2022高考生物二輪復習 專題八 生物技術(shù)實踐限時規(guī)范訓練

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1、2022高考生物二輪復習 專題八 生物技術(shù)實踐限時規(guī)范訓練 [限時規(guī)范訓練]                  練思維 練規(guī)范 練就考場滿分 1.為獲得果膠酶高產(chǎn)菌株,科研人員進行了下列分離、篩選、鑒定工作。 (1)為分離果膠酶產(chǎn)生菌,科研人員配制了下表所示成分的培養(yǎng)基,該表空白處的兩種成分是________。制備的培養(yǎng)基常用________法進行滅菌。 K2HPO4 MgSO4 NaNO3 FeSO4 瓊脂 0.1 g 0.5 g 3 g 0.01 g 2 g 15 g 加至1 L (2)科研人員將采集的果園土壤放入無菌水中,振蕩混勻,制成懸液。為

2、獲得較均勻分布的單菌落,還需要將懸液進行__________,用__________法接種于固體培養(yǎng)基上。接種后的培養(yǎng)基__________狀態(tài)放入培養(yǎng)箱。 (3)選擇單菌落數(shù)目適宜的培養(yǎng)基,加入一定濃度的剛果紅溶液(果膠與剛果紅結(jié)合后顯紅色),一段時間后洗去培養(yǎng)基表面的剛果紅溶液,觀察并比較菌落和________直徑的比值,篩選果膠酶高產(chǎn)菌株。 (4)將獲得的菌株進行液體培養(yǎng)后,從培養(yǎng)液的________(填“上清液”或“沉淀物”)獲得粗提的果膠酶。將一定量的粗提果膠酶與適量果膠溶液混合,一定時間后測定吸光值來測定酶活性。進行吸光值測定時,需將________________與等量果膠溶

3、液混合,作為實驗的對照。 答案:(1)果膠和蒸餾水 高壓蒸汽滅菌 (2)梯度稀釋(或系列稀釋) (稀釋)涂布平板 倒置 (3)水解(或透明)圈 (4)上清液 等量失活的粗提果膠酶 2.(2018·山西太原模擬)在微生物連續(xù)培養(yǎng)時,一部分舊的液體培養(yǎng)基以一定的速度流出,同時不斷有等量的新鮮液體培養(yǎng)基流入以保證微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要。研究人員將大腸桿菌JA122菌株接種到葡萄糖含量受到限制的液體培養(yǎng)基中,連續(xù)培養(yǎng)多代,然后取樣分析其中存在的新菌株。請回答: (1)液體培養(yǎng)基中除了把葡萄糖作為________外,還應(yīng)該含有_______________________。 (2)樣品中還

4、發(fā)現(xiàn)了CV101、CV103新品種,對其菌株的代謝差異進行分析發(fā)現(xiàn),CV103對葡萄糖吸收率最高,代謝終產(chǎn)物是醋酸鹽。進一步研究表明,CV101可以在過濾的、培養(yǎng)過CV103的培養(yǎng)基中生長,據(jù)此作出的推測是:________________________。 請再設(shè)計并完成下列實驗,來驗證你的觀點。 ①配制________________的固體培養(yǎng)基(A組)和不含碳源的固體培養(yǎng)基(B組)。 ②將等量且適量稀釋的CV101菌液分別接種到A、B培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間,并觀察記錄菌株的生長情況。實驗過程應(yīng)在________條件下進行。 ③預期實驗結(jié)果:_____________________

5、_______________________________________。 解析:(1)根據(jù)題意,微生物連續(xù)培養(yǎng)時,一部分舊的培養(yǎng)基以一定的速度流出,同時不斷有等量的新鮮培養(yǎng)基流入以保證微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的需要,因此該培養(yǎng)基一定為液體培養(yǎng)基;液體培養(yǎng)基的基本營養(yǎng)成分為碳源、氮源、水、無機鹽和生長因子,其中葡萄糖為碳源。(2)由題意知,CV103對葡萄糖吸收率最高,代謝終產(chǎn)物是醋酸鹽。進一步研究表明,CV101可以在過濾的、培養(yǎng)過CV103的培養(yǎng)基中生長,據(jù)此可以推測CV101菌株能以CV103菌株產(chǎn)生的醋酸鹽為碳源。 答案:(1)碳源 氮源、水、無機鹽、特殊營養(yǎng)物質(zhì)(生長因子) (2

