微生物學化膿性細菌PPT課件

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1,微生物學各論,三性兩法生物學性狀 微生物學檢查法致病性免疫性 防治法,,,2,第十四章 化膿性細菌,,3,化膿性細菌：一類能夠感染人體并引起化膿性炎癥的細菌。常引起創(chuàng)傷感染和醫(yī)院內(nèi)感染。 根據(jù)革蘭染色性的不同可分成 G+菌：葡萄球菌、鏈球菌、肺炎鏈球菌等 G-菌：腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、銅綠假單胞菌等。,,4,第一節(jié) 葡萄球菌屬 (Staphylococcus),對人類致病的主要是金黃色葡萄球菌（S.aureus）。,5,分布廣泛，是最常見的化膿性球菌 醫(yī)院內(nèi)交叉感染的重要傳染源 所致疾病 化膿性炎癥 食物中毒 燙傷樣皮膚綜合征 毒性休克綜合征 耐藥率高,6,1、形態(tài)與染色 球形或橢圓形，平均直徑1μm，典型排列呈葡萄串狀； 無鞭毛，無芽胞，體外培養(yǎng)時一般不形成莢膜； 革蘭染色陽性。 衰老、死亡或被中性粒細胞吞噬后易G－。,一、生物學性狀,7,膿標本革蘭染色鏡檢,8,2、培養(yǎng)特性,營養(yǎng)要求不高，耐鹽，最適生長溫度為37℃，最適pH為7.4。 在普通瓊脂平板上孵育24~48h后，形成S型（光滑）菌落。 可產(chǎn)生脂溶性色素，菌落呈現(xiàn)金黃色、白色、檸檬色不同的顏色。 血瓊脂平板上，致病性葡萄球菌形成明顯的全透明溶血環(huán)（?溶血）。,9,三種葡萄球菌培養(yǎng),瓊脂培養(yǎng)基,金黃色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,腐生葡萄球菌,金黃色色素,白色色素,檸檬或白色色素,致病力強,條件致病菌,一般不致病,,10,金黃色葡萄球菌—金黃色菌落,11,金黃色葡萄球菌血平板,,12,3、生化反應,觸酶陽性；可與鏈球菌區(qū)別 多數(shù)菌株能分解葡萄糖、麥芽糖和蔗糖； 致病株能分解甘露醇。,13,4、抗 原 結(jié) 構,14,葡萄球菌A蛋白(staphylococcus A protein ，SPA)是葡萄球菌細胞壁的一種表面蛋白，可與人類免疫球蛋白IgG的Fc段非特異性結(jié)合，而IgG分子的Fab段仍能同相應抗原分子特異性結(jié)合，介導完成協(xié)同凝集試驗。,15,意義：,I. 含SPA的葡萄球菌可作為載體，結(jié)合特異性抗體后，開展簡易、快速的協(xié)同凝集試驗，檢測多種微生物抗原。,16,,II. SPA 與IgG結(jié)合后的復合物具有抗吞噬、促細胞分裂、引起超敏反應、損傷血小板等多種生物學活性。,17,莢膜：體內(nèi)的大多數(shù)金黃色葡萄球菌有莢膜，有粘附作用，與細菌侵襲力有關。 多糖抗原：具有群特異性，存在于細胞壁。,18,5、抵抗力,葡萄球菌在無芽胞菌中抵抗力最強。60℃ 1h或80℃30分鐘才被殺死。 對堿性染料敏感，龍膽紫可抑制其生長。 對許多抗生素敏感，但易產(chǎn)生耐藥性。近年來出現(xiàn)的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）已成為醫(yī)院感染最常見的致病菌。,19,根據(jù)色素與生化反應根據(jù)噬菌體：分為5個噬菌體群和26個噬菌體型。,,金黃色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,腐生葡萄球菌,6、分類,20,二、致病性與免疫性,,致病物質(zhì)所致疾病,21,（一）致病物質(zhì),毒素細胞毒素（?