廣西2020版高考生物一輪復(fù)習(xí) 第14單元 第2講 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 酶的應(yīng)用課件 新人教版選修1 .ppt
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1、第2講微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 酶的應(yīng)用,1.微生物的分離和培養(yǎng)。2.某種微生物數(shù)量的測定。3.培養(yǎng)基對微生物的選擇作用。4.酶活力測定的一般原理和方法。5.酶在食品制造和洗滌等方面的應(yīng)用。6.制備和應(yīng)用固相化酶。,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),微生物的分離與培養(yǎng) 1.培養(yǎng)基 (1)概念:人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。 (2)營養(yǎng)組成:一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽,還需要滿足微生物生長對pH、氧氣以及特殊營養(yǎng)物質(zhì)的要求。,教材深挖平板冷凝后,為什么要將平板倒置? 提示:平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可
2、以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。,,,,,,,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),2.無菌技術(shù) (1)關(guān)鍵:防止外來雜菌的入侵。 (2)無菌操作的方法,,,,,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),3.大腸桿菌的純化培養(yǎng) (1)制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基,(2)純化大腸桿菌 純化培養(yǎng)原理:在培養(yǎng)基上將細(xì)菌稀釋或分散成單個(gè)細(xì)胞,使其長成單個(gè)的菌落,這個(gè)菌落就是一個(gè)純化的細(xì)菌菌落。 菌落:由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體。 常用的微生物接種方法 a.平板劃線法:通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的
3、表面。 b.稀釋涂布平板法:將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進(jìn)行培養(yǎng)。,,,,,,,,,,,,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),(3)菌種的保藏方法 對于頻繁使用的菌種,可以采用臨時(shí)保藏的方法。 對于需要長期保存的菌種,可以采用甘油管藏的方法。,,,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),(1)培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽。( ) (2)在配制培養(yǎng)基時(shí),除滿足營養(yǎng)需求外,還應(yīng)考慮微生物對pH、O2及特殊營養(yǎng)物質(zhì)的需求。( ) (3)培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)皿后才能進(jìn)行滅菌。( ) (4)消毒的原則是既能殺死材料表面的微生物,又要減
4、少消毒劑對細(xì)胞的傷害。( ) (5)無菌操作的對象只要是沒有生物活性的材料(如培養(yǎng)基、接種環(huán)等)都可采用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌。 ( ) (6)平板劃線法中每一次劃線后要將接種環(huán)灼燒。 ( ) (7)用稀釋涂布平板法純化大腸桿菌時(shí),只要稀釋度足夠高,就能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。( ),,,,,,,,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),右上圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖,請思考下列問題。 (1)獲得圖A效果和圖B效果的接種方法分別是什么? 提示:獲得圖A效果的接種方法為稀釋涂布平板法,獲得圖B效果的接種方法為平板劃線法。 (2)某同學(xué)在純化土壤中的某種細(xì)菌時(shí)
