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1、微 生 物 基 礎 知 識 一 微 生 物 ：（ microorganism,microbe ） 是 一 切 肉 眼 看 不 見 或 看 不清 的 微 小 生 物 的 總 稱 。 它 們 都 是 一 些 個 體 小 (0.1mm)、構 造 簡 單 的 低 等 生 物 。 原 核 類 ： 細 菌 ， 放 線 菌 ， 藍 細 菌 ， 支 原 體 ， 立 克 次 氏 體 ， 衣 原 體 等 。真 核 類 ： 真 菌 (酵 母 菌 ， 霉 菌 ， 蕈 菌 )非 細 胞 類 ： 病 毒 ， 亞 病 毒二 按 進 化 地 位 分 三 微 生 物 的 特 點 ： 體 積 小 ,面 積 大 ： 單 位 體 積
2、 所 占 有 的 表 面 積 稱 為 比 面值 。 吸 收 多 ， 轉 化 快 ： Escherichia coli（ 發(fā) 酵 乳 糖 的 細 菌 )在 1小 時 內 可 分 解 其 自 重 1000 10000倍 的 乳 糖 ； Candida utilis (產 朊 假 絲 酵 母 ） 合 成 蛋 白 質 的 能 力 比 食 用 公 牛 強 10萬倍 生 長 旺 ， 繁 殖 快 ： （ 二 分 裂 為 主 ） 微 生 物 有 驚 人的 繁 殖 速 度 ， 大 多 數(shù) 微 生 物 幾 十 分 鐘 內 就 可 以 繁 殖 一 代 分 布 廣 ,種 類 多 ： 自 然 界 中 到 處 都 有 ，
3、 達 到 無 孔 不入 的 地 步 ， 只 要 條 件 合 適 ， 他 們 就 可 以 “ 隨 遇 而 安 ” ， 如 水 、空 氣 、 土 壤 等 , 土 壤 中 的 數(shù) 量 最 多 。 適 應 性 強 ， 易 變 異 ： 是 良 種 選 育 和 防 止 菌 種 衰 退 的理 論 依 據(jù) 。 菌 落 （ colony ） : 由 單 個 菌 細 胞 或 幾 個 同 種 菌 細 胞 在 培 養(yǎng) 基 上 長成 肉 眼 可 見 的 菌 落 ， 每 個 菌 落 就 是 1CFU。四 細 菌 (bacteria): 狹 義 的 細 菌 是 指 一 類 細 胞 細 短 （ 直 徑 0.5m，長 度 0.
4、5-5m） ， 結 構 簡 單 、 胞 壁 堅 硬 、 多 以 二 分 裂方 式 繁 殖 和 水 生 性 較 強 的 原 核 生 物 ； 廣 義 的 細 菌 則是 指 所 有 原 核 生 物 。 菌 落 單 位 CFU 細 菌 按 形 態(tài) 分 類球 形 桿 狀 弧 形 或 螺 旋 形 菌 落 特 征 ： 包 括 菌 落 大 小 ， 形 狀 ， 隆 起 形 狀 ，邊 緣 情 況 ， 表 面 狀 態(tài) ， 表 面 光 澤 ， 顏 色 ， 透 明 程 度 等 。 影 響 菌 落 特 征 的 因 素 ： 同 一 種 微 生 物 菌 落有 著 相 似 的 菌 落 特 征 ， 取 決 于 菌 落 的 細 胞
5、 結 構 和生 長 行 為 。 細 菌 按 結 構 （ 革 蘭 氏 染 色 ） 分 類G+ G- 革 蘭 氏 染 色 法 ： 初 染 （ 結 晶 紫 1min） 媒染 （ 碘 液 1min） 脫 色 (酒 精 15-20s) 復 染 （ 沙黃 1min） 細 菌 的 一 般 結 構 細 菌 的 特 殊 結 構 ： 莢 膜 鞭 毛 纖 毛 芽 孢 五 獲 得 單 個 菌 落 的 方 法 ： 傾 注 平 板 法 、 涂 布 法 、 平 板 劃 線 、 富 集 培養(yǎng) 法 六 液 體 接 種 培 養(yǎng) 七 影 響 微 生 物 生 長 的 主 要 因 素 ： 溫 度 是 微 生 物 生 長 的 重 要 因
