(填填“厭氧厭氧”“好氧好氧”或或“兼性厭氧兼性厭氧”)微生物。微生物。(2)加入蘋果汁時，瓶內要留出大約加入蘋果汁時，瓶內要留出大約1/3的空間，目的是的空間，目的是_。(3)酵母菌利用蘋果汁進行酒精發(fā)酵的反應式為酵母菌利用蘋果汁進行酒精發(fā)酵的反應式為_，密封充氣口后可用，密

27、封充氣口后可用_檢檢測是否有酒精生成。測是否有酒精生成。(4)要利用蘋果酒繼續(xù)發(fā)酵生產蘋果醋，接種發(fā)酵所用菌要利用蘋果酒繼續(xù)發(fā)酵生產蘋果醋，接種發(fā)酵所用菌種后，需要將發(fā)酵溫度變?yōu)榉N后，需要將發(fā)酵溫度變?yōu)開，并，并_。(5)圖圖(2)中能表示裝置內液體發(fā)酵過程中中能表示裝置內液體發(fā)酵過程中pH變化的曲線變化的曲線是是_。核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 答案答案 (1)醋酸好氧醋酸好氧(2)有利于酵母菌進行繁殖，防止發(fā)酵旺盛時發(fā)酵液溢出有利于酵母菌進行繁殖，防止發(fā)酵旺盛時發(fā)酵液溢出(3)C6H12O62C2H5OH2CO2(酸性酸性)重鉻酸鉀重鉻酸

28、鉀(4)3035 適時通過充氣口充氣適時通過充氣口充氣(5)解析解析 (1)制作果醋所用的微生物是醋酸菌。酵母菌是兼制作果醋所用的微生物是醋酸菌。酵母菌是兼性厭氧微生物，而醋酸菌是好氧微生物。性厭氧微生物，而醋酸菌是好氧微生物。(2)加入蘋果汁加入蘋果汁時，瓶內要留出大約時，瓶內要留出大約1/3的空間，有利于酵母菌進行繁殖，的空間，有利于酵母菌進行繁殖，同時防止發(fā)酵旺盛時發(fā)酵液溢出。同時防止發(fā)酵旺盛時發(fā)酵液溢出。(3)在酸性條件下，重在酸性條件下，重鉻酸鉀可與酒精反應呈現(xiàn)灰綠色。鉻酸鉀可與酒精反應呈現(xiàn)灰綠色。(4)制作果酒時所需的制作果酒時所需的條件是厭氧、條件是厭氧、1825 ，而制作果醋時

29、所需的條件是有，而制作果醋時所需的條件是有核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 氧、氧、3035 。(5)酵母菌進行酒精發(fā)酵時，產生的酵母菌進行酒精發(fā)酵時，產生的CO2使溶液使溶液pH略微下降，醋酸菌進行果醋發(fā)酵時，產生了大略微下降，醋酸菌進行果醋發(fā)酵時，產生了大量的醋酸，使溶液量的醋酸，使溶液pH快速下降，所以圖快速下降，所以圖(2)中符合條件的中符合條件的曲線是。曲線是。核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 對點訓練對點訓練酸菜，古稱菹，酸菜，古稱菹，周禮周禮中就有其大名。制作酸菜的初衷中就有其大名。制

30、作酸菜的初衷是為了延長蔬菜保存期限。請回答：是為了延長蔬菜保存期限。請回答： (1)酸菜制作過程中，起主要作用的微生物是酸菜制作過程中，起主要作用的微生物是_。但是在發(fā)酵初期，很多雜菌會大量繁殖，其中導致泡菜水但是在發(fā)酵初期，很多雜菌會大量繁殖，其中導致泡菜水的表面長白膜的微生物是的表面長白膜的微生物是_。(2)實驗室可采用實驗室可采用_法進行法進行菌種純化，在對該菌種進行培養(yǎng)時，與常規(guī)培養(yǎng)基相比，菌種純化，在對該菌種進行培養(yǎng)時，與常規(guī)培養(yǎng)基相比，還需要額外在培養(yǎng)基中添加還需要額外在培養(yǎng)基中添加_。核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐(3)為了保持所

