2018-2019學(xué)年高中生物 專題4.2 血紅蛋白的提取和分離課時同步試題 新人教版選修1 .doc

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專題4.2 血紅蛋白的提取和分離 一、選擇題（12小題） 1．在蛋白質(zhì)的提取和分離中，對于樣品的處理過程的分析正確的是 A．洗滌時離心速度過高、時間過長，白細(xì)胞等會沉淀，達(dá)不到分離的效果 B．洗滌紅細(xì)胞的目的是除去血漿中的葡萄糖、無機(jī)鹽 C．洗滌過程中用0.1%的生理鹽水 D．透析的目的是去除樣品中相對分子質(zhì)量較大的雜質(zhì) 【答案】A 【解析】洗滌紅細(xì)胞時，采用低速短時間離心法，否則達(dá)不到離心的效果，A正確；洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白，B錯誤；洗滌過程中要用0.9%的生理鹽水，C錯誤；透析的目的是去除樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)，D錯誤。 2．蛋白質(zhì)的分離與提純技術(shù)是蛋白質(zhì)研究的重要技術(shù)，下列有關(guān)敘述不正確的 A．根據(jù)蛋白質(zhì)分子不能通過半透膜的特性，可將樣品中各種不同蛋白質(zhì)分離 B．根據(jù)蛋白質(zhì)所帶電荷性質(zhì)的差異及分子大小，可通過電泳分離蛋白質(zhì) C．根據(jù)蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量的大小，可通過凝膠色譜法分離蛋白質(zhì) D．根據(jù)蛋白質(zhì)的分子大小、密度不同，可通過離心沉降法分離蛋白質(zhì) 【答案】A 考點：本題考查蛋白質(zhì)的提取和分離的相關(guān)知識，意在考查考生理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。 3．下列有關(guān)凝膠色譜法的敘述，不正確的是 A．凝膠色譜法的原理是不同大小的分子所經(jīng)的路徑不同而得以分離 B．目前經(jīng)常使用的凝膠有交聯(lián)葡聚糖、聚丙烯酰胺和瓊脂糖等 C．大分子物質(zhì)后被洗脫出來，小分子物質(zhì)先被洗脫出來 D．血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過程的監(jiān)測 【答案】C 4．下列有關(guān)血紅蛋白的提取與分離的實驗操作的敘述，正確的是 A．分離紅細(xì)胞時采用低速長時間離心 B．紅細(xì)胞釋放出血紅蛋白只需要加入蒸餾水即可 C．分離血紅蛋白溶液要低速短時間離心 D．透析時要用20 mmol/L的磷酸緩沖液，透析12 h 【答案】D 【解析】分離紅細(xì)胞應(yīng)采用低速短時間離心，防止白細(xì)胞與紅細(xì)胞一同沉淀，A錯誤；紅細(xì)胞釋放血紅蛋白，需加入蒸餾水和40%的甲苯，再在磁力攪拌器上充分?jǐn)嚢?0 min，B錯誤；分離血紅蛋白要高速長時間離心，C錯誤；透析時要用20 mmol/L的磷酸緩沖液，透析12 h，D正確。 5．細(xì)胞破碎后，各種蛋白質(zhì)就會釋放出來，再根據(jù)蛋白質(zhì)的不同特性進(jìn)行提取。下列關(guān)于蛋白質(zhì)抽提的措施中，不正確的是 A．酸性蛋白質(zhì)可用稀堿性溶液抽提 B．水溶性蛋白質(zhì)可用透析液(中性緩沖液)抽提 C．脂溶性蛋白質(zhì)可用有機(jī)溶劑抽提 D．堿性蛋白質(zhì)可用強(qiáng)酸性溶液抽提 【答案】D 【解析】酸性蛋白質(zhì)可以用稀堿性溶液提取，A正確；水溶性蛋白質(zhì)可用中性緩沖液提取，B正確；脂溶性蛋白質(zhì)可用有機(jī)溶劑提取，C正確；強(qiáng)酸、強(qiáng)堿都會使蛋白質(zhì)變性而沉淀，所以不可用強(qiáng)酸性溶液提取，D錯誤。 6．關(guān)于凝膠色譜柱的裝填，下列敘述錯誤的是 A．交聯(lián)葡聚糖凝膠（G-75）“G”表示凝膠的交聯(lián)程度，膨脹程度及分離范圍，75表示凝膠得水值 B．凝膠用自來水充分溶脹后，配成凝膠懸浮液 C．用300 mL的物質(zhì)的量濃度為20 mmol/L的磷酸緩沖液充分洗滌凝膠12 h D．色譜柱內(nèi)不能有氣泡存在，一旦發(fā)現(xiàn)有氣泡，必須重裝 【答案】B 【解析】凝膠需用磷酸緩沖液充分溶脹后，配成凝膠懸浮液，B錯誤。 考點：本題考查蛋白質(zhì)的分離技術(shù)等知識。 7．將處理破裂后的紅細(xì)胞混合液以2000r/min的速度離心10min后，離心管中的溶液分為四層，從上到下的順序依次是 A．血紅蛋白、甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、紅細(xì)胞破碎物沉淀層 B．