5、,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成了一片,最可能的原因是什么?應(yīng)當(dāng)怎樣操作才可避免此種現(xiàn)象? 提示:最可能的原因是菌液濃度過高或劃線時(shí)在每次劃線后未將接種環(huán)灼燒滅菌;采取的措施是增大稀釋倍數(shù)或每次劃線后將接種環(huán)灼燒滅菌。,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),考向 微生物的純化技術(shù) (2018全國卷)將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時(shí)間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養(yǎng)基。 回答下列問題。 (1)M培養(yǎng)基若用于真菌的篩選,則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制的生長,加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。 (2)M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)
6、,營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有(答出兩點(diǎn)即可)。氮源進(jìn)入細(xì)胞后,可參與合成的生物大分子有(答出兩點(diǎn)即可)。,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),(3)若在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培養(yǎng),平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是,該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是。 (4)甲、乙兩名同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果: 甲同學(xué)涂布了3個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133。 乙同學(xué)涂布了3個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。 有人認(rèn)為這兩名同學(xué)的結(jié)果
7、中,乙同學(xué)的結(jié)果可信度低,其原因是。,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),答案:(1)細(xì)菌選擇 (2)碳源、無機(jī)鹽蛋白質(zhì)、核酸 (3)碘液淀粉遇碘液顯藍(lán)色,產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解,形成透明圈 (4)乙同學(xué)的結(jié)果中,1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差較大,結(jié)果的重復(fù)性差,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),解析:(1)鏈霉素可抑制細(xì)菌的生存,但真菌可以在含鏈霉素的培養(yǎng)基中生存,所以加入鏈霉素的培養(yǎng)基可用于篩選出真菌,屬于選擇培養(yǎng)基。 (2)培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)主要有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等。蛋白質(zhì)和核酸都含氮元素,所以氮源進(jìn)入細(xì)胞后可用于合成蛋白質(zhì)和核酸等大分子物質(zhì)。 (3)檢測淀粉所用
8、的試劑是碘液,淀粉遇碘變藍(lán)。如果某種微生物產(chǎn)生了淀粉酶,則在其菌落周圍就沒有淀粉存在,不再呈現(xiàn)藍(lán)色,而是出現(xiàn)透明圈。 (4)計(jì)數(shù)時(shí)一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。乙同學(xué)的實(shí)驗(yàn)中,1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差較大,可信度低。,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),1.消毒和滅菌的比較,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),2.兩種微生物接種方法優(yōu)缺點(diǎn)的比較,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),微生物的篩選和計(jì)數(shù) 1.土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù),,,,,,,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),2.分解纖維素的微生物的分離 (1)纖維素酶 組成:纖維素酶是一種復(fù)合酶,一