6、)CV101菌株能以CV103菌株產(chǎn)生的醋酸鹽為碳源 ①以醋酸鹽為唯一碳源?、跓o菌(或適宜的溫度等)?、跘組菌株生長(形成菌落),B組菌株不能生長(無菌落) 3.三孢布拉霉菌能用來生產(chǎn)胡蘿卜素,但該菌株的高產(chǎn)性狀容易退化,需要定期篩選出高產(chǎn)菌株,研究表明菌體細胞內(nèi)的[H]可將無色的TTC還原為紅色復合物,且菌體細胞內(nèi)[H]含量越高,還原能力越強,胡蘿卜素合成能力也越強。請結(jié)合下列篩選菌株及提取胡蘿卜素的流程圖回答問題: 三孢布拉霉菌液→梯度稀釋→涂布到含有TTC的培養(yǎng)基上→挑取單菌落→擴大培養(yǎng)→收集菌絲并處理→萃取→鑒定 (1)工業(yè)生產(chǎn)上提取天然胡蘿卜素的方法主要有三種,除可利用上述微

7、生物的發(fā)酵生產(chǎn)之外,還可以從植物中提取和從________中獲取。 (2)將菌液涂布到含TTC的培養(yǎng)基上,目的是篩選出________________,對照組需涂布等量的________以判斷培養(yǎng)基是否被污染。挑取單菌落時,若菌落周圍________,則菌株合成胡蘿卜素的能力較強。 (3)從該微生物中提取胡蘿卜素時,擴大培養(yǎng)后要收集菌絲進行的處理是粉碎和________,以提高萃取效率。萃取加熱時需安裝冷凝回流裝置,其目的是防止______________。 (4)鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時,通常采用________法,該方法也可用于分離色素,其原理是________________

8、_______________________________________________________ ____________________。 解析:由于三孢布拉霉菌菌體細胞內(nèi)含有[H],可將無色的TTC還原為紅色復合物,由此可確定三孢布拉霉菌的存在,且紅色越深,說明菌體內(nèi)產(chǎn)生[H]越多,越符合生產(chǎn)提取要求。(1)工業(yè)生產(chǎn)上提取胡蘿卜素的方法是利用微生物的發(fā)酵生產(chǎn),從植物中提取和從大面積養(yǎng)殖的巖藻中獲取。(2)由題干可知,三孢布拉霉菌細胞內(nèi)的[H]可將無色的TTC還原為紅色復合物,且[H]含量越高,胡蘿卜素合成能力也越強。所以,將菌液涂布到含TTC的培養(yǎng)基上的目的是篩選出合成胡

9、蘿卜素能力較強的菌體,對照組需涂布等量的無菌水。挑取單菌落時,若菌落周圍紅色較深,則菌株合成胡蘿卜素的能力較強。(3)收集菌絲后要進行粉碎和干燥,除去水分,其目的是提高萃取效率;由于胡蘿卜素易溶于有機溶劑,有機溶劑具有易揮發(fā)的特點,所以萃取加熱時安裝冷凝回流裝置的目的是防止有機溶劑揮發(fā)。(4)鑒定萃取物中是否含有胡蘿卜素時,類比葉綠體色素提取與分離實驗,根據(jù)不同色素在有機溶劑中的溶解度不同的原理,采用紙層析法,將色素分離出來,并與標準色素帶進行對比。 答案:(1)(大面積養(yǎng)殖的)巖藻 (2)合成胡蘿卜素能力較強的菌體(或“高產(chǎn)菌株”) 無菌水 紅色較深 (3)干燥 有機溶劑揮發(fā) (4)