甲苯層、紅細(xì)胞破碎物沉淀層、血紅蛋白、脂質(zhì)物質(zhì)層 C．脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、甲苯層、紅細(xì)胞破碎物沉淀層 D．甲苯層、脂質(zhì)物質(zhì)層、血紅蛋白、紅細(xì)胞破碎物沉淀層 【答案】D 8．關(guān)于電泳的說法不正確的是 A．電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程 B．帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動 C．蛋白質(zhì)在醋酸纖維薄膜上的移動速度取決于它所帶凈電荷的多少 D．電泳后需經(jīng)染色、漂洗和脫色，才可長期保存 【答案】C 【解析】電泳是指帶電粒子在電場的作用下發(fā)生遷移的過程，A正確；由于同性相斥、異性相吸，帶電分子會向著與其所帶電荷相反的電極移動，B正確；在一定pH下，使蛋白質(zhì)基團(tuán)帶上正電或負(fù)電，加入帶負(fù)電荷多的SDS，形成“蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物”，使蛋白質(zhì)遷移速率僅取決于分子大小，C錯誤；電泳后需經(jīng)染色、漂洗和脫色，才可長期保存，D正確。 9．紅細(xì)胞中含有大量血紅蛋白，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進(jìn)行實驗來提取和分離血紅蛋白。下列對血紅蛋白提取和分離的敘述，錯誤的是 A．血紅蛋白提取和分離一般按照“樣品處理→粗分離→純化→純度鑒定”的順序進(jìn)行 B．純化過程中要用生理鹽水充分溶脹凝膠來配制凝膠懸浮液 C．樣品處理過程中用蒸餾水的目的是使紅細(xì)胞吸水漲破釋放出血紅蛋白 D．可經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定 【答案】B 【點睛】解決本題需要知道蛋白質(zhì)的提取和分離的原理：凝膠色譜法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動的速度快，因此相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)得以分離。血紅蛋白的提取與分離的實驗步驟主要有：(1)樣品處理；(2)粗分離；(3)純化；(4)純度鑒定——SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。 10．下列有關(guān)蛋白質(zhì)提取和分離的說法，錯誤的是 A．透析法分離蛋白質(zhì)的原理是利用蛋白質(zhì)不能通過半透膜的特性 B．采用透析法使蛋白質(zhì)與其他小分子化合物分離開來 C．離心沉降法通過控制離心速率使分子大小、密度不同的蛋白質(zhì)分離 D．蛋白質(zhì)在電場中可以向與其自身所帶電荷電性相同的電極方向移動 【答案】D 【解析】蛋白質(zhì)是生物大分子，不能通過半透膜，而其他小分子可以通過半透膜，可以利用半透膜進(jìn)行分離得到蛋白質(zhì)，AB正確。分子大小、密度不同的蛋白質(zhì)其離心速率不同，通過控制離心速率使分子大小、密度不同的蛋白質(zhì)分離，C正確。蛋白質(zhì)在電場中可以向與其自身所帶電荷電性相反的電極方向移動，D錯。 考點：本題考查蛋白質(zhì)提取和分離相關(guān)知識，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系，形成知識的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)能力。 11．下列關(guān)于蛋白質(zhì)的純化方法的敘述，錯誤的是 A．純化主要是根據(jù)蛋白質(zhì)以及蛋白質(zhì)與其他物質(zhì)之間的理化性質(zhì)的差異進(jìn)行的 B．透析法可去除小分子化合物雜質(zhì)，原理是不同分子所攜帶凈電荷不同 C．通過控制離心速率，可使分子大小、密度不同的蛋白質(zhì)沉降分層，從而分離不同的蛋白質(zhì) D．不同的物質(zhì)在同一電場中的移動速度不同，因此可用電泳法分離蛋白質(zhì) 【答案】B 12．以下對DNA和血紅蛋白的提取與分離（鑒定）實驗的分析錯誤的是 A．都要用豬血細(xì)胞來做實驗材料 B．在DNA的粗提取中可利用DNA在不同濃度鹽溶液中的溶解度不同而析出 C．在實驗中都要進(jìn)行除雜處理以便得到較純凈的DNA或血紅蛋白 D．