生物安全實(shí)驗(yàn)室操作技術(shù)規(guī)范

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1、單擊此處編輯母版標(biāo)題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,2017/1/12,#,生物安全實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范,2009,年，北京理工大學(xué)爆炸事故,原因：厭氧培養(yǎng)箱壓力不穩(wěn)定,2015,年，清華大學(xué)實(shí)驗(yàn)室爆炸事故,原因：氫氣瓶爆炸起火,2008,年，云南大學(xué)實(shí)驗(yàn)室發(fā)生化學(xué)爆炸，導(dǎo)致一名男博士毀容斷掌,2010,年，東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室因未按規(guī)定對山羊標(biāo)本進(jìn)行檢疫，導(dǎo)致,28,人感染嚴(yán)重布魯氏桿菌傳染。,生物危險,輻射危險,個體防護(hù),危險廢物的處理,常用儀器使用的注意事項(xiàng),化學(xué)危險,主要是由標(biāo)本攜帶的可傳染病毒等,生物危險,生物安全實(shí)驗(yàn)室（,Biosafety labo

2、ratory,）是通過實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)建造、實(shí)驗(yàn)設(shè)備的配置、個人防護(hù)裝備的使用，通過嚴(yán)格遵守預(yù)先制定的標(biāo)準(zhǔn)操作程序和管理規(guī)范等綜合措施，確保操作生物危險因子的工作人員不受實(shí)驗(yàn)對象的傷害，確保周圍環(huán)境不受其污染的實(shí)驗(yàn)室。,根據(jù)實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)等級分為：,BSL-1,（最低）：適用于通常情況下不會引起人畜疾病的微生物,BSL-2,：適合與從事對人和環(huán)境有中度危害的生物因子的工作。,BSL-3,：適用于主要通過呼吸途徑吸入使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的微生物及其毒素。,BSL-4,（最高）：適用于對人體、動植物或環(huán)境具有高度的危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明，目前尚無有效疫苗或治療方法的致病性

3、微生物或未知傳播風(fēng)險的有關(guān)病原體及其毒素,臨床樣本均具有不同程度的潛在傳染性,血液傳播性病原體（如,HBV,和,HIV,）的操作應(yīng)在,BSL-2,下進(jìn)行,應(yīng)由受過培訓(xùn)的人員采集患者的血樣,操作時應(yīng)戴手套及眼睛和粘膜的保護(hù)裝置,血液和血清應(yīng)當(dāng)小心吸取，不能傾倒,適當(dāng)?shù)南緞﹣砬逑磭姙R和溢出的標(biāo)本,感染性廢物應(yīng)經(jīng)過滅菌和焚燒處理,實(shí)驗(yàn)室常見化學(xué)危險品及標(biāo)識,化學(xué)危險,乙醚、乙醇、乙醛、苯、甲醇,強(qiáng)酸（濃鹽酸、濃硫酸）、強(qiáng)堿（氫氧化鈉）或其他腐蝕品（氯化銅、甲醛溶液）,受熱、受壓或撞擊時產(chǎn)生爆炸或燃燒，如疊氮鈉、,TNT,高溫、摩擦、撞擊等易燃燒，甚至爆炸，如硝酸鹽等,釙、鐳、鈷等，高毒甚至劇毒,揮

4、發(fā)性強(qiáng)，可以通過口鼻等進(jìn)入身體危害健康,Trizol,含有苯酚，有毒性和刺激性，應(yīng)避免皮膚接觸。眼睛接觸可能導(dǎo)致失明，皮膚大量接觸可能致死。如不慎接觸皮膚，應(yīng)立即用大量去垢劑和水沖洗。,溴化乙錠,(EB,),強(qiáng)誘變劑，嵌入堿基分子中導(dǎo)致錯配，高致癌性。應(yīng)避免皮膚接觸或者吸入，操作時穿戴合適的防護(hù)服、手套和護(hù)目鏡。,焦磷酸二乙酯（,DEPC,）,是一種潛在的蛋白質(zhì)變質(zhì)劑，且為可疑的致癌劑。開啟時瓶口不要指向操作者或其他人。瓶內(nèi)壓可導(dǎo)致噴濺。戴好手套并穿實(shí)驗(yàn)室工作服，在通風(fēng)櫥內(nèi)操作。,三羥甲基氨基甲烷,(,Tris,),吸入，攝入，皮膚吸收可造成傷害。戴好手套、口罩和護(hù)目鏡,氯仿（三氯甲烷）,刺激

