高中生物選修一知識(shí)點(diǎn)填空學(xué)案[含答案解析]

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1、 WORD格式整理版 選修一 生物技術(shù)實(shí)踐 專題一 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用 課題1 果酒和果醋的制作 1.果酒制作的原理 (1)人類利用微生物發(fā)酵制作果酒,該過程用到的微生物是 , 它的代謝類型是 ,與異化作用有關(guān)的方程有 。 生活狀態(tài):進(jìn)行發(fā)酵,產(chǎn)生大量 。 (2)果酒制作條件 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)所使用的酵母菌的來源是 。 酵母菌生長(zhǎng)的最適溫度是

2、 ; PH呈 ; (3)紅色葡萄酒呈現(xiàn)顏色的原因是:酒精發(fā)酵過程中,隨著 的提高,紅色葡萄皮的 進(jìn)入發(fā)酵液,使葡萄酒呈 色。 (4)在 、 的發(fā)酵液中,酵母菌可以生長(zhǎng)繁殖,而絕大多數(shù)其它微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到抑制。 2.果醋的制作原理 (1)果醋發(fā)酵菌種是 ,新陳代謝類型 。 (2)當(dāng)氧氣和糖源充足時(shí)醋酸菌將糖分解成 ,當(dāng)糖源不足時(shí)醋酸菌將 變?yōu)? 再變成

3、醋酸,其反應(yīng)式 。 3.操作過程應(yīng)注意的問題 (1)為防止發(fā)酵液被污染,發(fā)酵瓶要用 消毒。 (2)葡萄汁裝入發(fā)酵瓶時(shí),要留出大約 的空間。 (3)制作葡萄酒時(shí)將溫度嚴(yán)格控制在 ,時(shí)間控制在 d左右,可通過 對(duì)發(fā)酵的情況進(jìn)行及時(shí)的監(jiān)測(cè)。 (4)制葡萄醋的過程中,將溫度嚴(yán)格控制在 ,時(shí)間控制在 d,并注意適時(shí)在 充氣。 4.酒精的檢驗(yàn) (1)檢驗(yàn)試劑:

4、 。 (2)反應(yīng)條件及現(xiàn)象:在 條件下,反應(yīng)呈現(xiàn) 。 5.制作果酒、果醋的實(shí)驗(yàn)流程 挑選葡萄→ → → → ↓ ↓ 果酒 果醋 P4旁欄思考題 1.你認(rèn)為應(yīng)該先洗葡萄還是先除去枝梗,為什么? 應(yīng)該先沖洗葡萄,然后再除去枝梗,以避免除去枝梗時(shí)引起葡萄破損,增加被雜菌污染的機(jī)會(huì)。 2.你認(rèn)為應(yīng)該從哪些方面防止發(fā)酵液被污染? 需要從發(fā)酵制作的過程進(jìn)行全面的考慮,

5、因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌。例如:榨汁機(jī)、發(fā)酵裝置要清洗干凈;每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋、不要完全揭開瓶蓋等。 3.制作葡萄酒時(shí),為什么要將溫度控制在18~250C?制作葡萄醋時(shí),為什么要將溫度控制在30~350C? 溫度是酵母菌生長(zhǎng)和發(fā)酵的重要條件。200C左右最適合酵母菌繁殖,因此需要將溫度控制在其最適溫度范圍內(nèi)。而醋酸菌是嗜溫菌,最適生長(zhǎng)溫度為30~350C,因此要將溫度控制在30~350C。 4.制葡萄醋時(shí),為什么要適時(shí)通過充氣口充氣? 醋酸菌是好氧菌,再將酒精變成醋酸時(shí)需要養(yǎng)的參與,因此要適時(shí)向發(fā)酵液中充氣。 P4: A同學(xué):每次排氣時(shí)只需擰松瓶蓋,不要完全揭開瓶蓋

6、;制醋時(shí),再將瓶蓋打開,蓋上一層紗布,進(jìn)行葡萄醋的發(fā)酵。 來防止發(fā)酵液被污染,因?yàn)椴僮鞯拿恳徊蕉伎赡芑烊腚s菌 B同學(xué):分析果酒和果醋的發(fā)酵裝置中充氣口、排氣口和出料口分別有哪些作用。為什么排氣口要通過一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接? 充氣口:是在醋酸發(fā)酵時(shí)連接充氣泵進(jìn)行充氣用的; 排氣口:是在酒精發(fā)酵時(shí)用來排出二氧化碳的; 出料口:是用來取樣的。 排氣口要通過一個(gè)長(zhǎng)而彎曲的膠管與瓶身連接,其目的是防止空氣中微生物的污染。使用該裝置制酒時(shí),應(yīng)該關(guān)閉充氣口;制醋時(shí),應(yīng)將充氣口連接氣泵,輸入氧氣。 課題2 腐乳的制作 1.制作原理 (1).經(jīng)過微生物的發(fā)酵,豆腐中的蛋白質(zhì)被分解成小

7、分子的 和 ,脂肪被分解成 和 ,因而更利于消化吸收。 (2).腐乳的發(fā)酵有多種微生物參與,如 、 、 、 等,其中起主要作用的是 。它是一種絲狀 ,常見 、 、 、 上。 (3).現(xiàn)代的腐乳生產(chǎn)是在嚴(yán)格的 條件下,將優(yōu)良 菌種直接接種在豆腐上,這樣可以避免其他菌種的 ,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。 2. 腐乳制作的實(shí)驗(yàn)流程: 讓豆腐長(zhǎng)出

8、 → → →密封腌制。 3.實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng) (1)在豆腐上長(zhǎng)出毛霉時(shí),溫度控制在 ,自然條件下毛霉的菌種來自空氣中的 。 (2)將長(zhǎng)滿毛霉的豆腐塊分層加鹽,加鹽量要隨著擺放層數(shù)的加高而 ,近瓶口的表層要 。加鹽的目的是使豆腐塊失水,利于 ,同時(shí)也能 的生長(zhǎng)。鹽的濃度過低, ;鹽的濃度過高, 。 (3)鹵湯中酒精

