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1、湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 DNA重組技術的基本工具 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 據有關資料統(tǒng)計， 全世界被調查的 2億人 口中每年有近 4百萬人 被狗或者其他動物咬傷， 全球每年因狂犬病導致 的死亡人數約 6萬人。 狂犬病列法定報告?zhèn)魅?病死亡數之首。 發(fā)病死 亡率近 100% 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 煙草 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 煙草 能產生狂犬病 抗體蛋白的轉 基因 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 研究人員評估表明糖尿病死亡率現已 居全世界疾病死亡率之首
2、。目前中國糖尿 病患者人數已居世界第二位，預計二二 五年時更將達五千九百三十萬人。 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 研究人員評估表明糖尿病死亡率現已 居全世界疾病死亡率之首。目前中國糖尿 病患者人數已居世界第二位，預計二二 五年時更將達五千九百三十萬人。 治療糖尿病特效藥 胰島素 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 研究人員評估表明糖尿病死亡率現已 居全世界疾病死亡率之首。目前中國糖尿 病患者人數已居世界第二位，預計二二 五年時更將達五千九百三十萬人。 治療糖尿病特效藥 胰島素 每 100kg 豬或牛的胰腺中僅可提取 45g。 湖南長郡
3、衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 1979年，美國將 人的胰島素基因 重組 到 大腸桿菌 內，實現了細菌生產胰島素， 大大降低了生產成本。 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 1979年，美國將 人的胰島素基因 重組 到 大腸桿菌 內，實現了細菌生產胰島素， 大大降低了生產成本。 思考： 轉基因技術 實現了 一種生物 的某些 性狀 在 另一種生物 中 表達 。這些 性狀的表達與我們學過的基因的什么過 程有關？ 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 DNA(基因 ) mRNA 蛋白質 (性狀 ) 轉錄 翻譯 1979年，美國將
4、人的胰島素基因 重組 到 大腸桿菌 內，實現了細菌生產胰島素， 大大降低了生產成本。 思考： 轉基因技術 實現了 一種生物 的某些 性狀 在 另一種生物 中 表達 。這些 性狀的表達與我們學過的基因的什么過 程有關？ 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 密碼子在生物界是 的！ DNA(基因 ) mRNA 蛋白質 (性狀 ) 通用 1979年，美國將 人的胰島素基因 重組 到 大腸桿菌 內，實現了細菌生產胰島素， 大大降低了生產成本。 思考： 轉基因技術 實現了 一種生物 的某些 性狀 在 另一種生物 中 表達 。這些 性狀的表達與我們學過的基因的什
5、么過 程有關？ 轉錄 翻譯 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 問題探討 蘇云金桿菌 毒蛋白 蘇云金桿菌含有一種可以合成毒蛋白 的基因。 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 問題探討 蘇云金桿菌 毒蛋白 普通棉花 抗蟲棉 蘇云金桿菌含有一種可以合成毒蛋白 的基因。 讓細菌的毒蛋白基因在棉花細胞中表 達，可培育出抵抗棉鈴蟲害的抗蟲棉。 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 想一想需要做哪些關鍵工作？ 蘇云金桿菌細胞 毒蛋白基因 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 想一想需要做哪些關鍵工作？ 蘇云金桿菌
6、細胞 毒蛋白基因 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 想一想需要做哪些關鍵工作？ 蘇云金桿菌細胞 毒蛋白基因 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 想一想需要做哪些關鍵工作？ 蘇云金桿菌細胞 毒蛋白基因 棉花細胞 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 想一想需要做哪些關鍵工作？ 蘇云金桿菌細胞 毒蛋白基因 棉花細胞 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 想一想需要做哪些關鍵工作？ 蘇云金桿菌細胞 毒蛋白基因 棉花細胞 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 限制性核酸內切酶 能識別雙鏈 D
7、NA分子的某種特定的核苷酸序列 ， 并在使每一條鏈中 特定部位的兩個 核苷酸之間的磷酸二酯鍵 斷開。 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 A T G G C A T C T T C G A A 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 磷酸二酯鍵 即脫氧核糖、 磷酸之間的 連接 A T G G C A T C T T C G A A 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 磷酸二酯鍵 即脫氧核糖、 磷酸之間的 連接 A T G G C A T C T T C G A A 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 磷酸二酯鍵 即脫氧