31、獲得的菌種純凈，需要進行菌種的保藏。為了保持所獲得的菌種純凈，需要進行菌種的保藏。若采用臨時保藏，需將菌種接種在若采用臨時保藏，需將菌種接種在_上，上，放入放入4 冰箱中可保藏冰箱中可保藏36個月；若要長期保存，可將菌個月；若要長期保存，可將菌液與滅菌的液與滅菌的_混勻，放在混勻，放在20 的冰箱中保存一的冰箱中保存一年。年。(4)在市場上購買的真空包裝酸菜，在沒有發(fā)生漏氣狀態(tài)在市場上購買的真空包裝酸菜，在沒有發(fā)生漏氣狀態(tài)下發(fā)生了下發(fā)生了“脹袋脹袋”現(xiàn)象，現(xiàn)象，A同學懷疑是雜菌污染導致的，同學懷疑是雜菌污染導致的，B同學懷疑是乳酸菌大量繁殖導致的，說出你支持誰的觀點同學懷疑是乳酸菌大量繁殖導致

32、的，說出你支持誰的觀點并說出理由。支持并說出理由。支持_的觀點，理由是的觀點，理由是_。核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐答案答案 (1)乳酸菌酵母菌乳酸菌酵母菌(或產膜酵母或產膜酵母)(2)平板劃線法或稀釋涂布平板維生素平板劃線法或稀釋涂布平板維生素(3)固體斜面培養(yǎng)基甘油固體斜面培養(yǎng)基甘油(4)A同學乳酸菌代謝過程中不產生氣體同學乳酸菌代謝過程中不產生氣體(或乳酸菌呼吸或乳酸菌呼吸作用不產生二氧化碳作用不產生二氧化碳)解析解析 (1)酸菜制作過程中，起主要作用的微生物是乳酸酸菜制作過程中，起主要作用的微生物是乳酸菌，其代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，能發(fā)

33、酵產生乳酸。在發(fā)酵菌，其代謝類型是異養(yǎng)厭氧型，能發(fā)酵產生乳酸。在發(fā)酵初期，酵母菌初期，酵母菌(或產膜酵母或產膜酵母)會導致泡菜水的表面長白膜。會導致泡菜水的表面長白膜。(2)在實驗室純化菌種常用平板劃線法或稀釋涂布平板法；在實驗室純化菌種常用平板劃線法或稀釋涂布平板法；維生素是乳酸菌生長繁殖所必需的，在自身體內又不能合維生素是乳酸菌生長繁殖所必需的，在自身體內又不能合成，因此要在培養(yǎng)乳酸菌的培養(yǎng)基中添加維生素。成，因此要在培養(yǎng)乳酸菌的培養(yǎng)基中添加維生素。核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐(3)進行菌種保藏時，若采用臨時保藏，需將菌種接種在進行菌種保

34、藏時，若采用臨時保藏，需將菌種接種在固體斜面培養(yǎng)基上，放入固體斜面培養(yǎng)基上，放入4 冰箱中可保藏冰箱中可保藏36個月；若個月；若要長期保存，可將菌液與滅菌的甘油混勻，放在要長期保存，可將菌液與滅菌的甘油混勻，放在20 的冰箱中保存一年。的冰箱中保存一年。(4)乳酸菌是厭氧型微生物，只能進乳酸菌是厭氧型微生物，只能進行無氧呼吸，且無氧呼吸的產物只有乳酸，不產生氣體，行無氧呼吸，且無氧呼吸的產物只有乳酸，不產生氣體，因此支持因此支持A同學的觀點。同學的觀點。核核心心考考點點整整合合考點二蛋白質和核酸考點二蛋白質和核酸考例探究考例探究 考向考向1微生物培養(yǎng)的三大基本技術微生物培養(yǎng)的三大基本技術1無菌

35、技術消毒和滅菌的區(qū)別 返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 項目項目概念概念常用方法常用方法應用范圍應用范圍消毒消毒 使用較使用較為溫和的物為溫和的物理或化學方理或化學方法殺死物體法殺死物體表面或內部表面或內部的部分微生的部分微生物物(不包括不包括芽孢和孢子芽孢和孢子)煮沸消毒法：煮沸消毒法：100 煮煮沸沸56 min 一般一般物品物品巴氏消毒法：巴氏消毒法：7075 煮煮30 min或在或在80 煮煮15 min 一些一些不耐高不耐高溫的液體，如溫的液體，如牛奶牛奶 化學化學藥劑消毒法藥劑消毒法 如如用酒精擦用酒精擦拭雙手拭雙手紫外線消毒法：紫外線消毒法：30 W紫紫外