9、般認(rèn)為它至少包括三種組分,即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶。,(2)纖維素分解菌的篩選 原理 纖維素分解菌 ,,,,,,,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),篩選方法:剛果紅染色法,即通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。 培養(yǎng)基:以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基。 實(shí)驗(yàn)流程 土壤取樣:富含纖維素的環(huán)境 選擇培養(yǎng):用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng),以增加纖維素分解菌的濃度 梯度稀釋:制備系列稀釋液 涂布平板:將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落,,,,,,,,,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),教材深挖為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物? 提示:在選擇培養(yǎng)的條件下,那些能夠適應(yīng)
10、這種營養(yǎng)條件的微生物迅速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此選擇培養(yǎng)可以起到“濃縮”的作用。,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),(1)選擇培養(yǎng)基可以鑒定某種微生物的種類。( ) (2)只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。( ) (3)篩選能分解尿素的細(xì)菌所利用的培養(yǎng)基中,尿素是唯一的氮源。( ) (4)分解尿素的細(xì)菌在分解尿素時(shí),可以將尿素轉(zhuǎn)化為氨,使得培養(yǎng)基的pH降低。( ) (5)在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,若指示劑變藍(lán),則說明篩選到分解尿素的細(xì)菌。( ) (6)纖維素是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的主要成分,在纖維素酶的作用下,纖維素可以水解成葡萄糖
11、。( ) (7)在篩選能分解纖維素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中,選擇培養(yǎng)的目的是增大樣品中目的菌株的濃度。( ),,,,,,,,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),(8)剛果紅可以與纖維素形成透明復(fù)合物,所以可通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。( ) (9)剛果紅染色法只能在培養(yǎng)微生物的時(shí)候加入剛果紅。( ),,,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),1.一些微生物可以有效地分解石油,如何配制選擇培養(yǎng)基將這類微生物從含多種微生物的樣品中選擇出來? 提示:配制的選擇培養(yǎng)基中,以石油為唯一碳源,然后用這種培養(yǎng)基培養(yǎng)含多種微生物的樣品,能在該種培養(yǎng)基上生存的就是能分解石油的微生物。 2.為什么測
12、定活菌的數(shù)量不能用平板劃線法? 提示:用平板劃線法接種時(shí),一般只在最后一次劃線的末端形成只由一個(gè)活菌形成的菌落,而其他一些菌落往往由兩個(gè)活菌或多個(gè)活菌繁殖而成,還有一些不能形成菌落,而在計(jì)數(shù)時(shí)一個(gè)菌落對應(yīng)著一個(gè)活菌,這樣在劃線所得的平板中,菌落數(shù)目低于活菌的實(shí)際數(shù)值,所以不能用平板劃線法測定活菌數(shù)量。,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),考向1 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 1.(2016四川卷)圖甲是從土壤中篩選產(chǎn)脲酶細(xì)菌的過程,圖乙是脲酶基因轉(zhuǎn)錄的mRNA部分序列。,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),(1)圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以為唯一氮源;鑒別培養(yǎng)基還需添加作指示劑,產(chǎn)脲酶細(xì)菌在
13、該培養(yǎng)基上生長一段時(shí)間后,其菌落周圍的指示劑將變成色。 (2)在5個(gè)細(xì)菌培養(yǎng)基平板上,均接種稀釋倍數(shù)為105的土壤樣品溶液0.1 mL,培養(yǎng)一段時(shí)間后,平板上長出的細(xì)菌菌落數(shù)目分別為13、156、462、178和191。 該過程采取的接種方法是,每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為108個(gè);與血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)法相比,此計(jì)數(shù)方法測得的細(xì)菌數(shù)較。 (3)現(xiàn)有一菌株的脲酶由于基因突變而失活,突變后基因轉(zhuǎn)錄的mRNA在圖乙箭頭所示位置增加了70個(gè)核苷酸,使圖乙序列中出現(xiàn)終止密碼(終止密碼有UAG、UGA和UAA)。突變基因轉(zhuǎn)錄的mRNA中,終止密碼為,突變基因表達(dá)的蛋白含個(gè)氨基酸。,核心梳理,提能探究,考向感悟
