《蛋白質(zhì)氨基酸》PPT課件

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1、第 4章 蛋 白 質(zhì) 、 氨 基 酸 含 量 的 檢 測(cè)主 要 內(nèi) 容 第 一 節(jié) 蛋 白 質(zhì) 的 定 量 測(cè) 定 方 法 第 二 節(jié) 氨 基 氮 含 量 的 檢 測(cè) 方 法 第 三 節(jié) 多 種 氨 基 酸 的 分 離 和 測(cè) 定 第 四 節(jié) 味 精 純 度 的 測(cè) 定 方 法 第 一 節(jié) 蛋 白 質(zhì) 含 量 的 測(cè) 定一 、 蛋 白 質(zhì) 概 況 蛋 白 質(zhì) 是 含 氮 的 有 機(jī) 化 合 物 ， 分 子 量 很 大 。主 要 由 C、 H、 O、 N、 S五 種 元 素 組 成 。 某 些 蛋 白質(zhì) 中 還 含 有 微 量 的 P、 Cu、 Fe、 I 等 。 樣 品 中 蛋 白 質(zhì) 含 量

2、 的 測(cè) 定 ， 主 要 （ 也 是 最 常 用的 ） 用 凱 氏 定 氮 法 測(cè) 定 總 氮 量 ， 然 后 乘 一 個(gè) 蛋 白 質(zhì)換 算 系 數(shù) 。 這 里 也 包 括 非 蛋 白 的 氮 ， 所 以 只 能 稱(chēng) 為粗 蛋 白 的 含 量 。 具 體 測(cè) 定 方 法（ 一 ） 凱 氏 定 氮 法 最 常 用 的 ， 國(guó) 內(nèi) 外 應(yīng) 用 普 遍 （ GB/T5009.52008 第 一 法 ） 。（ 二 ） 分 光 光 度 法 （ GB/T5009.52008 第 二 法 ）（ 三 ） 電 位 滴 定 法（ 四 ） 雙 縮 脲 反 應(yīng)（ 五 ） 杜 馬 斯 燃 燒 法 (SN/T2115-2

3、008) 進(jìn) 出 口 食 品 和 飼 料 中 總 氮 及 粗 蛋 白 的 檢 測(cè) 方 法 杜 馬 斯 燃 燒 法 二 、 蛋 白 質(zhì) 含 量 的 定 量 測(cè) 定 一 些 蛋 白 質(zhì) 的 含 氮 量 一 般 為 15%-17.6%， 有 的 上 下 浮 動(dòng) 可 以 測(cè) 出 總 氮 N（ 一 ） 凱 氏 定 氮 法 丹 麥 化 學(xué) 家 Johan Kieldahl （ 克 達(dá) 爾 ）(1849-1900)研 制 了 今 天 人 所 共 知 的 分 析有 機(jī) 物 中 氮 含 量 的 凱 氏 法 。 于 1883年 提 出 ，現(xiàn) 發(fā) 展 為 常 量 、 微 量 、 自 動(dòng) 定 氮 儀 法 及 改良 凱

4、 氏 法 。 只 介 紹 前 三 種 。16%N = N 6.25 = 蛋 白 質(zhì) 含 量 丹 麥 分 析 化 學(xué) 家 。 1849年 生 于 亞 格 普 里 斯 ,1900年 7月18日 卒 于 齊 斯 維 勒 萊 厄 。 1873年 在 哥 本 哈 根 大 學(xué) 畢 業(yè)后 ,做 過(guò) 農(nóng) 業(yè) 中 學(xué) 的 教 師 。 1875年 任 卡 爾 斯 堡 研 究 所 化學(xué) 部 負(fù) 責(zé) 人 ,1876年 任 所 長(zhǎng) ,在 研 究 所 工 作 近 20年 。 他是 丹 麥 皇 家 科 學(xué) 院 院 士 ,1884年 哥 本 哈 根 大 學(xué) 授 予 他 名譽(yù) 博 士 學(xué) 位 。 他 主 要 研 究 發(fā) 酵 化

