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1、恩諾沙星檢測試劑盒說明書
酶聯(lián)免疫法定量檢測恩諾沙星
產品簡介
RIDASCREEN? Enrofloxacin/Quinolones（訂貨號：R3113R）恩諾沙星檢測試劑盒，
采用競爭性酶聯(lián)免疫法定量測定尿液、血清種的恩諾沙星藥物殘留。 試劑盒中含有酶聯(lián)免疫檢測所需的所有試劑，包括標準品。 試劑盒足夠進行96次檢測（包括標準測定）。 定量分析需要使用微孔板酶標儀。
檢測時間： 樣品制備（以10個樣品為例）.................大約30 分鐘
檢測過程（孵育時間）....................大約1小時15分鐘
檢測限： 尿
2、液、血清.................................................5ppb
回收率： 80 - 110 %
（與標準品對應）
特異性： RIDASCREEN? Enrofloxacin/Quinolones恩諾沙星檢測試劑盒的特異性根據與相關物質的交叉反應確定。
恩諾沙星 ........................................................... 100 %
諾氟沙星，麻保沙星，氧氟沙星...................... > 100 %
達氟沙星...........
3、.................................................... 67 %
環(huán)丙沙星............................................................... 41 %
沙氟沙星................................................................. 9 %
1. 用途
RIDASCREEN? Chinolone恩諾沙星檢測試劑盒采用了競爭性酶聯(lián)免疫法定量測定雞蛋、牛肉、豬肉、羊肉、雞肉、火雞、魚和蝦中的恩諾沙星藥物殘留。
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4、. 檢測原理
檢測的基礎是抗原抗體反應。微孔板包被有針對氟喹諾酮抗體的捕獲抗體。加入標
準品、樣品溶液、恩諾沙星酶連接物及氟喹諾酮抗體。游離的氟喹諾酮與恩諾沙星
酶連接物競爭氟喹諾酮抗體結合位點（競爭性酶聯(lián)免疫分析），同時氟喹諾酮抗體
也與微孔板上固定的捕獲抗體結合。沒有結合的恩諾沙星酶連接物在洗滌步驟中被
除去。將底物/發(fā)色劑加入到孔中并且孵育。結合的酶連接物將無色的發(fā)色劑轉化為
藍色的產物。加入反應終止液后使顏色由藍色轉變?yōu)辄S色。在 450 nm 處測量。吸
光度值與樣品中的氟喹諾酮濃度成反比。
3. 試劑盒組份
每一個盒中的試劑足夠進行 96次檢測（包括標準測定），
5、盒中的組份如下：
1 x 96孔微孔板（12 條每條8孔）
包被有針對氟喹諾酮抗體的捕獲抗體
6 x 標準品 （每瓶 1.3 ml）
0 ppb（零標準品），0.5 ppb，1.5 ppb，3 ppb，6 ppb，18 ppb 恩諾沙星甲醇溶液 即用型
1 x 酶連接物（6 ml）...............................紅色瓶蓋 過氧化物酶標記的恩諾沙星 即用型
1 x 氟喹諾酮抗體液（6 ml） ........................黑色瓶蓋 即用型
1 x 發(fā)色劑（10 ml）....................
6、......棕色瓶蓋 （底物/發(fā)色劑溶液），紅色 含有四甲聯(lián)苯胺
1 x 反應終止液（14 ml）...............................黃色瓶蓋 含1N的硫酸
1 x 洗滌緩沖液（鹽）
用于制作 10 mM的磷酸鹽緩沖液，pH 7.4 含有0.05 % Tween 20
4. 操作者應該注意之事項
本試劑盒建議由經過了培訓的實驗人員進行操作使用。請嚴格按照說明書的步驟和要求進行檢測使用。
反應終止液為1 N硫酸（R36/38，S2-26）。
5. 儲存條件
保存試劑盒于2-8°C，不要冷凍。
將不用的微孔板放進原錫箔袋中并且與提供
7、的干燥劑一起重新密封儲存于 2-8℃ 條件下。
底物/發(fā)色劑對光敏感，因此要避免直接暴露在光線下。
對過了有效期（見試劑盒標簽）的試劑盒不再提供任何質量保證。
不能交叉使用不同批號的盒中試劑。
6. 試劑變質的跡象
? 紅色的底物/發(fā)色劑在使用前發(fā)現(xiàn)顏色變藍
? 零標準品的吸光度值小于0.6 （E450 nm < 0.6）
7. 樣品處理
7.1 尿液和血清
尿液、血清
— 取30ul尿樣/血清+270洗滌緩沖液混合后，取50ul進行分析
稀釋倍數………………………………………….10
檢測限……………………………………………
8、5 ng/g (ppb)
定量檢測限…………………………………….. ..5 ng/g (ppb)
8. 檢測步驟
8.1. 檢測前的準備
使用之前將所有試劑回溫至室溫（20-25°C）。
洗滌緩沖液是PBS-Tween緩沖液，為此試劑盒中提供了一袋洗滌緩沖液鹽（參見4.）。使用1 l 蒸餾水溶解一袋洗滌緩沖液鹽制得洗滌緩沖液。制備好的洗滌緩沖液可在2-8°C下保存大約4－6周時間。
或者： 用100 ml蒸餾水溶解袋中的洗滌緩沖液鹽，得到10倍的洗滌緩沖液鹽濃縮液，此溶液能在室溫（20-25°C）下儲存8－12周。使用時，用9份蒸餾水溶解1份此濃縮液得到洗滌緩沖液。
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9、.2. 檢測操作
檢測必須在室溫（20-25°C）條件下進行！
仔細進行洗板的操作非常重要。在使用中不要讓微孔出現(xiàn)干燥。
0. 將足夠標準品和樣品檢測所需數量的孔條插入微孔板架，均做兩個平行實驗，
記錄下標準品和樣品的位置。
1. 將 50 μl 標準品及處理好的樣品溶液加到相應的微孔中。不同樣品或標準品的添加請換用新的移液頭。
2. 向每一個微孔中加入50 μl酶連接物溶液（紅色瓶蓋）。
3. 向每一個微孔中加入 50 μl 抗體溶液（黑色瓶蓋），充分混合，在室溫（20 - 25°C）條件下孵育 1小時。
4. 倒出孔中的液體，將微孔板架倒置在吸水紙上拍打（每輪拍打 3 次）以保證完全除去孔中的液體。加入 250 μl 洗滌緩沖液（參見 10.1.），再次倒掉微孔中液體。上述操作重復進行兩遍。
5. 向每一個微孔中加入 100 μl 底物/發(fā)色劑（棕色瓶蓋），充分混合并在室溫
（20 - 25 °C）條件下暗處孵育 15分鐘。
6. 向每一個微孔中加入 100 μl 反應終止液（黃色瓶蓋），充分混合。在加入反
應終止液后30分鐘內于450 nm處測量吸光度值。
恩諾沙星說明書(簡化版)
