臨檢基礎小知識點整理【江大京江版For醫(yī)學檢驗】
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1、血液部分 血液標本 全血:用于細胞計數、分類、形態(tài)觀察; 血漿:全血去除血細胞,用于血栓止血檢測; 血清:全血自然凝固后析出的液體,用于生物化學、免疫學檢測等。 ? 血液標本采集方法: 一、毛細血管采血法:用于微量檢測 ? ? ? ?部位:耳垂或手指末梢,主要是中指或無名指尖內側,半歲以下拇指或足部,特殊人員視情況而定 ? ? ? ?所用器材:采血針、吸管 二、靜脈采血法:用于血沉、免疫、生化等檢測項目 ? ? ? ?部位:主要是肘靜脈。還可以在:手背部手腕部等部位采血,幼兒可采用頸外靜脈采血。 ? ? ? ?采血器材:一次性注射器,檢驗用真空定量采血裝置。 ? 抗
2、凝:? 用物理或化學方法除去或抑制血 液中的某些凝血因子的活性,以阻止血液凝固,稱為抗凝。 一、草酸鹽, 抗凝原理:與血液中鈣離子形成沉淀; 使用方法:草酸鈉0.1mol/L和血液1:9。 優(yōu)點:溶解性好,價廉. 缺點:①對凝血因子保護功能差,影響凝血因子;②形成草酸鈣沉淀物,影響自動凝血儀器的使用. 使用范圍:逐步被淘汰。 二、檸檬酸鈉(枸櫞酸鈉), 抗凝原理:與鈣離子生成可溶性的鰲合物。 使用方法:配成109mmol/L的濃度和血液1:9(用于凝血試驗);106mmol/L的濃度和血液1:4(用于血沉)。 優(yōu)點:對凝血因子有很好的保護作用. 缺點:血液中溶解度低,抗
3、凝作用較弱。 使用范圍:止血學檢驗、血沉、輸血保養(yǎng)液(毒性?。?。 三、乙二胺四乙酸(EDTA)鹽, 抗凝原理:與鈣離子生成可溶性的鰲合物. 使用方法:15g/L EDTA和血液1:10. 優(yōu)點:對紅細胞和白細胞形態(tài)影響小。 缺點:影響血小板的聚集。 使用范圍:全血細胞分析和血細胞比容測定,但不適用于出凝血實驗和血小板功能. 四、肝素, 抗凝原理:加強抗凝血酶作用,阻止凝血酶形成。 使用方法:肝素鈉1g/L與血液1:10。 優(yōu)點:抗凝能力強、不影響血細胞體積、不易溶血、能耐高溫。 缺點:引起白細胞聚集,使白細胞計數降低,不利于制備血涂片,價格昂貴。 使用范圍:血漿生化/
4、免疫項目,紅細胞脆性實驗,科學研究等。 ? 亞鐵血紅素:? 血紅蛋白色素部分,由鐵原子及原卟啉區(qū)組成. ? ?血涂片的制備 1、用途:??血細胞形態(tài)學檢驗、網織紅、異常細胞檢驗、寄生蟲檢驗。 2、制備步驟:(手工推片法) 將推玻片向1的方向稍抽回,當血液充滿推玻片的寬度后,以一定均勻的速度向2的方向滑動。 3、質量評價:?均勻、厚薄、頭體尾、邊緣、兩側 注意:血滴大,速度快、角度大——--血膜厚 ? 瑞氏染色法 原理:分兩相進行,第一相是酸性伊紅與細胞中的堿性物質如血紅蛋白、嗜酸性顆粒結合;堿性染料天青B與細胞中的酸性物質如核染色質、特異中性顆粒、血小板結合。第二相
5、是天青B和伊紅結合在適宜條件下形成紫色的天青B—伊紅復合物,結果使白細胞核染色質成紫色(瘧原蟲的染色質成紅色),中性粒細胞的顆粒及血小板顆粒區(qū)成紫色。 試劑 1.? Wright染液:瑞氏染粉0。1g,甲醇60.0ml 甲醇:有強大的脫水力,可將細胞固定為一定形態(tài),并使蛋白質沉淀為顆粒狀、網狀等結構,增加細胞與染料接觸表面積,提高對染料的吸附作用,增強染色效果。 2.磷酸鹽緩沖液(PBS):磷酸二氫鉀(無水)0.3g,磷酸氫二鈉(無水)0.2g, 蒸餾水加到1000ml。配好后用磷酸鹽溶液校正pH(6.4-6.8),塞緊瓶口備用。 方法: a.? 用蠟筆在血膜兩頭劃線,平放于染色架
6、上。 b.? 加瑞氏染液覆蓋血膜,固定1min。 c.? 滴加等量或稍多的緩沖液,混勻,染色5—10分鐘。 d.? 用清水沖洗,待干后鏡檢。 ? 紅細胞計數:測定單位體積血液中紅細胞的數量 【技數方法】顯微鏡計數法: 用等滲稀釋液將血液稀釋一定倍數后,滴入血細胞計數盤,然后于顯微鏡下,計數一定范圍內的紅細胞數,經過換算即可求得每升血液中的紅細胞數。 【參考值】 成年男性:(4. 0 ~ 5. 5) ×10^12/L??成年女性:(3. 5 ~ 5。 0) ×10^12/L? 新生兒:(6?!。啊 ?7。 0) ×10^12/L??低于3。5×10^12/L可診斷為貧血,低于
7、1。5×10^12/L應考慮輸血。 網織紅細胞? 網織紅細胞是未完全成熟的紅細胞,是晚幼紅細胞脫核后到完全成熟的紅細胞之間的過渡型(未成熟)紅細胞。 【計數方法】顯微鏡計數法:(活體染色) ? ? ? 染料 煌焦油蘭:常用,染色效果好,但沉渣較多。 ? ? ? 新亞甲蘭:WHO推薦的,染色效果好,但試劑昂貴。 試驗方法 試管法:染色時間長(30min),效果好,易重復計數。 玻片法:染色時間短,水分易蒸發(fā),結果偏低。 制薄片,不復染,油鏡下計數1000個RBC中Ret數(縮小視野法或Miller窺盤)。 【參考值】?成人:0。005~0.015或(24-84)×10^9/