5、 學(xué) 。 1883年 發(fā) 明 測(cè) 定有 機(jī) 化 合 物 中 氮 含 量 的 方 法 :他 將 一 定 質(zhì) 量 的 試 樣 與 硫酸 作 用 ,使 試 樣 中 的 氮 全 部 轉(zhuǎn) 變 為 硫 酸 銨 ,然 后 往 硫 酸銨 溶 液 中 加 入 堿 ,再 將 生 成 的 氨 蒸 餾 到 一 定 體 積 的 標(biāo) 準(zhǔn)酸 溶 液 中 ,再 滴 定 過(guò) 量 的 酸 ,就 能 測(cè) 出 試 樣 的 含 氮 量 。此 法 普 遍 用 于 化 學(xué) 和 醫(yī) 學(xué) 研 究 及 農(nóng) 業(yè) 生 產(chǎn) 和 藥 物 工 業(yè) 。后 人 稱(chēng) 此 法 為 克 氏 定 氮 法 。 此 法 所 用 的 儀 器 是 一 種 梨形 長(zhǎng) 頸 燒

6、瓶 ,容 量 通 常 約 300毫 升 ,微 量 分 析 用 的 可 以 小到 10毫 升 ,后 人 稱(chēng) 這 種 燒 瓶 為 克 氏 燒 瓶 。 常 量 凱 氏 定 氮 法1. 原 理 樣 品 與 濃 硫 酸 和 催 化 劑 一 同 加 熱 消 化 ， 使 蛋 白質(zhì) 分 解 ， 其 中 碳 和 氫 被 氧 化 為 二 氧 化 碳 和 水 逸 出 ，而 樣 品 中 的 有 機(jī) 氮 轉(zhuǎn) 化 為 氨 與 硫 酸 結(jié) 合 成 硫 酸 銨 。然 后 加 堿 蒸 餾 ， 使 氨 蒸 出 。 用 H3BO3吸 收 后 再 以 標(biāo) 準(zhǔn) 鹽 酸 溶 液 滴 定 。 根 據(jù)標(biāo) 準(zhǔn) 酸 消 耗 量 可 以 計(jì) 算

7、出 蛋 白 質(zhì) 的 含 量 。 也 可 以 用 過(guò) 量 的 標(biāo) 準(zhǔn) H 2SO4或 標(biāo) 準(zhǔn) 鹽 酸 溶 液 吸收 后 再 以 標(biāo) 準(zhǔn) NaOH溶 液 滴 定 過(guò) 量 的 酸 。 整 個(gè) 過(guò) 程 分 三 步 ： 消 化 、 蒸 餾 、 吸 收 與 滴 定 、 消 化 總 反 應(yīng) 式 ：（ 1） 加 硫 酸 鉀 作 為 增 溫 劑 ， 提 高 溶 液 沸 點(diǎn) ，純 硫 酸 沸 點(diǎn) 340 ， 加 入 硫 酸 鉀 之 后 可 以 提 高至 400 以 上 。 也 可 加 入 硫 酸 鈉 ， 氯 化 鉀 等 提高 沸 點(diǎn) ， 但 效 果 不 如 硫 酸 鉀 。2NH2（ CH2） 2COOH+13H2

8、SO4 （ NH4） 2SO4+6CO2+12SO2+16H2O一 定 要 用 濃 硫 酸 （ 98%） （ 2） 加 硫 酸 銅 作 為 催 化 劑 。 還 可 以 作 消 化終 點(diǎn) 指 示 劑 （ 做 蒸 餾 時(shí) 堿 性 指 示 劑 ） 。 還 可 以加 氧 化 汞 、 汞 （ 均 有 毒 ， 價(jià) 格 貴 ） 、 硒 粉 、 二氧 化 鈦 。（ 3） 加 氧 化 劑 如 雙 氧 水 、 次 氯 酸 鉀 等 加 速 有機(jī) 物 氧 化 速 度 。 右 圖 為 消 化 裝置 、 蒸 餾 消 化 液 + 400g/L氫 氧化 鈉 加 熱 蒸餾 ， 放 出 氨氣 。 、 吸 收 與 滴 定（ 1）