9、的含量應(yīng)控制在 左右,它能 微生物的生長(zhǎng),同時(shí)也與豆腐乳獨(dú)特的 形成有關(guān)。酒精含量過高, ;酒精含量過低, 。香辛料可以調(diào)制腐乳的風(fēng)味,同時(shí)也有 作用。 (4)瓶口密封時(shí),最好將瓶口 ,防止瓶口污染。 P6旁欄思考題 1.你能利用所學(xué)的生物學(xué)知識(shí),解釋豆腐長(zhǎng)白毛是怎么一回事? 豆腐上生長(zhǎng)的白毛是毛霉的白色菌絲。嚴(yán)格地說是直立菌絲,在豆腐中還有匍匐菌絲。 2.王致和為什么要撒許多鹽,將長(zhǎng)

10、毛的豆腐腌起來? 鹽能防止雜菌污染,避免豆腐腐敗。 3.你能總結(jié)出王致和做腐乳的方法嗎? 讓豆腐長(zhǎng)出毛霉→加鹽腌制→密封腌制。 P7旁欄思考題 1.我們平常吃的豆腐,哪種適合用來做腐乳? 含水量為70%左右的豆腐適于作腐乳。用含水量過高的豆腐制腐乳,不易成形。 2.吃腐乳時(shí),你會(huì)發(fā)現(xiàn)腐乳外部有一層致密的“皮”。這層“皮”是怎樣形成的呢?它對(duì)人體有害嗎?它的作用是什么? “皮”是前期發(fā)酵時(shí)在豆腐表面上生長(zhǎng)的菌絲(匍匐菌絲),它能形成腐乳的“體”,使腐乳成形?!捌ぁ睂?duì)人體無害。 P8練習(xí) 1. 腌制腐乳時(shí),為什么要隨豆腐層的加高而增加鹽的含量?為什么在接近瓶口的表面要

11、將鹽厚鋪一些? 越接近瓶口,雜菌污染的可能性越大,因此要隨著豆腐層的加高增加鹽的用量,在接近瓶口的表面,鹽要鋪厚一些,以有效防止雜菌污染。 2.怎樣用同樣的原料制作出不同風(fēng)味的腐乳?(可以不看) 在酒和料上作變動(dòng) 紅腐乳:又稱紅方,指在后期發(fā)酵的湯料中,配以著色劑紅曲,釀制而成的腐乳。 白腐乳:又稱白方,指在后期發(fā)酵過程中,不添加任何著色劑,湯料以黃酒、白酒、香料為主釀制而成的腐乳,在釀制過程中因添加不同的調(diào)味輔料,使其呈現(xiàn)不同的風(fēng)味特色,目前大致包括糟方、油方、霉香、醉方、辣方等品種。 青腐乳:又稱青方,俗稱“臭豆腐”,指在后期發(fā)酵過程中,以低度鹽水為湯料釀制而成的腐乳,具有特有

12、的氣味,表面呈青色。 醬腐乳:又稱醬方,指在后期發(fā)酵過程中,以醬曲(大豆醬曲、蠶豆醬曲、面醬曲等)為主要輔料釀制而成的腐乳。 課題3 制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量 1.乳酸菌代謝類型為 ,在 情況狂下,將葡萄糖分解為乳酸。在自然界中分布廣泛,在 、 、 、 內(nèi)都有分布。常見的乳酸菌有 和 兩種,其中 常用于生產(chǎn)酸奶。 2.亞硝酸鹽為 ,易溶于 ,在食品生產(chǎn)中用作 。一般不會(huì)危害人體健康,但當(dāng)人體攝入硝酸鹽總量達(dá) g

13、時(shí),會(huì)引起中毒;當(dāng)攝入總量達(dá)到 g時(shí),會(huì)引起死亡。在特定的條件下,如 、 和 的作用下,會(huì)轉(zhuǎn)變成致癌物質(zhì)——亞硝胺,亞硝胺對(duì)動(dòng)物有致畸和致突變作用。 3.泡菜制作大致流程:原料處理→ →裝壇→ →成品 (1)配制鹽水:清水和鹽的比例為 ,鹽水 后備用。 (2)裝壇:蔬菜裝至 時(shí)加入香辛料,裝至 時(shí)加鹽水,鹽水要 ,蓋好壇蓋。壇蓋邊沿水槽中 ,保證壇內(nèi)

14、 環(huán)境。 (3)腌制過程種要注意控制腌制的 、 和 。溫度過高、食鹽用量不足10%、 過短,容易造成 , 。 4.測(cè)亞硝酸鹽含量的原理是 。 將顯色反應(yīng)后的樣品與已知濃度的 進(jìn)行比較,可以大致 出泡菜中亞硝酸鹽的含量。 測(cè)定步驟:配定溶液→

15、 → 制備樣品處理液→ P9旁欄思考題: 為什么含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶? 酸奶的制作依靠的是乳酸菌的發(fā)酵作用??股啬軌驓⑺阑蛞种迫樗峋纳L(zhǎng),因此含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶。 P10旁欄思考題: 1.為什么日常生活中要多吃新鮮蔬菜,不宜多吃腌制蔬菜? 有些蔬菜,入小白菜和蘿卜等,含有豐富的硝酸鹽。當(dāng)這些蔬菜放置過久發(fā)生變質(zhì)(發(fā)黃、腐爛)或者煮熟后存放太久時(shí),蔬菜中的硝酸鹽會(huì)被微生物還原成亞硝酸鹽,危害人體健康。 2.為什么泡菜壇內(nèi)有時(shí)會(huì)長(zhǎng)一層白膜?你認(rèn)為這層白膜是怎么形成的? 形成白膜是由于產(chǎn)膜

16、酵母的繁殖。酵母菌是兼性厭氧微生物,泡菜發(fā)酵液營(yíng)養(yǎng)豐富,其表面氧氣含量也很豐富,適合酵母菌繁殖。 P12練習(xí): 2.你能總結(jié)果酒、果醋、腐乳、泡菜這幾種發(fā)酵食品在利用微生物的種類和制作原理方面的不同嗎?你能總結(jié)出傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的共同特點(diǎn)嗎? 果酒的制作主要利用的是酵母菌的酒精發(fā)酵, 果醋的制作利用的是醋酸菌將酒精轉(zhuǎn)變成醋酸的代謝, 腐乳的制作利用的主要是毛霉分泌的蛋白酶等酶類, 泡菜的制作利用的是乳酸菌的乳酸發(fā)酵。 傳統(tǒng)的發(fā)酵技術(shù)都巧妙的利用了天然菌種,都為特定的菌種提供了良好的生存條件,最終的發(fā)酵產(chǎn)物不是單一的組分,而是成分復(fù)雜的混合物。 專題二 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用 課題1