8、L? 兒童:0.02~0。06 ? 血紅蛋白(Hb)?是在人體有核紅細胞及網織紅細胞內合成的一種含色素輔基的結合蛋白質,是紅紅細胞內的運輸蛋白。?【檢測原理】 血液在血紅蛋白轉化液中溶血后,除SHb外各種血紅蛋白均可被高鐵氰化鉀氧化成高鐵血紅蛋白(Hi),Hi與氰化鉀的氰根(CN—)生成穩(wěn)定的棕紅色氰化高鐵血紅蛋白(HiCN),HiCN在540nm有吸收峰。在特定的實驗條件下,可測得吸光度并計算Hb(G/L)。但在實際工作中,一般實驗室的分 光光度計達不到WHO規(guī)定的標準條件,所以利用Hb參考液制備標準曲線,換算出Hb(G/L)。 【參考值】?成年男性:120-160 g/L 成年
9、女性:110—150 g/L 新生兒:170—200 g/L 70歲以上老年男性:94.2-122。2 g/L 70歲以上老年女性:86。5-111.8 g/L ? 貧血:單位容積循環(huán)血液中紅細胞、血紅蛋白、血細胞比積低于參考值下限,稱為貧血。 臨床上通常以血紅蛋白為標準: 輕度貧血:男性〈120g/L,女性〈110g/L,>90g/L? 中度貧血:90~60 g/L 重度貧血:60~30 g/L?極度貧血:<30 g/L?低于45g/L應考慮輸血。 ? 紅細胞比積(Hct) 指紅細胞在全血中所占體積百分比。??【參考值】(溫氏法)??男:0.40~0. 54 女:0
10、.37~0. 47 ?紅細胞平均容積(MCV):指每個紅細胞平均體積的大小,以飛升(fl)為單位. 紅細胞平均血紅蛋白含量(MCH):指每個紅細胞內平均所含血紅蛋白的量,以皮克(pg)為單位. 紅細胞平均血紅蛋白濃度(MCHC):指平均每升紅細胞中所含血紅蛋白濃度(g/L) ? 血細胞沉降率(ESR) 是指紅細胞在一定條件下沉降速度,簡稱血沉.?【參考值】(魏氏法)?男:〈15mm/h? 女:<20mm/h ? 白細胞計數:類同與紅細胞計數 【計數方法】顯微鏡計數法 用稀乙酸將血液稀釋并破壞紅細胞,混勻后,滴入計數盤中,在顯微鏡下計數一定范圍內的白細胞數,經換算求得每升血
11、液中白細胞總數。 【參考值】 成人:(4-10)×10^9/L 新生兒:(15—20)×10^9/L 6月-2歲:(11—12)×10^9/L 白細胞分類計數 【技數方法】顯微鏡目視分類計數法 將標本制成血涂片,經Wright染色后,在顯微鏡下根據白細胞形態(tài)學特點逐個分類計數,得出各種白細胞相對比值(或百分率),并注意觀察其形態(tài)和質量的變化. 【參考值】?中性桿狀核粒細胞:1%~5%?中性分葉核粒細胞:50%~70%?嗜酸性粒細胞(E):0。5%~5%?嗜堿性粒細胞(B):0%~1%?淋巴細胞:20%~40% 單核細胞:3%~8% ?嗜堿性粒細胞計數【參考值】?(0.
12、02~0。 05)×10^9/L 異型淋巴細胞??在某些病毒性感染或過敏原刺激下使淋巴細胞增生,并出現一 定的形態(tài)變化稱為異型淋巴細胞。???退行性變白細胞? 白細胞出現胞體腫大、結構模糊、邊緣不清、核固縮、腫脹或 溶解等變化.? 中毒顆粒??在嚴重感染時中性粒細胞內出現的染成紫黑色的粗大顆粒。 中性粒細胞核左移??外周血中桿狀核超過5%和(或)出現桿狀核以前的細胞為核左移 .? 中性粒細胞核右移??外周血中性粒細胞五葉核以上者超過3%稱為核右移。? ? 點彩紅細胞 是一種較幼稚的紅細胞在發(fā)育過程中受到損害,其胞質中殘存變性的嗜堿性RNA在瑞氏染色時出現大小形狀不一的藍
13、色顆粒的細胞.??正常不超過?。啊#?03(0。03%) ? 血液分析儀的檢測原理 電阻抗法:懸浮在電解質溶液中的血細胞相對于電解質溶液是非導電的顆粒,當體積不同的血細胞(或類似顆粒)通過計數小孔時,可引起小孔內外電流或電壓的變化,形成與血細胞數量相當、體積大小相應的脈沖電壓,從而間接區(qū)分出血細胞群,并分別進行計數. ? ? 尿液部分 尿液的采集 指導病人后讓其自行留取,取清潔中段尿,適用于尿常規(guī)檢查、細菌檢查和細胞學檢查。 要求病人清洗手及外生殖器,一般留取中段尿到適當的未受污染的容器中。女性要防止陰道分泌物污染,嬰幼兒要避免糞便污染。 ? 晨尿:指清晨起床后、未進早餐
14、和做運動之前第一次排出的尿液。 第二次晨尿:指采集晨尿后2~4小時內的尿液.(要求從前一天晚上到采集此次尿液標本時,只飲水200ml) 隨機尿:指患者無需任何準備、不受時間限制、隨時排出的尿液標本. 餐后尿:指午餐后2~4小時內的尿液。 3小時尿:上午6時~9時的尿液稱為3小時尿。 12小時尿:從晚上8時開始到次日早晨8時終止的12小時內的全部尿液. 24小時尿:采集的當天,患者排空膀胱并棄去尿液,從此時開始計時并采集尿液,將24小時內的尿液全部采集于容器中;結束采集的次日(24小時后),患者排空膀胱,且將尿液采集于同一容器內。如此采集的尿液稱為~。 【小知識點】 尿液檢查一般