8、核糖、 磷酸之間的 連接 A T G G C A T C T T C G A A 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 EcoR 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 EcoR 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 EcoR 黏性末端 黏性末端 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 Sma 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 200
9、8年下學期 制作 03 Sma 平末端 平末端 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 原核生物 4000種 1. 主要來源： 2. 種類： 3. 作用特點： 4. 作用結果： 一、限制性核酸內切酶 “ 分子手術刀 ” 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 識別 特定核苷酸序列， 切斷 磷酸二酯鍵。具特 異性。 原核生物 4000種 1. 主要來源： 2. 種類： 3. 作用特點： 4. 作用結果： 一、限制性核酸內切酶 “ 分子手術刀 ” 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 識別 特定核苷酸序列
10、， 切斷 磷酸二酯鍵。具特 異性。 原核生物 產生黏性末端或平末端 4000種 1. 主要來源： 2. 種類： 3. 作用特點： 4. 作用結果： 一、限制性核酸內切酶 “ 分子手術刀 ” 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 要想獲得某個特定性狀的基因必須 要用限制酶切幾個切口？可產生幾個末 端？ 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 要想獲得某個特定性狀的基因必須 要用限制酶切幾個切口？可產生幾個末 端？ 要切兩個切口，產生四個末端。 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 要想獲得某個特定性
11、狀的基因必須 要用限制酶切幾個切口？可產生幾個末 端？ 要切兩個切口，產生四個末端。 如果把兩種來源不同的 DNA用同一 種限制酶來切割，會怎樣呢？ 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 要想獲得某個特定性狀的基因必須 要用限制酶切幾個切口？可產生幾個末 端？ 要切兩個切口，產生四個末端。 如果把兩種來源不同的 DNA用同一 種限制酶來切割，會怎樣呢？ 會產生相同的末端。 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G 湖南長郡衛(wèi)星遠程
12、學校 2008年下學期 制作 03 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同種限制酶 切割 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同種限制酶 切割 湖
13、南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同種限制酶 切割 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C
14、T T A A A A T T C G 用同種限制酶 切割 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 G A A T T C C T T A A G G A A T T C C T T A A G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G G C T T A A A A T T C G 用同種限制酶 切割 “分子縫合針” : DNA連接酶 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 分類： Ecoli DNA連接酶 T4 DNA連接酶 作用： 二、 “ 分子縫合針 ”
15、 DNA連接酶 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 Ecoli DNA連接酶 或 T4DNA連接酶 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 Ecoli DNA連接酶 或 T4DNA連接酶 可把黏性末端之間的 縫隙 “ 縫合 ” 起來， 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 Ecoli DNA連接酶 或 T4DNA連接酶 可把黏性末端之間的 縫隙 “ 縫合 ” 起來， 即 恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間 的磷酸二酯鍵 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03
16、T4 DNA連接酶 還可把平末端之間的縫 隙 “ 縫合 ” 起來，但效率較低 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 DNA連接酶與 DNA聚合酶是一回 事嗎？為什么？ 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 DNA連接酶與 DNA聚合酶是一回 事嗎？為什么？ 不是一回事。 相同點 ：形成磷酸二酯鍵 不同點 ： 1） DNA聚合酶只能將單個核 苷酸加到已有的核酸片段上，形成磷酸 二酯鍵；而 DNA連接酶是在兩個 DNA片 段之間形成磷酸二酯鍵 2） DNA聚合酶需要以一條 DNA鏈為模 板；而 DNA連接酶不需要模板。 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年