36、燈照射外燈照射30 min 接種接種室室核核心心考考點點整整合合 返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 項目項目概念概念常用方法常用方法應用范圍應用范圍滅菌滅菌 使用強使用強烈的理化因烈的理化因素殺死物體素殺死物體內外所有的內外所有的微生物微生物(包包括芽孢和孢括芽孢和孢子子) 灼燒滅菌：通過酒精燈灼燒滅菌：通過酒精燈火焰灼燒火焰灼燒接種工具的接種工具的滅菌滅菌 干熱滅菌：在干熱滅菌：在160170 加熱加熱12 h玻璃器皿、玻璃器皿、金屬工具的滅金屬工具的滅菌菌高壓蒸汽滅菌：高壓蒸汽滅菌：121 條件下維持條件下維持1530 min培養(yǎng)基的滅培養(yǎng)基的滅菌菌核核心心考考點點

37、整整合合2培養(yǎng)基的制備技術培養(yǎng)基的制備技術(1)培養(yǎng)基的種類培養(yǎng)基的種類 返回目錄返回目錄核核心心考考點點整整合合專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 劃分標準劃分標準培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基種類特點特點應用應用物理性質物理性質液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基 不加凝固劑不加凝固劑 工業(yè)生產工業(yè)生產半固體半固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基 加凝固劑加凝固劑(如瓊脂如瓊脂)觀察微生物的運觀察微生物的運動、分類鑒定動、分類鑒定固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基微生物的分離、微生物的分離、鑒定，活菌計數(shù)，鑒定，活菌計數(shù)，菌種保藏菌種保藏核核心心考考點點整整合合 返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 用途用途選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)

38、基 培養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某中加入某種化學物質，以抑種化學物質，以抑制不需要的微生物制不需要的微生物的生長，促進所需的生長，促進所需要的微生物的生長要的微生物的生長 培養(yǎng)培養(yǎng)、分離出、分離出特定微生物特定微生物(如以如以尿素為唯一氮源的尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基用于分離能培養(yǎng)基用于分離能分解尿素的細菌分解尿素的細菌)鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基 根據(jù)根據(jù)微生物的代微生物的代謝特點，在培養(yǎng)基謝特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑中加入某種指示劑或化學藥品或化學藥品 鑒別鑒別不同種類不同種類的微生物的微生物(如可用如可用伊紅伊紅美美藍培養(yǎng)藍培養(yǎng)基鑒別飲用水或乳基鑒別飲用水或乳制品中是否有大腸制品中是否有大腸桿菌桿菌)核

39、核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐(2)培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基的制備過程：計算過程：計算稱量稱量溶化溶化滅菌滅菌倒平板。倒平板。原則：原則：a目的要明確：根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等，選擇目的要明確：根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等，選擇原料配制培養(yǎng)基，如培養(yǎng)自養(yǎng)型的微生物就不用加入有原料配制培養(yǎng)基，如培養(yǎng)自養(yǎng)型的微生物就不用加入有機營養(yǎng)物質。機營養(yǎng)物質。b營養(yǎng)要協(xié)調：注意各種營養(yǎng)物質的濃度和比例。營養(yǎng)要協(xié)調：注意各種營養(yǎng)物質的濃度和比例。cpH要適宜：各種微生物適宜生長的要適宜：各種微生物適宜生長的pH范圍不同。范圍不同。核核心心考考點點整整合合3微生物的

40、純化培養(yǎng)技術微生物的純化培養(yǎng)技術平板劃線法與稀釋涂布平平板劃線法與稀釋涂布平板法板法 返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 方法方法平板劃線法平板劃線法稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法注意注意事項事項 (1)接種環(huán)的灼燒接種環(huán)的灼燒第一次劃線前：殺死接第一次劃線前：殺死接種環(huán)上的微生物，避免污染種環(huán)上的微生物，避免污染培養(yǎng)物培養(yǎng)物之后每次劃線前：殺死之后每次劃線前：殺死殘留菌種，保證每次劃線菌殘留菌種，保證每次劃線菌種來自上次劃線末端種來自上次劃線末端劃線結束后：殺死殘留劃線結束后：殺死殘留菌種，避免污染環(huán)境和感染菌種，避免污染環(huán)境和感染操作者操作者 (1)稀釋操作：每支試管及

