江蘇省宿遷市馬陵中學(xué)高考生物專題復(fù)習(xí) 酵母細(xì)胞的固定化課件2

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1、 酶是活細(xì)胞產(chǎn)生的一類具有生物酶是活細(xì)胞產(chǎn)生的一類具有生物催化作用的催化作用的有機(jī)物有機(jī)物. .一一. .酶的概念:酶的概念:產(chǎn)生場(chǎng)所產(chǎn)生場(chǎng)所:作用部位作用部位:作作 用用:化學(xué)本質(zhì)化學(xué)本質(zhì):活細(xì)胞內(nèi)活細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞內(nèi)或外細(xì)胞內(nèi)或外催化催化作用作用多數(shù)是蛋白質(zhì)多數(shù)是蛋白質(zhì),少數(shù)是少數(shù)是RNA 作用機(jī)理作用機(jī)理: 降低化學(xué)反應(yīng)的活化能降低化學(xué)反應(yīng)的活化能組成單體組成單體:合成部位合成部位: 如果你是工程技術(shù)人員,你如何解決如果你是工程技術(shù)人員,你如何解決這個(gè)問(wèn)題?這個(gè)問(wèn)題?包埋法包埋法化學(xué)結(jié)合法化學(xué)結(jié)合法物理吸附法物理吸附法六、固定化細(xì)胞常用的載體材料六、固定化細(xì)胞常用的載體材料 :1 1、明膠、明

2、膠2 2、瓊脂糖、瓊脂糖3 3、海藻酸鈉、海藻酸鈉4 4、醋酸纖維素、醋酸纖維素5 5、聚丙烯酰胺等、聚丙烯酰胺等共同的特點(diǎn):共同的特點(diǎn):是不溶于水的多孔是不溶于水的多孔性載體性載體八、固定化細(xì)胞實(shí)驗(yàn)操作:八、固定化細(xì)胞實(shí)驗(yàn)操作:制備固定化酵母細(xì)胞制備固定化酵母細(xì)胞1 1、酵母細(xì)胞的活化、酵母細(xì)胞的活化 2 2、配制物質(zhì)的量濃度為、配制物質(zhì)的量濃度為0.05mol/L 0.05mol/L 的的CaClCaCl2 23 3、配制海藻酸鈉的溶液、配制海藻酸鈉的溶液4 4、海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合、海藻酸鈉溶液與酵母細(xì)胞混合5 5、固定化酵母細(xì)胞、固定化酵母細(xì)胞,以便形成穩(wěn)定,以便形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。

3、的結(jié)構(gòu)。 如何檢驗(yàn)?zāi)z珠的質(zhì)量是否合格?如何檢驗(yàn)?zāi)z珠的質(zhì)量是否合格? 一、是用鑷子夾起一個(gè)凝膠珠放在實(shí)驗(yàn)桌一、是用鑷子夾起一個(gè)凝膠珠放在實(shí)驗(yàn)桌上用手?jǐn)D壓,如果凝膠珠不容易破裂,沒(méi)有上用手?jǐn)D壓,如果凝膠珠不容易破裂,沒(méi)有液體流出,就表明凝膠珠的制作成功。液體流出,就表明凝膠珠的制作成功。 二、是在實(shí)驗(yàn)桌上用力摔打凝膠珠,如果二、是在實(shí)驗(yàn)桌上用力摔打凝膠珠,如果凝膠珠很容易彈起,也能表明制備的凝膠珠凝膠珠很容易彈起,也能表明制備的凝膠珠是成功的。是成功的。 三、三、觀察凝膠珠的顏色和形狀觀察凝膠珠的顏色和形狀原因分析:原因分析:1、如果制成的凝膠珠容易破裂?、如果制成的凝膠珠容易破裂?海藻酸鈉或

4、海藻酸鈉或CaClCaCl2 2的濃度過(guò)低的濃度過(guò)低在在CaClCaCl2 2溶液中浸泡的時(shí)間短溶液中浸泡的時(shí)間短原因分析:原因分析: 如果制作的凝膠珠顏色過(guò)淺、如果制作的凝膠珠顏色過(guò)淺、呈白色,說(shuō)明海藻酸鈉的濃度偏呈白色,說(shuō)明海藻酸鈉的濃度偏 ,固定的酵母細(xì)胞數(shù)目固定的酵母細(xì)胞數(shù)目 ;如果形;如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形,則成的凝膠珠不是圓形或橢圓形,則說(shuō)明海藻酸鈉的濃度偏說(shuō)明海藻酸鈉的濃度偏 ,制作失,制作失敗,需要再作嘗試。敗,需要再作嘗試。(二)用固定化細(xì)胞發(fā)酵(二)用固定化細(xì)胞發(fā)酵1 1、將固定好的酵母細(xì)胞、將固定好的酵母細(xì)胞( (凝膠凝膠珠珠) )用蒸餾水沖洗用蒸餾水沖洗2-3

