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1、單擊此處編輯母版標題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,2017/1/12,#,生物安全實驗室操作規(guī)范,2009,年，北京理工大學爆炸事故,原因：厭氧培養(yǎng)箱壓力不穩(wěn)定,2015,年，清華大學實驗室爆炸事故,原因：氫氣瓶爆炸起火,2008,年，云南大學實驗室發(fā)生化學爆炸，導致一名男博士毀容斷掌,2010,年，東北農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學實驗室因未按規(guī)定對山羊標本進行檢疫，導致,28,人感染嚴重布魯氏桿菌傳染。,生物危險,輻射危險,個體防護,危險廢物的處理,常用儀器使用的注意事項,化學危險,主要是由標本攜帶的可傳染病毒等,生物危險,生物安全實驗室（,Biosafety labo
2、ratory,）是通過實驗室設(shè)計建造、實驗設(shè)備的配置、個人防護裝備的使用，通過嚴格遵守預先制定的標準操作程序和管理規(guī)范等綜合措施，確保操作生物危險因子的工作人員不受實驗對象的傷害，確保周圍環(huán)境不受其污染的實驗室。,根據(jù)實驗室生物安全防護等級分為：,BSL-1,（最低）：適用于通常情況下不會引起人畜疾病的微生物,BSL-2,：適合與從事對人和環(huán)境有中度危害的生物因子的工作。,BSL-3,：適用于主要通過呼吸途徑吸入使人傳染上嚴重的甚至是致死疾病的微生物及其毒素。,BSL-4,（最高）：適用于對人體、動植物或環(huán)境具有高度的危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，目前尚無有效疫苗或治療方法的致病性
3、微生物或未知傳播風險的有關(guān)病原體及其毒素,臨床樣本均具有不同程度的潛在傳染性,血液傳播性病原體（如,HBV,和,HIV,）的操作應(yīng)在,BSL-2,下進行,應(yīng)由受過培訓的人員采集患者的血樣,操作時應(yīng)戴手套及眼睛和粘膜的保護裝置,血液和血清應(yīng)當小心吸取，不能傾倒,適當?shù)南緞﹣砬逑磭姙R和溢出的標本,感染性廢物應(yīng)經(jīng)過滅菌和焚燒處理,實驗室常見化學危險品及標識,化學危險,乙醚、乙醇、乙醛、苯、甲醇,強酸（濃鹽酸、濃硫酸）、強堿（氫氧化鈉）或其他腐蝕品（氯化銅、甲醛溶液）,受熱、受壓或撞擊時產(chǎn)生爆炸或燃燒，如疊氮鈉、,TNT,高溫、摩擦、撞擊等易燃燒，甚至爆炸，如硝酸鹽等,釙、鐳、鈷等，高毒甚至劇毒,揮
4、發(fā)性強，可以通過口鼻等進入身體危害健康,Trizol,含有苯酚，有毒性和刺激性，應(yīng)避免皮膚接觸。眼睛接觸可能導致失明，皮膚大量接觸可能致死。如不慎接觸皮膚，應(yīng)立即用大量去垢劑和水沖洗。,溴化乙錠,(EB,),強誘變劑，嵌入堿基分子中導致錯配，高致癌性。應(yīng)避免皮膚接觸或者吸入，操作時穿戴合適的防護服、手套和護目鏡。,焦磷酸二乙酯（,DEPC,）,是一種潛在的蛋白質(zhì)變質(zhì)劑，且為可疑的致癌劑。開啟時瓶口不要指向操作者或其他人。瓶內(nèi)壓可導致噴濺。戴好手套并穿實驗室工作服，在通風櫥內(nèi)操作。,三羥甲基氨基甲烷,(,Tris,),吸入，攝入，皮膚吸收可造成傷害。戴好手套、口罩和護目鏡,氯仿（三氯甲烷）,刺激