41、稀釋操作：每支試管及其中的其中的9 mL水、移液管等均水、移液管等均需滅菌；操作時，試管口和需滅菌；操作時，試管口和移液管應在離酒精燈火焰移液管應在離酒精燈火焰12 cm處處核核心心考考點點整整合合 返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 注意注意事項事項 (2)灼燒接種環(huán)之后，要灼燒接種環(huán)之后，要待接種環(huán)冷卻后再進行取種，待接種環(huán)冷卻后再進行取種，以免溫度太高殺死菌種以免溫度太高殺死菌種(3)劃線時最后一區(qū)域不要劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連與第一區(qū)域相連(4)劃線時用力大小要適當，劃線時用力大小要適當，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破防止用力過大將培養(yǎng)基劃破 (2)涂布平板涂

42、布平板涂布器用體積分數(shù)為涂布器用體積分數(shù)為70%酒精消毒，取出時，讓酒精消毒，取出時，讓多余酒精在燒杯中滴盡，然多余酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃在酒精燈火焰上引燃不要將過熱的涂布器放不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精引燃其中的酒精目的目的 在固體培養(yǎng)基上形成由單個細菌繁殖而來的子細胞群在固體培養(yǎng)基上形成由單個細菌繁殖而來的子細胞群體體菌落菌落培養(yǎng)培養(yǎng)平板冷凝后倒置培養(yǎng)，使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，平板冷凝后倒置培養(yǎng)，使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染防止皿蓋

43、上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 例例2 微生物的分離和培養(yǎng)是現(xiàn)代生物工程應用中的重要微生物的分離和培養(yǎng)是現(xiàn)代生物工程應用中的重要環(huán)節(jié)。圖甲和圖乙是大腸桿菌分離和培養(yǎng)過程中部分操作環(huán)節(jié)。圖甲和圖乙是大腸桿菌分離和培養(yǎng)過程中部分操作和實驗結果示意圖，請據(jù)圖和實驗結果示意圖，請據(jù)圖T143回答有關問題：回答有關問題：圖圖T143核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐(1)(1)圖甲所示的是制備固體培養(yǎng)基時的實驗操作步驟之一，該過程被稱為圖甲所示的是制備固體培養(yǎng)基時的實驗操作步驟之一，

44、該過程被稱為_。若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮。若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮_、_和滲透壓等條件。和滲透壓等條件。(2)(2)培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是基應采用的檢測方法是_。(3)(3)圖乙是平板劃線法接種操作示意圖，正確的操作順序是圖乙是平板劃線法接種操作示意圖，正確的操作順序是AB_(AB_(用字母和箭頭表示用字母和箭頭表示) )；找出圖乙中兩處錯誤的操；找出圖乙中兩處錯誤的操作：作：_、_(_(用字母表示用字母表示) )。(

45、4)(4)某同學將用平板劃線法接種后的培養(yǎng)基培養(yǎng)某同學將用平板劃線法接種后的培養(yǎng)基培養(yǎng)12 h12 h后，如果培養(yǎng)基上后，如果培養(yǎng)基上_，則說明無菌操作基本符合要求。，則說明無菌操作基本符合要求。核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐答案答案 (1)倒平板溫度倒平板溫度(氧氣氧氣)pH(無菌無菌)(2)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生(3)GFECDHCD(4)生長的菌落顏色、形狀、大小基本一致，并符合大腸生長的菌落顏色、形狀、大小基本一致，

46、并符合大腸桿菌菌落的特點桿菌菌落的特點解析解析 (1)圖甲所示的實驗操作為倒平板。若用該培養(yǎng)基圖甲所示的實驗操作為倒平板。若用該培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌，還要考慮溫度、氧氣、培養(yǎng)大腸桿菌，還要考慮溫度、氧氣、pH和無菌操作等和無菌操作等一系列相關條件。一系列相關條件。(2)培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染，因此要設置對照實驗。對于固體培測培養(yǎng)基是否被污染，因此要設置對照實驗。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度養(yǎng)基應采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產生，若有，下放置適宜的時間，觀