5、眼睛、呼吸道、皮膚和黏膜，為一種致癌劑。有肝、腎毒性。有揮發(fā)性。避免吸入蒸汽。戴好手套和護(hù)目鏡。在通風(fēng)櫥內(nèi)操作。,生物實(shí)驗(yàn)室常見危險品,-,巰基乙醇,吸入或皮膚吸收可致命，攝入有害。高濃度溶液對黏膜、上呼吸道、皮膚和眼睛有極大損害。,-,巰基乙醇有難聞氣味,，,應(yīng)戴好手套和護(hù)目鏡,，,在通風(fēng)櫥內(nèi)操作。,丙烯酰胺,為一種潛在的神經(jīng)毒素，可通過皮膚吸收（有累積效應(yīng)）。,應(yīng),戴好手套和面罩，在化學(xué)通風(fēng)櫥內(nèi)操作。,蛋白酶,K,有刺激性。吸入，攝入，皮膚吸收可造成傷害。戴好手套口罩和護(hù)目鏡。,四甲基乙烯二胺（,TEMED,）,易燃易揮發(fā)，具有腐蝕性和強(qiáng)神經(jīng)毒性。避免皮膚接觸和吸入。,過硫酸銨,對黏膜組織

6、、上呼吸道、眼睛和皮膚有極大的破壞性。吸入可致命。戴好手套和護(hù)目鏡，穿好防護(hù)服。必須在化學(xué)通風(fēng)櫥內(nèi)操作。操作后要徹底清洗。,十二烷基硫酸鈉（,SDS,）,有毒性和刺激性，有嚴(yán)重?fù)p傷眼睛的危險。吸入，攝入，皮膚吸收可造成損傷。戴好手套和護(hù)目鏡，不要吸入粉塵。,甲醇,有毒，可致失明。吸入，攝入，皮膚吸收可造成傷害。要有足夠的通風(fēng)以減少揮發(fā)氣。不要吸入這些氣體。戴好手套和護(hù)目鏡，在化學(xué)通風(fēng)櫥內(nèi)操作。,丙酮,易燃易揮發(fā)，對眼鼻喉有刺激性，對中樞神經(jīng)有一定的麻醉作用，避免皮膚接觸或吸入。,甲醛,有劇毒性和揮發(fā)性。也是一種致癌劑。可通過皮膚吸收，對皮膚、眼睛、黏膜和上呼吸道有刺激或損傷。避免吸入氣體。戴好

7、手套和護(hù)目鏡。始終在通風(fēng)櫥內(nèi)操作。遠(yuǎn)離熱源、火花和明火。,過氧化氫,有腐蝕性、毒性，對皮膚有強(qiáng)損害性。吸入，攝入，皮膚吸收可造成傷害。戴好手套和護(hù)目鏡，只在化學(xué)通風(fēng)櫥內(nèi)操作。,苯酚,有劇毒性和高度腐蝕性，可致嚴(yán)重?zé)齻?。吸入，攝入，皮膚吸收可造成傷害。戴好合適的手套和護(hù)目鏡，穿好防護(hù)服，在通風(fēng)櫥內(nèi)操作。若有皮膚接觸藥物，可用大量清水沖洗，并用肥皂和水清洗，不要用乙醇洗。,化學(xué)品的存儲,在適宜的溫度和濕度下儲存化學(xué)品，須,遠(yuǎn)離高熱源,，,如烤箱,；避免陽光直射，如靠近窗臺,定期目測原料和包裝容器：顏色、是否溢出、腐蝕等,不得將化學(xué)品存放在實(shí)驗(yàn)臺上，防止被碰倒,不得將化學(xué)品存放在地面上，即使是臨時放

8、置也不允許,不能將通風(fēng)櫥用作化學(xué)品的存放地，以免破壞通風(fēng)櫥的通風(fēng)效果,不得將易漏有害性或腐蝕性化學(xué)品存放在視力水平以上的藥品架上,主要是,紫外線,（,UV,）,超凈工作臺,瓊脂糖凝膠電泳成像系統(tǒng),紫外滅菌后一定要關(guān)閉紫外燈，并且打開鼓風(fēng),瓊脂糖凝膠回收時一定要加放紫外擋板或者佩戴防護(hù)鏡。,輻射危險,個體防護(hù),實(shí)驗(yàn)室人員進(jìn)出,進(jìn)入,退出,公共,清潔區(qū),更衣室,緩沖間,污染區(qū),污染區(qū),緩沖間,更衣室,公共,清潔區(qū),淋浴間,在進(jìn)行可能接觸到血液、體液以及其他具有潛在感染性的材料或感染性動物的操作時，應(yīng)戴上合適的手套。,手套用完后，應(yīng)先消毒再摘除，隨后必,須,認(rèn)真,洗,手,。在,處理完感染性實(shí)驗(yàn)材料和

9、動物后，以及在離開實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域前，都必須洗手,。,禁止非工作人員人進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，或必須經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人同意后方可進(jìn)入。,在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū),禁止吸煙,。禁止在實(shí)驗(yàn)室放置食物、飲料及類似的存在有潛在的從手到口的接觸途徑的其他物質(zhì)。禁止用實(shí)驗(yàn)室的冰箱（柜）等儲存?zhèn)€人物品。,在實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)應(yīng),穿實(shí)驗(yàn)服或防護(hù)服,，服裝應(yīng)符合實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的要求,鞋子應(yīng)具有一定的防滑功能。處理腐蝕性或毒性物質(zhì)時必須做好防護(hù)工作,應(yīng)使用安全鏡、面罩或其他的眼睛和面部防護(hù)用品。,嚴(yán)禁穿著實(shí)驗(yàn)室服離開實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)域,。,在實(shí)驗(yàn)工作區(qū)頭發(fā)不可下垂，避免與污染物質(zhì)接觸或影響實(shí)驗(yàn)操作，有此類危險的飾物應(yīng)避免帶入工作區(qū)。不可留長胡須。,常用儀

