第二章4 基因工程受體菌或細(xì)胞915

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1、第二章第二章4 基因工程受體菌或基因工程受體菌或細(xì)胞胞915第1頁(yè)，共17頁(yè)。四、基因工程受體菌或細(xì)胞四、基因工程受體菌或細(xì)胞受體細(xì)胞應(yīng)具備的條件受體細(xì)胞應(yīng)具備的條件各種基因工程受體及其特性各種基因工程受體及其特性實(shí)驗(yàn)室常用的基因工程受體實(shí)驗(yàn)室常用的基因工程受體第2頁(yè)，共17頁(yè)。受體細(xì)胞應(yīng)具備的條件受體細(xì)胞應(yīng)具備的條件限制性缺陷型限制性缺陷型外切酶和內(nèi)切酶活性缺陷外切酶和內(nèi)切酶活性缺陷 (recBrecB-、recCrecC-、hsdRhsdR-)；重組整合缺陷型重組整合缺陷型用于基因擴(kuò)增或高效表達(dá)的受體細(xì)胞用于基因擴(kuò)增或高效表達(dá)的受體細(xì)胞 (recArecA-)；具有較高的轉(zhuǎn)化效率具有較高的

2、轉(zhuǎn)化效率具有與載體選擇標(biāo)記互補(bǔ)的表型具有與載體選擇標(biāo)記互補(bǔ)的表型感染寄生缺陷型感染寄生缺陷型防止重組細(xì)菌擴(kuò)散污染，生物武器除外。防止重組細(xì)菌擴(kuò)散污染，生物武器除外。第3頁(yè)，共17頁(yè)。各種基因工程受體及其特性各種基因工程受體及其特性遺傳背景清楚遺傳背景清楚載體受體系統(tǒng)完備載體受體系統(tǒng)完備 生長(zhǎng)迅速生長(zhǎng)迅速培養(yǎng)簡(jiǎn)單培養(yǎng)簡(jiǎn)單重組子穩(wěn)定重組子穩(wěn)定產(chǎn)結(jié)構(gòu)復(fù)雜、種類繁多的內(nèi)毒素產(chǎn)結(jié)構(gòu)復(fù)雜、種類繁多的內(nèi)毒素大腸桿菌：大腸桿菌：優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：第4頁(yè)，共17頁(yè)。外源外源DNADNA克隆和擴(kuò)增；克隆和擴(kuò)增；原核基因高效表達(dá)；原核基因高效表達(dá)；基因文庫(kù)構(gòu)建?；蛭膸?kù)構(gòu)建。用途：用途：是基因工程主要原核受體

3、菌。第5頁(yè)，共17頁(yè)。遺傳背景清楚遺傳背景清楚蛋白質(zhì)分泌機(jī)制健全蛋白質(zhì)分泌機(jī)制健全 生長(zhǎng)迅速生長(zhǎng)迅速培養(yǎng)簡(jiǎn)單培養(yǎng)簡(jiǎn)單不產(chǎn)內(nèi)毒素不產(chǎn)內(nèi)毒素遺傳欠穩(wěn)定遺傳欠穩(wěn)定載體受體系統(tǒng)欠完備載體受體系統(tǒng)欠完備枯草桿菌：枯草桿菌：優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：第6頁(yè)，共17頁(yè)。用途：用途：原核基因的克隆與表達(dá)；原核基因的克隆與表達(dá)；重組蛋白多肽的分泌。重組蛋白多肽的分泌。第7頁(yè)，共17頁(yè)。鏈霉菌：鏈霉菌：抗生素的主要生產(chǎn)者抗生素的主要生產(chǎn)者遺傳操作簡(jiǎn)單遺傳操作簡(jiǎn)單不產(chǎn)內(nèi)毒素不產(chǎn)內(nèi)毒素用途：抗生素生產(chǎn)菌株的改良。用途：抗生素生產(chǎn)菌株的改良。遺傳不穩(wěn)定遺傳不穩(wěn)定生長(zhǎng)相對(duì)緩慢生長(zhǎng)相對(duì)緩慢優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：第8頁(yè)，共1

