《中國藥典》生物檢定部分修訂內(nèi)容

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1、 中 國 藥 典 生 物 檢 定 部 分 修 訂 內(nèi) 容 中 國 藥 品 生 物 制 品 檢 定 所 主 要 內(nèi) 容n 一 、 藥 品 生 物 檢 定 概 況n 二 、 藥 品 生 物 檢 定 增 修 訂 情 況 藥 品 生 物 檢 定 概 況n 定 義n 應(yīng) 用 范 圍n 作 用 藥 品 生 物 檢 定 -定 義 生 物 檢 定 法 是 利 用 生 物 體 包 括 整 體 、 離 體 組 織 、器 官 、 細(xì) 胞 和 微 生 物 等 評(píng) 估 藥 物 生 物 活 性 的 一 種 方法 。 它 以 藥 物 的 藥 理 作 用 為 基 礎(chǔ) ， 以 生 物 統(tǒng) 計(jì) 為 工具 ， 運(yùn) 用 特 定 的

2、實(shí) 驗(yàn) 設(shè) 計(jì) 在 一 定 條 件 下 比 較 供 試 品和 相 當(dāng) 的 標(biāo) 準(zhǔn) 品 或 對(duì) 照 品 所 產(chǎn) 生 的 特 定 反 應(yīng) ， 通 過等 反 應(yīng) 劑 量 間 比 例 的 運(yùn) 算 或 限 值 劑 量 引 起 的 生 物 反應(yīng) 程 度 ， 從 而 測(cè) 定 供 試 品 的 效 價(jià) 、 生 物 活 性 或 雜 質(zhì)引 起 的 毒 性 。 藥 品 生 物 檢 定n 體 內(nèi) 測(cè) 定 （ in vivo） -以 整 體 動(dòng) 物 生 物 體n 體 外 測(cè) 定 （ in bitro） -以 離 體 器 官 、 組織 、 微 生 物 、 酶 和 細(xì) 胞 （ 原 代 細(xì) 胞 、 傳代 細(xì) 胞 ） 為 生 物

3、 體 ， 利 用 這 些 生 物 體 評(píng)價(jià) 藥 品 的 生 物 活 性 （ 藥 效 、 活 力 或 毒 力 ） 應(yīng) 用 范 圍n 藥 品 （ 生 化 藥 品 、 中 藥 ）n 生 物 制 品 （ 疫 苗 、 血 液 制 品 ）n 安 全 性 檢 查 應(yīng) 用 范 圍n 對(duì) 從 動(dòng) 物 臟 器 、 微 生 物 或 體 液 等 提 取 的 ， 有 效 成分 不 夠 確 切 ， 多 組 分 、 結(jié) 構(gòu) 復(fù) 雜 ， 理 化 方 法 不 能有 效 鑒 定 并 具 有 生 物 活 性 的 天 然 生 化 藥 物 、 中 藥 ，以 及 有 些 生 物 技 術(shù) 藥 物 ， 由 于 空 間 結(jié) 構(gòu) 的 細(xì) 微 變

4、化 ， 影 響 藥 物 的 活 性 中 心 位 點(diǎn) ， 目 前 質(zhì) 量 標(biāo) 準(zhǔn) 中仍 應(yīng) 用 生 物 檢 定 法 評(píng) 估 藥 物 的 生 物 活 性 。n 如 生 化 藥 物 ： 一 般 是 從 生 物 體 分 離 、 純 化 所 得 如 肝 素 鈉 、 魚 精 蛋 白 、 促 腎 上 腺 皮 質(zhì) 激 素 。 中 藥 ： 洋 地 黃 制 劑 、 人 工 麝 香 、 水 蛭 等 。 藥 品 生 物 檢 定 作 用n 工 藝 與 方 法 驗(yàn) 證n 效 價(jià) 與 活 性n 鑒 別 作 用 工 藝 及 方 法 驗(yàn) 證n 對(duì) 于 新 生 產(chǎn) 工 藝 、 新 檢 測(cè) 方 法 的 改 進(jìn) 、變 更 ， 往 往

5、 需 要 生 物 檢 定 來 驗(yàn) 證 核 對(duì) 。中 、 外 藥 典 在 重 組 人 生 長(zhǎng) 激 素 （ rhGH）重 組 人 胰 高 血 糖 素 質(zhì) 量 標(biāo) 準(zhǔn) 中 明 確 規(guī) 定 ，在 生 產(chǎn) 研 發(fā) 階 段 ， “ 生 產(chǎn) 過 程 中 的 產(chǎn) 品必 須 用 體 內(nèi) 生 物 檢 定 方 法 測(cè) 定 其 生 物 效價(jià) ” ， 直 到 生 產(chǎn) 穩(wěn) 定 為 止 。 作 用 效 價(jià) 與 活 性n 當(dāng) 采 用 理 化 方 法 測(cè) 定 如 HPLC替 代 胰 島 素等 原 有 的 生 物 效 價(jià) 測(cè) 定 法 時(shí) ， 仍 需 作 大量 的 方 法 比 對(duì) 、 相 關(guān) 性 研 究 等 工 作 。 作 用 效

6、 價(jià) 與 活 性n 定 量 的 測(cè) 定 方 法n 半 定 量 的 測(cè) 定 方 法 定 量 的 測(cè) 定 方 法 效 價(jià) （ potency） 測(cè) 定 是 生 物 檢 定 的 主 要內(nèi) 容 ， 它 是 以 藥 理 為 基 礎(chǔ) ， 生 物 統(tǒng) 計(jì) 為 工 具 ，運(yùn) 用 特 定 的 實(shí) 驗(yàn) 設(shè) 計(jì) ， 利 用 生 物 體 在 一 定 條件 下 比 較 供 試 品 與 相 當(dāng) 于 標(biāo) 準(zhǔn) 品 或 對(duì) 照 品 所產(chǎn) 生 的 特 定 反 應(yīng) （ 可 測(cè) 量 、 量 化 的 生 理 指 標(biāo)或 生 物 藥 效 或 毒 力 ） 的 一 種 定 量 的 方 法 ， 因而 被 稱 為 定 量 藥 理 學(xué) 。 定 量

7、的 測(cè) 定 方 法n 胰 島 素n 縮 宮 素n 肝 素n 卵 泡 刺 激 素n 黃 體 生 成 素 n 升 壓 素n 硫 酸 魚 精 蛋 白n 洋 地 黃n 生 長(zhǎng) 激 素n 降 鈣 素 半 定 量 的 測(cè) 定 方 法 （ 活 性 檢 查 ） 當(dāng) 理 化 測(cè) 定 占 主 導(dǎo) 地 位 ， 效 價(jià) 測(cè) 定 一 般來 講 可 以 不 必 精 確 ， 可 歸 于 活 性 檢 查 項(xiàng) ， 采用 半 定 量 方 法 ， 設(shè) 定 限 值 ， 不 需 精 密 生 物 統(tǒng)計(jì) ， 盡 可 能 減 少 實(shí) 驗(yàn) 動(dòng) 物 用 量 或 其 他 生 物 體用 量 ； 甚 至 只 用 于 定 性 的 鑒 別 。 例 如 ：

8、 新 藥重 組 人 胰 高 血 糖 素 類 多 肽 是 治 療 糖 尿 病 用 藥 ，其 質(zhì) 量 標(biāo) 準(zhǔn) 中 即 采 用 該 法 （ 限 值 為 小 鼠 血 糖降 低 大 于 20%） 進(jìn) 行 活 性 檢 查 。 鑒 別n 隨 著 對(duì) 動(dòng) 物 保 護(hù) 意 識(shí) 提 高 ， 對(duì) 實(shí) 驗(yàn) 動(dòng) 物減 少 、 替 代 、 優(yōu) 化 （ 3R： Reduction、Replacement、 Refinement） 的 實(shí) 施 ， 對(duì)能 用 理 化 測(cè) 定 的 藥 品 ， 生 物 效 價(jià) 測(cè) 定 逐漸 降 為 鑒 別 項(xiàng) 的 定 性 或 半 定 量 測(cè) 定 。n 如 USP升 壓 素 大 鼠 血 壓 升 高