47、察培養(yǎng)基上是否有菌落產生，若有， 核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐則說明培養(yǎng)基已被污染，應重新配制培養(yǎng)基進行實驗。則說明培養(yǎng)基已被污染，應重新配制培養(yǎng)基進行實驗。(3)圖乙是平板劃線法接種操作示意圖，正確的操作順序是圖乙是平板劃線法接種操作示意圖，正確的操作順序是ABGFECDH；圖乙中兩處錯誤的操作是；圖乙中兩處錯誤的操作是C未在酒精燈火焰旁進行操作，未在酒精燈火焰旁進行操作，D將第將第5區(qū)域內的劃線與第區(qū)域內的劃線與第1區(qū)域內的劃線相連。區(qū)域內的劃線相連。(4)將接種后的培養(yǎng)基培養(yǎng)將接種后的培養(yǎng)基培養(yǎng)12 h后，后，如果培養(yǎng)基上生長的菌落顏色

48、、形狀、大小基本一致，并如果培養(yǎng)基上生長的菌落顏色、形狀、大小基本一致，并符合大腸桿菌菌落的特點，則說明沒有被雜菌污染，無菌符合大腸桿菌菌落的特點，則說明沒有被雜菌污染，無菌操作基本符合要求。操作基本符合要求。核核心心考考點點整整合合 考向考向2 微生物的分離與計數(shù)微生物的分離與計數(shù)1微生物的分離微生物的分離(1)篩選原則：人為提供有利于目的菌株生長的條件，同時篩選原則：人為提供有利于目的菌株生長的條件，同時抑制或阻止其他微生物的生長。抑制或阻止其他微生物的生長。(2)從土壤中分離尿素分解菌和纖維素分解菌的比較從土壤中分離尿素分解菌和纖維素分解菌的比較 返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術

49、實踐生物技術實踐 分解尿素的細菌分解尿素的細菌分解纖維素的微生物分解纖維素的微生物 選擇培養(yǎng)基的成分：以尿素選擇培養(yǎng)基的成分：以尿素作為唯一氮源作為唯一氮源鑒定方法：在培養(yǎng)基中加入鑒定方法：在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若酚紅指示劑，若pH升高，指示劑升高，指示劑變紅，則說明細菌能分解尿素變紅，則說明細菌能分解尿素選擇培養(yǎng)基的成分：以纖維選擇培養(yǎng)基的成分：以纖維素作為唯一碳源素作為唯一碳源鑒定方法：剛果紅染色法，鑒定方法：剛果紅染色法，即剛果紅與纖維素形成紅色復合即剛果紅與纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，培養(yǎng)基物，當纖維素被分解后，培養(yǎng)基出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心

50、的透明圈明圈核核心心考考點點整整合合2統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法統(tǒng)計菌落數(shù)目的方法(1)顯微鏡直接計數(shù)法顯微鏡直接計數(shù)法原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡原理：利用特定細菌計數(shù)板或血細胞計數(shù)板，在顯微鏡下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。下計算一定容積的樣品中微生物的數(shù)量。方法：用計數(shù)板計數(shù)。方法：用計數(shù)板計數(shù)。缺點：不能區(qū)分死菌與活菌缺點：不能區(qū)分死菌與活菌。返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 核核心心考考點點整整合合(2)間接計數(shù)法間接計數(shù)法(活菌計數(shù)法活菌計數(shù)法)原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一原理：當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個

51、菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)計算公式：每克樣品中的菌株數(shù)(C/V)M，其中，其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布代表涂布平板時所用的稀釋液的體積平板時所用的稀釋液的體積(mL)，M代表稀釋倍數(shù)。代表稀釋倍數(shù)。操作：設置重復組，增強實驗的說服力與準確性。同時操作：設置重復組，增強實驗的說服力與準確性。同時為了保證結果準確，一般選擇菌落數(shù)在為了保證結

52、果準確，一般選擇菌落數(shù)在30300之間的平之間的平板進行計數(shù)。板進行計數(shù)。 返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 例例3 某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機化合物機化合物A。研究人員用化合物。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物量元素配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物A的的細菌細菌(目的菌目的菌)。實驗的主要步驟如圖。實驗的主要步驟如圖T144所示。請分析所示。請分

