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1、2022年高考生物大一輪復習 6蛋白質(zhì)和DNA技考題演練 中圖版選修1
1.某生物興趣小組在“蛋白質(zhì)的提取和分離”實驗中,準備從豬的血液中初步提取血紅蛋白,設(shè)計的“血紅蛋白提取、分離流程圖”如下:
請回答下列有關(guān)問題:
(1)樣品處理中紅細胞的洗滌要用__________________反復沖洗、離心。向紅細胞懸液中加入一定量的低濃度pH=7.0的緩沖液并充分攪拌,可以破碎紅細胞,破碎細胞的原理是__________________。
(2)血紅蛋白粗分離階段,透析的目的是__________________,若要盡快達到理想的透析效果,可以__________________(寫
2、出一種方法)。
(3)電泳利用了待分離樣品中各種分子的________________________等的差異,而產(chǎn)生不同遷移速度,實現(xiàn)各種分子的分離。
(4)一同學通過血紅蛋白醋酸纖維薄膜電泳,觀察到正
常人和鐮刀型細胞貧血癥患者的血紅蛋白電泳結(jié)果如
圖所示。由圖可知攜帶者有________種血紅蛋白,從
分子遺傳學的角度作出的解釋是_________________
___________________________________________________________________。
【解析】(1)洗滌紅細胞所用的溶液是生理鹽水,根據(jù)滲透作用原理,將紅細胞置
3、于低滲溶液中,紅細胞會吸水漲破,釋放出血紅蛋白。(2)血紅蛋白粗分離階段,透析的目的是除去樣品中的小分子雜質(zhì);可通過增加緩沖液的量或及時更換緩沖液等方法縮短透析時間,能盡快達到理想的透析效果。(3)由于各種分子帶電性質(zhì)以及分子大小、形狀等的差異,在電泳過程中產(chǎn)生了不同的遷移速度,實現(xiàn)各種分子的分離。(4)根據(jù)圖示可知,鐮刀型細胞貧血癥的攜帶者含有兩種血紅蛋白,原因是攜帶者具有(控制血紅蛋白的)一對等位基因,分別控制合成兩種不同的蛋白質(zhì)。
答案:(1)生理鹽水 滲透原理(當外界溶液濃度低于動物細胞內(nèi)液濃度時,細胞吸水漲破)
(2)除去小分子雜質(zhì) 增加緩沖液的量或及時更換緩沖液
(3)帶電性
4、質(zhì)以及分子大小、形狀
(4)2 攜帶者具有(控制血紅蛋白的)一對等位基因,可以控制合成兩種不同的蛋白質(zhì)
2.(xx·廣東高考改編)地中海貧血癥屬于常染色體遺傳病。一對夫婦生有一位重型β地中海貧血癥患兒,分析發(fā)現(xiàn),患兒血紅蛋白β鏈第39位氨基酸的編碼序列發(fā)生了點突變(C→T)。用PCR擴增包含該位點的一段DNA片段l,突變序列的擴增片段可用一種限制酶酶切為大小不同的兩個片段m和s;但正常序列的擴增片段不能被該酶酶切,如圖a。目前患兒母親再次懷孕,并接受了產(chǎn)前基因診斷。家庭成員及胎兒的PCR擴增產(chǎn)物酶切電泳帶型示意圖見圖b。(終止密碼子為UAA、UAG、UGA。)
(1)在獲得單鏈模
5、板的方式上,PCR擴增與體內(nèi)DNA復制不同,前者通過____________解開雙鏈,后者通過____________解開雙鏈。
(2)據(jù)圖分析,胎兒的基因型是__________(基因用A、a表示)?;純夯疾】赡艿脑蚴莀_____________的原始生殖細胞通過________________過程產(chǎn)生配子時,發(fā)生了基因突變;從基因表達水平分析,其患病是由于_______________
__________________________________________________________________。
【解題指南】解答本題需要明確以下兩點:
(1)體內(nèi)DNA復制
6、與PCR的區(qū)別、基因突變的有關(guān)知識。
(2)能夠準確識別電泳結(jié)果的圖示,并根據(jù)圖示寫出親代和子代的基因型。
【解析】(1)PCR是體外擴增DNA的方式,通過高溫使雙鏈解開,體內(nèi)DNA的復制則是通過解旋酶使DNA雙鏈解開。
(2)由題意可知重型β地中海貧血癥是隱性遺傳病,突變后的序列可以被剪切成m和s兩個片段,而正常序列無法被剪切,因此母親、父親、患兒和胎兒的基因型分別為AA、Aa、aa和Aa。母親和父親的基因型為AA和Aa,生下患兒可能是因為母親的原始生殖細胞通過減數(shù)分裂產(chǎn)生配子時發(fā)生了基因突變。由圖可知,該突變?yōu)槟0彐溕系腉TC突變成了ATC,mRNA上由CAG變成UAG,因此終止密碼
7、子提前出現(xiàn),使翻譯提前終止。
答案:(1)高溫 解旋酶
(2)Aa 母親 減數(shù)分裂 mRNA上編碼第39位氨基酸的密碼子變?yōu)榻K止密碼子,β鏈的合成提前終止,β鏈變短而失去功能
【延伸探究】電泳法只能分離蛋白質(zhì)分子嗎?試分析原因。
