2022屆高考生物二輪復習 專題八 生物技術實踐 課時作業(yè)（十七）生物技術實踐

《2022屆高考生物二輪復習 專題八 生物技術實踐 課時作業(yè)（十七）生物技術實踐》由會員分享，可在線閱讀，更多相關《2022屆高考生物二輪復習 專題八 生物技術實踐 課時作業(yè)（十七）生物技術實踐（7頁珍藏版）》請在裝配圖網(wǎng)上搜索。

1、2022屆高考生物二輪復習 專題八 生物技術實踐 課時作業(yè)（十七）生物技術實踐 1．[2018·河北武邑高三質檢]為解決塑料袋造成的“白色污染”問題，某同學試圖從土壤中尋找一種能加速塑料袋自然降解的目的菌，請根據(jù)有關知識回答下列問題： (1)為培養(yǎng)該目的菌，需要配制出供其________所需的營養(yǎng)基質—培養(yǎng)基，對培養(yǎng)基滅菌常用的方法是________。在接種前需要檢驗使用的培養(yǎng)基滅菌是否合格，方法是________________________________________________________________________。 (2)為了確保能夠從樣品中分離得到所需要的微

2、生物，我們可在接種之前進行__________培養(yǎng)，以增加目的菌的濃度。實驗室常用的接種方法有__________和__________。 (3)該同學在稀釋倍數(shù)為104的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)分別為24、23、25，則每毫升樣品中的菌落數(shù)是________個(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2 mL)。用該方法統(tǒng)計的數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目________。 【解析】　無菌操作技術有消毒和滅菌，消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化學藥劑消毒法，滅菌有灼燒滅菌法適用于接種工具、干熱滅菌法適用于玻璃器皿和金屬工具、高壓蒸汽滅菌法適用于培養(yǎng)基及容器的滅菌。接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平

3、板法。 (1)培養(yǎng)基可以為目的菌的生長繁殖提供營養(yǎng)物質，常用的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌法；在接種前需要檢測使用的培養(yǎng)基是否被污染，可以將未接種的培養(yǎng)基在37℃(或適宜溫度)恒溫箱中培養(yǎng)一段時間，觀察是否有菌落生成。(2)為了確保能夠從樣品中分離得到所需要的微生物，在接種之前用以聚乙烯塑料為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基進行選擇培養(yǎng)，以增加目的菌的濃度；實驗室常用的接種方法有平板劃線法和稀釋涂布平板法。(3)根據(jù)題意可知，每克樣品中的菌落數(shù)＝平板上菌落數(shù)的平均值÷體積×稀釋倍數(shù)＝(24＋23＋25)÷0.2×104＝1.2×106個；由于細菌會相互重疊，因此用該方法統(tǒng)計的數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目少。 【

4、答案】　(1)生長繁殖　高壓蒸汽滅菌法　將未接種的培養(yǎng)基在37℃(或適宜溫度)恒溫箱中倒置培養(yǎng)一段時間(或1—2天)，觀察是否有菌落生成 (2)選擇　平板劃線法　稀釋涂布平板法 (3)1.2×106　少 2．[2018·安徽滁州高三期末]科學家篩選培育良種纖維素分解菌對玉米芯進行降解，并進一步利用酵母菌發(fā)酵制備乙醇?；卮鹣铝袉栴}： (1)篩選纖維素分解菌時，一般在以______________為唯一碳源的培養(yǎng)基中添加________染料，通過是否產生______________來篩選纖維素分解菌。 (2)請用文字敘述圖1中分解玉米芯絲菌用量與還原糖濃度的關系_________

5、_____________________________________。 (3)圖2表示酵母菌量與酒精產生量的關系，酵母菌接種量超過40mL后，酒精產量反而減少的原因是_________________________________________________。 為確定發(fā)酵罐內酵母菌的數(shù)量，常用稀釋涂布平板法統(tǒng)計細菌數(shù)量，統(tǒng)計的數(shù)據(jù)往往會偏小的原因是___________________________________________________。 【解析】　據(jù)圖分析，圖1中，隨著纖維素分解菌用量的增加，還原糖濃度先增加后降低，菌用量為30時還原糖濃度最大；圖2中，隨著酵母