15、應在收到標本后迅速進行。一般2h內送檢,30min內完成檢測. 如不能及時送檢或分析,必須采取保存措施。常用的方法有冷藏法和化學防腐法。 ? 尿量:指24小時內排出體外的尿液總量。 【參考區(qū)間】 成人1~2L/24h,即1ml/(h*kg);兒童按體重計算尿量,大約為成年人的3~4倍。 相關內容 多尿:是指成人24小時的尿量超過2.5L,兒童24小時尿量超過3L。 少尿:24小時尿量少于0。4L或每小時尿量持續(xù)小于17ml(兒童小于0.8ml/kg)。 無尿:12小時無尿或24小時尿量小于100ml。 ? 尿的外觀: 包括顏色及混濁度。 正常的尿液顏色由淡黃到深黃色,
16、隨尿量的多少、飲食、藥物及病變而變化,其顏色主要源于尿色素及尿膽原。 混濁度可分為【清晰、輕渾、混濁、明顯混濁】4個等級.正常尿液混濁的原因主要為結晶所致. ? 血尿:尿液內含有一定量的紅細胞時稱為~ 1、肉眼血尿:1L尿液內含有1ml以上血液,且尿液外觀呈紅色,稱為~. 2、鏡下血尿:如尿液外觀未見紅色,離心尿液鏡下紅細胞>3個/HP,稱為~。 ? 血紅蛋白尿:血管內溶血時,血漿游離血紅蛋白增多,超過珠蛋白結合能力(約1。3g/L),可通過腎小球濾出而形成的暗紅、棕紅甚至醬油色的尿液,稱為~. 肌紅蛋白尿:當肌肉組織廣泛損傷、變性時血漿肌紅蛋白含量增高,經腎臟排出,產生的粉紅
17、色或暗紅色尿液. ? 乳糜尿:由于泌尿系統淋巴管破裂火神不淋巴管阻塞致使乳糜液或淋巴液進入尿液,尿液呈乳白色渾濁,稱為~。 ? 膿細胞:在炎癥過程中被破壞、變性或壞死的中性粒細胞.其外形多變不規(guī)則,胞質內常充滿顆粒,胞核模糊不清,常聚集成團,邊界不清。 膿尿:由于含有大量白細胞,外觀呈黃白色或白色的尿液。 1、鏡下膿尿:尿液白細胞〉5個/HP. 2、肉眼膿尿:尿液中含大量白細胞而呈乳白色,甚至出現塊狀,稱為~ 相關內容: 閃光細胞:低滲尿液中,中性粒細胞胞質內顆粒呈布朗運動,在油鏡下由于光的折射可見灰藍色發(fā)光現象,運動似星狀閃光,故名。? ? 尿比重:指尿液在4℃時與同體
18、積純水的質量之比,是尿液中所含溶質濃度的指標??纱致苑从衬I臟的濃縮稀釋功能. 1、低滲尿/低比重尿:尿液比重常低于1.015; 2、等滲尿:尿液比重固定在1.010±0。003,與腎小球濾過液的比重接近 【參考區(qū)間】 成人:隨機尿1.003~1。030;晨尿>1。020. 新生兒:1.002~1。004 ? 尿滲量:指尿液中具有滲透活性的全部溶質微粒的總數量,與顆粒大小及所帶電荷無關,反映了溶質和水的相對排出速度。在評價腎臟濃縮稀釋功能時較尿比重優(yōu)越. 【參考區(qū)間】 ①尿滲量:600~1000mmol/kg H2O(相當于尿比重1.015~1.025)。最大范圍40~1400
19、mmol/kg H2O。②尿滲量/血漿滲量為(3.0~4.7):1.0。 ? 尿液氣味的【參考區(qū)間】為微弱芳香氣味,源自尿液中酯類與揮發(fā)性酸. 若尿液標本久置,則因為尿素分解可出現氨臭味。 ? 尿液酸堿度的【參考區(qū)間】 正常飲食條件下:①晨尿pH5.5~6.5,平均6.0.②隨機尿pH4。5~8.0.尿液可滴定酸度:20~40mmol/24小時尿. ? 終尿中的蛋白質含量很少,僅為30~130mg/24h。? 蛋白尿:當尿液中的蛋白質超過150mg/24h(或超過100mg/L)時,蛋白定性試驗呈陽性,稱為~。 【小知識點】 檢測蛋白尿的方法有:試帶法(定性或半定量),磺
20、基水楊酸法(定性或半定量,靈敏度為0.05~0.1 g/L),加熱乙酸法(經典方法,靈敏度為0.15g/L)。 參考值:① 定性:陰性。②定量:〈0.1g/L或≤0。15g/24h尿。 ? 生理性蛋白尿:因機體內外環(huán)境因素的變化所產生的蛋白尿,稱為~。 1、功能性蛋白尿:泌尿系統無器質性病變,尿液內暫時出現少量蛋白質,稱為~。 2、體位性蛋白尿:又稱直立性蛋白尿,在直立時出現蛋白尿而臥位則消失,且無血尿、高血壓、水腫等現象。 3、偶然性蛋白尿:又稱假性蛋白尿。由于尿液中混入血液、膿液、黏液、生殖系統分泌物或月經血等,導致尿蛋白定性試驗陽性的蛋白尿. ? 病理性蛋白尿 1、腎小
21、球性蛋白尿:腎小球濾過膜因炎癥、免疫、代謝等因素損傷后,慮過膜孔徑增大、斷裂和(或)靜電屏障作用減弱,血漿蛋白特別是白蛋白濾出,超出近端腎小管重吸收能力而形成的蛋白尿. (腎小球性蛋白尿中蛋白含量常大于2g/24h尿,通常以清蛋白為主,約占70%~80%,另外,β2微球蛋白也可輕度增多) 2、腎小管性蛋白尿:指腎小管受到感染、中毒損傷或繼發(fā)于腎小球疾病時,重吸收的能力降低或抑制而出現的以相對分子質量較小的蛋白質為主的蛋白尿。 (特點是以β2微球蛋白、溶菌酶等增多為主,清蛋白正常或輕度增高.單純性腎小管性蛋白尿,尿蛋白含量較低,一般低于1g/24h尿) 3、混合性蛋白尿:病變同時或相繼累
