分析化學(xué)08-1紫外可見光度法.ppt

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第四章紫外 可見光分光光度法 4 1概述分光光度分析法是以物質(zhì)對光的選擇性吸收為基礎(chǔ)的分析方法 根據(jù)物質(zhì)所吸收光的波長范圍不同 分光光度分析法又有紫外 可見及紅外分光光度法 本章重點討論可見光光度法 并簡單介紹紫外分光光度法 4 1 1方法的特點 1 靈敏度高通常 待測物質(zhì)的含量1 10 5 時 能夠用分光光度法準(zhǔn)確測定 所以它主要用于測定微量組分 2 應(yīng)用廣泛幾乎所有的無機離子和許多有機化合物可以用分光光度法進行測定 如土壤中的氮 磷以及植物灰 動物體液中各種微量元素的測定 3 操作簡便 迅速 儀器設(shè)備不太復(fù)雜若采用靈敏度高 選擇性好的有機顯色劑 并加入適當(dāng)?shù)难诒蝿?一般不經(jīng)過分離即可直接進行分光光度法測定 其方法的相對誤差通常為5 10 其準(zhǔn)確度雖不及重量分析法和容量法 但對于微量組分的測定 結(jié)果還是滿意的 4 2 1顏色的產(chǎn)生 4 2吸光光度法的基本原理 4 2 2電磁波和能量 光的波長 cm 頻率 Hz 它們與光速c的關(guān)系是 4 2 3光的基本性質(zhì) 在真空介質(zhì)中 光速為2 9979 1010cm s 單個光子的能量E與上述三要素的關(guān)系是 E 光子的能量 J h 普朗克常數(shù) 6 625 10 34J s 4 2 4溶液顏色與光吸收的關(guān)系 光波是一種電磁波 電磁波包括無線電波 微波 紅外光 可見光 紫外光 x射線等 如果按照其頻率或波長的的大小排列 可見光只是電磁波中一個很小的波段 見表12 1 有色物質(zhì)的不同顏色是由于吸收了不同波長的光所致 溶液能選擇性地吸收某些波長的光 而讓其他波長的光透過 這時溶液呈現(xiàn)出透過光的顏色 透過光的顏色是溶液吸收光的互補色 有色溶液對各種波長的光的吸收情況 常用光吸收曲線來描述 將不同波長的單色光依次通過一定的有色溶液 分別測出對各種波長的光的吸收程度 用字母A表示 以波長為橫坐標(biāo) 吸光程度為縱坐標(biāo)作圖 所得的曲線稱為吸收曲線或吸收光譜曲線 能復(fù)合成白光的兩種顏色的光叫互補色光 物質(zhì)所顯示的顏色是吸收光的互補色 KMnO4的顏色及吸收光譜 葉綠素的結(jié)構(gòu)和吸收光譜 一個新配合物的吸收光譜 4 3光吸收基本定律 當(dāng)一束平行的單色光照射均勻的有色溶液時 光的一部分被吸收 一部分透過溶液 一部分被比色皿的表面反射 如果人射光的強度為I0 吸收光的強度為Ia 透過光的強度為It 反射光的強度為Ir 則 I0 Ia It Ir在吸光光度法中 由于采用同樣質(zhì)料的比色皿進行測量 反射光的強度基本上相同 其影響可以相互抵消 上式可簡化為 I0 Ia It 透過光的強度It 與入射光的強度Io比之比稱為透光度或透光率 用T表示 T It Io 一束單色光通過溶液后 由于溶液吸收了一部分光能 光的強度就要減弱 若溶液的濃度不變 液層越厚 透過光的強度越小 光線減弱的程度越大 如果將液層分成許多無限小的相等的薄層 其厚度為db 則dI應(yīng)與db及I成正比 即 dI Idb 從而 dI I k1db 積分此式 得 動畫 1 朗伯定律 將上式變成常用對數(shù) 得 上式稱為朗伯定律 如用A lg I0 It 或lg 1 T 則 A稱為吸光度 例1 有一單色光通過厚度為1cm的有色溶液 其強度減弱20 若通過5cm厚度的相同溶液 其強度減弱百分之幾 解 lgT1c1 lgT25c1lgT2 5lgT1 5 lg0 80 0 485T2 32 7 即減弱67 3 當(dāng)一束單色光通過液層厚度一定的溶液時 溶液的濃度愈大 光線強度減弱愈顯著 若有色溶液的濃度增加dc 入射光通過溶液后 強度的減弱 dI與人射光強度I及dc成正比 即 dI k3Idc 或 dI I k3dc 積分 可得到 