17、 微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng) 1.根據(jù)培養(yǎng)基的物理性質(zhì)可將培養(yǎng)基可以分為 和 。 2.培養(yǎng)基一般都含有 、 、 、 四類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),另外還需要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì) 、 以及 的要求。 3.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 。 4.消毒是指 滅菌是指

18、 5.日常生活中常用的消毒方法是 ,此外,人們也常使用化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒,如用 、 等。常用的滅菌方法有 、 、 ,此外,實(shí)驗(yàn)室里還用 或 進(jìn)行消毒。 6.制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的方法步驟是⑴ ,⑵ ,⑶ ,⑷ ,⑸ 。 7.微生物接種的方法中最常用的是

19、 和 。 平板劃線是指 。 稀釋涂布平板法指 。 8.菌種的保藏: (1)臨時(shí)保藏:將菌種接種到試管的 ,在合適的溫度下培養(yǎng), 長(zhǎng)成后,放入 冰箱中保藏,以后每3—6個(gè)月,轉(zhuǎn)移一次新的培養(yǎng)基。 缺點(diǎn)是:保存時(shí)間 ,菌種

20、容易被 或產(chǎn)生變異。 (2)長(zhǎng)期保存方法: 法,放在 冷凍箱中保存。 P15旁欄思考題: 無菌技術(shù)除了用來防止實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外,還有什么目的? 無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。 P16旁欄思考題: 請(qǐng)你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要,請(qǐng)選擇合適的方法。 (1) 培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿 (2) 玻棒、試管、燒瓶和吸管 (3) 實(shí)驗(yàn)操作者的雙手 (1)、(2)需要滅菌;(3)需要消毒。 P17倒平板操作的討論 1.培養(yǎng)基滅菌后,需要冷卻到50 ℃左右時(shí)

21、,才能用來倒平板。你用什么辦法來估計(jì)培養(yǎng)基的溫度? 可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶,感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時(shí),就可以進(jìn)行倒平板了。 2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰? 通過灼燒滅菌,防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。 3.平板冷凝后,為什么要將平板倒置? 平板冷凝后,皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基,造成污染。 4.在倒平板的過程中,如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位,這個(gè)平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎?為什么? 空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生,因此最好

22、不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。 P18平板劃線操作的討論 1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時(shí),仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么? 操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物;每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后,接種環(huán)上殘留的菌種,使下一次劃線時(shí),接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少,以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán),能及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。 2.在灼燒接種環(huán)之后,為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線? 以免接種環(huán)溫度太高,殺死菌種。

23、 3.在作第二次以及其后的劃線操作時(shí),為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線? 劃線后,線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少,每次從上一次劃線的末端開始,能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少,最終能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來的菌落。 P19涂布平板操作的討論 涂布平板的所有操作都應(yīng)在火焰附近進(jìn)行。結(jié)合平板劃線與系列稀釋的無菌操作要求,想一想,第2步應(yīng)如何進(jìn)行無菌操作? 應(yīng)從操作的各個(gè)細(xì)節(jié)保證“無菌”。例如,酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適、吸管頭不要接觸任何其他物體、吸管要在酒精燈火焰周圍;等等。 P20六、課題成果評(píng)價(jià) 1.培養(yǎng)基的制作是否合格 如果未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫1~2

24、d后無菌落生長(zhǎng),說明培養(yǎng)基的制備是成功的,否則需要重新制備。 2.接種操作是否符合無菌要求 如果培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落的顏色、形狀、大小基本一致,并符合大腸桿菌菌落的特點(diǎn),則說明接種操作是符合要求的;如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)了其他菌落,則說明接種過程中,無菌操作還未達(dá)到要求,需要分析原因,再次練習(xí)。 3.是否進(jìn)行了及時(shí)細(xì)致的觀察與記錄 培養(yǎng)12 h與24 h后的大腸桿菌菌落的大小會(huì)有明顯不同,及時(shí)觀察記錄的同學(xué)會(huì)發(fā)現(xiàn)這一點(diǎn),并能觀察到其他一些細(xì)微的變化。這一步的要求主要是培養(yǎng)學(xué)生良好的科學(xué)態(tài)度與習(xí)慣。 P20練習(xí) 1.提示:可以從微生物生長(zhǎng)需要哪些條件的角度來思考。例如,微生物的生長(zhǎng)需要水、空

25、氣、適宜的溫度,食品保存可以通過保持干燥、真空的條件,以及冷藏等方法來阻止微生物的生長(zhǎng)。 2.提示:可以從這三種培養(yǎng)技術(shù)的原理、操作步驟等方面分別進(jìn)行總結(jié)歸納。例如,這三種培養(yǎng)技術(shù)都需要為培養(yǎng)物提供充足的營(yíng)養(yǎng),但無土栽培技術(shù)的操作并不需要保證無菌的條件,而其他兩種技術(shù)都要求嚴(yán)格的無菌條件。 3.提示:這是一道開放性的問題,答案并不惟一,重點(diǎn)在于鼓勵(lì)學(xué)生積極參與,從不同的角度思考問題。例如,正是由于證明了微生物不是自發(fā)產(chǎn)生的,微生物學(xué)才可能發(fā)展成為一門獨(dú)立的學(xué)科;巴斯德實(shí)驗(yàn)中用到的加熱滅菌的方法導(dǎo)致了有效的滅菌方法的出現(xiàn),而這一滅菌原理也適用于食品的保存等。 課題2 土壤中分解尿素