提示:不是。電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程,該方法除用于分離蛋白質(zhì)外,也可用于分離大小不等的DNA片段。
3.(xx·威海模擬)科學家發(fā)現(xiàn)家蠅體內(nèi)存在著一種抗菌活性蛋白。這種蛋白具有極強的抗菌能力,受到研究者重視。
(1)分離該抗菌蛋白可用電泳法,其原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的____________、大小及形狀不同,在電場中的__________
8、__不同而實現(xiàn)分離。
(2)可用金黃色葡萄球菌來檢驗該蛋白的體外抗菌特性??咕鷮嶒炈门囵B(yǎng)基中的牛肉膏和蛋白胨主要為細菌生長提供____________和____________。
(3)分別在加入和未加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基中接種等量菌液。培養(yǎng)一定時間后,比較兩種培養(yǎng)基中菌落的__________,確定該蛋白質(zhì)的抗菌效果。
(4)細菌培養(yǎng)常用的接種方法有______________和__________________。實驗結(jié)束后,對使用過的培養(yǎng)基應進行__________________處理。
【解題指南】解答本題需要明確以下三點:
(1)分離蛋白質(zhì)的原理和常用方法。
(2)微生
9、物的培養(yǎng)基的成分和作用。
(3)微生物培養(yǎng)的接種方法和無菌技術(shù)。
【解析】(1)電泳法分離蛋白質(zhì)的原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的電荷(帶電情況)、大小及形狀不同,在電場中的遷移速度不同而實現(xiàn)分離。
(2)牛肉膏和蛋白胨均為天然成分,含有豐富的營養(yǎng)物質(zhì),主要為細菌生長提供碳源和氮源。
(3)由于抗菌蛋白能夠抑制微生物的生長,因此在加入該抗菌蛋白的培養(yǎng)基上長出的菌落少,通過比較菌落數(shù)量即可確定該抗菌蛋白的抗菌效果。
(4)細菌培養(yǎng)常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法,實驗結(jié)束后,為避免有害菌污染環(huán)境,對使用過的培養(yǎng)基應進行滅菌處理。
答案:(1)電荷(帶電情況) 遷移速度 (2)碳源 氮
10、源
(3)數(shù)量 (4)平板劃線法 稀釋涂布平板法 滅菌
4.(xx·濟寧模擬)資料顯示,近十年來,PCR(聚合酶鏈式反應)技術(shù)成為分子生物實驗的一種常規(guī)手段,其原理是利用DNA半保留復制的特性,在試管中進行DNA的人工復制(如圖),在很短的時間內(nèi),將DNA擴增幾百萬倍甚至幾十億倍,使分子生物實驗所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。請據(jù)圖回答下列有關(guān)問題:
(1)加熱至95℃的目的是使DNA樣品的____________鍵斷裂,此過程在生物體細胞內(nèi)是通過____________酶的作用來完成的。
(2)新合成的DNA分子與模板DNA分子完全相同的原因是________________
11、__________和________________________。
(3)PCR技術(shù)不僅為遺傳病的診斷帶來了便利,而且改進了檢測細菌和病毒的方法。若要檢測一個人是否感染了艾滋病病毒,你認為可用PCR技術(shù)擴增他血液中的( )
A.白細胞DNA B.病毒的蛋白質(zhì)
C.血漿中的抗體 D.病毒的核酸
【解析】(1)PCR的原理是高溫使DNA的氫鍵斷裂,雙鏈打開。(2)DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)和堿基互補配對原則能夠保證子鏈DNA分子和母鏈DNA分子一樣。(3)因為用的就是PCR技術(shù),也就是擴增病毒的核酸(包括RNA和DNA)。PCR是不能擴增蛋白質(zhì)的,所以不可能是B項和C項,因為它們
12、的本質(zhì)都是蛋白質(zhì)。至于白細胞DNA,主要是體細胞的DNA,人類的體細胞DNA基本相同,擴增了也沒有太大差異,無法用于鑒別HIV。即使擴增白細胞DNA,若HIV曾將核酸插入其中(也就是感染),由于人體細胞DNA的數(shù)目極為龐大也會掩蓋HIV的特異性,也無法用于檢測。
答案:(1)氫 解旋
(2)DNA分子中獨特的雙螺旋結(jié)構(gòu)
復制過程中嚴格遵循堿基互補配對原則 (3)D
5.凝膠色譜技術(shù)是一種快速而又簡單的分離技術(shù),對高分子物質(zhì)有很好的分離效果,目前已經(jīng)被多個領(lǐng)域廣泛應用,不但應用于科學實驗研究,而且已經(jīng)大規(guī)模地用于工業(yè)生產(chǎn)。據(jù)圖回答問題:
(1)a、b均為蛋白質(zhì)分子,其中先從層析柱中洗脫
13、出來的是________,原因是