6、菌量的增加，酒精產率先增加后降低，酵母菌量為40時，酒精產率最高。 (1)纖維素分解菌具有分解纖維素的能力，因此其培養(yǎng)基中一般添加纖維素作為唯一碳源；剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅—纖維素的復合物就無法合成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，所以我們就可以通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌。(2)根據(jù)圖1中的曲線變化分析，隨著纖維素分解菌用量的增加，還原糖濃度先增加后降低，即在底物玉米芯用量一定的情況下，菌用量的增加有利于玉米芯酶解為還原糖，當菌用量過大時，還原糖含量下降。(3)圖2顯示，酵母菌接種量超過40 mL后，酒精產量反而減少，

7、其主要原因是酵母菌接種量過大導致酵母菌種群密度過大，不利于酵母菌的發(fā)酵活動。稀釋涂布平板法統(tǒng)計細菌數(shù)量時，由于兩個或多個細菌形成一個菌落，所以統(tǒng)計的數(shù)據(jù)往往會偏小。 【答案】　(1)纖維素　剛果紅　透明圈 (2)在底物玉米芯用量一定的情況下，菌用量的增加有利于玉米芯酶解為還原糖，當菌用量過大時，還原糖含量下降 (3)酵母菌接種量過大導致酵母菌種群密度過大，不利于酵母菌的發(fā)酵活動　兩個或多個細菌形成一個菌落 3．[2018·山東淄博高三一模]以下是在推進生態(tài)文明建設過程中，合理利用微生物的實例。 ①農作物秸稈可用于還田、造紙、養(yǎng)殖蘑菇、生產乙醇等，既能解決集中焚燒污染環(huán)境問題，又能變廢

8、為寶。 ②農業(yè)生產上廣泛使用的除草劑在土壤中不易被降解，長期使用會污染土壤，可選育降解該除草劑的細菌修復被污染的土壤。 請回答： (1)用于生物工程的目的菌大多是從自然環(huán)境中篩選純化出來的。在選育能分解除草劑(一類含氮有機物)的目的菌時，應將土壤浸出液接種在以________為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上。對固體培養(yǎng)基進行滅菌處理常用的方法是________，為檢測滅菌效果可對培養(yǎng)基進行____________________________。 (2)稻稈還田以及利用秸稈生產乙醇的過程都需要以纖維素為__________的微生物。分離該類微生物時應用含纖維素的培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，并加入_____

9、___形成紅色復合物進行篩選，目的菌應從周圍有________的菌落中選取。 (3)生產乙醇過程中常用的微生物是________，發(fā)酵過程中檢測該微生物數(shù)量可采用的方法有顯微直接計數(shù)(或血球計數(shù)板)法和________，后者統(tǒng)計得到的菌落數(shù)目往往比活菌的實際數(shù)目________。 【解析】　(1)根據(jù)題意分析，實驗的目的是選育分解除草劑(一類含氮有機物)的目的菌，因此應該將土壤浸出液接種在以除草劑為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上；固體培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法進行滅菌，以不接種培養(yǎng)(或空白培養(yǎng))為對照，檢測滅菌效果。 (2)秸稈還田提高土壤肥力以及利用秸稈生產乙醇的過程的原理主要是土壤中微生物以纖

10、維素等有機物為碳源，合成自己需要的有機物；剛果紅是一種染料，它可以與纖維素形成紅色復合物，但并不和纖維二糖、葡萄糖發(fā)生這種反應。當纖維素被纖維素酶分解后剛果紅－纖維素的復合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解為中心的透明圈，進而可以通過是否產生透明圈來篩選纖維素分解菌。 (3)乙醇是酵母菌無氧呼吸的產物；酵母菌的計數(shù)方法有顯微直接計數(shù)(或血球計數(shù)板)法和稀釋涂布平板法，后者觀察到的菌落往往有重疊現(xiàn)象，因此得到的值一般偏小。 【答案】　(1)除草劑　高壓蒸汽滅菌法　不接種培養(yǎng)(或空白培養(yǎng)) (2)碳源　剛果紅(CR)　較大透明圈 (3)酵母菌　稀釋涂布平板法　少 4．[2018·山