、?、?、?、殺白細胞素）、表皮剝脫毒素、毒性休克綜合征毒素-1、腸毒素等。 酶凝固酶、纖維蛋白溶酶、耐熱核酸酶、透明質(zhì)酸酶、脂酶等。 其他粘附素、莢膜、胞壁肽聚糖等。,22,凝固酶（coagulase）,能使含有枸櫞酸鈉或肝素抗凝劑的人或兔血漿發(fā)生凝固的酶類物質(zhì)。 作用： 抗吞噬作用（纖維蛋白沉積細菌表面） 保護病菌不受血清中殺菌物質(zhì)的破壞 使感染易于局限化和形成血栓 意義：鑒別葡萄球菌有無致病性的重要指標。,23,葡萄球菌溶素（膜損傷毒素）： 損傷細胞膜的毒素，主要是?溶素。 ?溶素對多種哺乳動物RBC有溶血作用。對白細胞、血小板、肝細胞、成纖維細胞、血管平滑肌細胞等均有損傷作用。 ?溶素是一種外毒素，可制成類毒素。 殺白細胞素：攻擊中性粒細胞和巨噬細胞，能抗吞噬和增強病菌的侵襲力。,24,腸毒素（enterotoxin）,約1/3臨床分離的金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生腸毒素。 耐熱的外毒素 引起急性胃腸炎即食物中毒。 作用機制：到達中樞神經(jīng)系統(tǒng)后刺激嘔吐中樞而導致以嘔吐為主要癥狀的食物中毒。,25,表皮剝脫毒素（exfoliatin）,蛋白質(zhì)外毒素，使表皮和真皮脫離。 可引起燙傷樣皮膚綜合征（staphylococcal scalded skin syndrome, SSSS），又稱剝脫性皮炎，多見于新生兒、幼兒和免疫功能低下的成人。,26,毒性休克綜合征毒素-1 （ TSST-1）,TSST-1可引起機體發(fā)熱，增加對毒素的敏感性； 可引起機體多個器官系統(tǒng)的功能紊亂或毒性休克綜合征（TSS）。,27,其他,耐熱核酸酶（heat-stable nuclease） 致病性葡萄球菌能產(chǎn)生該酶。耐熱，經(jīng)100℃15min或60℃ 2h不被破壞；能較強的降解DNA和RNA。耐熱核酸酶可作為測定葡萄球菌有無致病性的重要指標之一。,28,（二）所致疾病,1、化膿性感染: 化膿性炎癥大多由致病性較強的金葡菌引起。 （1）局部感染：癤、癰、毛囊炎、甲溝炎、蜂窩組織炎、膿胸、傷口化膿 （2）全身感染：敗血癥、膿毒血癥特點：膿液稠厚，不易擴散,29,化膿性感染,癤,癰,:,30,化膿性感染,31,2、毒素性疾病食物中毒由葡萄球菌腸毒素引起。為毒素性食物中毒，1～6h出現(xiàn)癥狀，以嘔吐為主要癥狀，大多于1～2d內(nèi)恢復。,32,,假膜性腸炎是一種菌群失調(diào)性腸炎。主要表現(xiàn)為腹瀉。病理特點是腸粘膜被一層炎性假膜覆蓋。現(xiàn)認為主要由艱難梭菌所致，金黃色葡萄球菌僅為伴隨菌。,33,,燙傷樣皮膚綜合征由表皮剝脫毒素引起，導致表皮上層脫落。,34,,,,毒性休克綜合征由毒性休克綜合征毒素-1引起，主要表現(xiàn)為急性高熱、低血壓、腥紅熱樣皮疹伴脫屑。嚴重時出現(xiàn)休克。,35,（三）免疫性,人類對葡萄球菌有一定的天然免疫力。 患病后，能獲得一定的免疫力，但不強。,36,幼貓試驗,三、微生物學檢查法,標本,膿汁、血液、腦脊液、剩余食物、嘔吐物等,分離培養(yǎng) 與鑒定,觸酶 血漿凝固酶 發(fā)酵甘露醇 耐熱核酸酶,直接涂片鏡檢,,革蘭陽性葡萄球菌,,,生長現(xiàn)象,,色素、溶血等,,生化反應,,毒素檢查,,,,37,致病性葡萄球菌的主要鑒別依據(jù),金黃色色素 ?溶血 凝固酶陽性 耐熱核酸酶陽性 分解甘露醇,38,,四、防治原則,,,防,,,注意 消毒隔離,注意 個人衛(wèi)生,,,防止 醫(yī)源性感染,防止 耐藥性產(chǎn)生,,,治,,,抗菌素 藥敏試驗,自身菌苗療法,39,第二節(jié) 鏈球菌屬 （Streptococcus）,對人類致病的主要是A群鏈球菌和肺炎鏈球菌。