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1、人教版選修人教版選修1專(zhuān)題專(zhuān)題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題課題1 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物包括哪五類(lèi)：微生物包括哪五類(lèi)：病毒病毒細(xì)菌細(xì)菌放線(xiàn)菌放線(xiàn)菌真菌真菌原生動(dòng)物原生動(dòng)物 原核生物界原核生物界 原生生物界原生生物界真菌界真菌界病毒界病毒界1、培養(yǎng)基可以分為哪兩類(lèi)？2、培養(yǎng)基一般都含有哪些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，此外 還要滿(mǎn)足哪些要求？3、獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是什么？4、避免雜菌污染的方法主要包括哪四個(gè)方面 5、什么是消毒、滅菌，常用方法有哪些？6、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟 7、如何倒平板？（1）按物理狀態(tài)來(lái)分：培養(yǎng)基可分為）按物理狀態(tài)來(lái)分：培養(yǎng)基可分為固體固體
2、培養(yǎng)基培養(yǎng)基和和液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基。其中固體培養(yǎng)基用。其中固體培養(yǎng)基用于菌種分離、鑒定菌落等。于菌種分離、鑒定菌落等。（2）按功能來(lái)分，可分為）按功能來(lái)分，可分為選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基和和鑒鑒別培養(yǎng)基別培養(yǎng)基。（3）按成分來(lái)分，可分為）按成分來(lái)分，可分為天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基和和合合成培養(yǎng)基成培養(yǎng)基。1、培養(yǎng)基分類(lèi)：、培養(yǎng)基分類(lèi)：一、培養(yǎng)基一、培養(yǎng)基2、選擇培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基:分離酵母菌、霉菌等真菌分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基:分離金黃色葡萄球菌分離金黃色葡萄球菌不加氮源的無(wú)氮培養(yǎng)基不加氮源的無(wú)氮培養(yǎng)基:分離固氮菌分離固氮菌不加含碳有
3、機(jī)物的無(wú)碳培養(yǎng)基不加含碳有機(jī)物的無(wú)碳培養(yǎng)基:分離自養(yǎng)型微生物分離自養(yǎng)型微生物加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基:分離導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞分離導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞不管哪種培養(yǎng)基，一般都含有水、碳源、和氮源、無(wú)機(jī)鹽等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，另外還需要滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),例如:生長(zhǎng)因子(即細(xì)菌生長(zhǎng)必需，而自身不能合成的化合物,如維生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧氣、二氧化碳、滲透壓等的要求。3、培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（1）培養(yǎng)基一般都含有哪些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，此外還要滿(mǎn)足哪些要求？（2）獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是什么？（3）避免雜菌污染的方法主要包括哪四個(gè)方面（4）什
4、么是消毒、滅菌，常用方法有哪些？消毒與滅菌消毒與滅菌消毒：指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。滅菌：指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有微生物，包括芽孢和孢子。滅菌與消毒技術(shù)是微生物有關(guān)工作中最普滅菌與消毒技術(shù)是微生物有關(guān)工作中最普通也是最重要的技術(shù)。通也是最重要的技術(shù)。二、無(wú)菌技術(shù)二、無(wú)菌技術(shù)消毒的方法：消毒的方法：1、煮沸消毒法、煮沸消毒法:100煮沸煮沸5-6min2、巴氏消毒法：、巴氏消毒法：70-75 下煮下煮30min或或 80 下煮下煮15min3、化學(xué)藥劑消毒法、化學(xué)藥劑消毒法:用用75%酒精、新潔爾酒精、新潔爾滅等進(jìn)
5、行皮膚消毒滅等進(jìn)行皮膚消毒;氯氣消毒水源氯氣消毒水源4、紫外線(xiàn)或化學(xué)藥物消毒、紫外線(xiàn)或化學(xué)藥物消毒滅菌的方法：滅菌的方法：1、灼燒滅菌、灼燒滅菌2、干熱滅菌：、干熱滅菌：160-170 下加熱下加熱1-2h。3、高壓蒸汽滅菌：、高壓蒸汽滅菌：100kPa、121 下維持下維持15-30min.6、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟 7、如何倒平板？三、實(shí)驗(yàn)操作三、實(shí)驗(yàn)操作1、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基、制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基1 1、培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到、培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50 50 左右時(shí)，左右時(shí)，才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)基的才能用來(lái)倒平板。你用什么辦法來(lái)估計(jì)培養(yǎng)
6、基的溫度？溫度？答：答：可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手瓶，感覺(jué)錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。時(shí)，就可以進(jìn)行倒平板了。2 2、為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？、為什么需要使錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰？答：通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微答：通過(guò)灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。生物污染培養(yǎng)基。問(wèn)題討論：?jiǎn)栴}討論：3 3、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？、平板冷凝后，為什么要將平板倒置？4 4、在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基、在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用濺在皿蓋與皿底