11、東煙臺高三診斷]為了調查某河流的水質狀況，某研究小組測定了該河流水樣中的細菌含量，并進行了細菌分離和培養(yǎng)等工作?；卮鹣铝袉栴}： (1)該小組采用稀釋涂布平板法檢測水樣中細菌含量。為了檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格，可在涂布接種前，____________________；然后，將1 mL水樣稀釋1 000倍，在3個平板上用涂布法分別接入0.1 mL稀釋液；經(jīng)適當培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37，據(jù)此可得出每升水樣中的活菌數(shù)為________。 (2)該小組采用平板劃線法分離水樣中的細菌。操作時，接種環(huán)通過________滅菌，為了將聚集的菌體逐步稀釋以便獲得單個菌落，在第二

12、次及以后的劃線時，一定要________。示意圖A和B中，________表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果。通常，對獲得的純菌種可以依據(jù)________對細菌進行初步的鑒定和分類。 (3)該小組將得到的菌株接種到液體培養(yǎng)基中并混勻，一部分進行靜置培養(yǎng)，另一部分進行振蕩培養(yǎng)。結果發(fā)現(xiàn)：振蕩培養(yǎng)的細菌比靜置培養(yǎng)的細菌生長速度快。分析其原因是：振蕩培養(yǎng)能提高培養(yǎng)液中________的含量，同時可使菌體與培養(yǎng)液充分接觸，提高______________的利用率。 【解析】　(1)為了確定培養(yǎng)基的滅菌是否合格，通過隨機取若干滅菌后的空平板培養(yǎng)一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成，用來進行

13、對照。由題意知1 ml水樣中的菌落數(shù)是(39＋38＋37)÷3÷0.1×1 000＝3.8×105個，每升水樣中的活菌數(shù)為3.8×105×103＝3.8×108個。(2)接種環(huán)用灼燒法進行滅菌。在第二次及以后劃線時，總是從上一次劃線的末端開始劃線，這樣做的目的是：通過劃線次數(shù)的增加，將聚集的菌體逐漸稀釋分散，使每次劃線時菌體的數(shù)目逐漸減少，以便獲得由單個細胞繁殖而來的單個菌落。圖A是平板劃線法，圖B表示的是用稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后得到的結果?？梢砸罁?jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細菌進行初步的鑒定和分類。(3)振蕩培養(yǎng)可以增加液體培養(yǎng)基的氧氣含量，促進好氧型微生物的生長；同時還能使菌體與培養(yǎng)液

14、充分接觸，提高營養(yǎng)物質的利用率。 【答案】　(1)隨機取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)一段時間　3.8×108 (2)灼燒　從上一次劃線的末端開始劃線　B　菌落的形狀、大小等菌落特征 (3)溶解氧　營養(yǎng)物質 5．[2018·山東濟南章丘區(qū)高三模擬]請回答下列問題： (1)制作果醋和葡萄酒使用微生物在結構上有所不同，主要表現(xiàn)在前者________________。果酒發(fā)酵后是否有酒精產生，可以用重鉻酸鉀溶液進行檢驗，酒精與重鉻酸鉀在酸性條件下反應呈________________色。 (2)腐乳制作過程中，豆腐發(fā)酵主要利用微生物產生的________等，將豆腐中的營養(yǎng)物質分解成易于消化

15、和吸收的小分子物質。 (3)測定泡菜中亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生_________________________反應后，再與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成______________染料。 (4)從土壤中分離及篩選高效分解尿素的細菌時，首先要將選取的一定量的土壤溶解在無菌水中進行________后，才能夠接種到培養(yǎng)基表面。 (5)生姜精油是傳統(tǒng)的保健良方，調和在洗發(fā)露中，可去頭風、止頭痛。提取生姜精油的流程如下：植物體→生姜→油水混合物→初級精油→除水、過濾→生姜精油。提取生姜精油時，采用_____________________________