9、法 用 于 鑒 別 。2010年 中 國 藥 典 縮 宮 素 注 射 液 將 子 宮 收縮 法 放 入 鑒 別 項(xiàng) 。 二 、 附 錄 生 物 檢 定 方 法 增 修 訂 情 況 n 附 錄 生 物 檢 定 方 法 增 修 訂 情 況n 附 錄 增 修 訂 主 要 特 點(diǎn)n 增 修 訂 主 要 內(nèi) 容 附 錄 檢 查 法 或 指 導(dǎo) 原 則 藥 典 增 修 訂 情 況一 部 二 部熱 原 檢 查 法 修 訂 修 訂 細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 檢 查 法 修 訂 修 訂 異 常 毒 性 檢 查 法 新 增 修 訂 溶 血 與 凝 聚 檢 查 法 新 增 過 敏 反 應(yīng) 檢 查 法 新 增 修 訂 降

10、壓 物 質(zhì) 檢 查 法 新 增 修 訂 生 物 檢 定 統(tǒng) 計(jì) 法 修 訂中 藥 注 射 劑 安 全 性 檢 查 法 應(yīng) 用 指 導(dǎo) 原 則 修 訂 化 學(xué) 藥 品 注 射 劑 安 全 性 檢 查 法 應(yīng) 用 指 導(dǎo)原 則 新 增 中 藥 生 物 活 性 測(cè) 定 指 導(dǎo) 原 則 新 增 附 錄 生 物 檢 定 方 法 增 修 訂 情 況 附 錄 增 修 訂 主 要 特 點(diǎn) n 中 藥 質(zhì) 量 控 制 評(píng) 價(jià) 模 式 轉(zhuǎn) 變n 充 分 驗(yàn) 證n 完 善 提 高n 充 分 體 現(xiàn) 了 “ 3R”原 則 附 錄 增 修 訂 主 要 特 點(diǎn)n 中 藥 質(zhì) 量 控 制 評(píng) 價(jià) 模 式 轉(zhuǎn) 變n 生 物

11、活 性 引 入 實(shí) 現(xiàn) 了 中 藥 質(zhì) 量 標(biāo) 準(zhǔn) 由 單一 指 標(biāo) 成 分 定 性 定 量 向 活 性 有 效 成 分 及生 物 測(cè) 定 的 綜 合 檢 測(cè) 。 附 錄 增 修 訂 主 要 特 點(diǎn)n 充 分 驗(yàn) 證 ：n 遵 循 科 學(xué) 性 、 合 理 性 、 可 操 作 性 ， 新建 或 新 設(shè) 立 項(xiàng) 目 必 須 經(jīng) 不 同 實(shí) 驗(yàn) 室 的共 同 驗(yàn) 證 或 適 用 性 研 究 ， 如 注 射 劑 安全 性 指 導(dǎo) 原 則 對(duì) 方 法 學(xué) 的 適 用 性 研 究 ；中 藥 生 物 活 性 指 導(dǎo) 原 則 要 求 對(duì) 方 法 的專 屬 性 、 準(zhǔn) 確 性 、 精 密 度 （ 重 復(fù) 性 、

12、中 間 精 密 度 、 重 現(xiàn) 性 ） 、 適 用 性 、 科學(xué) 性 進(jìn) 行 了 研 究 。 附 錄 增 修 訂 主 要 特 點(diǎn)n 完 善 提 高n 對(duì) 2010藥 典 一 、 二 部 檢 查 法 和 指 導(dǎo)原 則 進(jìn) 行 修 訂 和 改 進(jìn) ， 對(duì) 影 響 結(jié) 果準(zhǔn) 確 性 的 實(shí) 驗(yàn) 條 件 提 出 了 要 求 ， 如熱 原 檢 查 法 、 溶 血 與 凝 聚 、 降 壓 物質(zhì) 檢 查 法 、 過 敏 試 驗(yàn) 。 附 錄 增 修 訂 主 要 特 點(diǎn)n 體 現(xiàn) 了 “ 3R”原 則n 如 熱 原 檢 查 法 取 消 家 兔 使 用 次 數(shù) 和 體 重上 限 規(guī) 定 。n 中 藥 生 物 活

13、性 指 導(dǎo) 原 則 中 對(duì) 動(dòng) 物 的 使 用等 。 增 修 訂 主 要 內(nèi) 容一 、 熱 原 檢 查 法二 、 細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 檢 查 法三 、 異 常 毒 性 檢 查 法四 、 溶 血 與 凝 聚 檢 查 法五 、 過 敏 反 應(yīng) 檢 查 法六 、 降 壓 物 質(zhì) 檢 查 法七 、 生 物 檢 定 統(tǒng) 計(jì) 法八 、 中 藥 注 射 劑 安 全 性 檢 查 法 應(yīng) 用 指 導(dǎo) 原 則九 、 化 藥 注 射 劑 安 全 性 檢 查 法 應(yīng) 用 指 導(dǎo) 原 則十 、 中 藥 生 物 活 性 測(cè) 定 指 導(dǎo) 原 則 熱 原 檢 查 法n 定 義n 2010 版 與 2005版 區(qū) 別n 修 訂

14、 背 景n 實(shí) 驗(yàn) 用 兔 靈 敏 度 測(cè) 試n 熱 原 檢 查 適 用 性 研 究 熱 原 檢 查 法n 定 義 ： 本 法 系 將 一 定 劑 量 的 供 試 品 ，靜 脈 注 入 家 兔 體 內(nèi) ， 在 規(guī) 定 時(shí) 間 內(nèi) ，觀 察 家 兔 體 溫 升 高 的 情 況 ， 以 判 定 供試 品 中 所 含 熱 原 的 限 度 是 否 符 合 規(guī) 定 。 2010 版 與 2005版 區(qū) 別2010版 2005版1、 體 重 1.7kg以 上（ 三 部 未 改 變 ） 體 重 1.73.0kg2、 其 中 升 溫 達(dá) 0.6 的家 兔 應(yīng) 休 息 2周 以 上 3、 _* 每 一 家 兔

15、的 使 用 次 數(shù) ， 用 于一 般 藥 品 的 檢 查 ， 不 應(yīng) 超 過10次 。*三 部 仍 規(guī) 定 ， 對(duì) 血 液 制 品 、 抗 毒 素 和 其 他 同 一 過 敏原 的 供 試 品 在 5天 內(nèi) 可 重 復(fù) 使 用 1次 。 2010版 2005版4、 在 做 熱 原 檢 查 前 1-2日 在 作 熱 原 檢 查 前 1-2日5、 溫 度 相 差 不 得 大 于 3 ， 且 應(yīng) 控 制 在 1725（ 指 實(shí) 驗(yàn) 室 和 飼 養(yǎng) 室 ） 實(shí) 驗(yàn) 室 和 飼 養(yǎng) 室 的 溫 度 相差 不 得 大 于 5 ， 實(shí) 驗(yàn) 室 的溫 度 應(yīng) 在 17 256、 實(shí) 驗(yàn) 室 溫 度 變 化 不

16、 得大 于 3 應(yīng) 注 意 實(shí) 驗(yàn) 室 溫 度 變 化 不得 大 于 3 2010版 2005版7、 應(yīng) 防 止 動(dòng) 物 騷 動(dòng) 防 止 動(dòng) 物 騷 動(dòng)8、 置 于 寬 松 適 宜 的 裝 置 中 置 于 適 宜 的 裝 置 中9、 且 同 組 各 兔 間 正 常 體 溫之 差 不 得 超 過 1 且 各 兔 間 正 常 體 溫 之差 不 得 超 過 1 2010版 2005版10、 與 供 試 品 接 觸 的 試驗(yàn) 用 器 皿 應(yīng) 無 菌 、無 熱 原 。 去 除 熱 原通 常 采 用 干 熱 滅 菌法 （ 250 、 加 熱30分 鐘 ） ， 也 可 采用 其 他 適 宜 的 方 法 試

