《白細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)用ppt課件》由會(huì)員分享,可在線閱讀,更多相關(guān)《白細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)用ppt課件(18頁(yè)珍藏版)》請(qǐng)?jiān)谘b配圖網(wǎng)上搜索。
1、,單擊此處編輯母版標(biāo)題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級(jí),第三級(jí),第四級(jí),第五級(jí),*,單擊此處編輯母版標(biāo)題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級(jí),第三級(jí),第四級(jí),第五級(jí),*,Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,*,*,白細(xì)胞計(jì)數(shù)課件,實(shí)驗(yàn)一、白細(xì)胞計(jì)數(shù),1.原理血液經(jīng)稀乙酸定量稀釋并破壞成熟紅細(xì)胞,在血細(xì)胞計(jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù)規(guī)定區(qū)域內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù),換算成每升血液中白細(xì)胞數(shù)。,2.試劑器材,白細(xì)胞稀釋液冰
2、乙酸 2.0ml,10g/L亞甲藍(lán) 3滴,加蒸餾水 至100ml,器材,改良牛鮑血細(xì)胞計(jì)數(shù)板及專(zhuān)用蓋片、微量吸管、帶孔吸頭、,1ML,刻度移液管、小試管、潔凈軟紗布、干棉球、光學(xué)顯微鏡。,毛細(xì)血管采血標(biāo)準(zhǔn)操作程序,操作步驟,1 采血部位成人以左手無(wú)名指內(nèi)側(cè)為宜,半歲以下嬰幼兒通常自拇指內(nèi)側(cè)或足跟兩側(cè)采血。,2 輕輕按摩采血部位。,3 用棉簽蘸消毒液消毒局部皮膚、待干。,4,緊捏刺血部位,使其自然充血。,5,用無(wú)菌刺針穿刺取血,動(dòng)作應(yīng)迅速,深度,2,3mm,,稍加擠壓以血液流出為宜。,6,用干棉球擦去第一滴血。,7,按需要依次采血。,8,采血完畢,用干棉球壓住傷口,止血片刻。,微量吸管的使用,1
3、將帶孔乳膠吸頭輕輕套在微量吸管上,連接緊密不漏氣;,2拇指和中指夾住吸頭中下端,示指蓋住吸頭小孔,拇、中指輕微擠壓排出適量空氣;,3將微量吸管插入抗凝血,拇、中指緩慢松勁(松動(dòng)快血液會(huì)吸入吸頭),吸取抗凝血至所需刻度略上方(不能有氣泡),吸管呈水平略下垂,松開(kāi)示指;,4用干棉球順吸管向下拭盡管外余血(保證血量準(zhǔn)確),輕觸吸管下口吸去多余血量,使管內(nèi)抗凝血正處所需刻度;,5將微量吸管插入小試管底部,三指輕微用力慢慢排出血液,用上清液沖洗管內(nèi)余血23次,輕搖試管混勻;,6拔出微量吸管棄入污物桶。,38ml白細(xì)胞稀釋液。,白細(xì)胞總數(shù)=4大格白細(xì)胞數(shù)(N)/410 20 106,4 緊捏刺血部位,使其
4、自然充血。,3 用棉簽蘸消毒液消毒局部皮膚、待干。,中央大方格四角和正中5個(gè)中方格為紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū),稀釋液和采血量要準(zhǔn)確,充分混勻,充液適量,無(wú)不足、外溢和氣泡,細(xì)胞分布均勻。,計(jì)數(shù)區(qū)域分為9個(gè)大方格,白細(xì)胞數(shù)量過(guò)高時(shí),可加大稀釋倍數(shù),白細(xì)胞數(shù)量過(guò)低時(shí),可計(jì)數(shù)8個(gè)大方格的白細(xì)胞數(shù)或取雙倍血量。