22、及腎小球和腎小管而產生的蛋白尿,兼具以上兩種蛋白尿的特點。 (低相對分子質量的β2微球蛋白及中相對分子質量的清蛋白同時增多) 4、溢出性蛋白尿:(腎小球/腎小管功能均正常)因血漿中相對分子質量較小或陽性電荷蛋白異常增多,經腎小球濾過,超過腎小管重吸收能力所形成的蛋白尿,即~。 5、組織性蛋白尿:指來源于腎小管代謝產生的、組織破壞分解的、炎癥或藥物刺激泌尿系統分泌的蛋白質,進入尿液而形成的蛋白尿。 還可按其發(fā)生的部位分為腎前性、腎性和腎后性蛋白尿。 ? 健康人的尿液中可有微量葡萄糖,一般<2.8mmol/24h,普通方法檢測為陰性.血糖濃度超過8.88mmol/L(1.6g/L)時,
23、尿液中卡是開始出現葡萄糖 糖尿:尿糖定性試驗呈陽性的尿液,取決于血糖濃度、腎血流量和腎糖閥。一般指葡萄糖尿。 腎糖閾:尿中開始出現葡萄糖時最低血糖濃度,稱為~。 【小知識點】 檢測尿糖的方法有:試帶法,班氏法,薄層層析法。 參考值:①定性:陰性。②定量:〈2。8mmol/24h(0.1~0.8mmol/L)。 ? 酮體:是乙酰乙酸(占20%)、β—羥基丁酸(占78%)和丙酮(占2%)的總稱,它們是機體脂肪氧化代謝 產生的中間產物。 血漿酮體濃度一旦超過腎閾值,就會產生酮尿。 ? 尿中膽色素包括膽紅素、尿膽原及尿膽素,俗稱尿三膽. 膽紅素:紅細胞破壞后的代謝產物,可分為游
24、離膽紅素和結合膽紅素。 1、游離膽紅素不溶于水,在血中與蛋白質結合,不能通過腎小球濾出; 2、結合膽紅素相對分子質量小,溶解度高,可通過腎小球濾出。正常人血中結合膽紅素含量很低,因此尿中不能檢出膽紅素。 ? 尿膽原:是膽紅素在腸道中被細菌還原所產生,尿膽原經空氣氧化及光線照射后轉變成黃色的尿膽素(糞膽素)。 【參考值】 尿膽原:①定性:陰性或弱陽性(1∶20稀釋后陰性).②定量:男性:0。30~3.55μmol/L;女性:0.00~2.64μmol/L;兒童:0.13~2.30μmol/L。 尿膽素:陰性。 黃疸類型??????????????尿膽紅素???????????尿
25、膽原 正常????????????????????? 陰性?????????????????? 陰性~弱陽性 梗阻性黃疸?????????? 顯著增加???????????? 陰性 溶血性黃疸?????????? 陰性??????????????????? 顯著增加 肝細胞性黃疸??????? 中度增加???????????? 輕度增加 ? 健康人的尿液清蛋白一般小于20mg/L,大于30mg/L時即提示異常。 微量白蛋白尿:是指尿中清蛋白含量超過健康人水平,但常規(guī)尿蛋白試驗為陰性的低濃度清蛋白. ? 本周蛋白:實質是免疫球蛋白輕鏈或其聚合物。 【小知識點】 檢測方法:對
26、甲苯磺酸沉淀篩選實驗(靈敏度3mg/L)、免疫固定電泳(最佳方法)。 臨床意義:多發(fā)性骨髓瘤、原發(fā)性巨球蛋白血癥. ? 尿沉渣:尿液排出體外并經離心沉淀后,能在顯微鏡下看得到的有形成分。是尿液中有形沉淀成分的統稱。 離心尿液直接涂片法 取新鮮尿標本10~15ml,以1000~1500rpm離心3~5分鐘,取出離心管,用吸管慢慢將上清液棄掉,切勿弄混沉渣,最終留?。埃?ml,混勻后滴在載玻片上,用18mm×18mm蓋玻片鏡檢。 觀察時先用低倍鏡觀察有形成分全貌和管型,然后用高倍鏡鑒定細胞成分,細胞用高倍鏡觀察10個視野,管型用低倍鏡觀察20個視野,記錄結果。 ? 管型:是蛋白質、
27、細胞及其崩解產物在腎小管、集合管內凝固而形成的圓柱形蛋白凝聚體. 形成管型的必要條件是: ①原尿中有少量的白蛋白和由腎小管分泌的T-H蛋白是構成管型的基質; ②腎小管有使尿液濃縮和酸化能力; ③要有可供交替使用的腎單位. ? 結晶:酸性尿液內的結晶包括草酸鈣結晶、尿酸結晶、非晶形尿酸鹽,硫酸鈣結晶及馬尿酸結晶等。 尿液中是否出現結晶,取決于這些物質在尿液中的溶解度、濃度、pH、溫度及膠體狀況等因素.當促進與抑制結晶析出的動態(tài)平衡被打破時,就可見結晶析出.結晶多來自飲食,一般無重要臨床意義. ? ? ? 糞便部分 糞便組成: 細菌(占干重的1/3)、消化道分泌物和有形成
28、分、未消化的食物、食物分解產物 其中3/4是水,1/4是固體物質。 標本的采集與處理 1、容器??? 干凈,標志明顯,大小適宜,盛便后不漏不溢,不吸收水份,最好是一次性的塑料盒。 2、標本的要求 a、標本務必新鮮,不可混人尿液。 b、采集標本時應用干凈竹簽挑取糞便含有粘液或膿血部分,外觀無異常的糞便應從不同部位淺、深處糞便多處取材; c、一般檢查留取少量糞便即可(至少有5克大?。?稀便2ml,濃集卵時至少要取雞蛋大小糞便, 3、及時檢查 標本采集后應在1h內檢查完畢,否則因pH及消化酶等影導致有形成分破壞。 4、特殊檢查標本應按規(guī)定進行 檢查痢疾阿米巴滋養(yǎng)體應于排便后立