10、紙層析 不同色素在有機溶劑中的溶解度不同 4.(2018·廣州中山模擬)毒死蜱(C9H11C13NO3PS)是一種有機磷殺蟲劑,長期使用將導致土壤中農(nóng)藥殘留嚴重。某研究小組從長期施藥的韭菜溫室土壤(偏酸性)里分離出能降解毒死蜱的木霉,并對其降解特性進行初步研究。請回答: (1)用于分離木霉菌種的培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。配制此培養(yǎng)基時,應(yīng)加入________作為唯一碳源。接種前,將培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適當?shù)臅r間,觀察培養(yǎng)基________以確定培養(yǎng)基是否被污染。 (2)純化木霉時,統(tǒng)計出0.2 mL的稀釋液在稀釋倍數(shù)為105的平板上的平均菌落數(shù)為40個,則每mL樣液中的菌落數(shù)為

11、________個。用此法測定木霉數(shù)量,實際活菌數(shù)量要比統(tǒng)計的菌落數(shù)量________,原因是________________________________。 (3)探究pH對木霉降解毒死蜱活性的影響 ①研究小組向不同pH的培養(yǎng)基中分別加入100 mg/L毒死蜱,5天后檢測毒死蜱的殘留量(圖1)。由圖可推知:在偏酸性的土壤中,________________。 ②研究小組向不同pH的培養(yǎng)基中分別加入100 mg/L毒死蜱,再分別接種1 mL木霉懸液,混合均勻,5天后檢測毒死蜱的殘留量(圖2)。在此韭菜溫室土壤中,若要提高木霉對毒死蜱的降解活性,可對土壤作何處理?________

12、________________。 解析:(1)要分離出能降解毒死蜱的木霉,需要以毒死蜱作為唯一碳源培養(yǎng)基,在該培養(yǎng)基上只有能降解毒死蜱的木霉能生存,其他微生物都不能生存,因此該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。接種前,將培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適當?shù)臅r間,觀察培養(yǎng)基是否產(chǎn)生菌落,以確定培養(yǎng)基是否被污染。(2)純化木霉時,統(tǒng)計出0.2 mL的稀釋液在稀釋倍數(shù)為105的平板上的平均菌落數(shù)為40個,則每mL樣液中的菌落數(shù)為40×5×105=2×107(個)。用此法測定木霉數(shù)量,因為當兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落,因此實際活菌數(shù)量要比統(tǒng)計的菌落數(shù)量多。(3)①由圖1可推知:在偏酸性的土壤

13、中,毒死蜱穩(wěn)定性較好。②由圖2可知,在此韭菜溫室土壤中,若要提高木霉對毒死蜱的降解活性,可適當提高土壤的pH至7左右。 答案:(1)選擇 毒死蜱 是否產(chǎn)生菌落 (2)2×107 多 當兩個或多個細胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落 (3)①毒死蜱穩(wěn)定性較好?、谶m當提高土壤的pH至7左右 5.為研究“某品牌酸奶中乳酸菌數(shù)量及其對抗生素耐藥性情況”,某同學進行了如下實驗。請分析回答下列問題: (1)配制的細菌培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無機鹽等主要營養(yǎng)成分外,還應(yīng)加入適量的________和瓊脂。在培養(yǎng)基各成分溶化與滅菌之間,要進行的操作是________。 (2)接種微生

14、物的方法有很多,圖中過程①②③所示的方法為________________。用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)后,所得數(shù)據(jù)需要乘以10n后,才可表示乳酸菌的數(shù)量(單位:個/mL),這里的n=________。用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時,同時需要做A、B、C三個培養(yǎng)皿,原因是 ________________________________________________________________________。 (3)為了檢測乳酸菌對抗生素的敏感性,取該單菌落適當稀釋,接種于固體培養(yǎng)基表面,在37 ℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h,使其均勻生長,布滿平板。將分別含有A、B、C三種抗生素的濾紙片均勻置于該平