通常稱比耳定律 動畫 2 比耳定律 例2 一符合比爾定律的有色溶液 當(dāng)濃度為c時 透射比為T 若其它條件不變 濃度為c 3時 T為 濃度為2c時 T為 解 T1 3T2這說明濃度與透射比T的是指數(shù)關(guān)系 3 朗伯一比耳定律 如果溶液濃度和液層厚度都是可的 就要同時考慮溶液濃度c和液層厚度b對吸光度的影響 為此 將朗伯和比耳公式和合并 得到 即通常所稱的朗伯一比耳定律 4 吸光系數(shù) 摩爾吸光系數(shù)和桑德爾靈敏度 在朗伯 比耳公式 k值決定于c b所用的單位 它與入射光的波長及溶液的性質(zhì)有關(guān) 當(dāng)濃度c以g L 1 液層厚度b以cm表示時 常數(shù)k是以a表示 此時稱為吸光系數(shù) 單位為L g 1 cm 1 朗伯 比耳公式可表示為 A abc若b以cm為單位 c以mol L 1為單位時 則將k稱為摩爾吸光系數(shù) 以符號 表示 其單位為L mol 1cm 1 的物理意義表達了當(dāng)吸光物質(zhì)的濃度為1mol L 1 液層厚度為1cm時溶液的吸光度 在這種條件下上式可改寫為 A bc 摩爾吸光系數(shù)是有色化合物的重要特性 愈大 表示該物質(zhì)對某波長的光吸收能力愈強 因而光度測定的靈敏度就越高 的值 不能直接取1mol L這樣高濃度的有色溶液來測量 而只能通過計算求得 由于溶液中吸光物質(zhì)的濃度常因離解 聚合等因素而改變 因此 計算 時 必須知道溶液中吸光物質(zhì)的真正濃度 但通常在實際工作中 多以被測物質(zhì)的總濃度計算 這樣計算出的 值稱為表觀摩爾吸光系數(shù) 文獻中所報道的 值就是表觀摩爾吸光系數(shù)值 桑德爾 Sandell 靈敏度 桑德爾靈敏度又叫桑德爾指數(shù) 用S表示 在分光光度分析中常常使用 桑德爾靈敏度規(guī)定儀器的檢測極限為A 0 001時 單位截面積光程內(nèi)所能檢測出被測物質(zhì)的最低含量 以 g cm2表示 S與 的關(guān)系可如下推導(dǎo) A 0 001 bc 即cb 0 001 c為mol 1000cm3 b為cm 故cb為單位截面積光程內(nèi)的物質(zhì)量 即mol 1000cm2 如果cb乘以被測物質(zhì)的摩爾質(zhì)量M 就是單位截面積光程內(nèi)被測物質(zhì)的質(zhì)量 即為S 所以 S cb 1000 M 106 cbM 103 g cm2 代入cb后 5 偏離朗伯 比耳定律的原因 朗伯 比耳定律是吸光光度分析的理論基礎(chǔ) 在實際應(yīng)用時 通常是使液層厚度保持不變 然后測定一系列濃度不同的標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度 根據(jù)A kbc k c關(guān)系式 以濃度為橫坐標(biāo) 吸光度為縱坐標(biāo)作圖 應(yīng)得到一通過原點的直線 稱為標(biāo)準(zhǔn)曲線或工作曲線 但是 在實際工作中 當(dāng)有色溶液的濃度較高時 往往不成直線 這種現(xiàn)象稱為偏離朗伯 比耳定律 見圖12 8 引起偏離朗伯 耳定律的原因主要有以下幾個方面 1 由于入射光不是單色光而引起的偏離朗伯 比耳定律只適用于單色光 但實際上單波長的光不能得到 目前各種方法所得到的入射光是具有一定波長范圍的波帶 而非單色光 因而發(fā)生偏離朗伯一比耳定律的現(xiàn)象 單色光的純度愈差 吸光物質(zhì)的濃度愈高 偏離朗伯 比耳定律的程度愈嚴(yán)重 在實際工作中 若使用精度較高的分光光度計 可獲得較純的單色光 2 由于介質(zhì)的不均勻性引起的偏離當(dāng)被測溶液是膠體溶液 懸濁液或乳濁液時 入射光通過溶液后除一部分被吸收外 還有一部分因溶液中存在微粒的散射作用而損失 并使透光度減小 而當(dāng)膠體或其他微粒凝聚沉淀時 又會使溶液吸光度下降 3 溶液中的化學(xué)變化引起的偏離溶液中的化學(xué)變化如締合 離解 溶劑化 形成新的化合物 互變異構(gòu)等 使吸光度不隨溶液濃度而成正比地改變 