26、的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù) 1.尿素只有被 分解成 之后,才能被植物吸收利用。選擇分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基特點(diǎn): 惟一氮源,按物理性質(zhì)歸類為 培養(yǎng)基。 2..PCR( )是一種在體外將 。此項(xiàng)技術(shù)的自動(dòng)化,要求使用耐高溫的DNA聚合酶。 3實(shí)驗(yàn)室中微生物的篩選應(yīng)用的原理是:人為提供有利于 生長(zhǎng)的條件(包括 等),同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。 4.選擇培養(yǎng)基是指

27、 。 5.常用來統(tǒng)計(jì)樣品中活菌數(shù)目的方法是 。即當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí),培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落,來源于樣品稀釋液中的 。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù),就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確,一般選擇菌落數(shù)在 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù),計(jì)數(shù)公式是 。利用稀釋涂布平板法成功統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的關(guān)鍵是 。另外, 也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。 6.一般來說,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比

28、活菌的實(shí)際數(shù)目 。這是因?yàn)? 。因此,統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用 而不是活菌數(shù)來表示。 7.設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)的主要目的是 ,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。對(duì)照實(shí)驗(yàn)是 。滿足該條件的稱為 ,未滿足該條件的稱為 。 8.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)包括的內(nèi)容有: 、 、 和 ,具體的實(shí)驗(yàn)步驟以及時(shí)間安排等的綜合考慮和安排。

29、9.不同種類的微生物,往往需要不同的培養(yǎng) 和培養(yǎng) 。在實(shí)驗(yàn)過程中,一般每隔24小時(shí)統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目,選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果,這樣可以 。 10.土壤有“ ”之稱,同其他生物環(huán)境相比,土壤中微生物 、 。 11.土壤中的微生物約 是細(xì)菌,細(xì)菌適宜在酸堿度接近 潮濕土壤中生長(zhǎng)。土壤中微生物的數(shù)量不

30、同,分離不同微生物采用的 的稀釋度不同。 12.一般來說,在一定的培養(yǎng)條件下,同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。這些特征包括菌落的 、 、 和 等方面。 13.在進(jìn)行多組實(shí)驗(yàn)過程中,應(yīng)注意做好標(biāo)記,其目的是 。 14.對(duì)所需的微生物進(jìn)行初步篩選,只是分離純化菌種的第一步,要對(duì)分離的菌種進(jìn)行一步的鑒定,還需要借助 的方法。 15.在細(xì)菌分解尿素的化學(xué)反應(yīng)中,細(xì)菌合成的 將尿素分解成了 。氨會(huì)

31、使培養(yǎng)基的堿性 ,PH 。因此,我們可以通過檢測(cè)培養(yǎng)基 變化來判斷該化學(xué)反應(yīng)是否發(fā)生?!≡谝? 為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入 指示劑。培養(yǎng)某種細(xì)菌后,如果PH升高,指示劑將變 ,說明該細(xì)菌能夠 。 P22旁欄思考題 1.想一想,如何從平板上的菌落數(shù)推測(cè)出每克樣品中的菌落數(shù)? 答:統(tǒng)計(jì)某一稀釋度下平板上的菌落數(shù),最好能統(tǒng)計(jì)3個(gè)平板,計(jì)算出平板菌落數(shù)的平均值,然后按課本旁欄的公式進(jìn)行計(jì)算。 P22 兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測(cè)定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù),在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)106的培養(yǎng)集中,得到以下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果:1.第一位同

32、學(xué)在該濃度下涂布了一個(gè)平板,統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為230;2.第二位同學(xué)在該濃度下涂布了三個(gè)平板…… 第一位同學(xué)只涂布了一個(gè)平板,沒有設(shè)置重復(fù)組,因此結(jié)果不具有說服力。第二位同學(xué)考慮到設(shè)置重復(fù)組的問題,涂布了3個(gè)平板,但是,其中1個(gè)平板的計(jì)數(shù)結(jié)果與另2個(gè)相差太遠(yuǎn),說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯(cuò)誤,因此,不能簡(jiǎn)單地將3個(gè)平板的計(jì)數(shù)值用來求平均值。 P22設(shè)置對(duì)照 A同學(xué)的結(jié)果與其他同學(xué)不同,可能的解釋有兩種。一是由于土樣不同,二是由于培養(yǎng)基污染或操作失誤。究竟是哪個(gè)原因,可以通過實(shí)驗(yàn)來證明。實(shí)驗(yàn)方案有兩種。一種方案是可以由其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn),如果結(jié)果與A同學(xué)一致,則證明A無誤;如果

33、結(jié)果不同,則證明A同學(xué)存在操作失誤或培養(yǎng)基的配制有問題。另一種方案是將A同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進(jìn)行培養(yǎng),作為空白對(duì)照,以證明培養(yǎng)基是否受到污染。通過這個(gè)事例可以看出,實(shí)驗(yàn)結(jié)果要有說服力,對(duì)照的設(shè)置是必不可少的。 P24旁欄思考題 為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度?測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量,選用的稀釋范圍相同嗎? 這是因?yàn)橥寥乐懈黝愇⑸锏臄?shù)量(單位:株/kg)是不同的,例如在干旱土壤中的上層樣本中:好氧及兼性厭氧細(xì)菌數(shù)約為2 185萬,放線菌數(shù)約為477萬,霉菌數(shù)約為23.1萬。因此,為獲得不同類型的微生物,就需要按不同的稀釋度進(jìn)行分離,

34、同時(shí)還應(yīng)當(dāng)有針對(duì)性地提供選擇培養(yǎng)的條件。 P25 結(jié)果分析與評(píng)價(jià) 1.培養(yǎng)物中是否有雜菌污染以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落 對(duì)照的培養(yǎng)皿在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長(zhǎng),說明培養(yǎng)基沒有被雜菌污染。牛肉膏培養(yǎng)基的菌落數(shù)目明顯大于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目,說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些菌落。 2.樣品的稀釋操作是否成功 如果得到了2個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)目在30~300的平板,則說明稀釋操作比較成功,并能夠進(jìn)行菌落的計(jì)數(shù)。 3.重復(fù)組的結(jié)果是否一致 如果學(xué)生選取的是同一種土樣,統(tǒng)計(jì)的結(jié)果應(yīng)該接近。如果結(jié)果相差太遠(yuǎn),教師需要引導(dǎo)學(xué)生一起分析產(chǎn)生差異的原因。 P26練習(xí) 2.提示:反芻動(dòng)物的瘤胃中含有大量的微