15、板上的不同位置,培養(yǎng)一段時間后,含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明該致病菌對抗生素A________(填“敏感”或“不敏感”);含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是________________。 解析:(1)配制的細菌培養(yǎng)基除了含有水、碳源、氮源和無機鹽等主要營養(yǎng)成分外,還需要維生素,由于該培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基,因此還應(yīng)加入適量的瓊脂作為凝固劑。在培養(yǎng)基各成分溶化與滅菌之間,要進行的操作是調(diào)pH。(2)接種微生物的方法有很多,圖中過程①②③所示的方法為稀釋涂布平板法。用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時,同時需要做A、B、C三個培養(yǎng)皿,分別

16、計數(shù)3次,取平均值,使實驗結(jié)果更加準確可靠,用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)后,所得數(shù)據(jù)需要乘以10n后,才可表示乳酸菌的數(shù)量(單位:個/mL),分析圖解可知,圖中酸奶樣品總共稀釋105倍,并且稀釋涂布平板時只取了0.1 mL,因此這里的n=6。(3)在抗藥性檢驗過程中,如果在菌落周圍出現(xiàn)透明的圓圈,說明此種抗生素可抑制該細菌,因此該致病菌對抗生素A敏感;含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小,且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落,在排除雜菌污染的情況下,此菌落很可能是抗生素C的耐藥菌。 答案:(1)維生素 調(diào)pH (2)稀釋涂布平板法 6 分別計數(shù)3次,取平均值,使實驗結(jié)果更加準確可靠 (3)敏感 抗生素C的耐

17、藥菌 6.在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)研究上,常常需要進行微生物的培養(yǎng)和計數(shù)。 (1)如圖是利用________法進行微生物接種,把聚集的菌種逐步________分散到培養(yǎng)基的表面。 (2)分析下面培養(yǎng)基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、H2O。若此培養(yǎng)基用于培養(yǎng)分解尿素的細菌,則應(yīng)除去上述________成分,并加入________,以補充________源。 (3)三位同學用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中細菌數(shù)量。在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中,得到以下統(tǒng)計結(jié)果:甲同學涂布了兩個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)是236和260,取平均值248;乙同學涂布了三個平板

18、,統(tǒng)計的菌落數(shù)是210、240和250,取平均值233;丙同學涂布了三個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)是21、212和256,取平均值163;在三位同學的統(tǒng)計中,只有一位同學的統(tǒng)計是正確的,指出另兩位同學的統(tǒng)計為什么不正確。 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (4)若在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為233,那么每毫升樣品中

19、的菌株數(shù)是(涂布平板時所用稀釋液的體積為0.2 mL)________。 解析:(1)據(jù)圖分析,圖示接種方法為平板劃線法,平板劃線操作就是把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。(2)培養(yǎng)分解尿素的細菌,其氮源是尿素,所以培養(yǎng)基中要除去含氮物質(zhì),即去除NaNO3,并加入尿素和葡萄糖,以補充氮源和碳源。(3)甲同學只涂布了兩個平板,實驗數(shù)據(jù)說服力不夠;丙同學雖然涂布了三個平板,但其中一個平板的計數(shù)結(jié)果與另兩個相差太遠,說明操作過程出現(xiàn)錯誤,實驗數(shù)據(jù)缺乏說服力。(4)根據(jù)題意可知,每毫升樣品中的菌株數(shù)=平板上菌落數(shù)的平均值÷稀釋液體積×稀釋倍數(shù)=233÷0.2×106=1.165×109。 答

20、案:(1)平板劃線 稀釋 (2)NaNO3 尿素和葡萄糖 氮、碳 (3)甲同學只涂布了兩個平板,實驗數(shù)據(jù)說服力不夠;丙同學雖然涂布了三個平板,但其中一個平板的計數(shù)結(jié)果與另兩個相差太遠,說明操作過程出現(xiàn)錯誤,實驗數(shù)據(jù)缺乏說服力 (4)1.165×109 7.下面是利用微生物制作葡萄酒的流程示意圖,請回答: 葡萄除?!扑椤匀话l(fā)酵→葡萄酒→滅菌貯藏 (1)葡萄酒制作的原理是______________________________________________________ __________________________________________________