,超過(guò)上述標(biāo)準(zhǔn)者為不合格,2拇指和中指夾住吸頭中下端,示指蓋住吸頭小孔,拇、中指輕微擠壓排出適量空氣;,稀釋液和采血量要準(zhǔn)確,充分混勻,充液適量,無(wú)不足、外溢和氣泡,細(xì)胞分布均勻。,白細(xì)胞數(shù)量過(guò)高時(shí),可加大稀釋倍數(shù),白細(xì)胞數(shù)量過(guò)低時(shí),可計(jì)數(shù)8個(gè)大方格的白細(xì)胞數(shù)或取雙倍血量。,白細(xì)胞總數(shù)在參考范圍內(nèi),大方格間
5、的細(xì)胞數(shù)不得相差10個(gè)以上,兩次重復(fù)計(jì)數(shù)誤差不得超過(guò)10。,計(jì)數(shù)板上下各一個(gè)計(jì)數(shù)池,采血時(shí)針刺深度必須適當(dāng),不能過(guò)度擠壓,防止組織液滲入或采血時(shí)間太長(zhǎng)引起血液凝固。,計(jì)數(shù)板上下各一個(gè)計(jì)數(shù)池,改良牛鮑血細(xì)胞計(jì)數(shù)板及專(zhuān)用蓋片、微量吸管、帶孔吸頭、1ML刻度移液管、小試管、潔凈軟紗布、干棉球、光學(xué)顯微鏡。,2 輕輕按摩采血部位。,3.,操作步驟,(,1,),加稀釋液 用移液管,向小試管內(nèi)加入,0.38ml,白細(xì)胞稀釋液。,(,2,)采血、稀釋用微量吸管采血,20ul,,拭去管外余血,釋放于小試 管,底部,用上部,稀釋液洗凈吸管內(nèi)余血,,輕搖,試管,混勻,靜置等其溶血。,(,3,)清潔計(jì)數(shù)板及蓋片(動(dòng)
6、作輕柔),夾持蓋片緣縱向前推輕放于兩側(cè)支持堤上。,(,4,)充計(jì)數(shù)池將小試管輕微振蕩,2,min,,立即以一次性微量吸管吸取混勻后的白,細(xì)胞懸液,充入計(jì)數(shù)池內(nèi)。,靜置,2-3min,,使細(xì)胞沉于,計(jì)數(shù)池底面,。,(,5,)調(diào)試顯微鏡,將計(jì)數(shù)板放置載物臺(tái)上,,選擇(,4,),低倍鏡,調(diào)節(jié)聚光器使光線較暗,調(diào)節(jié)旋鈕找到方格線,轉(zhuǎn)至,低倍鏡(,10,),調(diào)節(jié)光亮,。,(,6,),計(jì)數(shù),低倍鏡下計(jì)數(shù)四角,4,個(gè)大方格內(nèi)白細(xì)胞總數(shù),壓線細(xì)胞,數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右,。,血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的方格,計(jì)數(shù)板上下各一個(gè)計(jì)數(shù)池,計(jì)數(shù)區(qū)域分為,9,個(gè)大方格,四角的大方格各劃分為,16,個(gè)中方格,中央大方格劃分為,25,個(gè)
7、中方格,四角的大方格為白細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū),中央大方格四角和正中,5,個(gè)中方格為紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū),結(jié)果計(jì)算,白細(xì)胞總數(shù),=4,大格白細(xì)胞數(shù)(,N,),/410 20 10,6,=N,20 10,9,/L,用,.10,9,/L,(小數(shù)點(diǎn)后一位)表示,注意事項(xiàng),稀釋液,小試管、計(jì)數(shù)板,采血,充池,計(jì)數(shù)原則,WBC,過(guò)多,WBC,過(guò)少,WBC,校正,顯微鏡調(diào)試,5.,注意事項(xiàng),(1).,稀釋液密封保存,防止污染,小試管、計(jì)數(shù)板、蓋片均須清潔,以免雜質(zhì)、微粒等被誤認(rèn)為細(xì)胞。,(2).,采血時(shí)針刺深度必須適當(dāng),不能過(guò)度擠壓,防止組織液滲入或采血時(shí)間太長(zhǎng)引起血液凝固。,(3).,稀釋液和采血量要準(zhǔn)確,充分混勻,充液適