4、7頁(yè)。酵母菌：酵母菌：具有真核生物的特征具有真核生物的特征遺傳背景清楚遺傳背景清楚生長(zhǎng)迅速生長(zhǎng)迅速培養(yǎng)簡(jiǎn)單培養(yǎng)簡(jiǎn)單外源基因表達(dá)系統(tǒng)完善外源基因表達(dá)系統(tǒng)完善遺傳穩(wěn)定遺傳穩(wěn)定內(nèi)源蛋白產(chǎn)物的內(nèi)源蛋白產(chǎn)物的種類多、含量高種類多、含量高優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：第9頁(yè)，共17頁(yè)。用途：用途：外源外源DNADNA擴(kuò)增和克隆擴(kuò)增和克隆真核基因高效表達(dá)真核基因高效表達(dá)基因文庫(kù)構(gòu)建基因文庫(kù)構(gòu)建真核基因表達(dá)調(diào)控研究真核基因表達(dá)調(diào)控研究是基因工程重要的真核受體菌。是基因工程重要的真核受體菌。第10頁(yè)，共17頁(yè)。昆蟲(chóng)細(xì)胞（家蠶）：昆蟲(chóng)細(xì)胞（家蠶）：具有真核生物的特征具有真核生物的特征外源基因表達(dá)量高外源基因表達(dá)量高繁殖

5、較快繁殖較快培養(yǎng)成本低培養(yǎng)成本低遺傳穩(wěn)定遺傳穩(wěn)定用途：真核生物基因的高效表達(dá)。用途：真核生物基因的高效表達(dá)。DNADNA重組操作重組操作系統(tǒng)欠完善系統(tǒng)欠完善優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：第11頁(yè)，共17頁(yè)。哺乳動(dòng)物細(xì)胞（中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞哺乳動(dòng)物細(xì)胞（中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 CHOCHO）：）：與人的親緣關(guān)系近與人的親緣關(guān)系近分子重組表達(dá)系統(tǒng)健全分子重組表達(dá)系統(tǒng)健全具有合適的糖基化修飾系統(tǒng)具有合適的糖基化修飾系統(tǒng)細(xì)胞培養(yǎng)條件苛刻細(xì)胞培養(yǎng)條件苛刻生長(zhǎng)緩慢生長(zhǎng)緩慢 優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：第12頁(yè)，共17頁(yè)。用途：用途：哺乳動(dòng)物和人基因表達(dá)調(diào)控研究哺乳動(dòng)物和人基因表達(dá)調(diào)控研究基因藥物生產(chǎn)基因藥物生產(chǎn)是基因工程的

6、主要哺乳動(dòng)物受體。第13頁(yè)，共17頁(yè)。植物細(xì)胞（擬南芥、煙葉植物細(xì)胞（擬南芥、煙葉）：）：轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞易分化轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞易分化細(xì)胞培養(yǎng)簡(jiǎn)單細(xì)胞培養(yǎng)簡(jiǎn)單成本低廉成本低廉具有光合作用具有光合作用遺傳操作繁瑣遺傳操作繁瑣 優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：第14頁(yè)，共17頁(yè)。用途：用途：高等植物基因表達(dá)調(diào)控研究高等植物基因表達(dá)調(diào)控研究農(nóng)作物品質(zhì)改良農(nóng)作物品質(zhì)改良第15頁(yè)，共17頁(yè)。實(shí)驗(yàn)室常用的基因工程受體實(shí)驗(yàn)室常用的基因工程受體酵母菌：畢赤酵母、啤酒酵母酵母菌：畢赤酵母、啤酒酵母哺乳動(dòng)物細(xì)胞：哺乳動(dòng)物細(xì)胞：CHO CHO LE392LE392、ED8654 ED8654 C600C600、DH5DH5 、HB101HB101、JM109 JM109 大腸桿菌大腸桿菌用于接受質(zhì)粒：用于接受質(zhì)粒：用于接受用于接受 -DNA-DNA：第16頁(yè)，共17頁(yè)。謝謝！第17頁(yè)，共17頁(yè)。