53、析并回答下列問題：并回答下列問題：圖圖T144核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 (1)在培養(yǎng)基中加入化合物在培養(yǎng)基中加入化合物A的目的是的目的是_，這種，這種培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。(2)目的菌生長所需的氮源和碳源來自培養(yǎng)基中的目的菌生長所需的氮源和碳源來自培養(yǎng)基中的_。實驗需要振蕩培養(yǎng)，由此推測目的菌的代。實驗需要振蕩培養(yǎng)，由此推測目的菌的代謝類型是謝類型是_。(3)在上述實驗操作過程中，獲得純凈目的菌的關鍵是在上述實驗操作過程中，獲得純凈目的菌的關鍵是_。(4)轉為固體培養(yǎng)基培養(yǎng)時，常采用平板劃線法進行接種，轉為固體培養(yǎng)基培養(yǎng)時

54、，常采用平板劃線法進行接種，此過程中所用的接種工具是此過程中所用的接種工具是_，操作時采用，操作時采用_滅菌的方法進行滅菌。滅菌的方法進行滅菌。核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 (5)實驗結束后，使用過的培養(yǎng)基必須進行滅菌處理才能實驗結束后，使用過的培養(yǎng)基必須進行滅菌處理才能倒掉，這樣做的目的是倒掉，這樣做的目的是_。(6)某同學計劃統(tǒng)計污水池中目的菌的總數(shù)，他選用某同學計劃統(tǒng)計污水池中目的菌的總數(shù)，他選用104、105、106倍稀釋液進行平板劃線，每種稀釋液都設置倍稀釋液進行平板劃線，每種稀釋液都設置了了3個培養(yǎng)皿。從設計實驗的角度看，還應設置

55、的一組對個培養(yǎng)皿。從設計實驗的角度看，還應設置的一組對照實驗是照實驗是_，此對照實驗的目的，此對照實驗的目的是是_。核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 答案答案 (1)篩選目的菌選擇篩選目的菌選擇(2)化合物化合物A異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)需氧型(3)防止外來雜菌污染防止外來雜菌污染(4)接種環(huán)灼燒接種環(huán)灼燒(5)防止造成環(huán)境污染防止造成環(huán)境污染(6)不接種的空白培養(yǎng)基不接種的空白培養(yǎng)基 證明培養(yǎng)基制備過程以及培養(yǎng)證明培養(yǎng)基制備過程以及培養(yǎng)過程中無雜菌污染過程中無雜菌污染解析解析 (1)在培養(yǎng)基中加入特定物質，可以篩選出特定的在培養(yǎng)基中加入特定物質，可以篩選

56、出特定的細菌。細菌。(2)根據(jù)題目所給的培養(yǎng)基配方可知，目的菌生長根據(jù)題目所給的培養(yǎng)基配方可知，目的菌生長所需的氮源和碳源只能來自培養(yǎng)基中的化合物所需的氮源和碳源只能來自培養(yǎng)基中的化合物A。異養(yǎng)需。異養(yǎng)需氧型細菌需要振蕩培養(yǎng)。氧型細菌需要振蕩培養(yǎng)。(3)獲得純凈目的菌的關鍵是防獲得純凈目的菌的關鍵是防止外來雜菌污染。止外來雜菌污染。(4)用平板劃線法進行接種時，所用的用平板劃線法進行接種時，所用的核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 接種工具是接種環(huán)，操作時采用灼燒滅菌法進行滅菌。接種工具是接種環(huán)，操作時采用灼燒滅菌法進行滅菌。(5)為防止造成環(huán)境污

57、染，實驗結束后，使用過的培養(yǎng)基必須為防止造成環(huán)境污染，實驗結束后，使用過的培養(yǎng)基必須進行滅菌處理才能倒掉。進行滅菌處理才能倒掉。(6)統(tǒng)計目的菌數(shù)量時，注意設統(tǒng)計目的菌數(shù)量時，注意設置一組不接種的空白培養(yǎng)基作為對照實驗，此對照實驗的置一組不接種的空白培養(yǎng)基作為對照實驗，此對照實驗的目的是證明培養(yǎng)基制備過程以及培養(yǎng)過程中無雜菌污染。目的是證明培養(yǎng)基制備過程以及培養(yǎng)過程中無雜菌污染。核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 對點訓練對點訓練金黃色葡萄球菌是一種具有高度耐鹽性的微生物，可引起金黃色葡萄球菌是一種具有高度耐鹽性的微生物，可引起人類肺炎、腸炎等疾病