29、即送檢,寒冷季節(jié)時標本送驗及檢查時應需保溫。 ? 糞便顏色: 健康成人糞便應為黃褐色,嬰兒為金黃色.為糞膽素導致。各種生理性因素和病理性變化可以使其顏色發(fā)生變化。 1、黑色或柏油色:見于上消化道出血、服用鐵劑、食用豬血等。 產生機制:紅細胞被破壞,血紅蛋白在細菌作用下被分解,降解為血紅素、鐵、卟啉。鐵與腸道分解生成的硫化氫形成黑色的硫化鐵. 2、白陶土色:見于阻塞性黃疸、膽道梗阻,食用脂肪過量、鋇餐后。 ? 糞便性狀: 健康成人為成形軟便,便秘者為球形硬塊.嬰兒為糊狀. 糞便的pH: 變化范圍6。9—7。2。 細菌性痢疾、血吸蟲病時堿性,8 .0左右。阿米巴痢疾、病毒性
30、腸炎為酸性,6.1-6 . 6左右。 糞便的量: 健康成人每日糞便為100-300g。 隨食物種類、進食量和消化系統功能而變化。粗糧或纖維豐富的,糞便量;細糧或肉類較多,糞便較少. ? 糞便顯微鏡檢查:手工鹽水涂片鏡檢 操作方法:取一清潔玻片,滴加2滴生理鹽水,用竹簽挑取糞便中的異常部份,與鹽水均勻混合制成薄涂片,蓋上蓋片,其涂抹厚度以透過標本看清字跡為宜。 先用低倍觀察蟲卵、原蟲和其它異物,再用高倍鏡仔細觀察各種異常成分。細胞計數時,至少應檢查10個以上的高倍視野。 ? 糞便隱血:是指消化道出血量少(每日出血量<5ml),糞便中無可見的血液,且紅細胞被消化破壞,顯微鏡下也見
31、不到紅細胞,這種肉眼及顯微鏡均不能證明,需用化學法、免疫法才能證實的微量出血稱為隱血。隱血試驗(OBT)是指用化學或免疫學的方法證實微量血液的試驗. 【相關內容】 檢測方法 1)化學法:這類方法種類很多,根據色原物質不同分為:鄰聯甲苯胺法、鄰甲苯胺法、聯苯胺法、無色孔雀綠法、愈創(chuàng)木酯法、還原酚酞法等;根據反應試劑狀態(tài)或試劑載體不同又分為濕化學和干化學試紙法。其實驗設計原理基本相同,此類方法簡便易行,成本低廉,目前實驗室常用。 靈敏度: a、鄰聯甲苯胺、鄰甲苯胺、還原酚酞法最靈敏,可檢出0。2~1.0mg/L的血紅蛋白,只要消化道有1~5ml出血就可檢出。 其中鄰聯甲苯胺法是在198
32、3年中華醫(yī)學會全國臨床檢驗方法學學術討論會推薦的方法,但易出現假陽性。 b、中度靈敏的試驗有聯苯胺法、匹拉抗米酮法及無色孔雀綠法,可檢出1~5mg/L的血紅蛋白,消化道有5~10ml出血即為陽性。 為了減少假陽性和假陰性,臨床上宜采用中度靈敏方法。 2)免疫學法:免疫學法常用的方法有ELISA和膠體金等方法,此類方法所使用的抗體為抗人血紅蛋白單克隆抗體。免疫法操作簡便、快速、靈敏度高(一般血紅蛋白為0。2mg/L即可獲陽性結果)、特異性強,飲食和藥物等均對結果無影響,目前被認為是大腸癌普查最適用試驗。 ?臨床意義 1、對消化道出血有診斷價值:消化道潰瘍、藥物致胃粘膜損傷、腸結核、潰瘍
33、性結腸炎、結腸息肉、鉤蟲病、流行性出血熱及消化道惡性腫瘤所致消化道出血時,隱血試驗常呈陽性反應。 2、為消化道潰瘍與腫瘤出血的鑒別提供依據:消化道腫瘤病人,由于腫瘤直接或間接侵犯、破壞消化器官中的血管,隱血試驗呈持續(xù)性陽性;胃腸道潰瘍病人僅在發(fā)病時有出血的表現,隱血試驗結果呈間斷性陽性。 3、可作為消化道惡性腫瘤普查的1個篩選指標:隱血試驗對消化道腫瘤的診斷陽性率可達95%,其中早期胃癌診斷符合率為20%,晚期符合率達95%,對50歲以上的無癥狀者,每年做1次糞便隱血試驗,對早期消化道惡性腫瘤有重要價值.早期大腸癌病灶僅限于粘膜層或粘膜下層時,往往無癥狀,糞便中帶有微量的出血是早期診斷大腸
34、癌唯一可查出的異常指標. 精液 精液主要由精子和精漿(精囊液、前列腺液、尿道球腺、旁腺液)組成。 標本的采集 1。采集標本前要禁欲(包括無遺精或手淫)3-7天(30歲以下2-3天,30-40禁欲3-5天,40以上禁欲5—7天) 2.要將精液全部排入潔凈的干燥容器中。 天冷時要注意保溫,盡快送檢(30—60min) ? 精液的量 精液量為2.0~6。0ml,平均為3.5ml,少于1.5ml或大于8.0ml可視為異常。 無精液癥:精液量減少至1~2滴,甚至排不出,稱為無精液癥。 ? 精液的外觀(顏色和透明度) 灰白色或乳白色,久未射精者可呈淡黃色,微渾濁,液化后半透明樣。
35、 精液的氣味 正常精液具有栗花和石楠花的特殊氣味,由前列腺液產生。 精液的粘稠度 剛排出的精液迅速凝成膠凍狀,然后逐漸液化.正常精囊分泌的凝固蛋白使得精液凝固. pH 正常精液呈現弱堿性,為7。2-8.0。測定應在標本留取后1小時內完成。 ? 精液的液化時間:精液由膠胨狀態(tài)轉變?yōu)榱鲃訝顟B(tài)所需的時間稱為精液液化時間。精液液化主要是由于前列腺分泌的精液蛋白分解酶所致。 剛射出的精液具有高度的粘稠性,液化時間〈30min.。 精液延遲液化癥:新鮮精液標本在室溫下超過60min不液化,稱為~,常見于前列腺炎。 ? 精子活動率指活精子的數量,以“活”精子比率表示。 1、濕片法:
36、在高倍鏡下觀察100個精子,計數活動精子與不活動精子的比例來表示精子活動率。該法簡便、快速、應用廣泛,但該法較主觀,且影響因素多,結果誤差較大,重復性較差。 2、活體染色法(也稱為精子存活率):檢測正?;顒拥木訑?是測定活精子和死精子的定量方法.用染料對精子染色。該法操作較為復雜,費時,但較客觀反映死活精子比例,結果準確、可靠、重復性好,試劑易配制,易保存,是檢測精子功能簡便方法。 ?【參考值】 ①濕片法:>70%(精液離體30~60min內)。 ②伊紅染色法:>75%(精液離體30~60min內) 精子活率檢查主要用于男性不育癥的診斷.正常精液排出后60min內,精子活動率為80
37、%~90%,至少>60%, 曾認為精子數在60×10^9/L以上才能受孕,現認為只要有活動力的精子達45%,即使精子數〈0。5×10^9/L,仍能受孕。 ? 精子活動率:指精子向前運動的能力,是直接反映精子質量的一項指標. WHO將活力分4級(書上分為三級),用百分率表示。 ?a:快速前向運動 ,精子活動力良好 ?b:慢或呆滯的前向 ,精子活動力較好 ?c:非前向,在原地打轉或抖動,精子活動力不良?????????????? ?d:不動 ,死精子 檢測方法: 顯微鏡檢查:取液化后精液1d 于玻片上,在高倍鏡下觀察5—10個視野,計數100個精子并進行活動分級用百分率來表示。
38、 連續(xù)攝影法:將液化的精液直接充入記數池當中,在顯微鏡下200倍視野下,調節(jié)精子濃度大約每視野10-15個,然后顯微攝影,在同一張膠片上對同一個視野的精子進行6次暴光攝影,1s/次,可以得到精子的運動軌跡,死精子位置則始終不變。 精子質量分析儀測定:利用光束通過少量精液,檢測精子運動帶來的光密度變化.簡單迅速,重復性好。 【參考值】? 射精60min內,a級精子應〉25%;或a和b級精子之和〉50%。 精子活動力與受精的關系十分密切,若連續(xù)檢查,精子活率不足40%,且以c級活動力精子為主,則可能為男性不育的原因之一. ? 精子計數 【方法】 1、血細胞計數板檢測; 2、Ma
39、kler精子計數板檢測:專門用于精子檢驗,池深為10um,不影響精子的正常運動,但是只使用于相差顯微鏡和暗視野顯微鏡; 3、Macro計數板檢測:可以用于普通顯微鏡檢測. 【參考值】 ①精子濃度:(50~100)×10^9/L;WHO:>20×109/L。②精子總數:≥40×10^6/次 一般認為〈20×109/L為不正常,連續(xù)3次檢查皆低下者可確定為少精癥,多次未查到精子為無精癥. 但臨床上亦可見到精子濃度〈20×10^9/L仍能生育,因此估計一個男性的生育能力應將精子濃度與精液其他參數結果綜合考慮分析. ? 正常精子形態(tài): 正常精子外形似蝌蚪狀,由頭、體(頸、中段)、尾(主
40、、末段)構成。頭部正面觀呈卵圓形,側面觀呈扁平梨形,長約4。0~5。0μm,頭部輪廓規(guī)則,頂體覆蓋頭部表面的1/3以上.體部輪廓直而規(guī)則,長約5~7μm。尾部細長,彎而不卷曲呈鞭毛狀,長約50~60μm。 檢查方法 涂片染色:HE染色、Giemsa染色,相差顯微鏡檢查 【參考值】 正常精液中異常精子數<20%。 精子形態(tài)檢查是反映男性生育能力的1項重要指標.如正常形態(tài)精子<30%,稱為畸形精子癥(WHO), 畸形精子>40%,即會影響精液質量,〉50%??芍虏挥?精子形態(tài)異常與睪丸、附睪的功能異常密切相關 ? 未成熟生殖細胞:是指各階段發(fā)育不完全的生精細胞,包括精原、初級精母、次
41、級精母和發(fā)育不完全的精子細胞。正常精液未成熟生殖細胞<1%, 根據生精細胞的類型可進一步衡量睪丸生精功能,分析睪丸病因,為無精癥、少精癥的病因分析提供科學依據。同時,動態(tài)觀察精液生精細胞的變化,可作為男性不育癥療效觀察和判斷預后的指標之一。 ? 精漿果糖: 由精囊產生,它是精子活動的主要能源,正常濃度9。11-17。67mmol/L 精漿中富含果糖,由精囊腺將血糖轉化為分泌而來,是精子能量的主要來源,其含量高低直接影響精子的活力。 ? 精漿中ACP來自于前列腺,屬前列腺酸性磷酸酶,含量明顯高于其他體液?;钚愿叩涂梢苑从城傲邢俚墓δ? 測定方法有磷酸苯二鈉【參考值48.8~208