6、 素 ， 最 適溫 度 并 不 等 于 生 長 率 最 高 的 培 養(yǎng) 的 溫 度 。 氧 氣 把 微 生 物 分 成 好 氧 菌 、 厭 氧 菌 、兼 性 厭 氧 菌 PH 八 常 用 滅 菌 消 毒 方 法 1、 干 熱 滅 菌 法火 焰 灼 燒 法 、 烘 箱 內 熱 空 氣 滅 菌 法 (160-170 ) 常 壓 下加 壓 下2、 濕 熱 滅 菌 法 巴 氏 消 毒 法煮 沸 消 毒 法間 歇 滅 菌 法常 規(guī) 加 壓 滅 菌 法連 續(xù) 加 壓 滅 菌 法LTH 法HTST法 九 培 養(yǎng) 基 根 據(jù) 微 生 物 對 營 養(yǎng) 物 質 需 要 ， 經 過 人 工 配 制 適 合 微生 物
7、 生 長 繁 殖 和 積 累 代 謝 產 物 的 營 養(yǎng) 基 質 。 （ 為 微 生 物生 長 繁 殖 提 供 必 要 營 養(yǎng) 物 質 的 物 質 ） 。 分 類 ： 按 原 料 來 源 a.天 然 培 養(yǎng) 基 b.合 成 培 養(yǎng) 基 c.半 合 成 培 養(yǎng) 基 根 據(jù) 物 理 性 狀 a.液 體 培 養(yǎng) 基 b.固 體 培 養(yǎng)基 c.半 固 體 培 養(yǎng) 基 根 據(jù) 用 途 a.基 礎 培 養(yǎng) 基 b.厭 氧 培 養(yǎng) 基 c.加 富 培 養(yǎng) 基 d.特 殊 培 養(yǎng) 基 e.鑒 別 培 養(yǎng) 基 f.生 化實 驗 培 養(yǎng) 基 g.選 擇 培 養(yǎng) 基 h.增 菌 培 養(yǎng) 基 十 涂 抹 和 空 氣
8、沉 降 試 驗 方 法 涂 抹 采 樣 方 法 用 5cm 5cm滅 菌 規(guī) 格 板 放 在 被 檢 物 體 表 面 ， 用 浸 有 無菌 的 生 理 鹽 水 采 樣 液 的 棉 拭 子 1支 ， 在 規(guī) 格 板 內 橫 豎 往 返個 涂 抹 5次 ， 并 隨 之 轉 動 棉 試 子 ， 連 續(xù) 采 樣 14個 規(guī) 格 版 面子 直 接 涂 抹 物 體 采 樣 ， 若 采 樣 物 體 表 面 有 消 毒 劑 殘 留 時 ，采 樣 時 含 相 應 的 中 和 劑 。 采 樣 面 積 ： 取 100cm2 空 氣 沉 降 通 過 自 然 沉 降 原 理 收 集 在 空 氣 中 的 生 物 粒 子
9、于 培 養(yǎng) 基平 皿 ， 在 適 宜 的 條 件 下 讓 其 繁 殖 到 可 見 的 菌 落 進 行 計 數(shù) ，以 平 板 培 養(yǎng) 皿 中 的 菌 落 數(shù) 來 判 斷 潔 凈 環(huán) 境 內 的 微 生 數(shù) ，并 以 此 來 評 定 潔 凈 室 的 潔 凈 度 。 十 一 食 品 中 大 腸 菌 群 計 數(shù) （ GB 4789.3-2010） 大 腸 菌 群 coliforms： 在 一 定 條 件 下 能 發(fā) 酵乳 糖 、 產 酸 產 氣 的 需 氧 和 兼 性 厭 氧 革 蘭 氏 陰 性無 芽 孢 桿 菌 。 2.檢 驗 方 法 ： 9管 發(fā) 酵 法 3.操 作 步 驟 ： 樣 品 的 稀 釋 初 發(fā) 酵 實 驗 復 發(fā) 酵 實 驗 4.大 腸 菌 群 最 可 能 數(shù) (MPN)的 報 告 ： 檢 索 MPN表 謝 謝 !
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