21、__________________________ ____________________________________,葡萄可為發(fā)酵菌提供________________等生長繁殖必需的物質(zhì)。 (2)葡萄除梗應(yīng)在沖洗之________(填“前”或“后”)完成,原因是 ________________________________________________________________________。 (3)葡萄酒制作過程中,在沒有嚴格滅菌的條件下,通過控制________和通入________等措施,使酵母菌大量繁殖而成為優(yōu)勢菌種。 (4)在葡萄酒制作過程中出現(xiàn)葡

22、萄酒變酸現(xiàn)象,其原因可能是發(fā)酵液中混有的________菌發(fā)酵產(chǎn)生乳酸;也可能是________________,導致醋酸菌生長繁殖,產(chǎn)生醋酸。 解析:(1)葡萄酒制作的原理是酵母菌無氧呼吸產(chǎn)生酒精,葡萄可為發(fā)酵菌提供碳源、氮源、水和無機鹽等生長繁殖必需的物質(zhì)。(2)為避免除梗時引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機會,葡萄除梗應(yīng)在沖洗之后完成。(3)葡萄酒制作過程中,在沒有嚴格滅菌的條件下,通過控制溫度和通入氧氣等措施,使酵母菌大量繁殖而成為優(yōu)勢菌種。(4)在葡萄酒制作過程中出現(xiàn)葡萄酒變酸現(xiàn)象,其原因可能是發(fā)酵液中混有的乳酸菌發(fā)酵產(chǎn)生乳酸;也可能是發(fā)酵容器密閉不嚴,導致好氧型的醋酸菌生長繁殖,產(chǎn)

23、生醋酸。 答案:(1)酵母菌在無氧條件下,將葡萄中的葡萄糖分解為酒精和CO2 水、無機鹽、碳源、氮源 (2)后 避免除梗時引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機會 (3)溫度 氧氣(無菌空氣) (4)乳酸 發(fā)酵容器密閉不嚴 8.請回答下列與發(fā)酵食品有關(guān)的問題: (1)葡萄酒釀造前需要沖洗葡萄,其主要目的是____________________________,葡萄酒呈現(xiàn)紅色的原因是____________________。喝剩的葡萄酒放置一段時間后變酸的原因是________________________________________________________________

24、________ ________________________________________________________________________。 (2)蘋果醋生產(chǎn)過程中利用了________菌的發(fā)酵作用,該過程需將溫度控制在________。 (3)制作酸奶需要的細菌的代謝類型是________。含有抗生素的牛奶能否作為酸奶發(fā)酵原料________(填“能”或“否”),原因是_____________________________________________ ___________________________________________________

25、_____________________。 解析:(1)葡萄酒釀造前沖洗葡萄的目的主要是洗去浮塵;葡萄皮中含有色素,溶解在發(fā)酵液中,使葡萄酒呈現(xiàn)紅色;葡萄酒中乙醇在醋酸菌作用下會轉(zhuǎn)變?yōu)榇姿帷?2)蘋果醋生產(chǎn)過程中利用了醋酸菌的發(fā)酵作用;醋酸菌生長最適溫度為30~35 ℃。(3)制作酸奶利用了乳酸菌發(fā)酵作用,乳酸菌的代謝類型為異養(yǎng)厭氧型;抗生素能殺死乳酸菌。 答案:(1)洗去浮塵 紅葡萄皮中的色素溶解在發(fā)酵液中 空氣中的醋酸菌混入葡萄酒后發(fā)酵產(chǎn)生了醋酸 (2)醋酸 30~35 ℃ (3)異養(yǎng)厭氧 否 抗生素可以殺死乳酸菌 9.“樹橘柚者,食之則甘,嗅之則香”。橘子全身都是寶:不僅果肉