將析出的DNA溶解在2 mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺試劑沸水浴后呈現(xiàn)藍(lán)色 【答案】A 【解析】豬血紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核，不適宜作DNA粗提取的實驗，故A錯誤；在DNA的粗提取與鑒定實驗中，第一次DNA析出利用了DNA易溶于2 mol/L的NaCl溶液中，而在0.14 mol/L的NaCl溶液溶解度很低，故B正確；在兩個實驗中都要進(jìn)行除雜處理以便得到較純凈的DNA或血紅蛋白，故C正確；將析出的DNA溶解在2 mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺試劑后需要水浴加熱會呈現(xiàn)藍(lán)色，故D正確。 考點：本題考查DNA的粗提取和鑒定實驗的有關(guān)知識，意在考查考生能獨立完成“生物知識內(nèi)容表”所列的生物實驗，包括理解實驗?zāi)康?、原理、方法和操作步驟，掌握相關(guān)的操作技能，并能將這些實驗涉及的方法和技能進(jìn)行綜合運用的能力。 二、非選擇題（3小題） 13．某生物興趣小組在“蛋白質(zhì)的提取和分離”實驗中，準(zhǔn)備從豬的血液中初步提取血紅蛋白，設(shè)計的“血紅蛋白提取、分離流程”如下： 實驗準(zhǔn)備（配制緩沖液、血細(xì)胞懸液）→樣品處理（洗滌、破碎、離心等）→蛋白質(zhì)粗分離（透析）→純化、純度鑒定（凝膠色譜法、電泳等） 請回答下列有關(guān)問題： （1）樣品處理中紅細(xì)胞的洗滌要用________________反復(fù)沖洗、離心。向紅細(xì)胞懸液中加入一定量的低濃度pH＝7.0的緩沖液并充分?jǐn)嚢?，可以破碎紅細(xì)胞，破碎細(xì)胞的原理是________________。 （2）血紅蛋白粗分離階段，透析的目的是________，若要盡快達(dá)到理想的透析效果，可以________________（寫出一種方法）。 （3）電泳利用了待分離樣品中各種分子的________等的差異，而產(chǎn)生不同遷移速度，實現(xiàn)各種分子的分離。 （4）一同學(xué)通過血紅蛋白醋酸纖維薄膜電泳，觀察到正常人和鐮刀型細(xì)胞貧血癥患者的血紅蛋白電泳結(jié)果如下圖所示。由圖可知攜帶者有________種血紅蛋白，從分子遺傳學(xué)的角度作出的解釋是________________。 【答案】（1）生理鹽水 滲透原理（當(dāng)外界溶液濃度低于動物細(xì)胞內(nèi)液濃度時，細(xì)胞吸水脹破） （2）除去小分子雜質(zhì) 增加緩沖液的量或及時更換緩沖液 （3）帶電性質(zhì)以及分子大小、形狀 2 攜帶者具有（控制血紅蛋白的）一對等位基因，可以控制合成兩種不同的蛋白質(zhì) （2）血紅蛋白粗分離階段，透析的目的是除去樣品中的小分子雜質(zhì)；可通過增加緩沖液的量或及時更換緩沖液等方法縮短透析時間，能盡快達(dá)到理想的透析效果。 （3）由于各種分子帶電性質(zhì)以及分子大小、形狀等的差異，在電泳過程中會產(chǎn)生不同的遷移速度，從而實現(xiàn)各種分子的分離。 （4）根據(jù)圖示可知，鐮刀型細(xì)胞貧血癥的攜帶者含有兩種血紅蛋白，原因是攜帶者具有（控制血紅蛋白的）一對等位基因，分別控制合成兩種不同的蛋白質(zhì)。 【點睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握血紅蛋白提取和分離的程序，明確血紅蛋白粗分離階段，透析的目的是除去樣品中的小分子雜質(zhì)。 14．紅細(xì)胞含有大量的血紅蛋白，紅細(xì)胞的機(jī)能主要是由血紅蛋白完成的，血紅蛋白的主要功能是攜帶O2或CO2，我們可以選用豬、牛、羊或其他脊椎動物的血液進(jìn)行實驗，來提取和分離血紅蛋白，請回答下列有關(guān)問題： （1）血紅蛋白提取和分離的過程可分為四步：________、________、________和________。 （2）實驗前取新鮮的血液，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，取血回來，馬上進(jìn)行離心，收集、血紅蛋白溶液。 ①加入檸檬酸鈉的目的是________________。 ②以上所述的過程即是樣品處理，它包括________、________收集血紅蛋白溶液。 （3）洗滌紅細(xì)胞的目的是________________________。 （4）你如何知道紅細(xì)胞已洗滌干凈？_______________________________________。 （5）分離紅細(xì)胞時的離心速度及離心時間分別是_______________________________________。 （6）若離心速度過高和時間過長結(jié)果會怎樣？_______________________________________。 （7）將收集的血紅蛋白溶液放在透析袋中進(jìn)行透析，即樣品的粗分離。 ①透析的目的是______________________。 ②透析的原理是______________________。 （8）然后通過凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化，最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。樣品純化的目的是_______________________________________。 【答案】（1）樣品處理 粗分離 純化 純度鑒定 （2）①防止血液凝固 ②紅細(xì)胞的洗滌 血紅蛋白的釋放 （3）去除血漿蛋白 （4）離心后的上清液沒有黃色 （5）低速500 r/min，短時間如2 min （6）離心速度過高和時間過長會使白細(xì)胞等一同沉淀，得不到純凈的紅細(xì)胞，影響后續(xù)血紅蛋白的提取純度 （7）①去除分子量較小的雜質(zhì) ②透析袋能使小分子自由進(jìn)出，而大分子則保留在袋內(nèi) （8）通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)蛋白除去 【解析】（1）分離、提取血紅蛋白的實驗流程大致是樣品處理→粗分離→純化→純度鑒定四個步驟。（2）①檸檬酸鈉是一種抗凝劑，加入檸檬酸鈉可以防止血液凝固。②樣品處理包括紅細(xì)胞的洗滌、血紅蛋白的釋放、收集血紅蛋白溶液。 （3）洗滌紅細(xì)胞的目的是去除血漿蛋白，以利于后續(xù)步驟的分離純化。 （4）離心后的上清液沒有黃色，表明紅細(xì)胞已洗滌干凈。 （8）凝膠色譜法是一種根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小分離蛋白質(zhì)的有效方法。相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)只能從凝膠間隙通過，路程短，移動速度快，先到達(dá)色譜柱的下端；相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程較長，移動速度較慢?？梢?，通過凝膠色譜法去除相對分子質(zhì)量較大的雜質(zhì)蛋白。 15．血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細(xì)胞的主要組成成分，負(fù)責(zé)血液中O2或CO2的運輸。請根據(jù)血紅蛋白的提取和分離流程圖回答問題。 （1）將實驗流程補(bǔ)充完整：A為________，B為________。凝膠色譜法是根據(jù)____________而達(dá)到蛋白質(zhì)分離的有效方法。 （2）洗滌紅細(xì)胞的目的是去除_________，洗滌次數(shù)過少，無法除去_________；離心速度過高和時間過長會使_______一同沉淀，達(dá)不到分離的效果。洗滌干凈的標(biāo)志是__________。釋放血紅蛋白的過程中起作用的是______________。 （3）在洗脫過程中加入物質(zhì)的量濃度為20 mmol/L的磷酸緩沖液（pH為7.0）的目的是__________。如果紅色區(qū)帶____________，說明色譜柱制作成功。 【答案】（1）血紅蛋白的釋放 樣品的加入和洗脫 相對分子質(zhì)量的大小 （2）雜蛋白（血漿蛋白）血漿蛋白 白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞 離心后的上清液中沒有黃色 蒸餾水和甲苯 （3）準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境，保持體外的pH和體內(nèi)一致 均勻一致地移動 （2）洗滌紅細(xì)胞的目的是去除雜蛋白，釋放血紅蛋白的過程是讓紅細(xì)胞吸水脹破。如果分層不明顯，可能是洗滌次數(shù)少，無法除去血漿蛋白。此外，離心速度過高和時間過長，會使白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞一同沉淀，也得不到純凈的紅細(xì)胞，影響后續(xù)血紅蛋白的提取純度。重復(fù)洗滌三次，直至上清液中沒有黃色，表明紅細(xì)胞已洗滌干凈，因為甲苯是表面活性劑的一種，可將細(xì)胞膜溶解，從而使細(xì)胞破裂。釋放血紅蛋白的過程中起作用的是蒸餾水和甲苯。 （3）磷酸緩沖液（pH為7.0）能夠準(zhǔn)確模擬生物體內(nèi)的生理環(huán)境，保持體外的pH和體內(nèi)的一致。如果凝膠色譜柱裝填得很成功、分離操作也正確，能清楚地看到血紅蛋白的紅色區(qū)帶均勻一致地移動，隨著洗脫液緩慢流出；如果紅色區(qū)帶歪曲、散亂、變寬，說明分離的效果不好，這與凝膠色譜柱的裝填有關(guān)。 【點睛】本題關(guān)鍵要熟悉血紅蛋白的提取、分離和純化以及鑒定的方法、原理。