42、.6U/ml】和b-硝基酚比色法. 【臨床意義】 ①精漿中的ACP測定有助于了解前列腺功能和前列腺疾病的診斷。如前列腺炎時功能低下酶活性下降,前列腺肥大和前列腺癌時,酶活性升高。 ②ACP測定是法醫(yī)鑒定有無精液最靈敏的指標. ? 精子頂體酶: 是一種蛋白水解酶,存在于精子頂體內,經常以無活性酶原形式存在,當精子頭部進入卵細胞透明帶時,才被激活,水解卵細胞透明帶,使精子與卵子融合,在受精過程中起重要作用。 【比色法參考值:48。2~217。7μIU/10^—6】 ? 抗精子抗體: 當生殖系統炎癥、阻塞、免疫系統遭到破壞等病理改變時,精子作為一種獨特的抗原與機體免疫系統接觸,產
43、生自身或同種抗精子抗體(AsAb)。血液或生殖道分泌液中有AsAb,可引起免疫性不育。 精漿免疫球蛋白: 主要是IgA、IgG,相當于血清中的1%~2%。精漿中的IgG由血清滲透于前列腺而來,精漿中的IgA主要來自前列腺。 【參考值】①IgG:28。6±16.7mg/L。②IgA:90.3±57.7mg/L.③IgM:2.3±1.9mg/L。 AsAb陽性者,IgG、IgM增高;正常人精漿中分泌性IgA含量很低,生殖道炎癥時,分泌性IgA增高;生殖道感染早期IgM增高。 ? ? ? 陰道分泌物 ? ?陰道分泌物:是女性生殖道分泌的液體,主要由宮頸腺體、前庭大腺、子宮內膜及陰
44、道粘膜的分泌物混合而成,俗稱“白帶"。 陰道分泌物一般由婦產科醫(yī)務人員采集,根據不同檢查目的可從不同部位取材,一般采用消毒棉拭子自陰道深部或陰道穹后部、宮頸管處取材,用生理鹽水涂片。 取材前24h內,禁止性交、盆浴、陰道灌洗和局部用藥等,不可使用潤滑劑。 ? 一般性狀 正常陰道分泌物為白色、絮狀、帶有粘性的液體,無氣味,量多少不等,性狀與雌激素水平及生殖器充血情況有關。1、臨近排卵期量多,清澈透明、稀薄似蛋清;2、排卵2~3d后量減少,混濁粘稠;3、行經前量又增加;妊娠期,白帶量較多。 ? 清潔度檢查 檢查方法有濕片法及涂片染色法。濕片法簡便、快速,臨床常用,但對細菌觀察結果較
45、差。涂片染色檢查,對細胞結構和細菌觀察清楚,結果準確客觀,但較復雜、費時、少用。 【參考值】? I~II度。 ? ?陰道毛滴蟲:是寄生在女性陰道以及尿道和男性尿道和前列腺等部的鞭毛蟲 檢查方法有濕片法、涂片染色法、膠乳凝集試驗及體外培養(yǎng)法等. 濕片法簡便易行,快速,為臨床實驗室常用方法,不足之處是受送檢時間、溫度、涂片厚度及檢驗者水平影響,陽性率較低。 涂片染色檢查能用油鏡觀察蟲體結構,可提高檢出率。但受涂片及染色等多種因素影響,如蟲體可不典型,大小懸殊,要求檢驗者經驗豐富. 乳膠凝集試驗有試劑盒供應,操作簡便、快速、靈敏度和特異性高,優(yōu)于濕片法和培養(yǎng)法,適用于臨床常規(guī)應用,
46、但陰道分泌物為粘性時可出現非特異性反應。 培養(yǎng)法陽性率高,但操作復雜,主要用于癥狀較輕帶蟲者或慢性病人的檢查以及作為診斷和治療觀察的依據。 ? ? ? 漿膜腔積液 人體的胸腔、腹腔、心包腔等統稱為漿膜腔。在正常情況下僅有少量液體,主要起潤滑作用。正常人漿膜內少量液體來自壁層漿膜毛細血管內的血漿濾出,并通過臟層漿膜的淋巴管和小靜脈的回吸收。 【正常值】胸腔液<20ml,腹腔液〈50ml,心包腔液約為10-30ml,關節(jié)腔液0.1—0。2ml. 漿膜腔積液:當漿膜有炎癥、循環(huán)障礙,惡性腫瘤等病變時,漿膜腔液生成增多并積聚在漿膜腔內,其性質也發(fā)生變化,此時稱為~. ? 漏出液:一
47、般為非炎癥性積液,在正常情況下,組織液不斷被重吸收,液體在毛細血管內外移動的方向取決于四個因素: 1、毛細血管血壓;2、組織液膠體滲透壓;3、血漿膠滲壓;4、組織液靜水壓; 有效濾過壓=( 毛細血管血壓+組織液膠體滲透壓)-(血漿膠滲壓+組織液靜水壓)? 則漏出液的形成原因: 1、毛細血管血壓升高;2、血管內膠體滲透壓下降;3、淋巴回流受阻;4、水、鈉儲留: ? 滲出液:多為炎癥性積液,炎癥時由于病原微生物的毒素,缺氧以及炎癥介質作用使血管內皮細胞受損,血管通透性增加,致使液體、血管內大分子物質(如白蛋白、球蛋白、纖維蛋白等)和各種細胞成分等從血管內滲出到血管外和組織間隙及漿膜腔,
48、形成積液. 1、感染性:如化膿性細菌、分枝桿菌、病毒或支原體等。 2、惡性腫瘤:產生血管活性物質,使?jié){膜毛細血管通透性增加 3、其他:如外傷、化學性刺激(血液、尿液、膽汁和胃液)、風濕性疾病等也可引起積液. ? 標本的采集 一般由臨床醫(yī)生行漿膜腔穿刺術獲得;采集標本分4管留取, 第1管細菌學;第2管化學和免疫學;第3管細胞學,第4管觀察凝固現象。 常規(guī)及細胞學檢查宜用EDTA-K2抗凝,化學檢查肝素抗凝。 注意:送檢和檢測必須及時;如不能檢查應該加無水乙醇放置于冰箱保存。 ? 漿膜腔積液的量 正常胸腔、腹腔和心包腔內均有少量的液體,但在病理情況下,液體增多,其增多的程度