35、生物,其中也包括分解尿素的微生物。由于瘤胃中的微生物多為厭氧菌,接觸空氣后會(huì)死亡,因此分離其中能分解尿素的微生物除了需要準(zhǔn)備選擇培養(yǎng)基外,還應(yīng)參照厭氧菌的培養(yǎng)方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。 課題3 分解纖維素的微生物的分離 1.纖維素是 類物質(zhì), 是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物,此外,木材、作物秸稈等也富含纖維素。 2.纖維素酶是一種 酶,一般認(rèn)為它至少包括三種組分,即 、 和 ,前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖,第三種酶將纖維二糖分解成 。正是在這三種酶的協(xié)同作用下,纖維素最終被水解成葡萄糖,

36、為微生物的生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng),同樣,也可以為人類所利用。 3.篩選纖維素分解菌可以用 法,這種方法能夠通過 直接對(duì)微生物進(jìn)行篩選。 可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成 ,但并不和水解后的 和 發(fā)生這種反應(yīng)。纖維素分解菌能產(chǎn)生 分解纖維素,從而使菌落周圍形成 。 4.分離分解纖維素的微生物的實(shí)驗(yàn)流程圖如下: → →梯度稀釋→ → 。 5.為確定得到的菌是否是纖維素分解菌,還學(xué)進(jìn)

37、行 的實(shí)驗(yàn)。纖維素酶的發(fā)酵方法有 發(fā)酵和 發(fā)酵。測(cè)定方法一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的 進(jìn)行定量測(cè)定。 P28旁欄思考題 1.本實(shí)驗(yàn)的流程與課題2中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些異同? 本實(shí)驗(yàn)流程與課題2的流程的區(qū)別如下。課題2是將土樣制成的菌懸液直接涂布在以尿素為惟一氮源的選擇性培養(yǎng)基上,直接分離得到菌落。本課題通過選擇培養(yǎng),使纖維素分解菌得到增殖后,再將菌液涂布在選擇培養(yǎng)基上。其他步驟基本一致。 2.為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌? 由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系,在富含纖維素的

38、環(huán)境中,纖維素分解菌的含量相對(duì)提高,因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。 3.將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深? 將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對(duì)聚集,實(shí)際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約10 cm左右腐殖土壤中。 P29旁欄思考題 1.想一想,這兩種方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足?你打算選用哪一種方法?(兩種剛果紅染色法的比較) 方法一是傳統(tǒng)的方法,缺點(diǎn)是操作繁瑣,加入剛果紅溶液會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜;其優(yōu)點(diǎn)是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。 方法二的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便,不存在菌落混雜問題,缺點(diǎn)是由于纖維素和瓊

39、脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì),可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊,因?yàn)榕囵B(yǎng)基中纖維素占主要地位,因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。方法二的另一缺點(diǎn)是:有些微生物具有降解色素的能力,它們?cè)陂L(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)過程中會(huì)降解剛果紅形成明顯的透明圈,與纖維素分解菌不易區(qū)分。 2.為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物? 在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖,而那些不適應(yīng)這種營(yíng)養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制,因此可以起到“濃縮”的作用。 P29六、課題成果評(píng)價(jià) 1.培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落:對(duì)

40、照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長(zhǎng)則說明培養(yǎng)基制作合格。如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落,則說明可能獲得了分解纖維素的微生物。 2.分離的結(jié)果是否一致:由于在土壤中細(xì)菌的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌的數(shù)量,因此最容易分離得到的是細(xì)菌。但由于所取土樣的環(huán)境不同,學(xué)生也可能得到真菌和放線菌等不同的分離結(jié)果。 P30練習(xí) 2.答:流程圖表示如下。 土壤取樣→選擇培養(yǎng)(此步是否需要,應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定)→梯度稀釋→將菌懸液涂布到有特定選擇作用的培養(yǎng)基上→挑選單菌落→發(fā)酵培養(yǎng) 專題三 植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 課題1 菊花的組織培養(yǎng) 1.有某種生物全套 的任何一個(gè)

41、活細(xì)胞,都具有發(fā)育成 的能力,即每個(gè)生物細(xì)胞都具有 。但在生物體的生長(zhǎng)發(fā)育過程中并不表現(xiàn)出來,這是因?yàn)樵? 條件下,通過基因的 ,構(gòu)成不同組織和器官。 2. 植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用有:實(shí)現(xiàn)優(yōu)良品種的 ;培育 作物;制作 種子;培育作物 以及細(xì)胞產(chǎn)物的 等。 3. 細(xì)胞分化:個(gè)體發(fā)育中細(xì)胞在 上出現(xiàn) 差異的過程。 4. 愈傷組織是通過 形

42、成的,其細(xì)胞排列 ,高度 呈 狀態(tài)的 細(xì)胞。 5. 植物組織培養(yǎng)的過程可簡(jiǎn)單表示為: (脫分化)) ( ) 愈傷組織 組織 (生長(zhǎng)) 新個(gè)體 6.材料:植物的種類、材料的 和 等都會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。菊花組織培養(yǎng)一般選擇 作材料。 7. 營(yíng)養(yǎng):常用的培養(yǎng)基是 培養(yǎng)基,其中含有的大量元素是 ,微量元素是 ,有機(jī)物有甘氨酸、煙酸、肌

43、醇、維生素、蔗糖等。 8.激素:在培養(yǎng)基中需要添加 和 等植物激素,其 、 、 等都影響結(jié)果 9.環(huán)境條件:PH、 、 等環(huán)境條件。菊花組培所需PH為 ,溫度為 ,光照條件為 。 10. 配制各種母液:將各種成分按配方比例配制成的濃縮液。使用時(shí)根據(jù)母液的 ,計(jì)算用量,并加 稀釋。 11. 配制培養(yǎng)基:應(yīng)加入的物質(zhì)有瓊脂、 、大量元素、微量元素、有機(jī)物和植物激素的母液,并用 定容到 毫升。