14、,歸納總結(jié),答案:(1)尿素酚紅紅 (2)稀釋涂布平板法1.75少 (3)UGA115,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),解析:(1)脲酶能夠催化尿素分解為氨,故圖中選擇培養(yǎng)基應(yīng)以尿素作為唯一氮源。由于尿素被分解成了氨,氨會使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng),pH升高,使酚紅指示劑變紅色,故用酚紅作為指示劑。 (2)本題用于計(jì)數(shù)細(xì)菌菌落數(shù)的接種方法是稀釋涂布平板法,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)應(yīng)介于30300之間,故應(yīng)選擇細(xì)菌菌落數(shù)為156、178和191的平板計(jì)數(shù),每克土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)量為(156+178+191)/30.1105=1.75108(個(gè))。由于兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連接在一起時(shí),往往統(tǒng)計(jì)的是一個(gè)菌落,故用此方
15、法測得的細(xì)菌數(shù)偏小。 (3)密碼子由mRNA上3個(gè)相鄰的堿基組成,271個(gè)堿基和后面2個(gè)堿基一起共組成91個(gè)密碼子,插入的70個(gè)核糖核苷酸和后面2個(gè)堿基一起共構(gòu)成24個(gè)密碼子,后面的UGA是終止密碼,故翻譯產(chǎn)生的蛋白質(zhì)含115個(gè)氨基酸。,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),考向2 分解纖維素的微生物的分離 2.為獲得果膠酶高產(chǎn)菌株,科研人員進(jìn)行了下列分離、篩選、鑒定工作。 (1)為分離果膠酶高產(chǎn)菌株,科研人員配制了下表所示成分的培養(yǎng)基,該表空白處的兩種成分分別是、。制備的培養(yǎng)基常用法進(jìn)行滅菌。,(2)科研人員將采集的果園土壤放入無菌水中,振蕩混勻,制成懸液。為獲得較均勻分布的單菌落,還需要
16、將懸液進(jìn)行,用法接種于固體培養(yǎng)基上。接種后的培養(yǎng)基呈狀態(tài)放入培養(yǎng)箱。,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),(3)選擇單菌落數(shù)目適宜的培養(yǎng)基,加入一定濃度的剛果紅溶液(果膠與剛果紅結(jié)合后顯紅色),一段時(shí)間后洗去培養(yǎng)基表面的剛果紅溶液,觀察并比較菌落和直徑的比值,篩選果膠酶高產(chǎn)菌株。 (4)將獲得的菌株進(jìn)行液體培養(yǎng)后,從培養(yǎng)液的(填“上清液”或“沉淀物”)獲得粗提的果膠酶。將一定量的粗提果膠酶與適量果膠溶液混合,一定時(shí)間后測定吸光值來測定酶活性。進(jìn)行吸光值測定時(shí),需將與等量果膠溶液混合,作為實(shí)驗(yàn)的對照。,答案:(1)果膠蒸餾水高壓蒸汽滅菌 (2)梯度稀釋(或系列稀釋)(稀釋)涂布平板倒置 (3
17、)透明圈 (4)上清液等量失活的粗提果膠酶,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),兩種微生物篩選方法的比較,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),酶的應(yīng)用 1.果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用 (1)果膠酶不特指一種酶,而是一類酶的總稱,包括多聚半乳糖醛酸酶、果膠分解酶和果膠酯酶等。 (2)果膠酶可以分解果膠,使榨取果汁變得更容易;果膠分解后,也使得渾濁的果汁變得澄清。,,,,,,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),2.探討加酶洗衣粉的洗滌效果 (1)加酶洗衣粉中常用的酶制劑包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶四種,這些酶的活性受溫度、酸堿度和表面活性劑等的影響。 (2)加酶洗衣粉去污機(jī)理:堿
18、性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶也能分別把大分子脂肪、淀粉和纖維素水解為小分子物質(zhì),使污跡容易從衣物上脫落。,,,,,,,,,,,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),3.酵母細(xì)胞的固定化 (1)固定化酶的應(yīng)用實(shí)例果糖生產(chǎn):將果糖生產(chǎn)中所用的葡萄糖異構(gòu)酶進(jìn)行固定,可以連續(xù)使用該酶,降低了生產(chǎn)成本,提高了產(chǎn)品質(zhì)量和生產(chǎn)效率。 (2)固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù):指利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù),包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法,其中包埋法常用來固定細(xì)胞。 (3)制備固定化酵母細(xì)胞的操作:酵母細(xì)胞的活化配制Ca