58、。金黃色葡萄球菌在血平板人類肺炎、腸炎等疾病。金黃色葡萄球菌在血平板(培養(yǎng)培養(yǎng)基中添加適量血液基中添加適量血液)上生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，上生長時，可破壞菌落周圍的紅細胞，使其褪色。圖使其褪色。圖T145為定性檢測鮮牛奶中是否存在金黃色為定性檢測鮮牛奶中是否存在金黃色葡萄球菌的操作流程，請回答相關問題：葡萄球菌的操作流程，請回答相關問題：圖圖T145核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 (1)按細胞結構分類，金黃色葡萄球菌屬于按細胞結構分類，金黃色葡萄球菌屬于_生物，生物，從培養(yǎng)過程分析，金黃色葡萄球菌可進行從培養(yǎng)過程分析，金黃色葡萄球菌可進

59、行_呼吸。呼吸。(2)7.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基為微生物提供的營養(yǎng)成分包括肉湯培養(yǎng)基為微生物提供的營養(yǎng)成分包括_，用，用7.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基進行選擇培肉湯培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)的主要目的是養(yǎng)的主要目的是_。(3)操作中在血平板上的接種方法是操作中在血平板上的接種方法是_，接種操作前后需要對接種工具進行接種操作前后需要對接種工具進行_滅菌。滅菌。(4)在制備血平板時需將在制備血平板時需將pH調節(jié)至調節(jié)至_(填填“微微酸性酸性”或或“微堿性微堿性”)后滅菌，待培養(yǎng)基后滅菌，待培養(yǎng)基_后，再后，再加入適量血液。按培養(yǎng)基功能分類，血平板屬于加入適量血液。按培養(yǎng)基功能分類，血平板屬于_培培養(yǎng)基。養(yǎng)

60、基。核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 (5)經多次規(guī)范操作、重復實驗，血平板上均出現(xiàn)經多次規(guī)范操作、重復實驗，血平板上均出現(xiàn)_的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃的菌落，初步證明鮮牛奶中存在金黃色葡萄球菌，但鮮牛奶供應商仍認為此菌并非鮮牛奶所攜色葡萄球菌，但鮮牛奶供應商仍認為此菌并非鮮牛奶所攜帶，因此，要對本操作進行完善，完善的方案是帶，因此，要對本操作進行完善，完善的方案是_。核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 答案答案 (1)原核有氧原核有氧(2)碳源、氮源、水和無機鹽增加金黃色葡萄球菌的數(shù)碳源、氮源

61、、水和無機鹽增加金黃色葡萄球菌的數(shù)量量(3)平板劃線法灼燒平板劃線法灼燒(4)微堿性冷卻鑒別微堿性冷卻鑒別(5)周圍存在透明圈設置不加鮮牛奶，其他操作均相同周圍存在透明圈設置不加鮮牛奶，其他操作均相同的對照組的對照組解析解析 (1)金黃色葡萄球菌是一種細菌，屬于原核生物。金黃色葡萄球菌是一種細菌，屬于原核生物。培養(yǎng)過程中沒有進行密閉處理且需要振蕩培養(yǎng)，因此金黃培養(yǎng)過程中沒有進行密閉處理且需要振蕩培養(yǎng)，因此金黃色葡萄球菌可進行有氧呼吸。色葡萄球菌可進行有氧呼吸。(2)7.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基可肉湯培養(yǎng)基可為微生物生長提供所需要的碳源、氮源、水和無機鹽。用為微生物生長提供所需要的碳源、氮源、水

62、和無機鹽。用7.5% NaCl肉湯培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)是為了增加金黃色葡肉湯培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)是為了增加金黃色葡核核心心考考點點整整合合返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 萄球菌的數(shù)量。萄球菌的數(shù)量。(3)圖示中用的接種工具是接種環(huán)，說明圖示中用的接種工具是接種環(huán)，說明在血平板上接種的方法是平板劃線法。接種工具在接種前在血平板上接種的方法是平板劃線法。接種工具在接種前后都要進行灼燒滅菌處理。后都要進行灼燒滅菌處理。(4)金黃色葡萄球菌的生長環(huán)金黃色葡萄球菌的生長環(huán)境為微堿性，培養(yǎng)基在滅菌前要先調節(jié)境為微堿性，培養(yǎng)基在滅菌前要先調節(jié)pH。因金黃色葡。因金黃色葡萄球菌能破壞紅細