17、驗(yàn) 用 器 的 注 射 器 、 針頭 及 一 切 與 供 試 品 溶液 接 觸 的 器 皿 ， 應(yīng) 置 烘箱 中 用 250 加 熱 30分鐘 ， 也 可 采 用 其 他 適 宜的 方 法 除 去 熱 原 2010版 2005版11、 3只 家 兔 體 溫 升高 總 和 低 于 1.3 （ 三 部 未 變 ， 仍 為 1.4 ） 3只 家 兔 體 溫 升 高 總和 低 于 1.4 修 訂 背 景n 、 熱 原 實(shí) 驗(yàn) 是 一 個(gè) 整 體 的 動(dòng) 物 實(shí) 驗(yàn) ， 易 受 許多 因 素 的 影 響 。 動(dòng) 物 自 身 的 行 為 、 生 理 、 外 部環(huán) 境 以 及 一 些 實(shí) 驗(yàn) 過 程 等 都

18、 可 影 響 結(jié) 果 的 準(zhǔn) 確性 。n 、 對(duì) 家 兔 體 重 取 消 了 上 限 3.0kg， 同 時(shí) 取 消家 兔 使 用 次 數(shù) 不 超 過 次 的 規(guī) 定 。 修 訂 背 景n 、 增 加 了 升 溫 達(dá) 0.6 的 家 兔 應(yīng) 休 息 2 周 以 上 新 要 求 。n 4、 實(shí) 驗(yàn) 環(huán) 境 要 求 更 加 嚴(yán) 格 ： 實(shí) 驗(yàn) 室 與 飼養(yǎng) 室 溫 度 相 差 由 不 大 于 5 改 為 3 n 5、 強(qiáng) 調(diào) 同 組 各 家 兔 間 溫 差 不 大 于 1 ， 對(duì)家 兔 固 定 方 式 ： 寬 松 。n 6、 判 定 標(biāo) 準(zhǔn) 更 加 嚴(yán) 格 ： 初 試 的 3只 家 兔 體溫 升 高

19、 總 和 低 于 1.4 改 為 低 于 1.3 實(shí) 驗(yàn) 用 兔 靈 敏 度 測(cè) 試n 每 年 不 定 期 隨 機(jī) 抽 取 體 重 和 使 用 次 數(shù) 不 同 的實(shí) 驗(yàn) 用 兔 ， 按 熱 原 檢 查 法 要 求 注 射 EU/kg或 10EU/kg內(nèi) 毒 素 標(biāo) 準(zhǔn) 品 ， 應(yīng) 得 到 不 符 合 規(guī)定 的 結(jié) 果 。 熱 原 檢 查 適 用 性 研 究n 新 品 種 建 立 熱 原 檢 查 標(biāo) 準(zhǔn) 時(shí) ， 建 議 進(jìn) 行 適 用性 研 究 ， 在 不 影 響 家 兔 正 常 生 理 的 前 提 下 ，按 人 用 每 公 斤 體 重 每 小 時(shí) 最 大 供 試 品 劑 量 的 倍 設(shè) 定 限

20、 值 。（ 化 學(xué) 藥 品 一 般 為 倍 ， 中 藥 為 倍 ） 。 熱 原 檢 查 適 用 性 研 究n 適 用 性 試 驗(yàn) 時(shí) 設(shè) 三 組 ： 限 值 劑 量 的 供 試 品組 10EU/kg內(nèi) 毒 素 組 含 10EU/kg內(nèi) 毒 素 的供 試 品 組 。n 適 用 性 試 驗(yàn) 判 定 ： 組 符 合 規(guī) 定 ， 、 組不 符 合 規(guī) 定 表 明 該 品 種 可 建 立 熱 原 檢 查 項(xiàng) 。 二 、 細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 檢 查 法n 定 義n 2010版 與 2005版 區(qū) 別n 修 訂 背 景n 注 射 用 藥 品 、 生 物 制 品 建 立 細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 檢 查法 指 導(dǎo)

21、原 則 二 、 細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 檢 查 法n 定 義 ： 本 法 系 利 用 鱟 試 劑 來 檢 測(cè) 或 量 化 由革 蘭 氏 陰 性 菌 產(chǎn) 生 的 細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 ， 以 判 斷供 試 品 中 細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 的 限 量 是 否 符 合 規(guī) 定的 一 種 方 法 。 2010版 與 2005版 區(qū) 別2010版 2005年 版1、 細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 檢 查 用水 系 指 內(nèi) 毒 素 含 量 小于 0.015EU/ml（ 用 于凝 膠 法 ） 或0.005EU/ml（ 用 于 光度 測(cè) 定 法 ） 且 對(duì) 內(nèi) 毒素 試 驗(yàn) 無 干 擾 作 用 的滅 菌 注 射 用 水 凝 膠

22、法 細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 檢查 用 水 系 指 內(nèi) 毒 素 含量 小 于 0.015EU/ml的滅 菌 注 射 用 水 。 光 度測(cè) 定 法 用 的 細(xì) 菌 內(nèi) 毒素 檢 查 用 水 ， 其 內(nèi) 毒素 的 含 量 應(yīng) 小 于0.005EU/ml 2010版 2005年 版2、 常 用 干 熱 滅 菌 法 （ 250 、30分 鐘 以 上 ） 去 除 常 用 的 方 法 是 在 250 干 烤 至 少60分 鐘3、 或 鱟 試 劑 生 產(chǎn) 廠 家 推 薦4、 內(nèi) 毒 素 限 值 按 L=K/M計(jì) 算 ， M為 人 用 每 公 斤 體 重 每 小 時(shí) 的 最大 供 試 品 劑 量 ， 以 ml/（

23、kg h） 、 mg/（ kg h） 或 U/（ kg h） 表 示 ， 人 均 體 重 按 60kg 計(jì) 算 ， 人 體 表 面 積 按1.62m 2計(jì) 算 。 注 射 時(shí) 間 若 不 足 1小 時(shí) ， 按 1小 時(shí) 計(jì) 算 。 供 試 品 每平 方 米 體 表 面 積 劑 量 乘 以 0.027即 可 轉(zhuǎn) 換 為 每 千 克 體 重 劑 量 （ M） 內(nèi) 毒 素 限 值 按 L=K/M計(jì) 算 ， M為 人用 每 公 斤 體 重 每 小 時(shí) 的 最 大 供 試品 劑 量 ， 以 ml/（ kg h） 、 mg/（ kg h） 或 U/（ kg h） 表 示 ，人 均 體 重 按 60kg 計(jì)

24、 算 ， 注 射 時(shí)間 若 不 足 1小 時(shí) ， 按 1小 時(shí) 計(jì) 算 。 修 訂 背 景1、 細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 與 檢 查 用 水 除 了 強(qiáng) 調(diào) 內(nèi) 毒 素 含量 外 ， 還 強(qiáng) 調(diào) 應(yīng) 對(duì) 內(nèi) 毒 素 試 驗(yàn) 無 干 擾 作 用 。2、 強(qiáng) 調(diào) 用 干 熱 滅 菌 法 （ 250 、 30分 鐘 以 上 ）去 除 內(nèi) 毒 素 與 熱 原 法 同 步 。3、 根 據(jù) 某 些 藥 （ 如 抗 腫 瘤 藥 ） 用 體 表 面 積 計(jì)算 給 藥 量 的 需 要 ， 增 加 了 按 體 表 面 積 給 藥 時(shí)的 計(jì) 算 方 法 。 注 射 用 藥 品 、 生 物 制 品 建 立 細(xì) 菌內(nèi) 毒 素

25、 檢 查 法 指 導(dǎo) 原 則n 本 原 則 依 據(jù) 2010年 版 藥 典 制 訂 ， 適 用 于注 射 用 藥 品 、 生 物 制 品 建 立 細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素檢 查 項(xiàng) 目 時(shí) 進(jìn) 行 的 實(shí) 驗(yàn) 及 研 究 。 需 建 立 內(nèi) 毒 素 檢 查 項(xiàng) 目 的 品 種n 質(zhì) 量 標(biāo) 準(zhǔn) 中 有 家 兔 熱 原 檢 查 法 需 轉(zhuǎn) 換 為細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 檢 查 方 法 的 品 種 。n 用 于 注 射 給 藥 ， 但 未 有 熱 原 質(zhì) 量 控 制 的品 種 。n 注 射 用 新 藥 需 建 立 熱 原 質(zhì) 量 控 制 的 品 種 。n 用 于 靜 脈 給 藥 的 原 輔 料 建 立 方