19、Cl2溶液配制海藻酸鈉溶液海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合固定化酵母細(xì)胞。,,,,,,,,,,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),(1)果膠酶能將乳糖醛酸分解成半乳糖醛酸。( ) (2)果膠酶只改變果膠分解的速度,反應(yīng)前后果膠酶本身沒有發(fā)生改變。( ) (3)加酶洗衣粉的效果總比普通洗衣粉的效果好。( ) (4)從酶的固定方式看,物理吸附法比化學(xué)結(jié)合法對酶活性影響小。( ),,,,,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),小華同學(xué)想用含有蛋白酶的洗衣粉洗滌媽媽送給她的真絲圍巾,你認(rèn)為她這樣做合適嗎?為什么? 提示:不合適。因?yàn)榻z綢的主要成分是蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)會被洗衣粉中的蛋白酶分解,從而使
20、真絲圍巾損壞。,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),考向 1 酶的活性測定及其應(yīng)用 1.果膠酶能分解果膠等物質(zhì),可以用來澄清果蔬飲料,在食品加工業(yè)中有著廣泛的應(yīng)用。回答下列問題。 (1)果膠酶是分解果膠的酶的總稱,包括、果膠分解酶和。食品工業(yè)中之所以使用果膠酶澄清果蔬飲料,是因?yàn)楣z酶能破壞植物的結(jié)構(gòu)。 (2)微生物是生產(chǎn)果膠酶的優(yōu)良生物資源。分離和篩選能產(chǎn)生果膠酶的微生物,使用的培養(yǎng)基應(yīng)該以為唯一碳源;為了純化該生物,需要在(填“固體”或“液體”)培養(yǎng)基上接種菌種,最常用的接種方法有。 (3)在榨取果汁前,要將果膠酶和果泥混勻保溫,目的是提高出汁率;過濾后要用果膠酶處理果汁,目的是。,核
21、心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),(4)根據(jù)下表實(shí)驗(yàn)結(jié)果,(填“能”或“不能”)確定40 就是果膠酶的最適溫度。,答案:(1)多聚半乳糖醛酸酶果膠酯酶細(xì)胞壁 (2)果膠固體平板劃線法和稀釋涂布平板法 (3)使果汁變澄清 (4)不能,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),考向2 固定化酶或細(xì)胞的制備和應(yīng)用 2.乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖,具有重要應(yīng)用價(jià)值。乳糖酶的制備及固定化步驟如下。,(1)篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L(fēng)時(shí),宜用作為培養(yǎng)基中的唯一碳源。培養(yǎng)基中瓊脂的作用是。從功能上講,這種培養(yǎng)基屬于。 (2)培養(yǎng)微生物L(fēng)前,宜采用方法對接種環(huán)進(jìn)行滅菌。 (3)乳糖酶宜采用化學(xué)結(jié)合法(
22、共價(jià)鍵結(jié)合法)進(jìn)行固定化,可通過檢測固定化乳糖酶的確定其應(yīng)用價(jià)值。除化學(xué)結(jié)合法外,酶的固定化方法還包括、等。,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),答案:(1)乳糖凝固劑選擇培養(yǎng)基 (2)灼燒 (3)(酶)活性或(酶)活力包埋法物理吸附法(注:后面兩空可顛倒) 解析:(1)在只有乳糖的培養(yǎng)基上,產(chǎn)生乳糖酶的微生物才能生存,從而篩選出產(chǎn)生乳糖酶的微生物,這類培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。 (2)接種微生物之前,對接種環(huán)要灼燒滅菌。 (3)獲取酶后要檢測其活性(活力)大小,活性(活力)大的酶才能用于生產(chǎn)。酶的固定方法包括化學(xué)結(jié)合法、包埋法、物理吸附法等。,核心梳理,提能探究,考向感悟,歸納總結(jié),1.果膠
23、酶與纖維素酶的比較,2.普通洗衣粉和加酶洗衣粉去污原理的異同,通關(guān)記,通關(guān)辨,通關(guān)練,1.無菌操作技術(shù)包括消毒和滅菌。消毒包括煮沸消毒、巴氏消毒、化學(xué)藥劑消毒和紫外線消毒等;滅菌包括灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。 2.培養(yǎng)基的制備包括計(jì)算、稱量、溶化、滅菌、倒平板等步驟。平板冷卻凝固后,倒置平板的目的是防止培養(yǎng)皿蓋上的水滴滴入培養(yǎng)基造成污染。 3.純化大腸桿菌常用的接種方法包括平板劃線法和稀釋涂布平板法。平板劃線法要求多次劃線,稀釋涂布平板法要求菌液要充分地稀釋。 4.微生物計(jì)數(shù)時(shí)每個(gè)稀釋度要制作多個(gè)平板,并選擇菌落數(shù)為30300個(gè)的平板計(jì)數(shù)。,通關(guān)記,通關(guān)辨,通關(guān)練,5.尿素分解菌和纖維