8、量,無(wú)不足、外溢和氣泡,細(xì)胞分布均勻。,(4).,白細(xì)胞總數(shù)在參考范圍內(nèi),大方格間的細(xì)胞數(shù)不得相差,10,個(gè)以上,兩次重復(fù)計(jì)數(shù)誤差不得超過(guò),10,。,(5).,白細(xì)胞數(shù)量過(guò)高時(shí),可加大稀釋倍數(shù),白細(xì)胞數(shù)量過(guò)低時(shí),可計(jì)數(shù),8,個(gè)大方格的白細(xì)胞數(shù)或取雙倍血量。,(6).,一些貧血患者血液中有核紅細(xì)胞增多,會(huì)計(jì)數(shù)在白細(xì)胞總數(shù)內(nèi),應(yīng)校正。,校正公式:白細(xì)胞校正數(shù),/L=M,(,100/100+N,),M,為未校正前白細(xì)胞數(shù),,N,為在白細(xì)胞分類(lèi)時(shí),計(jì)數(shù),100,個(gè)白細(xì)胞的同時(shí)計(jì)數(shù)到的有核紅細(xì)胞數(shù)。,(7).,調(diào)試顯微鏡,將血細(xì)胞計(jì)數(shù)板平放于載物臺(tái),低倍鏡處所充計(jì)數(shù)池正中蓋片略上方,向下微調(diào)載物臺(tái)(防止
9、壓碎蓋片)至看清計(jì)數(shù)區(qū)域內(nèi)分隔線條為止。,采血時(shí)針刺深度必須適當(dāng),不能過(guò)度擠壓,防止組織液滲入或采血時(shí)間太長(zhǎng)引起血液凝固。,實(shí)驗(yàn)一、白細(xì)胞計(jì)數(shù),實(shí)驗(yàn)一、白細(xì)胞計(jì)數(shù),校正公式:白細(xì)胞校正數(shù)/L=M(100/100+N),稀釋液和采血量要準(zhǔn)確,充分混勻,充液適量,無(wú)不足、外溢和氣泡,細(xì)胞分布均勻。,計(jì)數(shù)區(qū)域分為9個(gè)大方格,白細(xì)胞數(shù)量過(guò)高時(shí),可加大稀釋倍數(shù),白細(xì)胞數(shù)量過(guò)低時(shí),可計(jì)數(shù)8個(gè)大方格的白細(xì)胞數(shù)或取雙倍血量。,3 用棉簽蘸消毒液消毒局部皮膚、待干。,2拇指和中指夾住吸頭中下端,示指蓋住吸頭小孔,拇、中指輕微擠壓排出適量空氣;,3 用棉簽蘸消毒液消毒局部皮膚、待干。,評(píng)價(jià):白細(xì)胞 4.,超過(guò)上述
10、標(biāo)準(zhǔn)者為不合格,1 采血部位成人以左手無(wú)名指內(nèi)側(cè)為宜,半歲以下嬰幼兒通常自拇指內(nèi)側(cè)或足跟兩側(cè)采血。,白細(xì)胞總數(shù)在參考范圍內(nèi),大方格間的細(xì)胞數(shù)不得相差10個(gè)以上,兩次重復(fù)計(jì)數(shù)誤差不得超過(guò)10。,注意事項(xiàng),中央大方格四角和正中5個(gè)中方格為紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū),2拇指和中指夾住吸頭中下端,示指蓋住吸頭小孔,拇、中指輕微擠壓排出適量空氣;,稀釋液,小試管、計(jì)數(shù)板,WBC過(guò)少,(2)采血、稀釋用微量吸管采血20ul,拭去管外余血,釋放于小試 管底部,用上部稀釋液洗凈吸管內(nèi)余血,輕搖試管混勻,靜置等其溶血。,6.,細(xì)胞計(jì)數(shù)原則,大方格四邊壓線細(xì)胞數(shù)左不數(shù)右,數(shù)上不數(shù)下,,弓形移動(dòng),7.,正常參考值,成人,:(,4