16、___________________________________________ 法獲得油水混合物，然后在其中加入________試劑，分層后可獲得初級精油。 【解析】　(1)制作果醋和葡萄酒使用的菌種分別是醋酸菌和酵母菌，分別是原核生物和真核生物，兩者的主要區(qū)別是前者沒有核膜包被的成形的細胞核；橙色的重鉻酸鉀溶液，在酸性條件下與乙醇(酒精)發(fā)生化學反應，變成灰綠色。(2)腐乳發(fā)酵主要利用微生物產生的蛋白酶和脂肪酶等，其中蛋白酶能將蛋白質水解成小分子肽和氨基酸，脂肪酶能將脂肪水解成甘油和脂肪酸。(3)制作泡菜時常用比色法測定其中的亞硝酸鹽含量，該方法的原理是在鹽酸酸化的條件下，亞硝酸

17、鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料，將顯色反應后的樣品與已知濃度的標準液目測比較，可以大致估算出泡菜中亞硝酸鹽的含量。(4)從土壤中分離及篩選高效分解尿素的細菌時，為防止土壤浸出液濃度過高，不能獲得單菌落，應先將土壤用無菌水進行一系列的梯度稀釋。(5)提取生姜精油時，采用水蒸氣蒸餾法獲得油水混合物，然后在其中加入氯化鈉試劑，增加鹽的濃度，就會出現(xiàn)明顯的分層，分層后可獲得初級精油，再加入無水硫酸鈉吸水，放置過夜，再過濾除去固體硫酸鈉就可以得到生姜精油。 【答案】　(1)無成形的細胞核　灰綠 (2)蛋白酶和脂肪酶 (3)重氮化　玫瑰紅色 (4)

18、梯度稀釋 (5)水蒸氣蒸餾　氯化鈉 6．[2018·山東濟寧高三一模]已知微生物A可以產生脂肪酶，微生物B可以產生油脂。這兩種物質可用于生物柴油的生產。回答有關問題： (1)為了從自然界中獲得能產生脂肪酶的微生物單一菌落，可從含有油料作物種子腐爛物的土壤中取樣，并應選用以油脂為唯一________的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 (2)顯微觀察時，微生物B菌體中的油脂通?？捎胈_______染色。微生物B產生的油脂易揮發(fā)，可選用________(填“萃取法”或“水蒸氣蒸餾法”)從菌體中提取。 (3)若要測定培養(yǎng)液中微生物A的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用________直接計數(shù)；若要測定其活菌數(shù)量，可

19、選用________法進行計數(shù)。 (4)加酶洗衣粉是含有酶制劑的洗衣粉，除脂肪酶之外，常用的酶制劑還有______________________________等。(至少寫出兩種) 【解析】　(1)篩選能產生脂肪酶的微生物A時，應該使用只有目的菌能夠生存的，而其他微生物不能生存的選擇培養(yǎng)基，所以培養(yǎng)基中應該添加油脂作為唯一碳源。(2)油脂通?？杀惶K丹Ⅲ染液染成橘黃色(或被蘇丹Ⅳ染液染成紅色)；由于微生物B產生的油脂易揮發(fā)，所以可選用水蒸氣蒸餾法從菌體中提取。(3)若要測定培養(yǎng)液中微生物A的菌體數(shù)，可在顯微鏡下用血細胞計數(shù)板直接計數(shù)(該種方法測定的菌體包括活菌和死菌)；若要測定其活菌數(shù)量，

20、可選用稀釋涂布平板法進行計數(shù)。(4)加酶洗衣粉中除脂肪酶之外，常用的酶制劑還有蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶等。 【答案】　(1)碳源 (2)蘇丹Ⅲ(或者蘇丹Ⅳ)　水蒸氣蒸餾法 (3)血細胞計數(shù)板　稀釋涂布平板 (4)蛋白酶、淀粉酶、纖維素酶 7．[2018·河南濮陽高三二模]生物技術實踐在實際生產生活中有著多種應用。請回答下列有關問題： (1)泡菜發(fā)酵過程會產生少量的亞硝酸鹽，若泡菜中的亞硝酸鹽總量達到一定值，則會引起中毒，故需要檢測泡菜中亞硝酸鹽的含量，測定亞硝酸鹽含量的常用方法是____________________________________________________