24、素分解菌的分離都運(yùn)用了選擇培養(yǎng)基,前者所用的培養(yǎng)基中尿素是唯一的氮源,后者所用的培養(yǎng)基中纖維素是唯一的碳源。 6.果膠酶不是特指某一種酶,而是分解果膠的一類酶的總稱;果膠酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),能被蛋白酶水解;果膠酶具有酶的通性:只改變反應(yīng)速度,不改變反應(yīng)的平衡點(diǎn)。 7.加酶洗衣粉中的酶通常是通過基因工程生產(chǎn)的,能夠耐酸、耐堿、忍受表面活性劑和較高溫度。 8.添加了堿性蛋白酶的洗衣粉可以分解人體皮膚表面的蛋白質(zhì),使人患過敏性皮炎、濕疹等,因此,應(yīng)避免與這類洗衣粉長時(shí)間地接觸。,通關(guān)記,通關(guān)辨,通關(guān)練,9.固定化酶和固定化細(xì)胞的方法包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。一般來說,酶更適合采用化學(xué)結(jié)合
25、法和物理吸附法固定化,而細(xì)胞多采用包埋法固定化。,通關(guān)記,通關(guān)辨,通關(guān)練,1.選擇培養(yǎng)基的選擇方法 (1)在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)。例如,加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌;加入高濃度的食鹽可以分離出金黃色葡萄球菌。這里的加入是在主要營養(yǎng)成分完整的基礎(chǔ)上加入。 (2)改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分。例如,缺乏氮源時(shí)可以分離出固氮微生物;石油作為唯一碳源時(shí),可以分離出能分解石油的微生物。 (3)改變微生物的培養(yǎng)條件。例如,將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境下培養(yǎng),可以分離出耐高溫的微生物。 2.果膠酶和纖維素酶的作用辨析 (1)兩種酶都是復(fù)合酶,是催化幾個(gè)連續(xù)反應(yīng)的幾種不同的酶的總稱,不是特指一種酶。 (2)兩種酶都
26、是水解酶,可同時(shí)發(fā)揮作用,不會相互干擾,制作果汁過程中可同時(shí)加入。,通關(guān)記,通關(guān)辨,通關(guān)練,(2017江蘇卷)苯酚及其衍生物廣泛存在于工業(yè)廢水中,對環(huán)境有嚴(yán)重危害。小明同學(xué)準(zhǔn)備依據(jù)下圖操作步驟,從處理廢水的活性污泥中分離篩選酚降解高效菌株。請回答下列問題。,(1)酚降解菌富集培養(yǎng)基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作為碳源的有。 (2)將采集到的樣品接種培養(yǎng),苯酚用量應(yīng)隨轉(zhuǎn)接次數(shù)的增加而逐漸,以達(dá)到富集酚降解菌的目的。若上圖平板中菌落過于密集,應(yīng)進(jìn)一步,以便于菌落計(jì)數(shù)與分離。制備平板培養(yǎng)基時(shí)除了需要水、營養(yǎng)物質(zhì)外,還必須添加。,通關(guān)記,通關(guān)辨,通關(guān)練,(3)下圖為連續(xù)劃線法
27、示意圖,在圖中(填圖中序號)區(qū)域更易獲得單菌落。,通關(guān)記,通關(guān)辨,通關(guān)練,(4)采用比色測定法(使用苯酚顯色劑)檢測降解后的廢水中苯酚殘留量。先制作系列濃度梯度并進(jìn)行顯色反應(yīng),下表中15號比色管的苯酚濃度應(yīng)分別為。 如果廢水為50 mg/L 的苯酚溶液,降解后約有21%的苯酚殘留,則需將殘留液稀釋(填序號:510 20)倍后,再進(jìn)行比色。,答案:(1)蛋白胨、苯酚 (2)增加稀釋涂布凝固劑 (3) (4)0、0.2、0.4、0.6、0.8,通關(guān)記,通關(guān)辨,通關(guān)練,解析:(1)培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)一般都包括水、無機(jī)鹽、碳源、氮源,蛋白胨和苯酚中含有C元素,可作為碳源。 (2)要富集該菌,應(yīng)提高營養(yǎng)
28、物質(zhì)含量。若菌落過于密集,說明稀釋倍數(shù)不夠,應(yīng)進(jìn)一步稀釋,然后再涂布平板。制備固體培養(yǎng)基時(shí)需加入凝固劑瓊脂。 (3)用平板劃線法接種菌體,隨劃線次數(shù)的增加,菌體數(shù)量逐漸減少,故區(qū)域更易獲得單菌落。,通關(guān)記,通關(guān)辨,通關(guān)練,(4)題中已給出6號比色管中的苯酚濃度為1 mg/L,根據(jù)濃度梯度的設(shè)計(jì)原則和空白對照原則,15號比色管中的苯酚濃度應(yīng)依次為0 mg/L、0.2 mg/L、0.4 mg/L、0.6 mg/L、0.8 mg/L。廢水中苯酚的濃度為50 mg/L,降解后約有21%的苯酚殘留,則降解后廢水中苯酚的濃度為5021%=10.5(mg/L),因?yàn)楸壬苤斜椒拥臐舛确秶鸀?1 mg/L,若將降解后的廢水稀釋5倍或10倍,則稀釋后廢水中苯酚的濃度均大于1 mg/L,若稀釋20倍,則稀釋后廢水中苯酚的濃度為0.525 mg/L,介于01 mg/L之間,故需將降解后的廢水稀釋20倍后再進(jìn)行比色。,
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