44、在菊花組織培養(yǎng)中,可以不添加 ,原因是菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易。 12.滅菌:采取的滅菌方法是 。 13.發(fā)酵操作 13.1前期準(zhǔn)備:用 消毒工作臺(tái),點(diǎn)燃酒精燈。注意所有接種工作都必須在酒精燈旁進(jìn)行,器械使用前后都要用火焰灼燒 。 13.2接種操作:接種過程中插入外植體時(shí) 朝上,每個(gè)錐形瓶接種 個(gè)外植體。外植體接種與細(xì)菌接種相似之處是 。 13.3培養(yǎng)過程應(yīng)該放在 中進(jìn)行,并定

45、期進(jìn)行消毒,保持適宜的 和 。 13.4移栽前應(yīng)先打開培養(yǎng)瓶的 ,讓其在培養(yǎng)間生長(zhǎng)幾日,然后用流水清洗根部培養(yǎng)基。然后將幼苗移植到 等環(huán)境中生活一段時(shí)間,進(jìn)行壯苗。最后進(jìn)行露天栽培。 課題成果評(píng)價(jià) (一)對(duì)接種操作中污染情況的分析 接種3~4 d后,在接種操作中被雜菌污染的培養(yǎng)物會(huì)表現(xiàn)出被污染的現(xiàn)象。請(qǐng)學(xué)生適時(shí)統(tǒng)計(jì)污染率,分析接種操作是否符合無菌要求。 (二)是否完成了對(duì)植物組織的脫分化和再分化 觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果,看看是否培養(yǎng)出了愈傷組織,記錄多長(zhǎng)時(shí)間長(zhǎng)出愈傷組織。統(tǒng)計(jì)更換培養(yǎng)基

46、后愈傷組織進(jìn)一步分化成根和芽的比例和時(shí)間。 (三)是否進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)、對(duì)照與記錄 做好統(tǒng)計(jì)和對(duì)照,填好結(jié)果記錄表,培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)態(tài)度。從實(shí)驗(yàn)的第一步開始就要求學(xué)生做好實(shí)驗(yàn)記錄,可以讓學(xué)生分組配制不同培養(yǎng)基,如誘導(dǎo)愈傷或直接分化叢芽的培養(yǎng)基,然后做不同配方的比較。 (四)生根苗的移栽是否合格 生根苗移栽技術(shù)的關(guān)鍵是既要充分清洗根系表面的培養(yǎng)基,又不能傷及根系。一般使用無土栽培的辦法。培養(yǎng)基質(zhì)要提前消毒,可以向培養(yǎng)基質(zhì)噴灑質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%的高錳酸鉀,并用塑料薄膜覆蓋12 h。掀開塑料薄膜后24 h才能移栽。新移栽的組培苗要在溫室過渡幾天,等壯苗后再定植大田或進(jìn)行盆栽。學(xué)生可以在課后統(tǒng)計(jì)自己移栽的

47、成活率,看看移栽是否合格。 答案和提示 (一)旁欄思考題 1.你能說出各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎?同專題2中微生物培養(yǎng)基的配方相比,MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同? 答:微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無機(jī)鹽;蔗糖提供碳源,同時(shí)能夠維持細(xì)胞的滲透壓;甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營(yíng)養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同,MS培養(yǎng)基則需提供大量無機(jī)營(yíng)養(yǎng),無機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素兩大類。 2.你打算做幾組重復(fù)?你打算設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)嗎? 答:教師可以安排學(xué)生分組,做不同的材料或配方,最后分

48、別匯報(bào)成果。但每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù)。設(shè)置對(duì)照實(shí)驗(yàn)可以取用一個(gè)經(jīng)過滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶,與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng),用以說明培養(yǎng)基制作合格,沒有被雜菌污染。 (二)練習(xí) 1.答:植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差,對(duì)培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的生長(zhǎng),如一些細(xì)菌、真菌等的生長(zhǎng)。而培養(yǎng)物一旦受到微生物的污染,就會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)前功盡棄,因此要進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作。 2.答:外植體的生理狀態(tài)是成功進(jìn)行組織培養(yǎng)的重要條件之一。生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理狀況好,容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。 課題2 月季的花藥培養(yǎng) 1. 小孢子母細(xì)胞(2n)

49、( )時(shí)期(n) 單核( )期(n) 雙核期 ( )細(xì)胞核(n) ( )細(xì)胞核(n) ( )細(xì)胞(n) ( )細(xì)胞(n) ( )個(gè)精子(n) ( )分裂 ( )分裂 單核( )期(n) ( )分裂 2. 育被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷 、 和 等階段。花粉是由花粉母細(xì)胞經(jīng)過 而形成的,因此花粉是 。 3. 在正常情況下,一個(gè)小孢子母細(xì)胞可以產(chǎn)生 個(gè)精子;在一枚花藥中

50、可以產(chǎn)生 個(gè)花粉。 4. 產(chǎn)生花粉植物的兩種途徑 花藥中的花粉 花藥中的花粉 叢芽 叢芽 誘導(dǎo) 生根 移栽 脫分化 脫分化 ( ) ( ) ① ② 5. 誘導(dǎo)花粉植株能否成功及誘導(dǎo)成功率的高低,受多種因素影響,其中影主要因素是: 和 等。 6. 材料的選擇: ①從花藥來看,應(yīng)當(dāng)選擇(初花期、盛花期

51、、晚花期)的花藥; ②從花粉來看,應(yīng)當(dāng)選擇(四分體期、單核期、雙核期、萌發(fā)期)的花粉; ③從花蕾來看,應(yīng)當(dāng)選擇(完全未開放、略微開放、完全盛開)的花蕾。 7. 選擇花藥時(shí)一般通過 確定花粉發(fā)育時(shí)期,此時(shí)需要對(duì)花粉細(xì)胞核進(jìn)行染色,最常用的染色劑是 和 ,它們分別可以將細(xì)胞核染成 色和 色。 8. 在使用焙花青-鉻釩溶液時(shí),需要首先將花藥用 處理20min。該試劑的配制方法是將 按體積比為 的比例混合均勻。 9. 消毒后的花蕾,要在