而導(dǎo)致偏離朗伯 比耳定律 例如 重鉛酸鉀在弱酸性介質(zhì)中有如下平衡 Cr2O72 H2O2HCrO4 在450nm波長處測量不同濃度重鉻酸鉀溶液的吸光度 由于在濃度低時重鉻酸根的離解度大 而濃度高時離解度小 同時由于鉻酸氫根離子 HCrO4 的摩爾吸光系數(shù)比重鉻酸根離子的摩爾吸光系數(shù)要小得多 因此低濃度時重鉻酸根離子的吸光度降低十分顯著 這就使工作曲線偏離朗伯和耳定律 4 4光度分析的方法和儀器 4 4 1光度分析的方法1 目視比色法用眼睛觀察 比較溶液顏色深度以確定物質(zhì)含量的方法稱為目視比色法 將一系列不同量的標(biāo)準(zhǔn)溶液依次加入各比色管中 再分別加入等量的顯色劑和其他試劑 并控制其他實驗條件相同 最后稀釋至同樣體積 配成一套顏色逐漸加深的標(biāo)準(zhǔn)色階 將一定量的被測溶液置于另一比色管中 在同樣條件下進行顯色 并稀釋至同樣體積 從管口垂直向下 有時由側(cè)面 觀察顏色 如果被測溶液與標(biāo)準(zhǔn)系列中某溶液的顏色相同 則被測溶液的濃度就等于該標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度 如果被測試液濃度介于相鄰兩種標(biāo)準(zhǔn)溶液之間 則試液的濃度就介于這兩個標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度之間 2 標(biāo)準(zhǔn)曲線法 根據(jù)朗伯 比耳定律 保持液層厚度 入射光波長和其它測量條件也不變 則在一定濃度范圍內(nèi) 所測得吸光度與溶液中待測物質(zhì)的濃度成正比 因此 配制一系列已知的具有不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液 分別在選定波長處測其吸光度A 然后以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度c為橫坐標(biāo) 以相應(yīng)的吸光度A為縱坐標(biāo) 繪制出A c關(guān)系曲線 如果符合光的吸收定律 則可獲得一條直線 稱為標(biāo)準(zhǔn)曲線或稱工作曲線 在相同條件下測量樣品溶液的吸光度 就可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出樣品的濃度 A c 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線 動畫 3 加入標(biāo)準(zhǔn)法 所謂的加入標(biāo)準(zhǔn)法 即在一定濃度的試樣溶液測定吸光度A0后 加入合適濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液 再測吸光度A1 或再加幾次標(biāo)準(zhǔn)溶液 得A2 A3 吸光度 計算或作圖外推求試樣濃度的方法 即 A0 kC樣 A1 k C樣 C標(biāo) 設(shè)試樣體積為V0 加入的標(biāo)準(zhǔn)溶液體積為V標(biāo) 則 A1 k C樣V0 C標(biāo)V標(biāo) V0 V標(biāo) 聯(lián)解方程可求出C樣 或用A對C標(biāo)作圖 外推求出C樣 4 二元混合組分的測定 混合溶液里兩組分的測定有如圖12 5的三種情況 a 若1和2兩組分的最大吸收峰互不重合 而且在1組分的最大吸收波長 1處 2組分沒有吸收 或在2組分的最大吸收波長 2處 1組分無吸收 這樣比較簡單 按單組分測定方法測1和2兩組分即可 b 若1和2組分在混合溶液中的吸光光譜曲線如圖12 5 b 所示 則當(dāng)1和二混合在一起時 在1組分的最大吸收波長處 2組分無吸收 所以只需在 1處測定1組分 但在 2處所測定吸光度是1和2的總吸收 因此必須事先測得1組分在 2的 先從 1出1組分 再從疊加處得的和量中減去組分1 c 這種情況比較復(fù)雜 要解一個一元二次方程 5 三元絡(luò)合物的應(yīng)用 