高考生物 熱點專題訓練15 基因工程和細胞工程

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1、高考專題訓練(十五)　基因工程和細胞工程 1．(2012·浙江六校聯(lián)考)下面是四種不同質粒的示意圖，其中ori為復制必需的序列，amp為氨芐青霉素抗性基因，tet為四環(huán)素抗性基因，箭頭表示一種限制性核酸內切酶和酶切位點。若要得到一個能在四環(huán)素培養(yǎng)基上生長而不能在氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長的含重組DNA的細胞，應選用的質粒是(　　) 解析　A項破壞了復制必需的序列，不能復制；B項氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因都完好，在四環(huán)素培養(yǎng)基上和氨芐青霉素培養(yǎng)基上都能生長；C項氨芐青霉素抗性基因被破壞，四環(huán)素抗性基因完好，能在四環(huán)素培養(yǎng)基上生長而不能在氨芐青霉素培養(yǎng)基上生長；D項氨芐青霉素抗性基因完

2、好，四環(huán)素抗性基因被破壞。 答案　C 2．(2012·浙江寧波八校聯(lián)考)以下關于現(xiàn)代生物技術的說法，錯誤的是(　　) A．在基因工程技術中，需要用CaCl2處理的環(huán)節(jié)是將目的基因導入細菌 B．我國政府對待克隆人技術的態(tài)度是禁止克隆人，因為克隆人嚴重違反生物倫理 C．原生質體制備過程中用0.5～0.6 mol·L－1的甘露醇溶液是為了保護果膠酶和纖維素酶 D．在基因工程中，解旋酶作用的是氫鍵，限制性核酸內切酶和DNA連接酶作用的都是磷酸二酯鍵 解析　原生質體制備過程中用0.5～0.6 mol·L－1的甘露醇溶液是為了維持細胞的滲透壓。 答案　C 3．(2012·天津寶坻模擬)下

3、列有關基因工程的敘述，錯誤的是(　　) A．從基因組文庫中獲取的某種生物的部分基因，可以實現(xiàn)物種間的基因交流 B．從cDNA文庫中獲取的目的基因，既無啟動子，又無內含子 C．用人的胰高血糖素基因制成的DNA探針，檢測人胰島B細胞中的mRNA，可形成雜交分子 D．基因表達載體中的標記基因，不能含有限制酶的切割位點 解析　人的胰高血糖素基因在胰島A細胞中能轉錄出信使RNA，在胰島B細胞中不轉錄。 答案　C 4．(2012·北京東城示范校聯(lián)考)降鈣素是一種多肽類激素，臨床上用于治療骨質疏松癥等。人的降鈣素活性很低，半衰期較短。某科學機構為了研發(fā)一種活性高、半衰期長的新型降鈣素，從預期新

4、型降鈣素的功能出發(fā)，推測相應的脫氧核苷酸序列，并人工合成了兩條72個堿基的DNA單鏈，兩條鏈通過18個堿基對形成部分雙鏈DNA，過程如下圖： 獲得的雙鏈DNA經EcoRⅠ(識別序列和切割位點—ATTC—)和BamHⅠ(識別序列和切割位點—ATCC—)雙酶切后插入大腸桿菌質粒中。下列有關分析錯誤的是(　　) A．Klenow酶是一種DNA聚合酶 B．合成的雙鏈DNA有72個堿基對 C．EcoRⅠ和BamHⅠ雙酶切的目的是保證目的基因和運載體的定向連接 D．篩選重組質粒需要大腸桿菌質粒中含有標記基因 解析　合成的單鏈DNA有72個堿基，從題圖看出兩條單鏈并未左右兩端對齊配對，只通過

5、18個堿基對形成部分雙鏈DNA片段，因此獲得的雙鏈DNA有堿基對72＋72－18＝126個堿基對。 答案　B 5．(2012·江蘇百校聯(lián)考)(多選)右圖表示細胞膜上乙酰膽堿(一種神經遞質)受體基因的克隆技術操作過程，下列相關分析中錯誤的是(　　) A．獲得該mRNA的最佳材料是受精卵 B．構建基因表達載體最可能使用的載體是大腸桿菌 C．完成過程①②必不可少的酶分別是逆轉錄酶、DNA聚合酶 D．探針篩選的目的是淘汰被感染的細菌，獲得未被感染的細菌 解析　該受體基因在神經細胞中表達，獲得該mRNA的最佳材料是神經細胞；構建基因表達載體最可能使用的載體是質粒；探針篩選的目的是檢測是