52、條件下除去花萼、花瓣。剝?nèi)』ㄋ帟r(shí),一是注意不要損傷花藥,原因是 ;二是要徹底除去花絲,原因是 。 10. 剝?nèi)〉幕ㄋ幰⒖探臃N到 上。每個(gè)培養(yǎng)瓶接種 個(gè)花藥?;ㄋ幣囵B(yǎng)利用的培養(yǎng)基是 培養(yǎng)基,pH為 ,溫度為 ℃,幼苗形成之前(需要、不需要)光照。在花藥培養(yǎng)基中,用量最高的激素是 ;在誘導(dǎo)叢芽或胚狀體培養(yǎng)基中,用量最高的激素是 ;在誘導(dǎo)生根的培養(yǎng)基中,用量最高的激素是

53、 。 11. 培養(yǎng)20-30d后,花藥開裂,長(zhǎng)出 或釋放出胚狀體。前者還要轉(zhuǎn)移到 上進(jìn)行分化培養(yǎng)成再生植株;后者要盡快 并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上。通過愈傷組織形成的植株,常常會(huì)出現(xiàn) 的變化,因而需要鑒定和篩選。 課題成果評(píng)價(jià) (一)選材是否恰當(dāng) 選材是否成功是花藥培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。學(xué)生應(yīng)學(xué)會(huì)通過顯微鏡觀察處于適宜發(fā)育期的花粉。 (二)無菌技術(shù)是否過關(guān) 如果出現(xiàn)了污染現(xiàn)象,說明某些操作步驟,如培養(yǎng)基滅菌、花蕾消毒或接種等有問題。 (三)接種是否成功 如果接種的花藥長(zhǎng)出愈傷組織或釋放出胚狀體,花藥培養(yǎng)

54、的第一步就成功了。要適時(shí)轉(zhuǎn)換培養(yǎng)基,以便愈傷組織或胚狀體進(jìn)一步分化成再生植株。 答案和提示 (一)旁欄思考題 為什么花瓣松動(dòng)會(huì)給材料的消毒帶來困難? 答:花瓣松動(dòng)后,微生物就可能侵入到花藥,給材料的消毒帶來困難。 (二)練習(xí) 1.答:F2代紫色甜玉米的基因型組成可能為Aasusu或AAsusu。如果運(yùn)用常規(guī)育種方法,將F2代中的紫色甜玉米與白色甜玉米(aasusu)進(jìn)行測(cè)交,可以選擇出基因型為AAsusu純種紫色甜玉米。但這種方法比較繁瑣,耗時(shí)也較長(zhǎng),需要至少三年的選種和育種時(shí)間。如果利用花藥培養(yǎng)的技術(shù),在F1代產(chǎn)生的花粉中就可能有Asu的組合,再將花粉植株進(jìn)行染色體加倍,就可以直

55、接得到紫色甜玉米的純合體(AAsusu)。這種方法可以大大縮短育種周期。 2.答:植物組織培養(yǎng)技術(shù)與花藥培養(yǎng)技術(shù)的相同之處是:培養(yǎng)基配制方法、無菌技術(shù)及接種操作等基本相同。兩者的不同之處在于:花藥培養(yǎng)的選材非常重要,需事先摸索時(shí)期適宜的花蕾;花藥裂開后釋放出的愈傷組織或胚狀體也要及時(shí)更換培養(yǎng)基;花藥培養(yǎng)對(duì)培養(yǎng)基配方的要求更為嚴(yán)格。這些都使花藥培養(yǎng)的難度大為增加。 原理:細(xì)胞的全能性 概念: 基礎(chǔ): 條件: 植物組織培養(yǎng)的基本過程: 外植體 愈傷組織 胚狀體 幼苗 脫分化 再分化 影響植物組織培養(yǎng)的因素: 外植體的選擇 營(yíng)養(yǎng)、環(huán)境等 植

56、物激素的用法 溫度、pH、光照等 實(shí)驗(yàn)操作: 制備MS培養(yǎng)基 外植體消毒 培養(yǎng) 接種 移栽 栽培 植物組織培養(yǎng) 菊花的組織培養(yǎng) 月季的花藥培養(yǎng) 被子植物花粉的發(fā)育: 花粉母細(xì)胞→減數(shù)分裂→小孢子母細(xì)胞→四分體時(shí)期→單核期→雙核期→精子 產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑: 花藥中的花粉 花藥中的花粉 胚狀體 叢芽 叢芽 愈傷組織 誘導(dǎo) 生根 移栽 脫分化 脫分化 分化 再分化 影響花藥培養(yǎng)的因素: 主要因素:材料的選擇與培養(yǎng)基的組成 重要因素:選擇

57、合適的花粉發(fā)育時(shí)期 影響因素:親本植株的生長(zhǎng)條件、低溫處理和接種密度等 實(shí)驗(yàn)操作: 材料的消毒: 材料的選?。捍_定花粉發(fā)育時(shí)期的方法 接種和培養(yǎng): 鑒定和篩選: 專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) (一)DNA的粗提取與鑒定 1. 實(shí)驗(yàn)原理 提取生物大分子的基本思路是______________________________。對(duì)于DNA的粗提取而言,就是要利用____與____、_____等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,提取DNA,去除其他成分。 (1)

58、DNA的溶解性 ①DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的_____溶液中溶解度不同,利用這一特點(diǎn),選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使____充分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達(dá)到分離目的。 ②DNA不溶于______溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理,可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步的分離。 (2)DNA對(duì)酶、高溫和洗滌劑的耐受性 蛋白酶能水解_____,但是對(duì)_____沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受60—80oC的高溫,而DNA在______才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解____,但對(duì)DNA沒有影響。 (3)DNA的鑒定 在____條件下,DNA遇___會(huì)被染成__色,因此二苯胺可以作

59、為鑒定DNA的試劑。 2. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) (1)實(shí)驗(yàn)材料的選取 凡是含有____的生物材料都可以考慮,但是使用________的生物組織,成功的可能性更大。 (2)破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液 破碎動(dòng)物細(xì)胞:如在雞血細(xì)胞液中加入一定量的____,同時(shí)用_____攪拌,過濾后收集濾液即可。破碎植物細(xì)胞(如洋蔥),需在切碎的洋蔥中加入一定的___和_____,進(jìn)行充分的攪拌和研磨,過濾后收集研磨液。 ①加入蒸餾水作用:蒸餾水對(duì)于雞血細(xì)胞來說是一種____液體,使血細(xì)胞_____,再加上攪拌的機(jī)械作用,加速了雞血細(xì)胞的破裂(細(xì)胞膜和核膜的破裂),從而釋放出DNA。 ②加入洗滌劑的作用是:洗