9、用 20g/L硼 酸 吸 收 ， 用 鹽 酸 標(biāo) 準(zhǔn) 溶 液 滴 定 ，指 示 劑 用 混 合 指 示 劑 （ 甲 基 紅 溴 甲 酚 綠 混 合指 示 劑 ） 或 亞 甲 基 藍(lán) 甲 基 紅 。 指 示 劑 紫 紅 色 亮 綠 色 暗 灰 色 （ 酸 ） （ 堿 ） （ 酸 ） 2NH 3 + 4H3BO3 =（ NH4） 2B4O7 + 5H2O （ NH4） 2B4O7 + 2HCl + 5H2O = 2NH4Cl + 4H3BO3或 （ 2） 用 過(guò) 量 的 H2SO4 或 HCl 標(biāo) 準(zhǔn) 溶 液 吸 收 ，再 用 NaOH 標(biāo) 準(zhǔn) 溶 液 滴 定 過(guò) 剩 的 酸 液 。吸 收 滴 定

10、 結(jié) 果 計(jì) 算 ： 蛋 白 質(zhì) （ %） = 100 注 意 ： F氮 換 算 為 蛋 白 質(zhì) 的 系 數(shù) ， 一 般 為 6.25， 玉 米 、 高 粱 為 6.24， 大 豆 及 其 制 品 為5.71， 大 麥 為 5.83。 說(shuō) 明 ： 整 個(gè) 消 化 過(guò) 程 要 在 通 風(fēng) 櫥 進(jìn) 行 。 消 化 時(shí) 不 要 用 強(qiáng) 火 ， 應(yīng) 保 持 和 緩 沸 騰 ， 以 免粘 貼 在 凱 氏 瓶 內(nèi) 壁 上 的 含 氮 化 合 物 在 無(wú) 硫 酸存 在 的 情 況 下 消 化 不 完 全 而 造 成 氮 損 失 。 消 化 時(shí) ， 作 空 白 試 驗(yàn) 。 Fm cVV 014.0)( 0 消

11、 化 時(shí) 應(yīng) 注 意 不 時(shí) 轉(zhuǎn) 動(dòng) 凱 氏 燒 瓶 ， 以 便 利 用 冷凝 酸 液 將 附 在 瓶 壁 上 的 固 體 殘 渣 洗 下 ， 并 促 進(jìn) 其 消化 完 全 。 當(dāng) 樣 品 消 化 液 不 易 澄 清 透 明 時(shí) ， 可 將 凱 氏 燒 瓶冷 卻 ， 加 入 30 過(guò) 氧 化 氫 2-3 mL 后 再 繼 續(xù) 加熱 消 化 。 一 般 消 化 至 呈 透 明 后 ， 繼 續(xù) 消 化 30分 鐘 即 可 ，但 對(duì) 于 含 有 特 別 難 以 氨 化 的 氮 化 合 物 的 樣品 如 含 賴(lài) 氨 酸 、 組 氨 酸 、 色 氨 酸 、 酪 氨 酸 或脯 氨 酸 等 時(shí) ， 需 適

12、當(dāng) 延 長(zhǎng) 消 化 時(shí) 間 。 有 機(jī) 物 如分 解 完 全 ， 消 化 液 呈 藍(lán) 色 或 淺 綠 色 ， 但 含 鐵 量多 時(shí) ， 呈 較 深 綠 色 。 蒸 餾 裝 置 不 能 漏 氣 。 蒸 餾 前 若 加 堿 量 不 足 ， 消 化 液 呈 藍(lán) 色 不 生 成 氫氧 化 銅 沉 淀 ， 此 時(shí) 需 再 增 加 氫 氧 化 鈉 用 量 。 蒸 餾 完 畢 后 ， 應(yīng) 先 將 冷 凝 管 下 端 提 離 液 面 清 洗管 口 ， 再 蒸 1分 鐘 后 關(guān) 掉 熱 源 否 則 可 能 造 成 吸 收液 倒 吸 。 硼 酸 吸 收 液 的 溫 度 不 能 超 過(guò) 40 。 混 合 指 示 劑