,40,1、形態(tài)與染色 球形或橢圓形，呈鏈狀排列。 無芽胞，無鞭毛。培養(yǎng)早期（2~4h）形成透明質(zhì)酸的莢膜。 細胞壁外有菌毛樣結(jié)構，含有型特異性M蛋白。 革蘭染色陽性。,一、生物學性狀,41,42,2、培養(yǎng)特性,營養(yǎng)要求較高，需補充血液、血清、葡萄糖等。 在血清肉湯中易形成長鏈，管底呈絮狀沉淀。 在血瓊脂平板上形成灰白色半透明、表面光滑、邊緣整齊的菌落，不同菌株溶血不一。,43,3、生化反應,分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。 觸酶陰性。 鏈球菌一般不分解菊糖，不被膽汁溶解，這兩特性可用來鑒別甲型溶血性鏈球菌和肺炎鏈球菌。,44,4、抗原結(jié)構,蛋白質(zhì)抗原：或稱表面抗原。具有型特異性。A群鏈球菌有M、T、R和S不同性質(zhì)的蛋白質(zhì)抗原，與致病性有關的是M抗原。 多糖抗原：或稱C抗原。是群特異性抗原，是細胞壁的多糖組分。 核蛋白抗原：或稱P抗原。無特異性。,45,5、分類,根據(jù)溶血現(xiàn)象分類 根據(jù)抗原結(jié)構的分類,46,根據(jù)溶血現(xiàn)象分類,甲型溶血性鏈球菌：草綠色溶血環(huán)，稱甲型溶血或?溶血，?溶血環(huán)中的紅細胞并未完全溶解。多為條件致病菌。 乙型溶血性鏈球菌：完全透明溶血環(huán)，稱乙型溶血或?溶血，?溶血環(huán)中的紅細胞完全溶解，致病力強。 丙型鏈球菌：無溶血環(huán)，又稱不溶血性鏈球菌。一般不致病。,47,,48,根據(jù)抗原結(jié)構的分類,按多糖抗原，可分成20群。對人致病的鏈球菌菌株，90%左右屬A群。 A群根據(jù)其M抗原不同，可分為100個型。,49,6、抵抗力,抵抗力比較弱。 對常用消毒劑敏感。 對青霉素、紅霉素，四環(huán)素和磺胺藥都很敏感。青霉素是治療首選藥物，極少發(fā)現(xiàn)有耐藥菌株。,50,二、致病性與免疫性,51,（一）致病物質(zhì),鏈球菌溶素（streptolysin）致熱外毒素（pyrogenic exotoxin） 透明質(zhì)酸酶,脂磷壁酸 M蛋白 鏈激酶（streptokinase; SK） 鏈道酶（streptodornase; SD）,52,1、毒素,致熱外毒素（紅疹毒素／猩紅熱毒素） 是人類猩紅熱的主要毒性物質(zhì)。 由A群鏈球菌溶原菌菌株產(chǎn)生。,53,根據(jù)對氧的穩(wěn)定性可分為： SLO (鏈球菌溶素O)： 對O2敏感，氧化后即失去溶血活性。 抗原性強，可刺激機體產(chǎn)生SLO抗體（即抗“O”）， 常用于風濕熱活動性及腎小球腎炎的輔助診斷。（1:400） SLS (鏈球菌溶素S)： 對O2穩(wěn)定 破壞紅細胞 無免疫原性，不產(chǎn)生抗體。,鏈球菌溶素:,54,2、侵襲性酶,透明質(zhì)酸酶 又名擴散因子 能分解細胞間質(zhì)的透明質(zhì)酸，使病菌易在組織中擴散。,55,鏈激酶（streptokinase; SK）,能使血液中纖維蛋白酶原變成纖維蛋白酶，可溶解血塊或阻止血漿凝固，有利于病菌在組織中擴散。,鏈道酶（streptodornase; SD）,亦稱鏈球菌DNA酶。能降解膿液中具有高度粘稠性的DNA，使膿液稀薄，促進病菌擴散。,56,3、細胞壁成分,脂磷壁酸（LTA）圍繞在M蛋白外層，與M蛋白共同組成鏈球菌的菌毛樣結(jié)構。 與人類多種細胞膜上的受體結(jié)合，使細菌能定植在皮膚和粘膜表面。 