60、滌劑是一些離子去污劑,能溶解_____,有利于____的釋放;加入食鹽的作用是:溶解_____。 ③如果研磨不充分,會(huì)使細(xì)胞核內(nèi)的_____釋放不完全,提取的DNA量變_____,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,導(dǎo)致看不到__________、用二苯胺鑒定不顯示____等。 (3)去除濾液中的雜質(zhì) ①方案一:利用DNA在不同濃度NaCl溶液中____不同,通過控制________去除雜質(zhì)。 ②方案二:根據(jù)酶的專一性,利用木瓜蛋白酶分解______,而不分解______; ③方案三:利用DNA和蛋白質(zhì)對(duì)高溫耐受性的不同,從而使____變性,與___分離。 (4)DNA的析出與鑒定 ①DNA的析出:將

61、處理后的溶液過濾,加入與濾液體積相等、冷卻的________,靜置2~3min,溶液中會(huì)出現(xiàn)________,這就是粗提取的DNA。 ②DNA的鑒定: 將白色絲狀物用_____的NaCl溶液再溶解,加入4ml的_____,混合均勻后,在______條件下,溶液被染成____色。 3.注意事項(xiàng) (1)以血液為實(shí)驗(yàn)材料時(shí),需要加入檸檬酸鈉防止________ (2)要提取洋蔥等的DNA時(shí),加入洗滌劑后,動(dòng)作要_____,否則容易產(chǎn)生大量的泡沫,不利于后續(xù)步驟地操作。 (3)加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí),動(dòng)作要____,以免_________,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。 (4)二苯胺試

62、劑要________,否則會(huì)影響鑒定的效果。 (5)當(dāng)NaCl溶液濃度低于0.14mol/L時(shí),隨濃度的升高,DNA的溶解度_______;當(dāng)NaCl溶液濃度高于0.14mol/L時(shí),隨濃度升高,DNA的溶解度________。 專題六 植物有效成分的提取 課題1 植物芳香油的提取 【導(dǎo)學(xué)誘思】 1.植物芳香油的來源 天然香料的主要來源是 和 。動(dòng)物香料主要來源于麝、靈貓、海貍和抹香鯨等,植物香料的來源更為廣泛。植物芳香油可以從大約50多個(gè)科的植物中提取。例如,工業(yè)生產(chǎn)中,玫瑰花用于提取 ,樟樹樹干用于提取 。提取出的植物芳香油

63、具有很強(qiáng)的 ,其組成也 ,主要包括 及其 思考:你能說出一些用于提取某些植物芳香油的器官嗎?并分別可提取哪種芳香油? 2.植物芳香油的提取方法 植物芳香油的提取方法有 、 和 等。具體采用那種方法要根據(jù)植物原料的特點(diǎn)來決定。 是植物芳香油提取的常用方法,它的原理是 。根據(jù)蒸餾過程中 的位置,可以將水蒸氣蒸餾法劃分為 、 和 。其中,水中蒸餾的方法對(duì)于有些原料不適用,如柑橘和檸檬。這

64、是因?yàn)? 等問題。因此,柑橘、檸檬芳香油的制備通常使用 法。 植物芳香油不僅 ,而且易溶于 ,如石油醚、酒精、乙醚和戊烷等。不適于用水蒸氣蒸餾的原料,可以考慮使用 法。萃取法是將 的方法。芳香油溶解于有機(jī)溶劑后,只需蒸發(fā)出有機(jī)溶劑,就可以獲得純凈的 了。但是,用于萃取的有機(jī)溶劑必須 , ,否則會(huì)影響芳香油的質(zhì)量。 3、玫瑰精油的提取 玫瑰精油是制作 的主要成分,能使人產(chǎn)生愉悅感。由于玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)

65、 ,難溶于 ,易溶于 ,能隨 一同蒸餾, 通常采用 法中的 法。 提取玫瑰精油的實(shí)驗(yàn)流程 、 、 、 、 、 。 思考:在提取過程中,如何對(duì)乳濁液的處理和玫瑰液的回收? 4、橘皮精油的提取 從橘皮中提取的 ,主要成分為 ,具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。橘皮精油主要儲(chǔ)藏在 部分,由于橘皮精油的有效成分在用水蒸氣蒸餾時(shí)會(huì)發(fā)生部分水解,使用水中蒸餾法又會(huì)

66、產(chǎn)生原料焦糊的問題,所以一般采用 法。 具體的流程是 、 、 、 、 、 、 。 實(shí)驗(yàn)案例 案例一 玫瑰精油的提取 5月上、中旬是玫瑰的盛開期,最好是選用當(dāng)天采摘的鮮玫瑰花。將花瓣用清水沖洗,去掉上面的灰塵等雜質(zhì),瀝干水分。由于玫瑰精油化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定,從玫瑰花中提取玫瑰精油可采取水中蒸餾法。本實(shí)驗(yàn)的具體操作步驟如下。 1.稱取50 g玫瑰花瓣,放入500 mL的圓底燒瓶中,加入200 mL蒸餾水。按教科書圖6-2所示安裝蒸餾裝置。蒸餾裝置包括:鐵架臺(tái)兩個(gè)、酒精燈、石棉網(wǎng)、蒸餾瓶、橡膠塞、蒸餾頭、溫度計(jì)、直型冷凝管、接液管、錐形瓶,以及連接進(jìn)水口和出水口的橡皮管。所有儀器必須事先干燥,保證無水。整套蒸餾裝置可分為左、中、右三部分,其中左邊的部分通過加熱進(jìn)行蒸餾,中部將蒸餾物冷凝,右邊的部分用來接收。安裝儀器一般都按照自下而上、從左到右的順序。拆卸儀器的順序與安裝時(shí)相反。具體安裝順序和方法如下。 (1)固定熱源──酒精燈。 (2)固定蒸餾瓶,使其離熱源的距離如

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