26、的營養(yǎng)價值高,藥用價值較高,其皮、核、絡(luò)、葉都是“地道藥材”。請回答下列問題: (1)橘皮精油是一種廣譜性的殺蟲劑,具有很高的經(jīng)濟價值,常采用________法提取橘皮精油。若采取水蒸氣蒸餾法提取,橘皮精油的有效成分會發(fā)生________,使用水中蒸餾法又會產(chǎn)生________________的問題。 (2)下圖是提取橘皮精油的實驗流程示意圖: 圖中①過程處理的作用是______________________________________________________ ______________________________________________________

27、__________________; ③過程一般加入相當于橘皮質(zhì)量0.25%的小蘇打和5%的硫酸鈉,其目的是 ________________________________________________________________________。 (3)若想利用橘子生產(chǎn)果醋需要用到醋酸菌,醋酸菌的最適生長溫度為________,當________都充足時,醋酸菌可將柑橘汁中的糖分解成醋酸。 解析:(1)由于橘皮精油的有效成分在水蒸氣蒸餾過程中會發(fā)生部分水解,用水中蒸餾法又會導致原料焦糊問題,因此一般采用壓榨法提取橘皮精油。(2)圖中①過程是將干燥去水的橘皮用石灰水浸泡,該處

28、理的作用是破壞細胞結(jié)構(gòu),分解果膠,防止橘皮壓榨時滑脫,提高出油率。③過程為壓榨,在壓榨過程中一般加入相當于橘皮質(zhì)量0.25%的NaHCO3(小蘇打)和5%的Na2SO4(硫酸鈉),并將pH調(diào)至7~8,其目的是使橘皮精油易于與水分離。(3)醋酸菌的最適生長溫度為30~35 ℃,當氧氣和糖源都充足時,醋酸菌可將柑橘汁中的糖分解成醋酸。 答案:(1)壓榨 部分水解 原料焦糊 (2)破壞細胞結(jié)構(gòu),分解果膠,防止橘皮壓榨時滑脫,提高出油率 使橘皮精油易于與水分離 (3)30~35 ℃ 氧氣和糖源 10.(2018·東北三省三校聯(lián)考)青蒿素,無色針狀晶體,易溶于有機溶劑,不溶于水、不易揮發(fā)。獲取途

29、徑主要是從黃花蒿中直接提取得到。根據(jù)生物相關(guān)知識,回答下列問題: (1)使用水蒸氣蒸餾法________(填“適用”或“不適用”)提取青蒿素,原因是 ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)從黃花蒿中提取青蒿素時,應(yīng)采用________法,并且通常在提取前將黃花蒿莖葉進行________和干燥,以提高效率;干燥過程應(yīng)控制好____

30、____和________,以防止青蒿素分解。 (3)提取過程中宜采用________加熱以防止燃燒、爆炸;所得液體濃縮前需進行________。 (4)最后需要對所提取物質(zhì)進行________,以確定是否提取到青蒿素。 解析:(1)水蒸氣蒸餾法的原理是利用水蒸氣將揮發(fā)性較強的植物芳香油攜帶出來,形成油水混合物,冷卻后混合物又重新分出油層和水層,由于青蒿素為非揮發(fā)性物質(zhì),不能隨水蒸氣蒸餾出,故青蒿素不適于用水蒸氣蒸餾法提取。(2)為了提高萃取效率,萃取前應(yīng)將莖葉進行粉碎和干燥。高溫會使青蒿素分解,所以在加熱干燥過程中,應(yīng)注意控制好溫度和時間。(3)有機溶劑易燃,直接使用明火加熱容易引起燃燒、爆炸,提取過程中宜采用水浴加熱;所得液體濃縮前需進行過濾,除去萃取液中的不溶物。(4)為確定是否提取了青蒿素,可以用紙層析法進行鑒定。 答案:(1)不適用 水蒸氣蒸餾法適用于蒸餾揮發(fā)性物質(zhì),而青蒿素為非揮發(fā)性物質(zhì),不能隨水蒸氣蒸餾出 (2)萃取 粉碎 溫度 時間 (3)水浴 過濾 (4)鑒定

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