M蛋白,有抗吞噬和抵抗吞噬細胞內(nèi)的殺菌作用 與某些超敏反應疾病有關,57,58,（二）所致疾病,A群鏈球菌為主，占90% 化膿性（淋巴管炎、淋巴結(jié)炎、扁桃體炎、咽炎、中耳炎等） 中毒性 猩紅熱 超敏反應性 風濕熱 急性腎小球腎炎,59,猩紅熱皮疹,小兒猩紅熱,60,61,（三）免疫性,可獲得對同型鏈球菌的特異性免疫力。 但因其型別多，各型間無交叉免疫力，故?？煞磸透腥尽?患猩紅熱后能建立牢固的同型抗毒素免疫。,62,三、微生物學檢查法,標本：膿液、咽拭子 直接涂片鏡檢 分離培養(yǎng)與鑒定接種在血瓊脂平板 如有?溶血菌落，應與葡萄球菌區(qū)別 ?溶血菌落，要和肺炎鏈球菌鑒別,63,血清學診斷,抗鏈球菌溶血素O試驗（antistreptolysin O test, ASO test）SLO+RBC 溶血SLO+患者血清+RBC 不溶血,,,結(jié)果：效價大于400單位 意義：風濕熱及其活動性的輔助診斷,64,四、防治原則,減少傳染源 注意消毒 治療患者以青霉素G為首選藥物，須治療徹底，防止超敏反應性疾病的發(fā)生。,65,第三節(jié) 肺炎鏈球菌 （S.pneumoniae）,,66,G+雙球菌，呈矛尖狀 培養(yǎng)：營養(yǎng)要求高。在血平板上的菌落細小、圓形略扁、灰白色半透明，菌落周圍出現(xiàn)草綠色溶血環(huán)，培養(yǎng)時間 48小時，菌落呈臍狀 生化反應：與甲型鏈球菌的鑒別－－菊糖發(fā)酵試驗、膽汁溶菌試驗,一、生物學性狀,67,肺炎球菌,68,肺炎鏈球菌菌落---扁平狀,69,肺炎鏈球菌落---臍狀,70,二、致病性,致病物質(zhì) 莢膜 肺炎鏈球菌溶素O 脂磷壁酸 神經(jīng)氨酸酶 所致疾病 大葉性肺炎 化膿性中耳炎、胸膜炎、膿胸、腦膜炎或敗血癥,71,三、微生物學檢查法,標本：取痰液、膿汁、血液或腦脊液等 直接涂片鏡檢 分離培養(yǎng)與鑒定：（與甲型溶血性鏈球菌鑒別） 膽汁溶菌試驗 Optochin試驗 莢膜腫脹試驗 動物試驗：少量具有毒力的肺炎鏈球菌注入小鼠腹腔內(nèi)，一般24h內(nèi)死亡。,72,右側(cè)：肺炎鏈球菌（澄清、透明） 左側(cè)：甲型溶血性鏈球菌（渾濁）,膽汁溶菌試驗,73,四、防治原則,莢膜多糖多價疫苗 治療前作常規(guī)藥物敏感試驗,74,第四節(jié) 奈瑟菌屬 （Neisseria）,,75,概述,革蘭陰性雙球菌。無鞭毛。無芽胞。有莢膜和菌毛。 種類 腦膜炎奈瑟菌（N.meningitidis） 淋病奈瑟菌（N. gonorrhoeae） 干燥奈瑟菌（N. sicca）、淺黃奈瑟菌（N. subflava）、金黃奈瑟菌（N. flavescens）、粘膜奈瑟菌（N. mucosa）等,76,一、腦膜炎奈瑟菌 （meningococcus）,,77,（一）生物學性狀,形態(tài)與染色：腎形或豆形革蘭陰性雙球菌，新分離菌株大多有莢膜和菌毛。 培養(yǎng)特性：營養(yǎng)要求較高，常用巧克力（色）培養(yǎng)基。專性需氧，5% CO2 條件下生長更佳。菌落為圓形光滑似露滴狀。血平板上不溶血。 抵抗力：很弱。對干燥、熱力、消毒劑等均敏感。,78,腦膜炎雙球菌,79,A B,A.腦膜炎奈瑟菌在血瓊脂平板上的菌落特征(18-24h) B.腦膜炎奈瑟菌在巧克力瓊脂平板上的菌落特征(18-24h),80,（二）致病性,致病物質(zhì) 侵襲力：莢膜和菌毛 毒素：內(nèi)毒素，是腦膜炎奈瑟菌的主要致病物質(zhì)。 所致疾病 流行性腦脊髓膜炎（簡稱流腦）主要經(jīng)飛沫傳播：鼻咽部炎癥-敗血癥-腦膜炎,81,標本,分離培養(yǎng)與鑒定,腦脊液、血液、出血點滲出液、鼻咽拭子 保暖、保濕、立即送檢，培養(yǎng)基預溫。 