5、2-3次。次。 2 2、 將將150mL150mL質(zhì)量分?jǐn)?shù)為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%10%的的葡萄糖溶液轉(zhuǎn)移到葡萄糖溶液轉(zhuǎn)移到200mL200mL的錐形的錐形瓶中,再加入固定好的酵母細(xì)瓶中,再加入固定好的酵母細(xì)胞,置于胞,置于2525下發(fā)酵下發(fā)酵24h24h。怎樣評(píng)價(jià)這一階段成功與否?怎樣評(píng)價(jià)這一階段成功與否?發(fā)酵產(chǎn)生酒精,會(huì)聞到酒味,發(fā)酵產(chǎn)生酒精,會(huì)聞到酒味,可以看到產(chǎn)生了很多氣泡??梢钥吹疆a(chǎn)生了很多氣泡。如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵液有酸味,如果發(fā)現(xiàn)發(fā)酵液有酸味,發(fā)酵裝置密封,分析原因?發(fā)酵裝置密封,分析原因?發(fā)酵裝置漏氣,分析原因?發(fā)酵裝置漏氣,分析原因?練習(xí):練習(xí):1 1、下列說(shuō)法不正確的是(、下列說(shuō)法不正確

6、的是( )A A、葡萄糖與固定化葡萄糖異構(gòu)酶接觸,葡萄糖與固定化葡萄糖異構(gòu)酶接觸,轉(zhuǎn)化成的是果糖轉(zhuǎn)化成的是果糖B B、從固定化酶反應(yīng)柱下端流出的是果糖從固定化酶反應(yīng)柱下端流出的是果糖C C、高果糖漿不會(huì)像蔗糖那樣誘發(fā)肥胖、高果糖漿不會(huì)像蔗糖那樣誘發(fā)肥胖、糖尿病、齲齒和心血管病糖尿病、齲齒和心血管病D D、酶溶解于葡萄糖溶液,可以從糖漿中酶溶解于葡萄糖溶液,可以從糖漿中回收回收2、制備固定化酵母細(xì)胞的過(guò)程中錯(cuò)誤的、制備固定化酵母細(xì)胞的過(guò)程中錯(cuò)誤的是(是( )A、取干酵母,加入蒸餾水,使其活化取干酵母,加入蒸餾水,使其活化B、配制海藻酸鈉時(shí),加熱用大火,直配制海藻酸鈉時(shí),加熱用大火,直到海藻酸鈉溶

7、化為止到海藻酸鈉溶化為止C、將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫,加入已活化的酵母細(xì)胞溫,加入已活化的酵母細(xì)胞D、將凝膠珠在將凝膠珠在Cacl2溶液中浸泡溶液中浸泡30 min左右左右3、下列敘述不正確的是(、下列敘述不正確的是( )A、從操作角度來(lái)考慮,固定化細(xì)胞比從操作角度來(lái)考慮,固定化細(xì)胞比固定化酶容易固定化酶容易B、固定化細(xì)胞比固定化酶對(duì)酶的活性固定化細(xì)胞比固定化酶對(duì)酶的活性影響更小影響更小C、固定化細(xì)胞固定的是一種酶固定化細(xì)胞固定的是一種酶D、將微生物的發(fā)酵過(guò)程變成連續(xù)的酶將微生物的發(fā)酵過(guò)程變成連續(xù)的酶反應(yīng)應(yīng)選擇固定化細(xì)胞技術(shù)反應(yīng)應(yīng)選擇固定化細(xì)胞技術(shù)4 4、

8、研究認(rèn)為,用固定化酶技術(shù)處理污、研究認(rèn)為,用固定化酶技術(shù)處理污染物是很有前途的。如將從大腸桿菌染物是很有前途的。如將從大腸桿菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龍膜上制得到的磷酸三酯酶固定到尼龍膜上制成制劑,可以用來(lái)降解殘留在土壤中成制劑,可以用來(lái)降解殘留在土壤中的有機(jī)磷農(nóng)藥,與用微生物降解相比,的有機(jī)磷農(nóng)藥,與用微生物降解相比,其作用不需要適宜的(其作用不需要適宜的( )A A、溫度溫度 B B、PHPHC C、水分水分 D D、營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)5.5.使用固定化細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)是使用固定化細(xì)胞的優(yōu)點(diǎn)是( )( )。A.A.能催化大分子物質(zhì)的水解能催化大分子物質(zhì)的水解 B.B.可催化一系列化學(xué)反應(yīng)可催化一系列化學(xué)反應(yīng)C.C.與反應(yīng)物易接近與反應(yīng)物易接近 D.D.有利于酶在細(xì)胞外發(fā)揮作用有利于酶在細(xì)胞外發(fā)揮作用6.6.酶的固定方法不包括酶的固定方法不包括( )( )。A.A.將酶吸附在固體表面上將酶吸附在固體表面上 B B將酶相互連接起來(lái)將酶相互連接起來(lái)C C將酶包埋在細(xì)微網(wǎng)格里將酶包埋在細(xì)微網(wǎng)格里 D D將酶制成固體酶制劑,如加酶洗將酶制成固體酶制劑,如加酶洗衣粉中的酶衣粉中的酶

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