7、之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎？為什么？來(lái)培養(yǎng)微生物嗎？為什么？答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固答：平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。培養(yǎng)微生物。2 2、純化大腸桿菌、純化大腸
8、桿菌接種方法有：接種方法有：平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法平板劃線(xiàn)法和稀釋涂布平板法 平板劃線(xiàn)法平板劃線(xiàn)法:通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)畫(huà)線(xiàn)的操作養(yǎng)基表面連續(xù)畫(huà)線(xiàn)的操作,將聚集的菌鐘將聚集的菌鐘逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面.在數(shù)次畫(huà)線(xiàn)后在數(shù)次畫(huà)線(xiàn)后,可以分離到由一個(gè)細(xì)胞可以分離到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體繁殖而來(lái)的肉眼可見(jiàn)的子細(xì)胞群體,這就這就是菌落是菌落.1 1、為什么在操作的第一步以及每次劃線(xiàn)之、為什么在操作的第一步以及每次劃線(xiàn)之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線(xiàn)操作結(jié)束時(shí)，仍然前都要灼燒接種環(huán)？在劃線(xiàn)操作結(jié)束時(shí)，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為
9、什么？需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線(xiàn)種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線(xiàn)前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線(xiàn)結(jié)束后，接種前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線(xiàn)結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線(xiàn)時(shí)，接種環(huán)上的環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線(xiàn)時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來(lái)源于上次劃線(xiàn)的末端，從而通過(guò)劃線(xiàn)菌種直接來(lái)源于上次劃線(xiàn)的末端，從而通過(guò)劃線(xiàn)次數(shù)的增加，使每次劃線(xiàn)時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，次數(shù)的增加，使每次劃線(xiàn)時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線(xiàn)結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時(shí)以便得到菌落。劃線(xiàn)結(jié)束后灼
10、燒接種環(huán)，能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。感染操作者。問(wèn)題討論：?jiǎn)栴}討論：2 2、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線(xiàn)？冷卻后再進(jìn)行劃線(xiàn)？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3 3、在作第二次以及其后的劃線(xiàn)操作時(shí)，、在作第二次以及其后的劃線(xiàn)操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)為什么總是從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)始劃線(xiàn)？答：劃線(xiàn)后，線(xiàn)條末端細(xì)菌的數(shù)目比線(xiàn)答：劃線(xiàn)后，線(xiàn)條末端細(xì)菌的數(shù)目比線(xiàn)條起始處要少，每次從上一次劃線(xiàn)的末端開(kāi)條起始處要少，每次從上一次劃
11、線(xiàn)的末端開(kāi)始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線(xiàn)次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)逐步減少，最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。的菌落。涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線(xiàn)與系列稀釋的無(wú)菌進(jìn)行。結(jié)合平板劃線(xiàn)與系列稀釋的無(wú)菌操作要求，想一想，第操作要求，想一想，第2 2步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)步應(yīng)如何進(jìn)行無(wú)菌操作？菌操作？應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無(wú)菌無(wú)菌”。例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、例如，酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周?chē)鹊?。在酒精燈火焰周?chē)鹊?。?wèn)題討論：?jiǎn)栴}討論：菌種的保存菌種的保存 1 1、臨時(shí)保藏：、臨時(shí)保藏：接種到固體斜面培接種到固體斜面培養(yǎng)基，菌落長(zhǎng)成后養(yǎng)基，菌落長(zhǎng)成后置于置于44冰箱保存。冰箱保存。2 2、長(zhǎng)期保存：、長(zhǎng)期保存：甘油冷凍管藏法甘油冷凍管藏法
高中生物選修一微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 課件(人教版)