21、____________________。 (2)微生物的接種方法有多種，常用于統(tǒng)計活菌數(shù)目的接種方法是________，使用該方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目偏低，原因是________________________。 統(tǒng)計微生物數(shù)目的方法除利用菌落進行活菌計數(shù)外，還有________法。 (3)精油在日常生活中有著廣泛的應用，不同精油的制備過程不同，這與其原料的性質等有關。柚皮在水中蒸餾時容易焦糊，宜采用______________法提取柚皮精油；玫瑰精油的化學性質穩(wěn)定，難溶于水，常選擇______________法進行提取。 (4)天然胡蘿卜素具有使癌細胞恢復成正常細胞的功

22、能。根據(jù)胡蘿卜素具有易溶于有機溶劑的特點，常采用________法提取胡蘿卜素；提取的胡蘿卜素粗產品可通過________法進行鑒定。 【解析】　(1)亞硝酸鹽與某些化學物質發(fā)生反應后形成玫瑰色染料。先將泡菜樣品及一系列已知濃度的亞硝酸鹽溶液分別與化學物質發(fā)生顯色反應，然后通過對比，可以估測出泡菜液樣品亞硝酸鹽的含量。(2)微生物的接種方法有稀釋涂布平板法和平板劃線法，其中稀釋涂布平板法常用于統(tǒng)計活菌數(shù)目；使用該方法統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目偏低，原因是當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落；除了活菌計數(shù)法外，顯微鏡直接計數(shù)也是測定微生物數(shù)量常用的方法。(3)柚皮在水中

23、蒸餾時容易焦糊，宜采用壓榨法提取柚皮精油；玫瑰精油的化學性質穩(wěn)定，難溶于水，常選擇水蒸氣蒸餾法進行提取。(4)根據(jù)胡蘿卜素具有易溶于有機溶劑的特點，常采用萃取法提取胡蘿卜素；提取的胡蘿卜素粗產品可通過紙層析法進行鑒定。 【答案】　(1)比色法 (2)稀釋涂布平板法　當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落　顯微鏡直接計數(shù) (3)壓榨　(水蒸氣)蒸餾 (4)(有機溶劑)萃取　紙層析 8．[2018· 河南八市學評高三測評]影響醬油衛(wèi)生指標的細菌主要有耐熱的芽孢桿菌和耐鹽菌。某生物興趣小組欲從釀制的醬油中篩選出耐鹽菌。請回答： (1)在篩選過程中，應將醬油接種于含有適量_

24、_______________________________________________________________________ 的固體培養(yǎng)基上：從功能上講，該培養(yǎng)基屬于________________培養(yǎng)基；對該培養(yǎng)基滅菌的方法是________________。在涂布接種前，隨機取若干滅菌后的空白培養(yǎng)基培養(yǎng)一段時間，發(fā)現(xiàn)空白培養(yǎng)基上出現(xiàn)了一些菌落?？瞻着囵B(yǎng)基上出現(xiàn)菌落的原因是： ①_______________________________________________； ②______________________________________________

25、__。 (2)在篩選耐鹽菌的過程中，必須在無菌條件下完成的操作是________(多選)。 ①配制培養(yǎng)基?、诘蛊桨濉、劢臃N?、芘囵B(yǎng) (3)若要統(tǒng)計活的耐鹽菌的數(shù)目，把醬油接種到培養(yǎng)基上常采用的方法為________；統(tǒng)計結果一般用菌落來表示，統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目________，原因是________________________________________________________________________。 (4)在純化耐鹽菌的過程中，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是____________________________，避免出現(xiàn)此種現(xiàn)象應

