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1、
鄰菲羅啉分光光度法測定鐵
中文名稱: 1,10-菲羅啉[1]?
中文別名： 鄰菲羅啉 又叫鄰二氮菲
英文名稱： 1,10-Phenanthroline monohydrate
英文別名： 1,10-Phenanthroline hydrate
CAS號： 5144-89-8
分子式： C12H8N2.H2O
分子量： 180.21
分子結構：
1,10-phenanthroline
危險品標志: T N 說明 風險術語： R25; R50/53; 說明 安全術語： S45; S60; S61
主要用途：鄰菲羅啉與亞鐵離子在PH2~9的條件下生成桔紅色絡合物
2、，然后用分光光度法測定鐵含量。
物理化學性質：一水合物為白色結晶性粉末。熔點93-94℃，無水物熔點為117℃，溶于300份水，70份苯，溶于醇和丙酮。
能與多種過渡金屬形成配合物，由于形成的配合物為螯合物，所以較為穩(wěn)定。與銅形成的配合物及其衍生物因為對DNA有一定的切割活性，可以用作非氧化性核酸切割酶，進而有一定的抗癌活性。
實驗原理
鄰二氮菲(phen)和Fe2+在pH3～9的溶液中，生成一種穩(wěn)定的橙紅色絡合物Fe(phen) 32+，其lgK=21.3，ε508=1.1 × 104L·mol-1·cm-1，鐵含量在0.1～6μg·mL-1范圍內遵守比爾定律。其吸收曲線如圖所示
3、。顯色前需用鹽酸羥胺或抗壞血酸將Fe3+全部還原為Fe2+，然后再加入鄰二氮菲，并調節(jié)溶液酸度至適宜的顯色酸度范圍。有關反應如下：
2Fe3+ + 2NH2OH·HC1＝2Fe2+ +N2↑+2H2O+4H++2C1－
測定時，控制溶液酸度在pH=2～9較適宜，酸度過高，反應速度慢，酸度太低，則Fe2+水解，影響顯色。
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Bi3+、Ca2+、Hg2+、Ag+、Zn2+離子與顯色劑生成沉淀，Cu2+、Co2+、Ni2+離子則形成有色絡合物，因此當這些離子共存時應注意它們的干擾作用。
分光光度計---
試劑
1 鹽酸溶液
4、-（180克/L）
2 氨水溶液-（85克/L）
3乙酸-乙酸鈉（HAc-NaAc）緩沖溶液（pH=4.5）：稱取164g分析純無水乙酸鈉，500mL水溶溶解后，加入240mL冰乙酸，加水稀釋至1000mL。
4 w=1%的鹽酸羥胺水溶液，因不穩(wěn)定，需臨用時配制。
抗壞血酸溶液，100克/L,一周內
5. 0.1%鄰菲羅啉水溶液：1.0克/L先用少許乙醇溶解后，用水稀釋至1000，新近配制，避光，使用無色溶液。
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6、鐵標準溶液（含鐵 0.200g/1000mL）
方法1
5、、準確稱取1.727g分析純硫酸鐵銨[(NH4)Fe(SO4)2·12H2O]于200mL燒杯中，加入水200mL，完全溶解后，移入1000mL容量瓶中，加20mL 稀釋至刻度，搖勻。
方法2、
7、鐵標準溶液（含鐵 0.020g/1000mL）--臨用時配制
試樣中鐵的含量測定
1稱樣，供試液制備
2空白試驗
3、標準曲線
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吸取鐵鹽標準溶液 mL于50mL燒杯中，加10mL 蒸餾水，
鹽酸溶液-（
6、180克/L）精密PH試紙
移入100mL容量瓶中，加入1 mL抗壞血酸溶液，
依次加入20mL HAc～NaAc緩沖液、10mL鄰菲羅啉溶液，用蒸餾水稀釋至刻度。
搖勻，
用 1cm比色皿以 為參比，在510nm測量吸光值。
分光光度計型號 編號: 波長 510nm
供試品溶液預計（含鐵 g/ mL）
鐵鹽標準溶液（含鐵
7、g/ mL）
編號
1
2
3
4
5
6
7
吸取體積/mL
鐵含量
吸光度/A
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4、供試品液制備
供試品液， mL于于50mL燒杯中，加10mL 蒸餾水，
鹽酸溶液-（180克/L）或氨水溶液-（85克/L），精密PH試紙
移入100mL容量瓶中，加入1 mL抗壞血酸溶液，
依次加入20mL HAc～NaAc緩沖液、10mL鄰菲羅啉溶液，用蒸餾水稀釋至刻度。
搖勻，
計算
標準曲線方程：
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