6、否存在cDNA。 答案　ABD 6．(2012·杭州一模)下圖示植物組織培養(yǎng)過程。據圖分析下列敘述正確的是(　　) A．⑤植株根尖細胞的全能性比①植株根尖細胞的強 B．②試管的培養(yǎng)基中含有植物生長調節(jié)劑，不含有有機物 C．③試管中的細胞能進行減數分裂 D．調節(jié)④培養(yǎng)中植物生長調節(jié)劑的比例可誘導產生不同的植物器官 解析?、葜仓旮饧毎娜苄耘c①植株根尖細胞相同；②試管的培養(yǎng)基中含有植物生長調節(jié)劑和有機物等；③試管中的細胞進行的分裂方式為有絲分裂；調節(jié)④培養(yǎng)中植物生長調節(jié)劑的比例，可誘導產生根和芽。 答案　D 7．(2012·北京海淀期末)下列實例與所利用的技術或原理不相符

7、合的是(　　) A．轉基因抗蟲棉的培育需要利用植物組織培養(yǎng)技術 B．植物組織培養(yǎng)過程依據的原理是植物細胞具有全能性 C．原生質體融合和動物細胞融合都利用了細胞膜的選擇透過性 D．植物愈傷組織的形成和雜交瘤細胞的培養(yǎng)都與細胞分裂有關 解析　原生質體融合和動物細胞融合都利用了細胞膜的流動性。 答案　C 8．(2012·江蘇)下列關于人類基因組計劃的敘述，合理的是(　　) A．該計劃的實施將有助于人類對自身疾病的診治和預防 B．該計劃是人類從細胞水平研究自身遺傳物質的系統(tǒng)工程 C．該計劃的目的是測定人類一個染色體組中全部DNA序列 D．該計劃的實施不可能產生種族歧視、侵犯個人隱

8、私等負面影響 解析　人類基因組計劃的主要目的是對人類的24條染色體上的DNA進行測序，該計劃的實施將有助于人類對自身疾病的診治和預防；該計劃屬于分子水平的研究；該計劃測定的染色體為24條，而一個染色體組中的染色體為23條；由于該計劃最終將會測定出不同種族、不同個體的DNA上的堿基序列，所以會導致種族歧視、侵犯個人隱私等問題的發(fā)生。 答案　A 9．(2011·天津)絮凝性細菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物，能與石油污水中的懸浮顆粒和有機物等形成絮狀沉淀，起到凈化污水的作用。為進一步提高對石油污水的凈化效果，將絮凝性細菌和石油降解菌融合，構建目的菌株。其流程圖如下： 據圖回答： (

9、1)溶菌酶的作用是________。 (2)PEG的作用是______________________________。 (3)經處理后，在再生培養(yǎng)基上，未融合的A、B難以生長。圖中AB融合菌能生長和繁殖的原因是_________________。 (4)目的菌株的篩選：篩選既能分泌具有絮凝活性的化合物，又能在含有________的培養(yǎng)基上生長的AB融合菌，選擇效果最好的作為目的菌株。 (5)為探究目的菌株不同發(fā)酵時間發(fā)酵液的絮凝效果，將目的菌株進行發(fā)酵培養(yǎng)，定時取發(fā)酵液，加入石油污水中；同時設置______________為對照組。經攪拌、靜置各3 min后，分別測定上層水樣的石油濃