13、 在 pH5.2時(shí) 為 紫 紅 色 ， pH5.4時(shí) 為暗 灰 色 ， pH5.6時(shí) 為 亮 綠 色 ， 變 色 點(diǎn) 為 pH5.4，指 示 劑 變 色 范 圍 很 窄 ， 靈 敏 度 高 。 微 量 凱 氏 定 氮 法1、 原 理 及 適 用 范 圍 同 前2、 與 常 量 法 不 同 點(diǎn) ：加 入 硼 酸 量 由 50 ml 10 ml,滴 定 用 鹽 酸 濃 度 由 0.1 mol/L 0.01 mol/L ,常 量 法 全 量 蒸 餾 ， 微 量 法 少 部 分 蒸 餾 。微 量 法 用 微 量 滴 定 管 滴 定 。3、 蒸 餾 裝 置 下 圖 。 問(wèn) 題 ： 用 微 量 凱 氏 定

14、 氮 法 測(cè) 定 一 樣 品 的 蛋 白 質(zhì) 含 量時(shí) ， 測(cè) 定 結(jié) 果 比 實(shí) 際 值 偏 低 ， 試 分 析 其 可 能 的 原 因 ？ 應(yīng) 用 實(shí) 例 ： 1、 醬 油 中 全 氮 含 量 的 測(cè) 定 2、 乳 與 乳 制 品 中 非 蛋 白 氮 含 量 的 測(cè) 定 （ GB/T 21704-2008） 3、 麥 芽 中 庫(kù) 爾 巴 哈 值 ;蛋 白 質(zhì) 區(qū) 分 （ 1） 庫(kù) 爾 巴 哈 值 ： 制 麥 過(guò) 程 中 蛋 白 質(zhì) 的 溶 解 度 ，用 可 溶 性 氮 占 總 氮 的 比 值 表 示 。 （ 2） 啤 酒 中 蛋 白 質(zhì) 區(qū) 分 自 動(dòng) 凱 氏 定 氮 法1、 原 理 及

15、適 用 范 圍 : 同 前 2、 特 點(diǎn) ：（ 1） 消 化 裝 置 用 優(yōu) 質(zhì) 玻 璃 制 成 的 凱 氏 消 化 瓶 ， 紅 外線(xiàn) 加 熱 的 消 化 爐 。（ 2） 快 速 ： 一 次 可 同 時(shí) 消 化 8-24個(gè) 樣 品 。（ 3） 自 動(dòng) ： 自 動(dòng) 加 堿 蒸 餾 ， 自 動(dòng) 吸 收 和 滴 定 ， 自 動(dòng)數(shù) 字 顯 示 裝 置 。 可 計(jì) 算 總 氮 百 分 含 量 并 記 錄 ， 幾 分 鐘完 成 1個(gè) 樣 。 福 斯 2300 北 京 福 德 泰 和 科 技 有 限 公 司產(chǎn) 品 名 稱(chēng) ： 凱 氏 定 氮 儀 （ 二 ） 分 光 光 度 法 （ 乙 酰 丙 酮 比 色 法

16、 ） 1、 原 理 （ 1） 樣 品 消 化 硫 酸 銨 。 （ 2） 在 pH4.8的 乙 酸 鈉 -乙 酸 緩 沖 溶 液 中 ， 銨 與 乙 酰丙 酮 和 甲 醛 反 應(yīng) 生 成 黃 色 的 3,5-二 乙 酰 -2,6-二 甲 基 -1,4-二 氫 化 吡 啶 化 合 物 。 （ 3） 在 波 長(zhǎng) 400nm處 測(cè) 定 吸 光 度 ， 與 標(biāo) 準(zhǔn) 系 列 比 較定 量 。 （ 4） 結(jié) 果 乘 以 換 算 系 數(shù) ， 即 為 蛋 白 質(zhì) 含 量 。 2、 方 法 特 點(diǎn) （ 1） 操 作 簡(jiǎn) 便 （ 2） 適 合 大 批 量 樣 品 蛋 白 質(zhì) 的 測(cè) 定 （ 三 ） 電 位 滴 定