11、.0-10.0,),10,9,/L,新生兒:(,15.0-20.0,),10,9,/L,6拔出微量吸管棄入污物桶。,采血時(shí)針刺深度必須適當(dāng),不能過(guò)度擠壓,防止組織液滲入或采血時(shí)間太長(zhǎng)引起血液凝固。,白細(xì)胞總數(shù)=4大格白細(xì)胞數(shù)(N)/410 20 106,稀釋液密封保存,防止污染,小試管、計(jì)數(shù)板、蓋片均須清潔,以免雜質(zhì)、微粒等被誤認(rèn)為細(xì)胞。,WBC過(guò)少,2拇指和中指夾住吸頭中下端,示指蓋住吸頭小孔,拇、中指輕微擠壓排出適量空氣;,2 輕輕按摩采血部位。,3 用棉簽蘸消毒液消毒局部皮膚、待干。,(5)調(diào)試顯微鏡 將計(jì)數(shù)板放置載物臺(tái)上,選擇(4 )低倍鏡,調(diào)節(jié)聚光器使光線較暗,調(diào)節(jié)旋鈕找到方格線,轉(zhuǎn)
12、至低倍鏡(10),調(diào)節(jié)光亮。,毛細(xì)血管采血標(biāo)準(zhǔn)操作程序,38ml白細(xì)胞稀釋液。,白細(xì)胞總數(shù)在參考范圍內(nèi),大方格間的細(xì)胞數(shù)不得相差10個(gè)以上,兩次重復(fù)計(jì)數(shù)誤差不得超過(guò)10。,(3)清潔計(jì)數(shù)板及蓋片(動(dòng)作輕柔),夾持蓋片緣縱向前推輕放于兩側(cè)支持堤上。,白細(xì)胞稀釋液冰乙酸 2.,改良牛鮑血細(xì)胞計(jì)數(shù)板及專(zhuān)用蓋片、微量吸管、帶孔吸頭、1ML刻度移液管、小試管、潔凈軟紗布、干棉球、光學(xué)顯微鏡。,2 輕輕按摩采血部位。,稀釋液和采血量要準(zhǔn)確,充分混勻,充液適量,無(wú)不足、外溢和氣泡,細(xì)胞分布均勻。,(6)計(jì)數(shù) 低倍鏡下計(jì)數(shù)四角4個(gè)大方格內(nèi)白細(xì)胞總數(shù),壓線細(xì)胞數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右。,白細(xì)胞數(shù)量過(guò)高時(shí),可加大稀
13、釋倍數(shù),白細(xì)胞數(shù)量過(guò)低時(shí),可計(jì)數(shù)8個(gè)大方格的白細(xì)胞數(shù)或取雙倍血量。,白細(xì)胞總數(shù)=4大格白細(xì)胞數(shù)(N)/410 20 106,加蒸餾水 至100ml,白細(xì)胞數(shù)量過(guò)高時(shí),可加大稀釋倍數(shù),白細(xì)胞數(shù)量過(guò)低時(shí),可計(jì)數(shù)8個(gè)大方格的白細(xì)胞數(shù)或取雙倍血量。,2 輕輕按摩采血部位。,2拇指和中指夾住吸頭中下端,示指蓋住吸頭小孔,拇、中指輕微擠壓排出適量空氣;,計(jì)數(shù)區(qū)域分為9個(gè)大方格,8 采血完畢,用干棉球壓住傷口,止血片刻。,加蒸餾水 至100ml,白細(xì)胞總數(shù)在參考范圍內(nèi),大方格間的細(xì)胞數(shù)不得相差10個(gè)以上,兩次重復(fù)計(jì)數(shù)誤差不得超過(guò)10。,中央大方格四角和正中5個(gè)中方格為紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū),超過(guò)上述標(biāo)準(zhǔn)者為不合格,中