5、眼睛、呼吸道、皮膚和黏膜，為一種致癌劑。有肝、腎毒性。有揮發(fā)性。避免吸入蒸汽。戴好手套和護目鏡。在通風櫥內(nèi)操作。,生物實驗室常見危險品,-,巰基乙醇,吸入或皮膚吸收可致命，攝入有害。高濃度溶液對黏膜、上呼吸道、皮膚和眼睛有極大損害。,-,巰基乙醇有難聞氣味,，,應(yīng)戴好手套和護目鏡,，,在通風櫥內(nèi)操作。,丙烯酰胺,為一種潛在的神經(jīng)毒素，可通過皮膚吸收（有累積效應(yīng)）。,應(yīng),戴好手套和面罩，在化學通風櫥內(nèi)操作。,蛋白酶,K,有刺激性。吸入，攝入，皮膚吸收可造成傷害。戴好手套口罩和護目鏡。,四甲基乙烯二胺（,TEMED,）,易燃易揮發(fā)，具有腐蝕性和強神經(jīng)毒性。避免皮膚接觸和吸入。,過硫酸銨,對黏膜組織
6、、上呼吸道、眼睛和皮膚有極大的破壞性。吸入可致命。戴好手套和護目鏡，穿好防護服。必須在化學通風櫥內(nèi)操作。操作后要徹底清洗。,十二烷基硫酸鈉（,SDS,）,有毒性和刺激性，有嚴重損傷眼睛的危險。吸入，攝入，皮膚吸收可造成損傷。戴好手套和護目鏡，不要吸入粉塵。,甲醇,有毒，可致失明。吸入，攝入，皮膚吸收可造成傷害。要有足夠的通風以減少揮發(fā)氣。不要吸入這些氣體。戴好手套和護目鏡，在化學通風櫥內(nèi)操作。,丙酮,易燃易揮發(fā)，對眼鼻喉有刺激性，對中樞神經(jīng)有一定的麻醉作用，避免皮膚接觸或吸入。,甲醛,有劇毒性和揮發(fā)性。也是一種致癌劑?？赏ㄟ^皮膚吸收，對皮膚、眼睛、黏膜和上呼吸道有刺激或損傷。避免吸入氣體。戴好
7、手套和護目鏡。始終在通風櫥內(nèi)操作。遠離熱源、火花和明火。,過氧化氫,有腐蝕性、毒性，對皮膚有強損害性。吸入，攝入，皮膚吸收可造成傷害。戴好手套和護目鏡，只在化學通風櫥內(nèi)操作。,苯酚,有劇毒性和高度腐蝕性，可致嚴重燒傷。吸入，攝入，皮膚吸收可造成傷害。戴好合適的手套和護目鏡，穿好防護服，在通風櫥內(nèi)操作。若有皮膚接觸藥物，可用大量清水沖洗，并用肥皂和水清洗，不要用乙醇洗。,化學品的存儲,在適宜的溫度和濕度下儲存化學品，須,遠離高熱源,，,如烤箱,；避免陽光直射，如靠近窗臺,定期目測原料和包裝容器：顏色、是否溢出、腐蝕等,不得將化學品存放在實驗臺上，防止被碰倒,不得將化學品存放在地面上，即使是臨時放
8、置也不允許,不能將通風櫥用作化學品的存放地，以免破壞通風櫥的通風效果,不得將易漏有害性或腐蝕性化學品存放在視力水平以上的藥品架上,主要是,紫外線,（,UV,）,超凈工作臺,瓊脂糖凝膠電泳成像系統(tǒng),紫外滅菌后一定要關(guān)閉紫外燈，并且打開鼓風,瓊脂糖凝膠回收時一定要加放紫外擋板或者佩戴防護鏡。,輻射危險,個體防護,實驗室人員進出,進入,退出,公共,清潔區(qū),更衣室,緩沖間,污染區(qū),污染區(qū),緩沖間,更衣室,公共,清潔區(qū),淋浴間,在進行可能接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動物的操作時，應(yīng)戴上合適的手套。,手套用完后，應(yīng)先消毒再摘除，隨后必,須,認真,洗,手,。在,處理完感染性實驗材料和
9、動物后，以及在離開實驗室工作區(qū)域前，都必須洗手,。,禁止非工作人員人進入實驗室，或必須經(jīng)實驗室負責人同意后方可進入。,在實驗室工作區(qū),禁止吸煙,。禁止在實驗室放置食物、飲料及類似的存在有潛在的從手到口的接觸途徑的其他物質(zhì)。禁止用實驗室的冰箱（柜）等儲存?zhèn)€人物品。,在實驗室工作區(qū)應(yīng),穿實驗服或防護服,，服裝應(yīng)符合實驗室設(shè)備的要求,鞋子應(yīng)具有一定的防滑功能。處理腐蝕性或毒性物質(zhì)時必須做好防護工作,應(yīng)使用安全鏡、面罩或其他的眼睛和面部防護用品。,嚴禁穿著實驗室服離開實驗室工作區(qū)域,。,在實驗工作區(qū)頭發(fā)不可下垂，避免與污染物質(zhì)接觸或影響實驗操作，有此類危險的飾物應(yīng)避免帶入工作區(qū)。不可留長胡須。,常用儀