10、度和COD值(COD值越高表示有機物污染程度越高)，計算石油去除率和COD去除率，結果如下圖。 (6)目的菌的種群生長曲線呈________型，在40～44 h，發(fā)酵液對石油污水的凈化效果最好，其原因是________________。 解析　(1)細菌有細胞壁，這將妨礙細菌的融合，所以用溶菌酶將其細胞壁進行分解，以實現(xiàn)兩者的融合。 (2)PEG是促進細胞融合的促融劑，作用是促進細胞融合。 (3)由圖示顯示A菌細胞質失去活性，B菌DNA失去活性，所以融合后，在選擇培養(yǎng)基上單純的A、B菌都不能存活，而讓融合的AB菌進行生長并繁殖。 (4)目的菌的選擇是要選擇能分泌具有絮凝活性的活性

11、高分子化合物，又具有降解石油的能力的融合菌。 (5)為探究目的菌株在不同時間的絮凝效果，則設置的對照組實驗應是不加發(fā)酵液(沒有目的菌株)的石油污水。 (6)圖示結果顯示：目的菌的種群生長曲線呈現(xiàn)S型。在40～44 h，發(fā)酵液中目的菌數量達到最大，產生的有活性的高分子化合物的含量較高，所以凈化污水的效果最好。 答案　(1)分解細胞壁 (2)誘導原生質體融合 (3)兩親本失活部位不同，融合后活性部位互補 (4)石油 (5)不加發(fā)酵液的石油污水 (6)S　此期間，目的菌及其產生的絮凝活性高分子化合物的含量高 10．(2012·天津)生物分子間特異性結合的性質廣泛用于生命科學研究。以

12、下實例為體外處理“蛋白質-DNA復合體”獲得DNA片段信息的過程圖。 據圖回答： (1)過程①酶作用的部位是________鍵，此過程只發(fā)生在非結合區(qū)DNA。過程②酶作用的部分是________鍵。 (2)①、②兩過程利用了酶的________特性。 (3)若將得到的DNA片段用于構建重組質粒，需要將過程③的測序結果與________酶的識別序列進行比對，以確定選用何種酶。 (4)如果復合體中的蛋白質為RNA聚合酶，則其識別、結合的DNA序列區(qū)為基因的________。 (5)以下研究利用了生物分子間特異性結合性質的有________(多選)。 A．分離得到核糖體，用蛋白酶酶

13、解后提取rRNA B．用無水乙醇處理菠菜葉片，提取葉綠體基粒膜上的光合色素 C．通過分子雜交手段，用熒光物質標記的目的基因進行染色體基因定位 D．將抑制成熟基因導入番茄，其mRNA與催化成熟酶基因的mRNA互補結合，終止后者翻譯，延遲果實成熟 解析　(1)DNA酶的作用是催化DNA的水解，故DNA水解的實質是磷酸二酯鍵的斷裂，所以DNA酶作用部位是磷酸二酯鍵。蛋白酶具有催化蛋白質水解的作用，蛋白質水解的實質是破壞肽鍵，所以蛋白酶作用的部位是肽鍵。 (2)這兩個過程分別利用了不同酶催化，利用了酶的專一性。 (3)構建重組質粒時要使用限制性核酸內切酶和DNA連接酶，其中限制性核酸內切酶

14、需要根據要切割的序列進行選擇，因為一種限制性核酸內切酶只能識別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并在特定部位進行切割。 (4)基因的上游非編碼區(qū)有一段特定的核苷酸序列，是RNA聚合酶識別和結合的位點，此段序列稱為基因的啟動子。 (5)A項利用了蛋白酶只能與蛋白質特異性結合，專一性的催化蛋白質的水解。B項利用的是相似相溶的原理，有機溶劑既可以是無水乙醇，也可以是丙酮等其他有機溶劑。C項利用了DNA探針與目的基因特異性結合的特點。D項利用了堿基互補配對原則。所以，利用分子間特異性結合性質的有A、C、D三項。 答案　(1)磷酸二酯　肽 (2)專一性 (3)限制性核酸內切 (4)啟動子(或轉

15、錄起始區(qū)) (5)A、C、D 11．(2011·江蘇)請回答基因工程方面的有關問題： (1)利用PCR技術擴增目的基因，其原理與細胞內DNA復制類似(如下圖所示)。圖中引物為單鏈DNA片段，它是子鏈合成延伸的基礎。 ①從理論上推測，第四輪循環(huán)產物中含有引物A的DNA片段所占的比例為________。 ②在第________輪循環(huán)產物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段。 (2)設計引物是PCR技術關鍵步驟之一。某同學設計的兩組引物 (只標注了部分堿基序列)都不合理(如下圖)，請分別說明理由。 ①第1組：____________，②第2組：__________。 (