14、央大方格四角和正中5個(gè)中方格為紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū),采血時(shí)針刺深度必須適當(dāng),不能過(guò)度擠壓,防止組織液滲入或采血時(shí)間太長(zhǎng)引起血液凝固。,3 用棉簽蘸消毒液消毒局部皮膚、待干。,采血時(shí)針刺深度必須適當(dāng),不能過(guò)度擠壓,防止組織液滲入或采血時(shí)間太長(zhǎng)引起血液凝固。,實(shí)驗(yàn)一、白細(xì)胞計(jì)數(shù),(6)計(jì)數(shù) 低倍鏡下計(jì)數(shù)四角4個(gè)大方格內(nèi)白細(xì)胞總數(shù),壓線細(xì)胞數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右。,3 用棉簽蘸消毒液消毒局部皮膚、待干。,2 輕輕按摩采血部位。,采血時(shí)針刺深度必須適當(dāng),不能過(guò)度擠壓,防止組織液滲入或采血時(shí)間太長(zhǎng)引起血液凝固。,稀釋液,小試管、計(jì)數(shù)板,中央大方格四角和正中5個(gè)中方格為紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū),109/L(小數(shù)點(diǎn)后一位)表示
15、,原理血液經(jīng)稀乙酸定量稀釋并破壞成熟紅細(xì)胞,在血細(xì)胞計(jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù)規(guī)定區(qū)域內(nèi)的白細(xì)胞總數(shù),換算成每升血液中白細(xì)胞數(shù)。,改良牛鮑血細(xì)胞計(jì)數(shù)板及專(zhuān)用蓋片、微量吸管、帶孔吸頭、1ML刻度移液管、小試管、潔凈軟紗布、干棉球、光學(xué)顯微鏡。,大方格四邊壓線細(xì)胞數(shù)左不數(shù)右,數(shù)上不數(shù)下,,超過(guò)上述標(biāo)準(zhǔn)者為不合格,白細(xì)胞數(shù)量過(guò)高時(shí),可加大稀釋倍數(shù),白細(xì)胞數(shù)量過(guò)低時(shí),可計(jì)數(shù)8個(gè)大方格的白細(xì)胞數(shù)或取雙倍血量。,白細(xì)胞數(shù)量過(guò)高時(shí),可加大稀釋倍數(shù),白細(xì)胞數(shù)量過(guò)低時(shí),可計(jì)數(shù)8個(gè)大方格的白細(xì)胞數(shù)或取雙倍血量。,白細(xì)胞總數(shù)在參考范圍內(nèi),大方格間的細(xì)胞數(shù)不得相差10個(gè)以上,兩次重復(fù)計(jì)數(shù)誤差不得超過(guò)10。,超過(guò)上述標(biāo)準(zhǔn)者為不合格,
16、0109/L者,RCS30%,四大格所見(jiàn)白細(xì)胞最大值最小值,中央大方格四角和正中5個(gè)中方格為紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū),8 采血完畢,用干棉球壓住傷口,止血片刻。,采血時(shí)針刺深度必須適當(dāng),不能過(guò)度擠壓,防止組織液滲入或采血時(shí)間太長(zhǎng)引起血液凝固。,稀釋液和采血量要準(zhǔn)確,充分混勻,充液適量,無(wú)不足、外溢和氣泡,細(xì)胞分布均勻。,稀釋液和采血量要準(zhǔn)確,充分混勻,充液適量,無(wú)不足、外溢和氣泡,細(xì)胞分布均勻。,2拇指和中指夾住吸頭中下端,示指蓋住吸頭小孔,拇、中指輕微擠壓排出適量空氣;,8.,考核評(píng)價(jià),a.,常規(guī)考核標(biāo)準(zhǔn) (,RCS,),RCS=100%,評(píng)價(jià):白細(xì)胞,4.0,10,9,/L,者,,RCS,30%,白細(xì)胞在(,4.1-14.9,),10,9,/L,者,RCS,20%,白細(xì)胞,15.0 10,9,/L,者,RCS,15%,超過(guò)上述標(biāo)準(zhǔn)者為不合格,b.,其他方法,四大格所見(jiàn)白細(xì)胞最大值,最小值,四大格所見(jiàn)白細(xì)胞數(shù)平均值,