最好床邊接種。,直接涂片鏡檢,中性粒細胞內(nèi)、外有革蘭陰性雙球菌，可作出初步診斷。,巧克力（色）培養(yǎng)基，5% CO2氣體。 生化反應和玻片凝集試驗鑒定。,快速診斷,對流免疫電泳，SPA協(xié)同凝集試驗,（三）微生物學檢查法,82,（四）防治原則,流腦莢膜多糖疫苗（A+C）進行特異性預防。 注意隔離治療流腦患者，控制傳染源。 流行期間兒童可口服磺胺藥物等預防。,83,二、淋病奈瑟菌 （gonococcus）,,84,（一）生物學性狀,形態(tài)與染色：革蘭陰性雙球菌，似一對咖啡豆。無芽胞。無鞭毛。有莢膜和菌毛。 培養(yǎng)特性：專性需氧，初次分離培養(yǎng)時需供給5% CO2。營養(yǎng)要求高，巧克力（色）血瓊脂平板是適宜培養(yǎng)基。 抵抗力：熱、冷、干燥和消毒劑極敏感，1%石炭酸 3 min或1:4000硝酸銀2 min即死亡。,85,Neisseria gonorrhoeae Gram stain of pure culture,Neisseria gonorrhoeae Gram stain of a pustular exudate,Neisseria gonorrhoeae,淋病奈瑟菌,86,致病物質(zhì)菌毛：粘附作用；抵抗吞噬。 外膜蛋白Ⅱ：有助于粘附。 IgA蛋白酶：能破壞黏膜表面sIgA。 內(nèi)毒素：損害人體黏膜的重要因素。,87,人類是淋病奈瑟菌的唯一宿主。 主要通過性接觸引起泌尿道和生殖系統(tǒng)炎癥。,,,淋病,新生兒 淋菌性結(jié)膜炎,新生兒由產(chǎn)道感染,,所致疾病,,88,,（三）微生物學檢查法,標本,用無菌棉拭沾取,直接涂片鏡檢,在中性粒細胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)有革蘭陰性雙球菌時，有診斷價值,分離培養(yǎng)與鑒定,標本采集后應注意保暖保濕，立即送檢接種,泌尿生殖道膿性分泌物 子宮頸口表面分泌物,巧克力色平板，5~10% CO2氣體,89,（四）防治原則,,防,開展防治性病的知識教育,防止不正當?shù)膬尚躁P系,,治,新生兒1%硝酸銀滴眼。,,,,抗生素。參考體外藥敏試驗。 對青霉素、頭孢胺噻肟鈉、環(huán)丙沙星、壯觀霉素等多種抗生素敏感，近年報告耐藥菌株增多。,,90,Purulent conjunctivitisOphthalmia neonatorum Infection in newborns during vaginal delivery,91,第五節(jié) 假單胞菌屬 Pseudomonas,,92,,一類G-桿菌，種類繁多，其中銅綠假單胞菌是一種常見的條件致病菌，也是院內(nèi)感染常見菌。 因在生長過程中產(chǎn)生綠色水溶性色素，感染后的膿汁或敷料上出現(xiàn)綠色，故俗稱綠膿桿菌。,93,直或微彎G－桿菌，有莢膜，單端有1～3根鞭毛，運動活潑。,革蘭染色,熒光染色,電鏡圖,形態(tài)特征,94,需氧，4℃不生長，42℃生長。可產(chǎn)生帶熒光的綠色水溶性色素，有溶血環(huán)。,血平板上細菌生長,普通培養(yǎng)基上細菌生長,培養(yǎng)特性,95,臨床表現(xiàn),多見于皮膚粘膜受損部位（燒傷和創(chuàng)傷等）與機體免疫力下降病人，表現(xiàn)為局部化膿性炎癥和全身感染。引起中耳炎、角膜炎、尿道炎、胃腸炎、 心內(nèi)膜炎、膿胸，也可引起菌血癥、敗血癥及引起嬰兒嚴重的流行性腹瀉。 醫(yī)源性感染。,96,本章主要內(nèi)容小結(jié),葡萄球菌和鏈球菌的生物學性狀、致病性、微生物學檢查方法。 致病性葡萄球菌的鑒別要點、抗O試驗。 其它球菌主要的生物學特點、致病性。,