17、法 1、 原 理 （ 1） 樣 品 消 化 硫 酸 銨 。 （ 2） 中 和 樣 品 至 pH8.2。 （ 3） 4 NH4 + +6HCHO (CH2)6N4+2H+ +6H2O （ 4） 2H+ +OH- H2O 2、 方 法 特 點(diǎn) （ 四 ） 雙 縮 脲 法 傳 統(tǒng) 的 凱 氏 定 氮 法 應(yīng) 用 范 圍 廣 ， 靈 敏 度 高 、準(zhǔn) 確 ， 不 要 大 儀 器 ， 但 費(fèi) 時(shí) 間 ， 有 環(huán) 境 污 染 。 新 開(kāi) 發(fā) 的 ： 雙 縮 脲 法 （ 由 農(nóng) 業(yè) 部 于 2008.10.20發(fā) 布 并 實(shí) 施 ） 適 合 于 乳 與 乳 制 品 中 蛋 白 質(zhì) 含 量 的 測(cè) 定 。 1

18、. 原 理脲 （ 尿 素 ） NH2CONH2 加 熱 至 150160 時(shí) ， 兩分 子 縮 合 成 雙 縮 脲 。雙 縮 脲 能 和 硫 酸 銅 的 堿 性 溶 液 生 成 紫 色 絡(luò) 合 物 ， 這種 反 應(yīng) 叫 雙 縮 脲 反 應(yīng) 。 （ 縮 二 脲 反 應(yīng) ）蛋 白 質(zhì) 分 子 中 含 有 肽 鍵 CONH 與 雙 縮 脲 結(jié) 構(gòu)相 似 。 在 同 樣 條 件 下 也 有 呈 色 反 應(yīng) ， 在 一 定 條 件 下 ，其 顏 色 深 淺 與 蛋 白 質(zhì) 含 量 成 正 比 ， 可 用 分 光 光 度 計(jì)來(lái) 測(cè) 其 吸 光 度 ， 確 定 含 量 。 （ 540nm）NH2CONHCO

19、NH2 + NH3NH2CONH2 + NH2CONH2 2.應(yīng) 用 乳 與 乳 制 品 中 蛋 白 質(zhì) 的 測(cè) 定 雙 縮 脲 比 色 法 （ NY/T 1678-2008） （ 五 ） 杜 馬 斯 燃 燒 法 1、 原 理 待 測(cè) 樣 本 在 純 氧 （ 99.99%） 環(huán) 境 中 高 溫燃 燒 ， 將 其 所 含 的 有 機(jī) 氮 和 無(wú) 機(jī) 氮 全 部 轉(zhuǎn) 化 成氮 的 氧 化 物 后 被 還 原 劑 還 原 成 氮 氣 。 最 后 ， 用TCD檢 測(cè) 器 檢 測(cè) 氮 氣 含 量 ， 計(jì) 算 蛋 白 質(zhì) 含 量 。 2、 特 點(diǎn) ： 杜 馬 斯 燃 燒 法 不 僅 能 夠 在 4 6分

20、鐘內(nèi) 準(zhǔn) 確 地 測(cè) 定 出 樣 品 的 總 氮 含 量 ， 而 且 還 能 測(cè)定 出 凱 氏 法 所 不 能 測(cè) 定 的 硝 態(tài) 氮 。 還 能 減 少 對(duì)環(huán) 境 的 污 染 以 及 對(duì) 人 類(lèi) 健 康 的 危 害 。 第 二 節(jié) 氨 基 氮 含 量 的 檢 測(cè) 方 法一 、 甲 醛 滴 定 法 1.原 理 ： 氨 基 酸 本 身 既 有 堿 性 NH2， 又 有 酸 性 COOH ， 成 中 性 內(nèi) 鹽 ， 加 入 甲 醛 溶液 后 ， 與 NH2 結(jié) 合 ， 堿 性 消 失 ， 再 用強(qiáng) 堿 來(lái) 滴 定 COOH 基 。 2 特 點(diǎn) ： 適 用 于 發(fā) 酵 工 業(yè) ， 如 發(fā) 酵 液 中