26、法 時(shí) 對(duì) 鱟 試 劑 及 樣 品 的 要 求n 同 時(shí) 使 用 兩 個(gè) 鱟 試 劑 廠 家 的 鱟 試 劑n 每 個(gè) 品 種 至 少 三 批 樣 品 （ 上 市 品 種 應(yīng) 檢測(cè) 兩 個(gè) 以 上 生 產(chǎn) 廠 家 ； 新 藥 需 檢 測(cè) 連 續(xù)生 產(chǎn) 的 樣 品 ） 。 確 定 內(nèi) 毒 素 限 值n 一 般 按 公 式 L=K/M計(jì) 算 。 M為 人 每 公 斤 每 小 時(shí) 臨 床 最 大 用 藥劑 量 ， 依 據(jù) 藥 品 使 用 說 明 書 ， 臨 床 用 藥 須 知 確 定 。n 兒 童 用 藥 如 大 于 成 人 ， 以 兒 童 為 準(zhǔn) 。n 為 保 障 安 全 用 藥 ， 對(duì) 于 抗

27、感 染 、 抗 腫 瘤 、 治 療 心 血 管 疾 病等 重 癥 用 的 藥 品 、 需 聯(lián) 合 用 藥 的 藥 品 ， 可 根 據(jù) 計(jì) 算 值 適 當(dāng)調(diào) 整 ， 嚴(yán) 格 至 計(jì) 算 限 值 的 1/2或 1/3。n 對(duì) 于 體 積 在 100ml以 上 （ 包 括 100ml） 的 復(fù) 方 靜 脈 輸 液 類 品種 ， 內(nèi) 毒 素 限 值 一 般 按 0.5EU/ml計(jì) 。 其 他 單 方 靜 脈 輸 液 品種 除 另 有 規(guī) 定 外 也 可 按 用 藥 劑 量 計(jì) 算 ， 以 EU/mg或 EU/U表示 。 n 對(duì) 于 美 國 、 歐 洲 或 日 本 藥 典 已 收 載 的 ， 并 已 建

28、 立 細(xì) 菌 內(nèi) 毒素 檢 查 法 的 品 種 可 參 考 國 外 藥 典 規(guī) 定 的 限 值 ， 與 按 公 式 計(jì)算 出 的 數(shù) 值 比 較 ， 以 嚴(yán) 格 者 為 該 品 種 的 限 值 。 如 果 使 用 的是 國 外 藥 典 的 限 值 ， 應(yīng) 以 最 新 版 本 藥 典 為 準(zhǔn) 。 干 擾 實(shí) 驗(yàn)n 建 議 使 用 較 低 靈 敏 度 鱟 試 劑 (0.5EU/ml或 0.25EU/ml),以 避 免 供 試品 中 內(nèi) 毒 素 的 陽 性 影 響 。 三 . 異 常 毒 性 檢 查 法 n 定 義n 2010版 與 2005版 區(qū) 別 三 . 異 常 毒 性 檢 查 法 n 定 義

29、 ： 本 法 系 給 予 小 鼠 一 定 劑 量 的 供試 品 溶 液 ， 在 規(guī) 定 時(shí) 間 內(nèi) 觀 察 小 鼠 出現(xiàn) 的 死 亡 情 況 ， 以 判 定 供 試 品 是 否 符合 規(guī) 定 的 一 種 方 法 。 三 . 異 常 毒 性 檢 查 法 n 異 常 毒 性 有 別 于 藥 物 本 身 所 具 有 的 毒性 特 征 ， 是 指 由 生 產(chǎn) 過 程 中 引 入 或 其他 原 因 所 導(dǎo) 致 的 毒 性 反 應(yīng) 。n 供 試 品 如 不 合 格 ， 表 明 藥 品 中 含 有 超過 正 常 產(chǎn) 品 毒 性 的 毒 性 雜 質(zhì) ， 臨 床 用藥 將 可 能 增 加 急 性 不 良 反 應(yīng)

30、 。 2010版 2005版1、 本 法 系 給 予 小 鼠一 定 劑 量 的 供 試 品溶 液 本 法 系 將 一 定 劑 量的 供 試 品 溶 液 注 入小 鼠 體 內(nèi) 或 口 服 給藥2、 制 備 配 制 四 . 溶 血 與 凝 聚 檢 查 法 n 定 義n 2010版 與 2005版 區(qū) 別n 修 訂 背 景 四 . 溶 血 與 凝 聚 檢 查 法 n 定 義 ： 本 法 系 將 一 定 量 供 試 品 與 2%的 家 兔 紅 細(xì) 胞 混 懸 液 混 合 ， 溫 育 一 定時(shí) 間 后 ， 觀 察 其 對(duì) 紅 細(xì) 胞 狀 態(tài) 是 否 產(chǎn)生 影 響 的 一 種 方 法 。 2010版 20

31、05版1、 2%的 家 兔 紅 細(xì) 胞混 懸 液 2%的 兔 （ 或 羊 ） 紅 細(xì)胞 混 懸 液2、 取 健 康 家 兔 血 液 取 兔 或 羊 血 數(shù) 毫 升（ 約 20ml ）3、 0.9%氯 化 鈉 溶 液 、蒸 餾 水 0.9%氯 化 鈉 溶 液 或 蒸餾 水 2010版 2005版4、 如 試 管 中 的 溶 液呈 澄 明 紅 色 如 試 驗(yàn) 中 的 溶 液 呈 澄明 紅 色5、 但 1、 2號(hào) 管 和 5號(hào) 管 肉 眼 觀 察 無 明 顯著 差 異 但 1號(hào) 管 和 5號(hào) 管 比 色無 明 顯 著 差 異6、 輕 輕 倒 轉(zhuǎn) 3次 仍不 分 散 振 搖 后 不 分 散 2010版

32、 2005版7、 應(yīng) 進(jìn) 一 步 置 顯 微 鏡 下觀 察 ， 如 可 見 紅 細(xì) 胞 聚集 為 凝 聚 。 如 有 紅 細(xì) 胞 凝 聚 的 現(xiàn) 象 ，可 按 下 法 進(jìn) 一 步 判 定 是 凝聚 還 是 假 凝 聚 。 若 凝 聚 物在 試 管 振 蕩 后 又 能 均 勻 分散 ， 或 將 凝 聚 物 置 于 載 玻片 上 ， 在 蓋 玻 片 邊 緣 滴 加2滴 0.9%氯 化 鈉 溶 液 ， 置顯 微 鏡 下 觀 察 ， 凝 聚 紅 細(xì)胞 能 被 沖 散 者 為 假 凝 聚 ，若 凝 聚 物 不 被 搖 散 或 在 玻片 上 不 被 沖 散 者 為 凝 聚 。 修 訂 背 景1、 考 慮

33、一 般 家 兔 容 易 得 到 ， 故 將 羊 血 刪 去 ；采 用 兔 紅 細(xì) 胞 懸 液 ；2、 2010版 用 輕 輕 倒 轉(zhuǎn) 3次 來 觀 察 凝 聚 ， 規(guī)范 了 操 作 ；3、 在 顯 微 鏡 下 見 紅 細(xì) 胞 凝 集 為 凝 聚 ， 簡(jiǎn) 單明 確 ；4、 同 時(shí) 觀 察 1、 2號(hào) 兩 個(gè) 平 行 管 與 5號(hào) 管 的對(duì) 比 ， 來 判 定 是 否 溶 血 ；5、 考 慮 藥 物 與 一 次 性 試 管 （ 高 分 子 材 料 ）的 相 容 性 ， 強(qiáng) 調(diào) 用 玻 璃 試 管 。 五 . 過 敏 反 應(yīng) 檢 查 法n 定 義n 2010版 與 2005版 區(qū) 別n 修 訂 背

34、景 五 . 過 敏 反 應(yīng) 檢 查 法n 定 義 ： 本 法 系 將 一 定 量 的 供 試 品 溶 液注 入 豚 鼠 體 內(nèi) ， 間 隔 一 定 時(shí) 間 后 靜 脈注 射 供 試 品 溶 液 進(jìn) 行 激 發(fā) ， 觀 察 動(dòng) 物出 現(xiàn) 過 敏 反 應(yīng) 的 情 況 ， 以 判 定 供 試 品是 否 引 起 動(dòng) 物 全 身 過 敏 反 應(yīng) 。 2010 版 與 2005版 區(qū) 別2010版 2005版1、 供 試 品 溶 液 進(jìn) 行激 發(fā) 供 試 品 進(jìn) 行 攻 擊2、 制 備 配 制3、 腹 腔 或 適 宜 的 途徑 注 射 腹 腔 注 射4、 稱 量 測(cè) 定 2010版 2005版6、 動(dòng) 物