16、3)PCR反應體系中含有熱穩(wěn)定DNA聚合酶，下面的表達式不能正確反映DNA聚合酶的功能，這是因為_________。 (4)用限制酶EcoRV，MboⅠ單獨或聯(lián)合切割同一種質粒，得到的DNA片段長度如下圖(1 kb即1 000個堿基對)，請在答題卡的指定位置畫出質粒上EcoRV、MboⅠ的切割位點。 解析　(1)①第四輪循環(huán)，共得到16個DNA分子，其中只有1個DNA分子不含引物A，所以含引物A的DNA片段占。 ②分析可看出從第三輪循環(huán)產物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段，長度可為DNA總長度減去引物A，或者為DNA總長度減去引物B。 (2)第1組引物Ⅰ和引物Ⅱ會發(fā)生

17、堿基互補配對，第2組中引物Ⅰ自身折疊會發(fā)生堿基互補配對。 (3)DNA聚合酶的作用是將單個的脫氧核苷酸連接到雙鏈DNA片段的引物鏈上。 (4)由題圖可看出質粒總長度為14 kb，切割質粒時EcoRV有1個切割位點，MboⅠ有2個切割位點，然后根據圖示數據畫出切割位點即可。 答案　(1)①15/16?、谌? (2)①引物Ⅰ和引物Ⅱ局部發(fā)生堿基互補配對而失效?、谝铫瘛渥陨碚郫B后會出現(xiàn)局部堿基互補配對而失效 (3)DNA聚合酶只能將單個脫氧核苷酸連續(xù)結合到雙鏈DNA片段的引物鏈上 (4)見下圖 12．(2012·東北三省四市統(tǒng)考)科學家通過轉基因技術獲得了含有人生長激素基因的奶牛，

18、如果要加速轉基因奶牛的繁育，可以對此轉基因奶牛進行克隆(如下圖所示)，請結合圖示回答下列問題。 (1)在進行細胞培養(yǎng)時，要對取自轉基因奶牛的組織細胞進行分離，形成單個細胞，這個過程中需要利用________酶處理。 (2)形成重組細胞時應選用________期的卵母細胞，并去掉其細胞核的原因是__________________________________。 (3)如果重組細胞為貼附性細胞，則在進行原代培養(yǎng)時，會表現(xiàn)出________和________等特點。 (4)圖中犢牛并非是對體細胞核供體母牛100%的復制，其原因主要有__________________________

19、__、________________________。 (5)上圖中所示的生物技術整體被稱為________。其包括的具體生物技術有________、________等。轉基因奶牛的克隆成功，說明了動物________具有全能性。 解析　在進行細胞培養(yǎng)時，要用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)對組織細胞進行分離，形成單個細胞。形成重組細胞時要用MⅡ中期的卵母細胞，去掉其細胞核，使克隆出的動物個體的遺傳物質幾乎全部來自供體細胞，具有供體的遺傳性狀，少量的遺傳物質來自卵細胞的細胞質。原代培養(yǎng)時，會出現(xiàn)細胞貼壁和接觸抑制?？寺游镉玫降募夹g有核移植(或體細胞核移植)、細胞培養(yǎng)、胚胎移植。 答案　(1)胰蛋白(或膠原蛋白) (2)MⅡ中(或減Ⅱ中)　使克隆出的動物個體的遺傳物質幾乎全部來自供體細胞(或“避免卵細胞中的遺傳物質對后代造成干擾”) (3)貼壁生長(或細胞貼壁)　接觸抑制(兩空順序可以顛倒) (4)生物的性狀受細胞核基因和細胞質基因共同控制　生物的性狀還受環(huán)境因素的影響(兩空順序可以顛倒) (5)核移植(或體細胞核移植)　細胞培養(yǎng)　胚胎移植　體細胞的細胞核