26、該采取的措施是______________________。 【解析】　(1)欲從釀制的醬油中篩選出耐鹽菌，應將醬油接種于含有適量NaCl(食鹽)的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。常采用高壓蒸汽滅菌的方法對培養(yǎng)基進行滅菌。培養(yǎng)的空白培養(yǎng)基上出現(xiàn)菌落的原因可能是：對培養(yǎng)基的滅菌不徹底；倒平板時培養(yǎng)基被污染。(2)配制培養(yǎng)基的步驟包括計算、稱量、溶化，培養(yǎng)基配制完成后需依次調節(jié)pH、滅菌，然后在酒精燈火焰旁進行倒平板；為了避免雜菌污染，接種和培養(yǎng)都需要在無菌條件下完成。綜上所述，在篩選耐鹽菌的過程中，必須在無菌條件下完成的操作是②③④。(3)若要統(tǒng)計活的耐鹽菌的數(shù)目，常采用稀釋

27、涂布平板法將醬油接種到培養(yǎng)基上。由于當兩個或多個細胞連在一起時，平板上只能觀察到一個菌落，所以統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低。(4)在純化耐鹽菌的過程中，若醬油中耐鹽菌濃度過高，則會出現(xiàn)菌落在培養(yǎng)基上連成一片的現(xiàn)象。為了避免出現(xiàn)此種現(xiàn)象，應對醬油進行梯度稀釋(或“加大稀釋倍數(shù)”)。 【答案】　(1)NaCl(食鹽)　選擇　高壓蒸汽滅菌　對培養(yǎng)基的滅菌不徹底　倒平板時培養(yǎng)基被污染 (2)②③④ (3)稀釋涂布平板法　低　兩個或多個細胞連在一起時，平板上只能觀察到一個菌落 (4)醬油中耐鹽菌濃度過高　對醬油進行梯度稀釋(或“加大稀釋倍數(shù)”) [重點選做題] 1．[2018·河北唐山

28、高三一模]有人認為，鮮榨果汁比盒裝或瓶裝的果汁更新鮮健康。食品監(jiān)督人員發(fā)現(xiàn)鮮榨果汁若不能做到無菌生產，更容易滋生細菌。研究過程如下： (1)純化培養(yǎng)細菌的方法：平板劃線法可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離，但不能________；使用稀釋涂布平板法，在稀釋度足夠高時，一個菌落代表________。 (2)對細菌計數(shù)時往往會產生實驗誤差，稀釋涂布平板法計數(shù)的值比實際值________，原因是__________________________________________；顯微計數(shù)法計數(shù)的結果比 實際值________，原因是______________________。 (3)接種結

29、束后，將一個未接種的培養(yǎng)基和一個接種的培養(yǎng)基放在一起培養(yǎng)的目的是____________。未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長很關鍵，如果有菌落生長，說明________________________________________________________________________。 【解析】　(1)平板劃線法可以觀察菌落特征，對混合菌進行分離，但不能計數(shù)；使用稀釋涂布平板法，在稀釋度足夠高時，聚集在一起的微生物將分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落，即一個菌落代表單個細胞。(2)用稀釋涂布平板法對細菌進行計數(shù)時，當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落

30、，所以統(tǒng)計的菌落往往比活菌的實際數(shù)目偏??；若用顯微計數(shù)法計數(shù)時，由于顯微鏡下無法區(qū)分細胞的死活，計數(shù)時包括了死細胞，所以計數(shù)的結果會比實際值偏大。(3)接種結束后，將一個未接種的培養(yǎng)基和一個接種的培養(yǎng)基放在一起培養(yǎng)的目的是作對照，未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長很關鍵。如果有菌落生長，則說明培養(yǎng)基滅菌不徹底(或培養(yǎng)基被污染了或需要重新制備)。 【答案】　(1)計數(shù)　單個細胞 (2)偏小　當兩個或多個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落　偏大　顯微鏡下無法區(qū)分細胞的死活，計數(shù)時包括了死細胞 (3)對照　培養(yǎng)基滅菌不徹底(或培養(yǎng)基被污染了或需要重新制備) 2．[2018·廣東汕頭高三