35、 有 無 過 敏 反 應(yīng) 癥 狀 動(dòng) 物 有 無 豎 毛 、 呼 吸 困 難 、抽 搐 等 過 敏 反 應(yīng)7、 如 在 同 一 只 動(dòng) 物 上 出 現(xiàn)豎 毛 、 發(fā) 抖 、 干 嘔 、 連 續(xù)噴 嚏 3聲 、 連 續(xù) 咳 嗽 3聲 ，紫 癜 和 呼 吸 困 難 等 現(xiàn) 象 如 有 豎 毛 、 噴 嚏 、 干 嘔 、 連續(xù) 咳 嗽 3聲 和 呼 吸 困 難 等 現(xiàn)象8、 或 出 現(xiàn) 二 便 失 禁 、 步 態(tài)不 穩(wěn) 或 倒 地 、 抽 搐 、 休 克 、死 亡 現(xiàn) 象 之 一 者 或 出 現(xiàn) 抽 搐 、 休 克 、 死 亡 現(xiàn)象 之 一 者 修 訂 背 景1、 適 宜 的 途 徑 考 慮 對(duì) 腹

36、 腔 有 刺 激 性的 藥 物 不 適 宜 腹 腔 注 射 ；2、 強(qiáng) 調(diào) 同 一 只 動(dòng) 物 上 ；3、 增 加 部 分 嚴(yán) 重 的 反 應(yīng) 指 標(biāo) 。 六 . 降 壓 物 質(zhì) 檢 查 法n 定 義n 2010 版 與 2005版 區(qū) 別n 修 訂 背 景 六 . 降 壓 物 質(zhì) 檢 查 法 n 定 義 ： 本 法 系 比 較 組 胺 對(duì) 照 品 （ S） 與供 試 品 （ T） 引 起 麻 醉 貓 血 壓 下 降 的 程度 ， 以 判 定 供 試 品 中 所 含 降 壓 物 質(zhì) 的限 度 是 否 符 合 規(guī) 定 2010 版 與 2005版 區(qū) 別2010版 2005版1、 經(jīng) 驗(yàn) 證 保

37、 持 活 性符 合 要 求 的 條 件 下 如 無 沉 淀 析 出2、 制 備 配 制3、 按 品 種 項(xiàng) 下 規(guī) 定的 限 值 ， 且 供 試 品 溶液 與 對(duì) 照 品 稀 釋 液 的注 入 體 積 應(yīng) 相 等 的 要求 ， 制 備 適 當(dāng) 濃 度 的供 試 品 溶 液 。 按 品 種 項(xiàng) 下 規(guī) 定 的 限量 ， 配 成 適 當(dāng) 濃 度 的供 試 品 溶 液 。 試 驗(yàn) 時(shí) ，一 般 要 求 供 試 品 溶 液與 對(duì) 照 品 稀 釋 液 的 注入 體 積 應(yīng) 相 等 2010 版 與 2005版 區(qū) 別4、 一 般 為 13.320.0kPa 一 般 為 13.316.0kPa5、 每 次

38、 注 射 應(yīng) 在 前一 次 反 應(yīng) 恢 復(fù) 穩(wěn) 定以 后 進(jìn) 行 ， 且 相 鄰兩 次 注 射 的 間 隔 時(shí)間 應(yīng) 盡 量 保 持 一 致 相 鄰 兩 次 注 射 的 間 隔時(shí) 間 應(yīng) 一 致 （ 35分鐘 ） ， 每 次 注 射 應(yīng) 在前 一 次 反 應(yīng) 恢 復(fù) 穩(wěn) 定以 后 進(jìn) 行6、 則 判 定 即 認(rèn) 為 修 訂 背 景1、 強(qiáng) 調(diào) 對(duì) 照 品 的 降 壓 活 性 要 符 合 要 求2、 強(qiáng) 調(diào) 貓 的 正 常 血 壓 范 圍 為13.320.0kPa3、 強(qiáng) 調(diào) 每 次 注 射 應(yīng) 在 前 一 次 反 應(yīng) 恢 復(fù) 穩(wěn)定 以 后 進(jìn) 行 ， 而 不 強(qiáng) 調(diào) 要 35分 鐘 之 內(nèi) 。

39、 七 . 生 物 檢 定 統(tǒng) 計(jì) 法n 定 義 ： 生 物 檢 定 統(tǒng) 計(jì) 法 主 要 敘 述 的 是應(yīng) 用 生 物 檢 定 時(shí) 必 須 注 意 的 基 本 原 則 、一 般 要 求 、 實(shí) 驗(yàn) 設(shè) 計(jì) 及 統(tǒng) 計(jì) 方 法 。 2010 版 與 2005版 區(qū) 別2010版 2005版1、 生 物 檢 定 法 是 利 用 生 物 體包 括 整 體 動(dòng) 物 、 離 體 組 織 、 器官 、 細(xì) 胞 和 微 生 物 等 評(píng) 估 藥 物生 物 活 性 的 一 種 方 法 。 它 以 藥物 的 藥 理 作 用 為 基 礎(chǔ) ， 以 生 物統(tǒng) 計(jì) 為 工 具 ， 運(yùn) 用 特 定 的 實(shí) 驗(yàn)設(shè) 計(jì) 在 一

40、定 條 件 下 比 較 供 試 品和 相 當(dāng) 的 標(biāo) 準(zhǔn) 品 或 對(duì) 照 品 所 產(chǎn)生 的 特 定 反 應(yīng) ， 通 過 等 反 應(yīng) 劑量 間 比 例 的 運(yùn) 算 或 限 值 劑 量 引起 的 生 物 反 應(yīng) 程 度 ， 從 而 測(cè) 定供 試 品 的 效 價(jià) 、 生 物 活 性 或 雜 質(zhì) 引 起 的 毒 性 生 物 檢 定 法 是 利 用 藥 物 對(duì) 生 物體 或 其 離 體 器 官 組 織 等 所 起 的藥 理 作 用 來 檢 定 藥 物 效 價(jià) 的 方法 ， 用 于 無 適 當(dāng) 理 化 方 法 進(jìn) 行檢 定 的 藥 物 2010版 2005版2、 可 信 限 和 可 信 限 率 可 信 限

41、3、 效 價(jià) 的 可 信 限 率 為可 信 限 的 高 限 與 低 限之 差 除 以 2倍 平 均 數(shù)（ 或 效 價(jià) ） 后 的 百 分率 ： %1002% 平 均 數(shù) （ 或 效 價(jià) ）可 信 限 低 限可 信 限 高 限FL 2010版 2005版5、 但 刪 除 個(gè) 別 結(jié) 果應(yīng) 符 合 “ 特 異 反 應(yīng) 剔除 ” 的 要 求 2010版 2005版6、 如 果 次 實(shí) 驗(yàn) 結(jié) 果 的 不 均 一 性 并 非 個(gè)別 實(shí) 驗(yàn) 結(jié) 果 的 影 響 ,則 按 (42)式 、 (43)式計(jì) 算 校 正 權(quán) 重 W， 如 經(jīng) 公 式 （ 43） 計(jì) 算結(jié) 果 為 負(fù) 值 ， 可 以 刪 除 減

42、號(hào) 后 面 一 項(xiàng) ，計(jì) 算 近 似 的 Sm2和 各 次 實(shí) 驗(yàn) 的 W。 用 W和 W代 替 公 式 （ 37） （ 38） 中 W和 W計(jì) 算 M 、 Sm ， 再 按 (39)式 、 (40)式 、 (41)式 計(jì) 算 M的 FL、 PT及 其 FL (42) (43) f=n-1 如 果 n次 實(shí) 驗(yàn) 結(jié) 果 的 不均 一 性 并 非 個(gè) 別 實(shí) 驗(yàn) 結(jié)果 的 影 響 ， 則 按 （ 42）或 （ 43） 式 計(jì) 算 n個(gè) M的 不 加 權(quán) 均 值 M及 其 SM，再 按 （ 39） 式 、 （ 40）式 、 （ 41） 式 計(jì) 算 的 M的 FL、 PT及 其 FL22 1 mM