49、與病變部位和病情嚴重程度有關??梢詮膸缀辽獢登Ш辽坏?。 顏 色 正常胸腔液、腹腔液和心包腔液為清亮、淡黃色的液體,病理情況下可出現不同的顏色變化。一般滲出液顏色深,漏出液顏色淺。 透明度(清澈、微渾、渾濁) 正常胸腔液、腹腔液和心包腔液為清晰透明的液體.積液的透明度常與其所含的細胞、細菌、蛋白質等程度有關。 滲出液呈不同程度的混濁,乳糜液因含有大量脂肪也呈混濁;漏出液一般清晰透明. 凝固性 漏出液一般不凝固,滲出液往往可以自行凝固或有凝塊出現. 原因:纖維蛋白原作用,滲出液中含有纖溶酶時可降解纖維蛋白。 比重 取決于蛋白質含量,漏出液小于1.015,滲出液大于1.018
50、。 pH 隔絕空氣,及時送檢 漏出液:7.455-7.465 滲出液:6。87-7。39? 【臨床意義】 1、胸腔積液:pH〈7.4,炎性積液;pH〈7.3,伴有葡萄糖減低,提示有并發(fā)癥;pH小于6.0,多由于胃液進入胸腔,見于食管破裂,嚴重膿胸。 2、腹腔積液:伴有感染時,細菌代謝產生的酸性物質增多,使pH減低。pH小于7.3對自發(fā)性細菌性腹膜炎診斷的靈敏度和特異性均為90%. 3、心包腔積液:明顯減低可見于風濕性、結核性、化膿性、惡性腫瘤性、尿毒癥性心包炎等,其中以惡性腫瘤性、結核性積液減低較明顯. ? 蛋白質檢查 ?1、定性-李瓦他(Rivalta)試驗 漿膜上皮
51、細胞在炎癥刺激下粘蛋白分泌增加。稀醋酸中滴加胸腹水,看有無蛋白沉淀出現。 陰性:清晰,不呈現霧狀 陽性:出現白色霧狀, 下沉到管底不消失 30g/L以下陰性,40g/L以上陽性,二者之間約80%陽性。 2、定量-雙縮脲法測定蛋白 總蛋白、球蛋白、纖維蛋白等, 滲出液大于30g/L,?漏出液小于25g/L。 近年來認為,積液/血清蛋白質的比值則更為準確。一般,比值大于0。5為滲出液,小于0.5為漏出液。胸水一般用此鑒別.而腹水則一般用血清-腹水清蛋白梯度(SAAG)來鑒別。 SAAG=血清白蛋白濃度-腹水白蛋白濃度(g/L) ①、SAAG≥11g/L,多為門靜脈高壓,為漏出液。
52、 ②、SAAG〈11g/L則沒有門靜脈高壓,多為滲出液。精確度97%。 ? 葡萄糖測定 漏出液中葡萄糖含量與血糖含量近似,為3。9-6.1mmol/L, 滲出液中的葡萄糖可被某些細菌分解而減少,化膿性胸膜炎病人,其胸腔積液中葡萄糖含量減少明顯,常低于1。12mmol/L,結核性胸膜炎的病人積液中葡萄糖含量也明顯減少。 ? 乳酸脫氫酶?(LD):是糖酵解過程中重要的酶.LD活性測定主要用于鑒別積液的性質。當積液LD大于200,積液LD/血清LD比值大于0。6時,則為滲出液。 在滲出液中,化膿性積液的LD活性增高最明顯,其次是癌性積液,結核性略高于正常。 ?腺苷脫氨酶 (ADA)
53、:?是一種核苷酸氨基水解酶,主要存在于紅細胞和T淋巴細胞內?!? ? ?? ?一般在結核性積液中活性升高且幅度最大,癌性次之,漏出液最低。結核性積液ADA活性常>40U/L,對結核性積液診斷陽性率可達99%, 溶菌酶:主要在單核、粒細胞、上皮細胞中,在淋巴、腫瘤中無。 結核性積液中溶菌酶含量多超過30mg/L,且積液與血清溶菌酶比值大于1.0,明顯高于癌性積液、結締組織病. 對鑒別良、惡性積液、結核性與其他性質積液有重要價值。 ? 漿膜腔積液細胞計數 計數時把全部有核細胞(包括間皮細胞)都列入細胞計數中。 惡性腫瘤引起的積液中血性者占50%-85%。當積液中紅細胞大于0.1×1
54、0^12/L時應考慮惡性腫瘤、肺栓塞、穿刺損失、創(chuàng)傷等所致。 1、細胞總數檢查:清亮或微混的標本,可直接計數。如果標本中細胞數量過多,用生理鹽水或紅細胞稀釋液稀釋標本后計數。 2、白細胞計數:可采用直接計數法。如果白細胞過多,可用白細胞稀釋液稀釋后計數白細胞。 3、白細胞分類計數:白細胞直接計數后,在高倍鏡下根據白細胞形態(tài)和細胞核的形態(tài)特征進行分類計數。也可采用Wright染色后,油鏡下分類計數。 ?【參考值】 1、漏出液中的白細胞數不超過100×10^6/L, 主要為間皮細胞及淋巴細胞。 2、滲出液的白細胞數多超過500×10^6/L. ? 腫瘤標志物檢查 1、癌胚抗原(C
55、EA):是一種分子量較大的糖蛋白,當積液中CEA>20ug/L,積液CEA/血清CEA比值>1時,應高度懷疑為癌性積液。 【酶聯免疫參考值】:3.2±0.77ug/L,>5ug/L為異常。癌性胸、腹腔積液時CEA多>5ug/L,良性積液時多<5ug/L ?2、甲胎蛋白(AFP):腹水中AFP檢測結果與血清AFP呈正相關。腹水中AFP>25ug/L時對診斷原發(fā)性肝癌是有價值的。 3、CA125:腹水中CA125升高常作為卵巢癌轉移的指標,其敏感性為85%,特異性可達95%。 ? ? 漏出液與滲出液的鑒別 PART1 PART2 ? 良性/惡性 腹水的鑒別 ? 結核性與惡性胸水的鑒別 ? ? 不足之處,請您指出來,謝謝! 31 / 31
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