21、 含 氨 基 氮 量 ，其 發(fā) 酵 過(guò) 程 中 氨 基 氮 量 減 少 情 況 等 （ 適 于 游 離 氨 基酸 的 測(cè) 定 ） 。3、 應(yīng) 用 實(shí) 例 釀 造 醬 油 （ GB18186-2000 ） 氨 基 氮 含 量 的 測(cè) 定 （ 1） 試 劑 a) 甲 醛 溶 液 ： 37 40 ； b) 0.05mol/L氫 氧 化 鈉 標(biāo) 準(zhǔn) 滴 定 溶 液 （ 2） 分 析 步 驟 吸 取 5.0mL樣 品 ， 置 于 100mL容 量 瓶 中 ， 加 水 至 刻 度 ，混 勻 后 吸 取 20.0mL， 置 于 200mL燒 杯 中 ， 加 水 60mL水 ， 開(kāi) 動(dòng) 磁 力 攪 拌 器 ，

22、 用 氫 氧 化 鈉 標(biāo) 準(zhǔn) 溶 液c(NaOH)=0.05mol/L滴 定 至 酸 度 計(jì) 指 示 pH8.2記 下 消 耗 氫 氧 化 鈉 標(biāo) 準(zhǔn) 滴 定 溶 液 （ 0.05mol/L）的 毫 升 數(shù) ， 可 計(jì) 算 總 酸 含 量 。 加 入 10.0mL甲 醛 溶 液 ， 混 勻 。 再 用 氫 氧 化 鈉 標(biāo) 準(zhǔn) 滴定 溶 液 （ 0.05mol/L） 繼 續(xù) 滴 定 至 pH 9.2, 記 下 消耗 氫 氧 化 鈉 標(biāo) 準(zhǔn) 滴 定 溶 液 （ 0.05mol/L） 的 毫 升 數(shù) 。 同 時(shí) 取 80mL水 ， 先 用 氫 氧 化 鈉 溶 液 （ 0.05mol/L）調(diào) 節(jié) pH

23、為 8.2， 再 加 入 10.0mL甲 醛 溶 液 ， 用 氫 氧 化鈉 標(biāo) 準(zhǔn) 滴 定 溶 液 （ 0.05mol/L） 滴 定 至 pH=9.2， 同時(shí) 做 試 劑 空 白 試 驗(yàn) 。 二 、 茚 三 酮 比 色 法 1、 原 理 ： 茚 三 酮 與 樣 品 中 的 -氨 基氮 反 應(yīng) ， 得 到 還 原 茚 三 酮 ， 再 與 氨 和 未 還原 的 茚 三 酮 反 應(yīng) ， 生 成 藍(lán) 紫 色 絡(luò) 合 物 ， 其顏 色 深 淺 與 -氨 基 氮 含 量 成 正 比 。 在570nm下 ， 測(cè) 定 吸 光 度 ， 計(jì) 算 樣 品 中 的 -氨 基 氮 含 量 。 2、 操 作 過(guò) 程 （

24、1） 取 7支 試 管 并 編 號(hào) ， 于 0號(hào) 試 管 中 加 入 蒸餾 水 2.00 mL， 于 1、 2、 3號(hào) 試 管 中 分 別 加 入 樣液 2.00 mL， 4、 5、 6號(hào) 試 管 中 分 別 加 入 甘 氨 酸標(biāo) 準(zhǔn) 使 用 液 2.00 mL。 （ 2） 7支 試 管 中 各 加 入 發(fā) 色 劑 1.00 mL， 混 勻 ，蓋 塞 ， 將 試 管 放 入 沸 水 浴 中 ， 準(zhǔn) 確 加 熱 16min， （ 3） 在 20 水 浴 中 冷 卻 20min。 再 各 加 入 碘 酸鉀 稀 釋 溶 液 5.00 mL， 充 分 搖 勻 。 （ 4） 用 空 白 液 管 調(diào) 節(jié)