43、SSw nSn nMMS Mm )(1 )( 2222 2010版 2005版7、 經(jīng) 特 異 反 應(yīng) 剔 除 計(jì) 算（ 公 式 10） ， 無 個(gè) 別 刪除 結(jié) 果 8、 合 并 計(jì) 算 中 M=lgPT 9、 Sm2 合 并 計(jì) 算 中 各次 實(shí) 驗(yàn) 間 的 差 方 10、 W合 并 計(jì) 算 中 各 次實(shí) 驗(yàn) 結(jié) 果 的 校 正 權(quán) 重 2010版 2005版11、計(jì) 算 結(jié) 果 為 負(fù) 數(shù) ,可 刪 除 減 號(hào) 后 面 項(xiàng) ，Sm2=0.001007計(jì) 算 各 次 實(shí) 驗(yàn) 結(jié) 果 的 差 方 Sm2、 差 方和 （ SM2+Sm2） 、 校 正 權(quán) 重 W 、 W M,見 表 7-2 0

44、01205.0002212.0001007.0601327206.016 6/5221.81094.12 22 mS 2010 版 與 2005版 區(qū) 別n 12、 對(duì) 結(jié) 果 不 均 一 時(shí) 進(jìn) 行 了 舉 例 ： 如 胰 島 素 測(cè)定 結(jié) 果 不 均 一 時(shí) 計(jì) 算 表 及 計(jì) 算 方 法 修 訂 背 景1、 生 物 檢 定 法 的 概 念2、 可 信 限 率 的 定 義 及 公 式3、 （ 42） 、 （ 43） 公 式 修 訂4、 Sm2 (各 次 實(shí) 驗(yàn) 差 方 )及 W(校 正 權(quán) 重 )的 定 義5、 合 并 計(jì) 算 時(shí) lgPT 八 . 中 藥 注 射 劑 安 全 性 檢 查

45、法 應(yīng) 用 指 導(dǎo) 原 則 八 . 中 藥 注 射 劑 安 全 性 檢 查 法應(yīng) 用 指 導(dǎo) 原 則n 中 藥 安 全 性 檢 查 項(xiàng) 目 的 設(shè) 定n 安 全 性 檢 查 方 法 和 檢 查 限 值 確 定 八 . 中 藥 注 射 劑 安 全 性 檢 查 法應(yīng) 用 指 導(dǎo) 原 則n 本 指 導(dǎo) 原 則 為 中 藥 注 射 劑 臨 床 使 用 的 安全 性 和 制 劑 質(zhì) 量 可 控 性 而 定 。n 中 藥 注 射 劑 安 全 性 檢 查 包 括 ： 熱 原 （ 或細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 ） 、 異 常 毒 性 、 降 壓 物 質(zhì) 、過 敏 反 應(yīng) 物 質(zhì) 、 溶 血 與 凝 聚 等 項(xiàng) 。n

46、根 據(jù) 處 方 、 工 藝 、 用 法 及 用 量 等 設(shè) 定 相應(yīng) 檢 查 項(xiàng) 目 n 進(jìn) 行 適 用 性 研 究 。 （ 一 ） 中 藥 安 全 性 檢 查 項(xiàng) 目 的 設(shè) 定 靜 脈 用 注 射 劑 ： 應(yīng) 設(shè) 熱 原 （ 或 細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 ） 、異 常 毒 性 、 過 敏 反 應(yīng) 、 溶 血 與 凝 聚 等 安 全 性檢 查 項(xiàng) ， 必 要 時(shí) 考 慮 降 壓 物 質(zhì) 檢 查 項(xiàng) 。 （ 功能 主 治 中 具 有 與 升 壓 相 關(guān) 內(nèi) 容 的 注 射 劑 除 外 ） 中 藥 注 射 劑 中 致 熱 成 分 復(fù) 雜 ， 可 能 干擾 細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 檢 查 ， 一 般 首 選

47、 熱 原 檢 查 項(xiàng) ，如 該 藥 本 身 具 有 清 熱 的 藥 理 作 用 或 對(duì) 家 兔 有毒 性 反 應(yīng) ， 也 可 選 擇 細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 檢 查 項(xiàng) 。 肌 內(nèi) 注 射 用 注 射 劑 ： 應(yīng) 設(shè) 異 常 毒 性 、 過 敏 反應(yīng) 等 檢 查 項(xiàng) 。 （ 二 ） 安 全 性 檢 查 方 法 和 檢 查 限值 確 定q 方 法 適 用 性 （ 設(shè) 定 限 值 前 研 究 ）q 確 定 限 值q 應(yīng) 進(jìn) 行 三 批 以 上 供 試 品 的 檢 查 驗(yàn) 證 1.熱 原 -細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 檢 查方 法 適 用 性 （ 設(shè) 定 限 值 前 研 究 ）l 熱 原 檢 查 應(yīng) 做 適 用

48、 性 研 究 ， 求 得 對(duì) 家 兔 無毒 性 反 應(yīng) 、 不 影 響 正 常 體 溫 和 無 解 熱 作 用的 劑 量 。l 細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 檢 查 應(yīng) 進(jìn) 行 干 擾 試 驗(yàn) ， 求 得 最大 無 干 擾 濃 度 。檢 查 方 法 l 參 照 熱 原 檢 查 法 （ 附 錄 A） 或 細(xì) 菌 內(nèi)毒 素 檢 查 法 （ 附 錄 D） 。 l 品 種 項(xiàng) 下 可 以 增 加 稀 釋 濃 度 、 調(diào) 節(jié) pH和 滲透 壓 或 緩 慢 注 射 等 排 除 干 擾 或 影 響 的 特 殊規(guī) 定 。 設(shè) 定 限 值 -熱 原 檢 查p 限 值 根 據(jù) 臨 床 一 小 時(shí) 內(nèi) 最 大 用 藥 劑 量

49、 計(jì) 算 。p 熱 原 檢 查 限 值 可 參 照 臨 床 劑 量 計(jì) 算 ， 一 般 為人 用 每 公 斤 體 重 每 小 時(shí) 最 大 供 試 品 劑 量 的3 5倍 ，p 供 試 品 注 射 體 積 每 公 斤 體 重 一 般 不 少 于0.5mL， 不 超 過 10mL。 p 限 值 劑 量 應(yīng) 不 影 響 正 常 體 溫 。 設(shè) 定 限 值 -內(nèi) 毒 素 檢 查p 限 值 根 據(jù) 臨 床 一 小 時(shí) 內(nèi) 最 大 用 藥 劑 量 計(jì) 算p 內(nèi) 毒 素 檢 查 限 值 按 規(guī) 定 要 求 計(jì) 算 ，p 由 于 藥 物 和 適 應(yīng) 癥 (如 抗 感 染 、 抗 腫 瘤 、 心 血管 藥 等

50、急 重 病 癥 用 藥 、 兒 童 老 人 用 藥 、 復(fù) 合 用藥 、 大 輸 液 等 ) 的 不 同 ， 限 值 可 適 當(dāng) 嚴(yán) 格 ， 至計(jì) 算 值 的 1/3 1/2， 以 保 證 安 全 用 藥 。 p 細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 測(cè) 定 濃 度 應(yīng) 無 干 擾 反 應(yīng) 。 2.異 常 毒 性 檢 查 方 法 適 用 性 （ 設(shè) 定 限 值 前 研 究 ）p 可 參 考 文 獻(xiàn) 數(shù) 據(jù) ， 并 經(jīng) 單 次 靜 脈 注 射 給 藥 毒 性 試 驗(yàn) 確 定該 注 射 劑 的 急 性 毒 性 數(shù) 據(jù) （ LD50或 LD1及 其 可 信 限 ） 。p 可 由 多 個(gè) 實(shí) 驗(yàn) 室 或 多 種 來 源