17、下學期 制作 03 棉花的 一段 DNA 含毒蛋白 基因的細 菌 DNA片 段 模擬制作： 用剪刀在特定部位對棉花 DNA進行 模擬切割，并將模擬毒蛋白基因取出， 再用膠紙模擬基因種間連接。 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 三、 “ 分子運輸車 ” 基因進入受體細胞的載體 載體需要的條件： 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 三、 “ 分子運輸車 ” 基因進入受體細胞的載體 載體需要的條件： 作為分子運輸車 載體，如果沒有 切割位點將會怎樣？ 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 三、 “ 分子運輸車 ”
18、 基因進入受體細胞的載體 載體需要的條件： 有 1多個限制酶切點 作為分子運輸車 載體，如果沒有 切割位點將會怎樣？ 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 三、 “ 分子運輸車 ” 基因進入受體細胞的載體 載體需要的條件： 有 1多個限制酶切點 作為分子運輸車 載體，如果沒有 切割位點將會怎樣？ 霍亂菌的質粒多個限制酶切點，你會 用它來做分子運輸車嗎？ 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 三、 “ 分子運輸車 ” 基因進入受體細胞的載體 載體需要的條件： 有 1多個限制酶切點 對受體細胞無害 作為
19、分子運輸車 載體，如果沒有 切割位點將會怎樣？ 霍亂菌的質粒多個限制酶切點，你會 用它來做分子運輸車嗎？ 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 假如目的基因導入受體細胞后不能復 制或不能轉錄，轉基因生物能有預想的效 果嗎？ 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 導入基因 能在受體細胞中復制、表達 假如目的基因導入受體細胞后不能復 制或不能轉錄，轉基因生物能有預想的效 果嗎？ 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 導入基因 能在受體細胞中復制、表達 假如目的基因導入受體細胞后不能復 制或不能轉錄，轉基因生物能有預想的效 果嗎？
20、 目的基因有沒有進入受體細胞，如 何去發(fā)現？ 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 導入基因 能在受體細胞中復制、表達 有某些標記基因，便于篩選 假如目的基因導入受體細胞后不能復 制或不能轉錄，轉基因生物能有預想的效 果嗎？ 目的基因有沒有進入受體細胞，如 何去發(fā)現？ 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 常用運載體： 細菌的質粒 噬菌體或某些動植物病毒 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 質粒的特點 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 質粒的特點 1.細胞染色體 (或擬核 DNA分子 )
21、 外能自主復制的 小型環(huán)狀 DNA 分子； 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 質粒的特點 1.細胞染色體 (或擬核 DNA分子 ) 外能自主復制的 小型環(huán)狀 DNA 分子； 2.質粒的存在對宿 主細胞無影響； 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 質粒的特點 1.細胞染色體 (或擬核 DNA分子 ) 外能自主復制的 小型環(huán)狀 DNA 分子； 2.質粒的存在對宿 主細胞無影響； 3.質粒的復制只能 在宿主細胞內完 成。 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 1.以下說法正確的是 （ ） A. 所有的限制酶只能識別一種特定 的核
22、苷酸序列 B. 質粒是基因工程中唯一的運載體 C. 運載體必須具備的條件之一是： 具有多個限制酶切點，以便與外源基因 連接 D. DNA連接酶使黏性末段的堿基 之間形成氫鍵 練習 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 1.以下說法正確的是 （ ） A. 所有的限制酶只能識別一種特定 的核苷酸序列 B. 質粒是基因工程中唯一的運載體 C. 運載體必須具備的條件之一是： 具有多個限制酶切點，以便與外源基因 連接 D. DNA連接酶使黏性末段的堿基 之間形成氫鍵 C 練習 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 2. 不屬于質粒
23、被選為基因運載體的 理由是 （ ） A. 能復制 B. 有多個限制酶切點 C. 具有標記基因 D. 它是環(huán)狀 DNA 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 2. 不屬于質粒被選為基因運載體的 理由是 （ ） A. 能復制 B. 有多個限制酶切點 C. 具有標記基因 D. 它是環(huán)狀 DNA D 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 3.有關基因工程的敘述中，錯誤的是 （ ） A. 基因工程技術能定向地改造生物的 遺傳性狀，培育生物新品種 B. 重
24、組 DNA的形成在細胞內完成 C. 目的基因須由運載體導入受體細胞 D. 質粒都可作為運載體 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 3.有關基因工程的敘述中，錯誤的是 （ ） A. 基因工程技術能定向地改造生物的 遺傳性狀，培育生物新品種 B. 重組 DNA的形成在細胞內完成 C. 目的基因須由運載體導入受體細胞 D. 質粒都可作為運載體 B D 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 4.下列四條 DNA分子，彼此間具有粘 性末端的一組是 ( ) A. B. C. D. 湖南長郡衛(wèi)星遠程學校 2008年下學期 制作 03 4.下列四條 DNA分子，彼此間具有粘 性末端的一組是 ( ) A. B. C. D. D
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