25、儀 器 零 點(diǎn) ， 于 570nm波 長(zhǎng)下 ， 測(cè) 量 吸 光 度 。 3、 計(jì) 算 4、 應(yīng) 用 啤 酒 生 產(chǎn) 中 ： 麥 汁 、 麥 芽 中 -氨 基氮 的 測(cè) 定 第 三 節(jié) 多 種 氨 基 酸 的 分 離 和 測(cè) 定 一 、 氨 基 酸 自 動(dòng) 分 析 儀 法 原 理 ： 1、 使 用 陽(yáng) 離 子 交 換 樹(shù) 脂 （ 聚 苯 乙 烯經(jīng) 交 聯(lián) 再 磺 化 ） 在 色 譜 柱 進(jìn) 行 分 離 ； 2、 洗 脫 下 來(lái) 的 氨 基 酸 可 用 茚 三 酮 顯色 ， 從 而 定 量 各 種 氨 基 酸 。 10-3 二 、 HPLC 第 四 節(jié) 味 精 純 度 的 測(cè) 定 方 法 GB/T

26、8967-2007 分 析 方 法 1、 高 氯 酸 非 水 溶 液 滴 定 法 原 理 ： 在 乙 酸 存 在 下 ， 用 高 氯 酸 標(biāo) 準(zhǔn)溶 液 滴 定 樣 品 中 的 谷 氨 酸 鈉 ， 以 電 位 滴定 法 確 定 其 終 點(diǎn) ， 或 以 -萘 酚 苯 基 甲 醇為 指 示 劑 ， 滴 定 溶 液 至 綠 色 為 終 點(diǎn) 。 2、 旋 光 法 本 章 復(fù) 習(xí) 題1、 為 什 么 凱 氏 定 氮 法 測(cè) 定 出 的 蛋 白 質(zhì) 含 量 為 粗 蛋 白含 量 ？2、 凱 氏 定 氮 法 測(cè) 定 蛋 白 質(zhì) 的 原 理 及 所 用 試 劑 的 作 用 ？3、 用 微 量 凱 氏 定 氮 法

27、 測(cè) 定 一 樣 品 的 蛋 白 質(zhì) 含 量 時(shí) ，測(cè) 定 結(jié) 果 比 實(shí) 際 值 偏 低 ， 試 分 析 其 可 能 的 原 因 ？4、 試 述 粗 蛋 白 質(zhì) 測(cè) 定 中 ， 樣 品 消 化 過(guò) 程 中 必 須 注 意的 事 項(xiàng) ？5、 試 比 較 凱 氏 定 氮 法 與 其 他 幾 種 常 用 蛋 白 質(zhì) 定 量 方法 的 優(yōu) 缺 點(diǎn) ？6、 說(shuō) 明 甲 醛 滴 定 法 測(cè) 定 氨 基 氮 的 原 理 及 操 作 要 點(diǎn) ？7、 雙 縮 脲 法 測(cè) 定 蛋 白 質(zhì) 原 理 ？8、 味 精 純 度 的 測(cè) 定 方 法 有 哪 些 ？ 作 業(yè) 題1、 常 用 的 樣 品 預(yù) 處 理 方 法 有 哪 些 ？ 其 中 有 機(jī) 物 破 壞法 各 有 什 么 優(yōu) 缺 點(diǎn) ？ 2、 試 述 藍(lán) -愛(ài) 儂 法 測(cè) 定 葡 萄 酒 中 總 糖 的 原 理 及 注 意事 項(xiàng) ？3、 用 微 量 凱 氏 定 氮 法 測(cè) 定 一 樣 品 的 蛋 白 質(zhì) 含 量 時(shí) ，測(cè) 定 結(jié) 果 比 實(shí) 際 值 偏 低 ， 試 分 析 其 可 能 的 原 因 ？