10、器使用的注意事項(xiàng),離心機(jī),在裝載離心管后應(yīng),正確平衡,離心管應(yīng)始終牢固蓋緊,放置好離心管后蓋上蓋子才可開始離心,離心機(jī)放置高度應(yīng)使實(shí)驗(yàn)人員能看到離心機(jī)內(nèi)部,有危險性的微生物，必須使用可封口的離心桶,高壓滅菌鍋,滅菌條件組合,134,o,C 3min,，,126,o,C 10min,，,121,o,C 15min,，,115,o,C 25min,注意事項(xiàng),物品應(yīng)放在空氣能排出并具有良好滲透性的容器中，,包裝稍松散，,待滅菌的物品放置不宜過緊。,滅菌完畢后，不可放氣減壓，否則瓶內(nèi)液體會劇烈沸騰，沖掉瓶塞而外溢甚至導(dǎo)致容器爆裂。,待溫度下降到,80,以下后才可打開門取出物品。,烘箱,烘箱嚴(yán)禁烘焙易燃

11、、易爆物品。,使用烘箱時注意底層散熱板上不能放置物品。,烘箱內(nèi)物品不要塞得過滿，以免影響熱氣流流通。,當(dāng)烘箱進(jìn)行高溫烘焙時（如,200,以上），嚴(yán)禁直接打開箱門。冷空氣突然進(jìn)入可能使玻璃門及烘箱內(nèi)玻璃制品因驟冷而破裂。,烘箱周圍,2,米范圍內(nèi)不得放置或堆積任何易燃、易爆、易揮發(fā)性物品，如：汽油、紙類、二甲苯、稀釋劑等。,烘箱溫度不能超過最高閾值。當(dāng)利用烘箱滅菌需要較高溫度（,160,以上）時，不能放置紙、棉塞等低燃點(diǎn)易燃物。,嚴(yán)禁過夜使用烘箱，因?yàn)楫?dāng)烘箱溫控系統(tǒng)出現(xiàn)故障時會導(dǎo)致溫度不斷升高，容易引發(fā)安全事故。,應(yīng)在每個工作臺上放置盛放廢棄物的容器、盤子或廣口瓶，最好是不易破碎的容器,(,如塑料

12、制品,),。當(dāng)使用消毒劑時，應(yīng)使廢棄物充分接觸消毒劑,(,即不能有氣泡阻隔,),，并根據(jù)所使用消毒劑的不同保持適當(dāng)接觸時間。盛放廢棄物的容器在重新使用前應(yīng)高壓滅菌并清洗。,廢棄物的處理,尿、胸水、腹水、腦脊液、涎液、胃液、腸液、關(guān)節(jié)腔液等在含有效氯消毒液中作用半小時以上，隨后交由有資質(zhì)的醫(yī)療廢棄物處理機(jī)構(gòu)進(jìn)行處理。,痰、膿、血、糞,(,包括動物糞便,),及其他液體標(biāo)本在含有效氯消毒液中作用,2,小時以上后交由有資質(zhì)的醫(yī)療廢棄物處理機(jī)構(gòu)進(jìn)行處理。,對廢酸、廢堿等廢液采用中和法、稀釋法等稀釋至,pH,值為中性時方可排入下水道。,液體廢棄標(biāo)本,帶有血凝塊等的廢棄樣品管，在加蓋后應(yīng)當(dāng)放在適當(dāng)?shù)姆缆┤萜鲀?nèi)高壓滅菌和,(,或,),焚燒。,固體廢棄物標(biāo)本,剩余標(biāo)本，如組織器官、動物尸體、檢驗(yàn)后的廢棄標(biāo)本及其容器，如塑料袋、紙袋,，應(yīng)及時交由醫(yī)療廢棄物處理機(jī)構(gòu)處理。,檢驗(yàn)剩余的標(biāo)本及使用過的帶菌平板、試管均須集中地點(diǎn)安全放置，經(jīng)消,毒后交由醫(yī)療廢棄物處理機(jī)構(gòu)處理。操,作區(qū)須備有消毒缸，以處理沾有活菌的玻片等污染物品。,皮下注射針頭用過后不應(yīng)再重復(fù)使用，包括不能從注射器上取下、回套針頭護(hù)套、截?cái)嗟龋瑧?yīng)將其完整地置于盛放銳器的一次性容器,中，交由醫(yī)療廢棄物處理機(jī)構(gòu)處理。,