51、 動(dòng) 物 試 驗(yàn) 求 得 LD50和 LD1數(shù) 據(jù) 。p 注 射 速 度 0.1ml/秒 ， 觀 察 時(shí) 間 為 72小 時(shí) 。 p 如 其 它 給 藥 途 徑 或 延 長(zhǎng) 觀 察 時(shí) 間 應(yīng) 進(jìn) 行 相 應(yīng) 途 徑 或 相 應(yīng)觀 察 時(shí) 間 的 急 性 毒 性 試 驗(yàn) 。 檢 查 方 法 參 照 異 常 毒 性 檢 查 法 （ 附 錄 E ） 。 對(duì) 動(dòng) 物 、 給 藥 途 徑 和 給 藥 次 數(shù) 、 觀 察 指 標(biāo) 和 時(shí) 間 等 ， 方 法和 限 值 有 特 殊 要 求 時(shí) ， 可 在 品 種 項(xiàng) 下 另 作 規(guī) 定 。 設(shè) 定 限 值p 限 值 應(yīng) 低 于 該 注 射 劑 本 身 毒

52、性 的 最 低 致 死 劑 量p 考 慮 到 實(shí) 驗(yàn) 室 間 差 異 、 動(dòng) 物 反 應(yīng) 差 異 和 制 劑 的 差 異 ，建 議p 限 值 至 少 應(yīng) 小 于 LD1可 信 限 下 限 的 1/3(建 議 采 用 1/3 1/6)，p 如 難 以 計(jì) 算 最 低 致 死 量 ， 可 采 用 LD50可 信 限 下 限 的 1/4 (建議 采 用 1/4 1/8)。p 如 半 數(shù) 致 死 量 與 臨 床 體 重 劑 量 之 比 小 于 20， 可 采 用 LD50可 信限 下 限 的 1/4或 LD1可 信 限 下 限 的 1/3。 p 靜 脈 注 射 最 大 劑 量 0.8ml/20g仍 未

53、 見 毒 性 反 應(yīng) 或 死 亡 ，可 以 此 作 為 檢 查 限 值 。 3.降 壓 物 質(zhì) 檢 查 q方 法 適 用 性 （ 設(shè) 定 限 值 前 研 究 ） 供 試 品 按 一 定 注 射 速 度 靜 脈 注 射 不 同 劑 量 ，觀 察 供 試 品 對(duì) 貓 血 壓 反 應(yīng) 的 劑 量 反 應(yīng) 關(guān) 系 。 供 試 品 與 對(duì) 照 品 注 射 體 積 應(yīng) 相 同 ， 通 常 為0.2 1ml/kg， 求 得 供 試 品 降 壓 物 質(zhì) 檢 查 符 合規(guī) 定 的 最 大 劑 量 （ 最 大 無 降 壓 反 應(yīng) 劑 量 ） 。 q檢 查 方 法 參 照 降 壓 物 質(zhì) 檢 查 法 （ 附 錄 F

54、） 。 設(shè) 定 限 值p 臨 床 單 次 用 藥 劑 量 的 1/5 5倍 作 為 降 壓 反應(yīng) 物 質(zhì) 檢 查 劑 量 限 值 ， 急 重 病 癥 用 藥 盡 可能 采 用 高 限 。p 特 殊 情 況 下 ， 如 供 試 品 有 一 定 降 壓 作 用 ，則 可 按 最 大 無 降 壓 反 應(yīng) 劑 量 的 1/2-1/4作 為限 值 劑 量 。 p 供 試 品 原 液 靜 脈 注 射 1ml/kg劑 量 未 見 降 壓反 應(yīng) ， 該 劑 量 可 作 為 給 藥 限 值 4. 過 敏 反 應(yīng) 檢 查方 法 適 用 性 （ 設(shè) 定 限 值 前 研 究 ）p 測(cè) 定 供 試 品 對(duì) 豚 鼠 腹

55、腔 (或 皮 下 )和 靜 脈 給 藥 的無 毒 性 反 應(yīng) 劑 量 。p 可 采 用 注 射 劑 的 半 成 品 原 輔 料 進(jìn) 行 致 敏 和 激 發(fā)研 究 ， 確 定 致 敏 方 式 和 次 數(shù)p 在 首 次 給 藥 后 14、 21、 28天 中 選 擇 最 佳 激 發(fā)時(shí) 間 。 p 檢 查 方 法 參 照 過 敏 反 應(yīng) 檢 查 法 （ 附 錄 G） 。 設(shè) 定 限 值p 致 敏 和 激 發(fā) 劑 量 應(yīng) 小 于 該 途 徑 的 急 性 毒 性 反 應(yīng) 劑量 , 適 當(dāng) 參 考 臨 床 劑 量p 一 般 激 發(fā) 劑 量 大 于 致 敏 劑 量 。p 常 用 腹 腔 或 鼠 鼷 部 皮

56、下 注 射 途 徑 致 敏 ， 每 次 每 只0.5ml, 每 只 1ml靜 脈 注 射 激 發(fā) 。 p 如 致 敏 劑 量 較 小 ， 可 適 當(dāng) 增 加 致 敏 次 數(shù) ， 方 法 和限 值 的 特 殊 要 求 應(yīng) 在 品 種 項(xiàng) 下 規(guī) 定 。 5.溶 血 與 凝 聚 檢 查p 方 法 適 用 性 （ 設(shè) 定 限 值 前 研 究 ）p對(duì) 注 射 劑 原 液 和 稀 釋 液 進(jìn) 行 溶 血 與 凝 聚 實(shí)驗(yàn) 研 究 , p指 標(biāo) 除 目 測(cè) 外 ， 可 增 加 比 色 法 和 顯 微 鏡 下紅 細(xì) 胞 計(jì) 數(shù) 方 法 , 確 定 無 溶 血 和 或 凝 聚 的最 大 濃 度 p 檢 查 方

57、 法 參 照 溶 血 與 凝 聚 檢 查 法 （ 附 錄 H） 。 設(shè) 定 限 值p 以 無 溶 血 和 凝 聚 的 最 大 濃 度 的 1/2作為 限 值 濃 度p 一 般 應(yīng) 高 于 臨 床 最 大 使 用 濃 度 。 修 訂 背 景 1、 增 加 了 中 藥 安 全 性 檢 查 項(xiàng) 目 的 設(shè) 定 原 則 。2、 增 加 了 限 制 前 研 究 （ 即 方 法 適 用 性 研究 ） ， 使 方 法 更 具 科 學(xué) 性 、 可 操 作 性 。3、 安 全 性 檢 查 法 內(nèi) 容 省 略 ， 檢 查 限 值 設(shè) 定更 加 具 體 明 確 。4、 家 兔 熱 原 檢 查 法 檢 查 限 值 由

58、 人 用 每 公 斤體 重 每 小 時(shí) 最 大 供 試 品 劑 量 的 1-3倍 修 改為 3-5倍 。 九 . 化 學(xué) 藥 品 注 射 劑 安 全 性 檢 查 法 應(yīng) 用 指 導(dǎo) 原 則 化 學(xué) 藥 品 注 射 劑 安 全 性 檢 查 法 應(yīng) 用 指 導(dǎo) 原 則n 化 學(xué) 藥 品 （ 包 括 抗 生 素 、 生 化 藥 品 ） 安全 性 檢 查 項(xiàng) 目 的 設(shè) 定n 安 全 性 檢 查 方 法 和 檢 查 限 值 確 定n 化 藥 與 中 藥 注 射 劑 安 全 性 檢 查 法 應(yīng) 用 指導(dǎo) 原 則 的 異 同 點(diǎn) 化 學(xué) 藥 品 注 射 劑 安 全 性 檢 查 法 應(yīng) 用 指 導(dǎo) 原 則p

59、 本 指 導(dǎo) 原 則 為 化 學(xué) 藥 品 注 射 劑 臨 床 使用 的 安 全 性 和 制 劑 質(zhì) 量 可 控 性 而 定 。p 化 學(xué) 藥 注 射 劑 安 全 性 檢 查 包 括 異 常 毒性 、 細(xì) 菌 內(nèi) 毒 素 （ 或 熱 原 ） 、 降 壓 物質(zhì) （ 或 組 胺 物 質(zhì) ） 、 過 敏 反 應(yīng) 等 項(xiàng) 。p 根 據(jù) 處 方 、 工 藝 、 用 法 及 用 量 等 設(shè) 定相 應(yīng) 的 檢 查 項(xiàng) 目 p 進(jìn) 行 適 用 性 研 究 。 （ 一 ） 化 學(xué) 藥 品 （ 包 括 抗 生 素 、 生 化藥 品 ） 安 全 性 檢 查 項(xiàng) 目 的 設(shè) 定1、 靜 脈 用 注 射 劑p 應(yīng) 設(shè) 細(xì)