31、模擬]塑料的生物降解，是一個世界性的難題。北京航天航空大學趙軍教授帶領的團隊所進行的研究，引人矚目。他們從一種吃塑料(聚乙烯)的蠟蟲腸道內容物中分離出8個菌株，并對其中的2個菌株進行了深入研究。 蠟蟲→腸道內容物→接種、培養(yǎng)、分離→菌種鑒定→菌種保藏 (1)塑料的生物降解，主要是利用某些生物分泌特定的________的作用。 (2)上述步驟中“培養(yǎng)”是為了________，其培養(yǎng)基應以聚乙烯為________、并加入水和________等制作而成。培養(yǎng)一定時間后，根據(jù)________對菌種進行初步分離。 (3)研究人員將其中兩個菌株YT1、YP1分別接種到含有聚乙烯膜的培養(yǎng)基中連續(xù)培養(yǎng)

32、，部分結果如下圖一、二所示。 ①圖一顯示，兩個菌株在實驗條件下，增殖能力更強的是__________________。圖中缺少對照組的數(shù)據(jù)，根據(jù)實驗設計的意圖，對照組的細胞密度應該為________。 ②圖二是對兩個菌株進行聚乙烯減重分析的實驗結果，可以得出的主要結論是___________________________。 【解析】　(1)某些生物分泌特定的酶，能夠降解塑料。(2)接種、培養(yǎng)、分離中的培養(yǎng)，是為了增加目的菌株數(shù)量。本操作是為了篩選能分解聚乙烯的菌種，其培養(yǎng)基應以聚乙烯為唯一碳源、并加入水和無機鹽等制作而成。培養(yǎng)一定時間后，根據(jù)菌落特征(或菌落的形態(tài)、菌落的顏色)對菌

33、種進行初步分離。(3)①由于在同一時間范圍內，YT1組的細胞密度較YP1更大，說明增殖能力更強的是YT1。對照組為未加入菌株的含有聚乙烯膜的培養(yǎng)基，其細胞密度應該為0。②與對照組相比，YT1和YP1的聚乙烯減重較大，且YP1的聚乙烯減重較YT1大，說明YT1和YP1都能降解聚乙烯，其中YP1的降解能力更強。 【答案】　(1)酶 (2)增加目的菌株數(shù)量　唯一碳源　無機鹽(和氮源)　菌落特征(或菌落的形態(tài)、菌落的顏色) (3)YT1　0　YT1和YP1都能降解聚乙烯，其中YP1的降解能力更強 3．[2018·安徽蕪湖高三一模]某研究小組對酸奶中乳酸菌數(shù)量進行了測定，取6支滅菌試管，分別加入

34、9 mL滅菌水，標號為A1、A2、A3、A4、A5、A6，吸取1 mL酸奶樣液加入試管A1中，混合均勻；然后從A1中吸取1 mL溶液，加入A2中，混合均勻；重復上述操作，最后從試管A6中取0.1 mL樣液進行涂布計數(shù)。涂布三個平板，其菌落數(shù)分別為251、265、276個。請回答下列問題： (1)該小組在取樣涂布前，隨機取若干滅菌后未接種平板先行培養(yǎng)一段時間，這樣做的目的是___________________________________________________。 (2)在制備乳酸菌培養(yǎng)基過程中，倒平板時培養(yǎng)基溫度不能太低，原因是_________________________

35、_____________； 待平板冷凝后，要將平板倒置，其目的是_________________________________________________ _________________________________________________。 (3)根據(jù)三個平板中菌落數(shù)，可推測原酸奶中乳酸菌濃度為________個/mL，該方法測定的乳酸菌含量和實際值相比偏小的原因是___________________________________________。 (4)該小組在探究橘皮精油對乳酸菌抑制作用時，提取橘皮精油采用________法而不用蒸餾法，原因是____