___________________________________________________________________。
(2)自己制作凝膠色譜柱時,在色譜柱底部d位置相當于多孔板的結(jié)構(gòu)可由______________________替代。
(3)裝填凝膠色譜柱時,色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在,原因是
___________________________________________________
___________________________________________________。
(4)若選用Sephadex
14、G-75,則“G”表示_______________,
75表示________________________________。
【解題指南】解答本題時需注意以下兩點:
(1)凝膠色譜柱分離原理:相對分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)只能在凝膠間隙移動,相對分子質(zhì)量較小的則進入凝膠內(nèi)部通道。
(2)凝膠色譜柱的填充成功與否影響蛋白質(zhì)的分離。
【解析】(1)用凝膠色譜技術(shù)分離各種不同蛋白質(zhì)時,大分子物質(zhì)由于直徑較大,只能分布于顆粒之間,所以向下移動的速度較快。小分子物質(zhì)除了可在凝膠顆粒間隙中擴散外,還可以進入凝膠顆粒的微孔,在向下移動的過程中,從一個凝膠顆粒內(nèi)擴散到顆粒間隙后再進入另一凝膠顆粒內(nèi),
15、如此不斷地進入和擴散,小分子物質(zhì)的下移速度落后于大分子物質(zhì),所以大分子物質(zhì)先洗脫出來。
(2)自己制作凝膠色譜柱時,在色譜柱底部d位置相當于多孔板的結(jié)構(gòu)可由尼龍網(wǎng)和尼龍紗替代。
(3)在色譜柱中裝填凝膠的時候要盡量緊密,以降低凝膠顆粒之間的空隙。一是在裝填凝膠柱時,不得有氣泡存在,因為氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果。二是凝膠色譜操作過程中,不能發(fā)生洗脫液流干、露出凝膠顆粒的現(xiàn)象。
答案:(1)a a相對分子質(zhì)量較大,無法進入凝膠內(nèi)部的通道,只能在凝膠間隙移動,路程較短,移動速度較快
(2)尼龍網(wǎng)和尼龍紗
(3)氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果
(4
16、)凝膠的交聯(lián)程度,膨脹程度及分離范圍
凝膠得水值,即每克凝膠膨脹時吸水7.5 g
6.聚合酶鏈式反應(PCR)是一種體外迅速擴增DNA片段的技術(shù)。請回答下列有關(guān)PCR技術(shù)的基本原理及應用的問題。
(1)DNA的兩條鏈是反向平行的,通常將__________________的末端稱為5′端,當引物與DNA母鏈通過堿基互補配對結(jié)合后,DNA聚合酶就能從引物的__________開始延伸DNA鏈。
(2)PCR利用DNA的熱變性原理解決了打開DNA雙鏈的問題,但又導致了DNA聚合酶失活的新問題。到20世紀80年代,科學家從一種Taq細菌中分離到________________________
17、__,它的發(fā)現(xiàn)和應用解決了以上問題。要將Taq細菌從其他普通的微生物中分離出來,所用的培養(yǎng)基叫______________________。
(3)PCR的每次循環(huán)可以分為____________________________三步。假設(shè)在PCR反應中,只有一個DNA片段作為模板,請計算在5次循環(huán)后,反應物中大約有____個這樣的DNA片段。
(4)請用簡圖表示出一個DNA片段PCR反應中第二輪的產(chǎn)物。
(5)簡述PCR技術(shù)的主要應用。
【解析】(1)DNA聚合酶只能把新的核苷酸加到已經(jīng)存在的核酸的3′-羥基上,與DNA母鏈結(jié)合的RNA引物就提供這個羥基。(2)因PCR利用了DNA的熱
18、變性原理解決了打開DNA雙鏈的問題,所以用于催化DNA復制過程的DNA聚合酶要具有耐高溫的特性。用選擇培養(yǎng)基可將Taq細菌從其他普通的微生物中分離出來。(3)DNA復制兩條鏈均作為模板,進行半保留復制,所以復制5次后得到的子代DNA分子數(shù)為25=32個。(4)新合成的DNA鏈帶有引物,而最初的模板DNA的兩條鏈不帶有引物。(5)PCR技術(shù)可以對DNA分子進行擴增,所以可用于遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學研究、基因克隆和DNA序列分析等方面。
答案:(1)磷酸基團 3′端
(2)耐高溫的TaqDNA聚合酶 選擇培養(yǎng)基
(3)高溫變性、低溫復性和中溫延伸 32
(4)
(5)遺傳疾病的診斷、刑偵破案、古生物學研究、基因克隆和DNA序列分析(要求3項以上)。