60、 菌 內(nèi) 毒 素 （ 或 熱 原 ） 檢 查 項(xiàng) 。p 所 用 原 料 系 動(dòng) 物 來 源 或 微 生 物 發(fā) 酵 液提 取 物 ， 組 分 結(jié) 構(gòu) 不 清 晰 或 有 可 能 污染 毒 性 雜 質(zhì) ， 且 又 缺 乏 有 效 的 理 化 分析 方 法 的 靜 脈 用 注 射 劑 ， 應(yīng) 考 慮 設(shè) 立異 常 毒 性 檢 查 項(xiàng) 。 安 全 性 檢 查 項(xiàng) 目 的 設(shè) 定1、 靜 脈 用 注 射 劑p 所 用 原 料 系 動(dòng) 物 來 源 或 微 生 物 發(fā) 酵 提 取 物 時(shí) ,組 分 結(jié) 構(gòu) 不 清 晰 ， 且 有 可 能 污 染 異 源 蛋 白 或未 知 過 敏 反 應(yīng) 物 質(zhì) 的 靜 脈

61、 用 注 射 劑 ， 如 缺 乏相 關(guān) 的 理 化 分 析 方 法 且 臨 床 發(fā) 現(xiàn) 過 敏 反 應(yīng) ，應(yīng) 考 慮 設(shè) 立 過 敏 反 應(yīng) 檢 查 項(xiàng) 。p 所 用 原 料 系 動(dòng) 物 來 源 或 微 生 物 發(fā) 酵 提 取 物 時(shí) , 組 分 結(jié) 構(gòu) 不 清 晰 或 有 可 能 污 染 組 胺 、 類 組 胺樣 降 血 壓 物 質(zhì) 的 靜 脈 用 注 射 劑 ， 應(yīng) 考 慮 設(shè) 立降 壓 物 質(zhì) 或 組 胺 類 物 質(zhì) 檢 查 項(xiàng) 。 安 全 性 檢 查 項(xiàng) 目 的 設(shè) 定2、 肌 內(nèi) 注 射 用 注 射 劑p 所 用 原 料 系 動(dòng) 物 來 源 或 微 生 物 發(fā) 酵 提取 物 時(shí) ,

62、組 分 結(jié) 構(gòu) 不 清 晰 或 有 可 能 污染 毒 性 雜 質(zhì) ， 且 又 缺 乏 有 效 的 理 化 分析 方 法 的 肌 內(nèi) 注 射 用 注 射 劑 ， 應(yīng) 考 慮設(shè) 立 異 常 毒 性 檢 查 項(xiàng) 。 安 全 性 檢 查 項(xiàng) 目 的 設(shè) 定2、 肌 內(nèi) 注 射 用 注 射 劑p 所 用 原 料 系 動(dòng) 物 來 源 或 微 生 物 發(fā) 酵 提 取 物時(shí) , 組 分 結(jié) 構(gòu) 不 清 晰 或 有 可 能 污 染 異 源 蛋白 或 未 知 過 敏 反 應(yīng) 物 質(zhì) 的 肌 內(nèi) 注 射 用 注 射劑 ， 如 缺 乏 相 關(guān) 理 化 分 析 方 法 且 臨 床 發(fā) 現(xiàn)過 敏 反 應(yīng) ， 應(yīng) 考 慮

63、設(shè) 立 過 敏 反 應(yīng) 檢 查 項(xiàng) 。 p 臨 床 用 藥 劑 量 較 大 ， 生 產(chǎn) 工 藝 易 污 染 細(xì) 菌內(nèi) 毒 素 的 肌 內(nèi) 注 射 用 注 射 劑 ， 應(yīng) 考 慮 設(shè) 細(xì)菌 內(nèi) 毒 素 檢 查 項(xiàng) 安 全 性 檢 查 項(xiàng) 目 的 設(shè) 定3、 特 殊 途 徑 的 注 射 劑p 椎 管 內(nèi) 、 腹 腔 、 眼 內(nèi) 等 特 殊 途 徑 的 注射 劑 ， 其 安 全 性 檢 查 項(xiàng) 目 一 般 應(yīng) 符 合靜 脈 用 注 射 劑 的 要 求 ，p 必 要 時(shí) 增 加 其 它 安 全 性 檢 查 項(xiàng) 目 ， 如刺 激 性 檢 查 、 細(xì) 胞 毒 性 檢 查 。 安 全 性 檢 查 項(xiàng) 目 的

64、 設(shè) 定4、 注 射 劑 輔 料p 注 射 劑 輔 料 使 用 面 廣 ， 用 量 大 ， 來 源復(fù) 雜 ， 與 藥 品 的 安 全 性 直 接 相 關(guān) 。p 在 質(zhì) 量 控 制 中 ， 應(yīng) 根 據(jù) 輔 料 來 源 、 性質(zhì) 、 用 途 、 用 法 用 量 ， 配 合 理 化 分 析方 法 ， 設(shè) 立 必 要 的 安 全 性 檢 查 項(xiàng) 目 。 安 全 性 檢 查 項(xiàng) 目 的 設(shè) 定5、 其 它p 原 料 和 生 產(chǎn) 工 藝 特 殊 的 注 射 劑 必 要 時(shí)應(yīng) 增 加 特 殊 的 安 全 性 檢 查 項(xiàng) 目 ， 如 病毒 檢 查 、 細(xì) 胞 毒 性 檢 查 等 。 （ 二 ） 安 全 性 檢

65、 查 方 法 和 檢 查 限 值 確 定 -組 胺 檢 查 法 定 義 ： 本 法 系 將 一 定 濃 度 的 供 試 品 和 組 胺 對(duì) 照品 分 別 觀 察 出 現(xiàn) 的 收 縮 反 應(yīng) 幅 度 并 加 以 比 較 ，以 判 定 供 試 品 是 否 符 合 規(guī) 定 的 一 種 方 法 。 不 合 格 供 試 品 表 明 含 有 組 胺 和 類 組 胺 物 質(zhì) ， 在臨 床 上 可 能 引 起 血 壓 下 降 和 類 似 過 敏 反 應(yīng) 等 嚴(yán)重 的 不 良 反 應(yīng) 。 （ 二 ） 安 全 性 檢 查 方 法 和 檢 查 限 值 確 定 -組 胺 檢 查 法檢 查 方 法 參 照 本 附 錄

66、“ 附 組 胺 類 物 質(zhì) 檢 查 法 ”設(shè) 定 限 值 前 研 究 在 確 定 限 值 前 ， 應(yīng) 考 察 供 試 品對(duì) 組 胺 對(duì) 照 品 引 起 的 離 體 豚 鼠 回 腸 收 縮 反 應(yīng) 的干 擾 （ 抑 制 或 增 強(qiáng) ） ， 求 得 最 大 無 收 縮 干 擾 濃度 。 若 供 試 品 的 處 方 、 生 產(chǎn) 工 藝 等 任 何 有 可 能影 響 試 驗(yàn) 結(jié) 果 的 條 件 發(fā) 生 改 變 時(shí) ， 需 重 新 進(jìn) 行干 擾 試 驗(yàn) 。 組 胺 檢 查 法干 擾 試 驗(yàn) 按 組 胺 類 物 質(zhì) 檢 查 法 ， 依 下 列 順 序 準(zhǔn) 確 注 入 供 試品 稀 釋 液 加 對(duì) 照 品 稀 釋 液 低 劑 量 、 對(duì) 照 品 稀 釋 液 低 劑 量 、供 試 品 稀 釋 液 加 對(duì) 照 品 稀 釋 液 高 劑 量 、 對(duì) 照 品 稀 釋 液 高劑 量 （ dSL+T、 dSL 、 dSH+T、 dSH ） ， 重 復(fù) 一 次 ， 如 dSL+T及 dSH+T所 致 的 反 應(yīng) 值 與 dSL及 dSH所 致 的 反 應(yīng) 值 基 本 一 致 ，可 認(rèn) 為 供 試 品 不 干 擾 組