36、____。抑菌實驗時，在長滿乳酸菌平板上，會出現(xiàn)以抑菌物質為中心的透明圈，可通過________來判斷抑菌效果。 【解析】　(1)對滅菌后而未接種平板先培養(yǎng)一段時間的目的是檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格。(2)制備培養(yǎng)基過程中， 倒平板時溫度太低會導致培養(yǎng)基凝固，無法鋪展均勻，因此倒平板時培養(yǎng)基的溫度不能太低；待平板冷凝后，要將平板倒置，其目的是防止平板冷凝后，培養(yǎng)皿蓋上凝結的水珠落入培養(yǎng)基中造成污染。(3)結合題意，根據(jù)操作步驟可推知得到了101、102、103、104、105、106倍的稀釋液。從試管A6中取0.1 mL樣液進行涂布計數(shù)，三個平板中菌落數(shù)分別為251、265、276個，可推測

37、原酸奶中乳酸菌的濃度為(251＋265＋276)÷3×10×106＝2.64×109個/mL。稀釋涂布平板法測定活菌數(shù)目時，因為相鄰的細菌可能形成一個菌落，因此測定值可能比實際值小。(4) 提取橘皮精油采用壓榨法而不用蒸餾法，原因是水中蒸餾會導致原料焦糊和有效成分水解。抑菌實驗時，在長滿乳酸菌平板上，會出現(xiàn)以抑菌物質為中心的透明圈，可通過測定透明圈大小來判斷抑菌效果。 【答案】　(1)檢測培養(yǎng)基平板滅菌是否合格 (2)溫度太低會導致培養(yǎng)基凝固，無法鋪展均勻　既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染 (3)2.64×109　兩個或多個乳酸菌連在一起時，平板

38、上只能觀察到1個菌落 (4)壓榨　水中蒸餾會導致原料焦糊和有效成分水解　測定透明圈大小(直徑) 4．[2018·山東省聊城市高三一模]以下是柿子醋制作的流程：柿果→挑選→清洗→去皮→去核→脫澀處理→切塊→壓榨→柿汁→滅菌→酒精發(fā)酵→醋酸發(fā)酵→滅菌→陳釀→淋醋→過濾→成品。請回答下列問題： (1)脫澀過程可以用成熟的蘋果、梨等水果釋放的________氣體促進柿子成熟。 (2)將壓榨后的柿汁加熱到80℃保持10～20分鐘的目的是________。酒精發(fā)酵時可添加活性干酵母進行，發(fā)酵的原理是__________________________________________________

39、______________________(寫反應式)。 (3)若醋酸發(fā)酵時需擴大培養(yǎng)醋酸菌種，實驗室常用的接種方法是________和________；接種前應對培養(yǎng)皿、接種環(huán)和培養(yǎng)基進行滅菌，方法分別是____________________；接種后培養(yǎng)時需要設置空白培養(yǎng)基，目的是__________________________________________________ __________________________________________________。 【解析】　(1)成熟的蘋果、梨等水果釋放的乙烯可促進果實的成熟。(2)將壓榨后的柿汁加熱到80℃保持

40、10～20分鐘的目的是滅菌，防止雜菌污染。果酒發(fā)酵是利用酵母菌進行無氧呼吸產生酒精的原理，其反應式是C6H12O62C2H5OH(酒精)＋2CO2＋少量能量。(3)純化培養(yǎng)微生物時常用的接種方法是：平板劃線法和稀釋涂布平板法；接種前對培養(yǎng)皿、接種環(huán)和培養(yǎng)基進行滅菌時所采用的方法分別是干熱滅菌、灼燒滅菌、高壓蒸汽滅菌；接種后培養(yǎng)時需要設置空白培養(yǎng)基，其目的是：檢測培養(yǎng)基是否合格(檢測培養(yǎng)基是否被污染)。 【答案】　(1)乙烯 (2)防止雜菌污染　C6H12O62C2H5OH＋2CO2＋能量 (3)平板劃線法　稀釋涂布平板法　干熱滅菌、灼燒滅菌、高壓蒸汽滅菌　檢測培養(yǎng)基是否合格(檢測培養(yǎng)基是否被污染)