10、器使用的注意事項,離心機,在裝載離心管后應(yīng),正確平衡,離心管應(yīng)始終牢固蓋緊,放置好離心管后蓋上蓋子才可開始離心,離心機放置高度應(yīng)使實驗人員能看到離心機內(nèi)部,有危險性的微生物，必須使用可封口的離心桶,高壓滅菌鍋,滅菌條件組合,134,o,C 3min,，,126,o,C 10min,，,121,o,C 15min,，,115,o,C 25min,注意事項,物品應(yīng)放在空氣能排出并具有良好滲透性的容器中，,包裝稍松散，,待滅菌的物品放置不宜過緊。,滅菌完畢后，不可放氣減壓，否則瓶內(nèi)液體會劇烈沸騰，沖掉瓶塞而外溢甚至導致容器爆裂。,待溫度下降到,80,以下后才可打開門取出物品。,烘箱,烘箱嚴禁烘焙易燃
11、、易爆物品。,使用烘箱時注意底層散熱板上不能放置物品。,烘箱內(nèi)物品不要塞得過滿，以免影響熱氣流流通。,當烘箱進行高溫烘焙時（如,200,以上），嚴禁直接打開箱門。冷空氣突然進入可能使玻璃門及烘箱內(nèi)玻璃制品因驟冷而破裂。,烘箱周圍,2,米范圍內(nèi)不得放置或堆積任何易燃、易爆、易揮發(fā)性物品，如：汽油、紙類、二甲苯、稀釋劑等。,烘箱溫度不能超過最高閾值。當利用烘箱滅菌需要較高溫度（,160,以上）時，不能放置紙、棉塞等低燃點易燃物。,嚴禁過夜使用烘箱，因為當烘箱溫控系統(tǒng)出現(xiàn)故障時會導致溫度不斷升高，容易引發(fā)安全事故。,應(yīng)在每個工作臺上放置盛放廢棄物的容器、盤子或廣口瓶，最好是不易破碎的容器,(,如塑料
12、制品,),。當使用消毒劑時，應(yīng)使廢棄物充分接觸消毒劑,(,即不能有氣泡阻隔,),，并根據(jù)所使用消毒劑的不同保持適當接觸時間。盛放廢棄物的容器在重新使用前應(yīng)高壓滅菌并清洗。,廢棄物的處理,尿、胸水、腹水、腦脊液、涎液、胃液、腸液、關(guān)節(jié)腔液等在含有效氯消毒液中作用半小時以上，隨后交由有資質(zhì)的醫(yī)療廢棄物處理機構(gòu)進行處理。,痰、膿、血、糞,(,包括動物糞便,),及其他液體標本在含有效氯消毒液中作用,2,小時以上后交由有資質(zhì)的醫(yī)療廢棄物處理機構(gòu)進行處理。,對廢酸、廢堿等廢液采用中和法、稀釋法等稀釋至,pH,值為中性時方可排入下水道。,液體廢棄標本,帶有血凝塊等的廢棄樣品管，在加蓋后應(yīng)當放在適當?shù)姆缆┤萜鲀?nèi)高壓滅菌和,(,或,),焚燒。,固體廢棄物標本,剩余標本，如組織器官、動物尸體、檢驗后的廢棄標本及其容器，如塑料袋、紙袋,，應(yīng)及時交由醫(yī)療廢棄物處理機構(gòu)處理。,檢驗剩余的標本及使用過的帶菌平板、試管均須集中地點安全放置，經(jīng)消,毒后交由醫(yī)療廢棄物處理機構(gòu)處理。操,作區(qū)須備有消毒缸，以處理沾有活菌的玻片等污染物品。,皮下注射針頭用過后不應(yīng)再重復使用，包括不能從注射器上取下、回套針頭護套、截斷等，應(yīng)將其完整地置于盛放銳器的一次性容器,中，交由醫(yī)療廢棄物處理機構(gòu)處理。,
生物安全實驗室操作技術(shù)規(guī)范