63、胞，使其褪色，所以血平板上出現(xiàn)周圍萄球菌能破壞紅細胞，使其褪色，所以血平板上出現(xiàn)周圍存在透明圈的菌落，說明有金黃色葡萄球菌存在，故血平存在透明圈的菌落，說明有金黃色葡萄球菌存在，故血平板屬于鑒別培養(yǎng)基。板屬于鑒別培養(yǎng)基。(5)為增強實驗結論的嚴謹性，應增為增強實驗結論的嚴謹性，應增加空白對照組。加空白對照組。核核心心考考點點整整合合考點三考點三酶的應用酶的應用考例探究考例探究1.探究果膠酶的最適溫度和探究果膠酶的最適溫度和pH的相關實驗的相關實驗(1)實驗流程：實驗流程：制備蘋果泥制備蘋果泥 設置一系列具有梯度的設置一系列具有梯度的pH和溫度和溫度 加入果膠酶反應一段時間加入果膠酶反應一段時間

64、 過濾果汁過濾果汁 返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 圖圖T146核核心心考考點點整整合合(2)變量分析：該實驗的自變量是溫度或變量分析：該實驗的自變量是溫度或pH，因變量是酶，因變量是酶的活性，檢測因變量是通過測定果汁的體積或澄清度來實的活性，檢測因變量是通過測定果汁的體積或澄清度來實現(xiàn)的?，F(xiàn)的。注意：注意：在蘋果泥和果膠酶混合之前，一定要保證底物和在蘋果泥和果膠酶混合之前，一定要保證底物和酶達到所要求的溫度或酶達到所要求的溫度或pH條件，以避免混合后條件的變化，條件，以避免混合后條件的變化，確保實驗結果的可信度和可靠性。確保實驗結果的可信度和可靠性。在探究溫度或在探

65、究溫度或pH對酶活性的影響時，不同的梯度溫度之對酶活性的影響時，不同的梯度溫度之間或不同的梯度間或不同的梯度pH之間構成了相互對照，通過相互對照可之間構成了相互對照，通過相互對照可確定果膠酶的最適溫度或確定果膠酶的最適溫度或pH。 返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 核核心心考考點點整整合合2探究果膠酶的最適用量的實驗分析探究果膠酶的最適用量的實驗分析(1)原理提示：本實驗是一個探究性的定量實驗，最適用量原理提示：本實驗是一個探究性的定量實驗，最適用量是在已知溫度、是在已知溫度、pH條件下測出的，因而果膠酶的最適用量條件下測出的，因而果膠酶的最適用量應標明溫度和應標明溫度

66、和pH。(2)確定最適用量的方法：如果隨酶濃度的增加，濾出的果確定最適用量的方法：如果隨酶濃度的增加，濾出的果汁體積增加，說明酶的用量不足；當酶的濃度增加到某個汁體積增加，說明酶的用量不足；當酶的濃度增加到某個值時，再增加酶的用量，濾出的果汁體積不再改變，說明值時，再增加酶的用量，濾出的果汁體積不再改變，說明酶的用量已經足夠，那么，這個值就是酶的最適用量酶的用量已經足夠，那么，這個值就是酶的最適用量(如如圖圖T147中中M)。 返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 圖圖T147核核心心考考點點整整合合3探究加酶洗衣粉洗滌效果的實驗設計探究加酶洗衣粉洗滌效果的實驗設計設計應遵循單一變量原則，需有效地控制其他變量設計應遵循單一變量原則，需有效地控制其他變量(如水如水質、水溫等質、水溫等)，具體實驗的實驗變量如下：，具體實驗的實驗變量如下： 返回目錄返回目錄專題十四專題十四生物技術實踐生物技術實踐 項目項目原理原理自變量自變量因變量因變量 加加酶洗衣粉與酶洗衣粉與普通洗衣粉洗滌普通洗衣粉洗滌效果的比較效果的比較加酶洗衣粉中含有酶加酶洗衣粉中含有酶制劑制劑 酶酶的的 有有無