所謂的三元絡(luò)合物是指由三個組分所形成的絡(luò)合物 目的是提高靈敏度和選擇性 例 Co H2O 3 NH3 3 2 淡紅色 Co H2O 2 NH3 4 2 暗紅色 Co H2O NH3 5 2 紅色 Co NH3 6 2 黃色 4 4 2分光光度計 停留分光光度計 A原理 光柵和棱鏡分光原理 光柵分光動畫 棱鏡分光動畫 儀器光通路圖 B 分光光度計的類型 動畫 雙光束光度計動畫示意 動畫 雙波長光度計光路示意圖 動畫 C 光電轉(zhuǎn)換器 I 定義光電轉(zhuǎn)換器是將光輻射轉(zhuǎn)化為可以測量的電信號的器件 S kP kd kPk 校正靈敏度 P 輻射功率 kd 暗電流 可通過線路補償 使為0 II 理想的光電轉(zhuǎn)換器要求靈敏度高 S N大 暗電流小 響應(yīng)快且在寬的波段內(nèi)響應(yīng)恒定 2 真空光電管 陰極表面可涂漬不同光敏物質(zhì) 高靈敏 K Cs Sb其中二者 紅光敏 Na K Cs Sb Ag O Cs 紫外光敏 平坦響應(yīng) Ga As 響應(yīng)受波長影響小 產(chǎn)生的光電流約為硒光電池的1 10 優(yōu)點 阻抗大 電流易放大 響應(yīng)快 應(yīng)用廣 缺點 有微小暗電流 Darkcurrent 40K的放射線激發(fā) PMT動畫 4 硅二極管 反向偏值 耗盡層 depletionlayer pn結(jié)電導(dǎo)趨于0 i 0 光照 耗盡層中形成空穴和電子 空穴移向p區(qū)并湮滅 外加電壓對pn 電容器 充電 產(chǎn)生充電電流信號 i 0 特點 靈敏度介于真空管和倍增管之間 CCD光電轉(zhuǎn)換演示動畫 CCD動畫 CID與CCD之比較 與PDA相比 CTD最大的優(yōu)勢在于其二維特性 可作為影像檢測器 在電視及航空等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用 ChargeinjectiondeviceChargecoupleddevice 4 5顯色反應(yīng)和顯色條件 4 5 1分光光度法對顯色反應(yīng)的要求在光度分析法中 使被測物質(zhì)在試劑 顯色劑 的作用下形成有色化合物的反應(yīng)稱為顯色反應(yīng) 對于顯色反應(yīng) 一般必須滿足下列要求 1 選擇性好 即在顯色條件下 顯色劑盡可能不要與溶液中其他共存離子顯色 如果其他離子也和顯色劑反應(yīng) 干擾離子的影響應(yīng)容易消除 2 靈敏度高 顯色反應(yīng)的靈敏度高 才能測定低含量的物質(zhì) 靈敏度可從摩爾吸光系數(shù)來判斷 但靈敏度高的顯色反應(yīng) 不一定選擇性好 在實踐中應(yīng)全面考慮 3 顯色產(chǎn)物應(yīng)具有固定的組成 符合一定的化學(xué)式 對于形成不同配合比的配合物的顯色反應(yīng) 需要嚴(yán)格控制實驗條件 使生成一定組成的配合物 以提高其重現(xiàn)性 4 顯色產(chǎn)物的化學(xué)性質(zhì)應(yīng)該穩(wěn)定 在測量過程中溶液的吸光度應(yīng)改變很小 5 顯色產(chǎn)物與顯色劑之間的顏色差別要大 4 5 2顯色條件 1 顯色劑的用量被測物質(zhì)與顯色劑的反應(yīng)可用下列一般式表示 M十R MR 被測物 顯色劑 有色配合物 為了使顯色反應(yīng)盡可能完全 一般應(yīng)加入過量的顯色劑 如果配合物穩(wěn)定度高 而且在一定條件下能保持穩(wěn)定 顯色劑不必大量過量 在分析實踐中 由于待測物質(zhì)的濃度未知 稍過量的顯色劑是必要的 當(dāng)生成不太穩(wěn)定的有色配合物時 必須加入相當(dāng)過量的試劑 以保證獲得足夠的有色配合物并有可觀的吸光度 有時顯色劑的用量過大 反而會引起副反應(yīng) 對光度測定不利 應(yīng)嚴(yán)格控制顯色劑的用量 以保證得到正確的結(jié)果 通常 顯色劑的用量是根據(jù)實驗結(jié)果來確定的 2 溶液的酸度 1 酸度對顯色劑濃度的影響所用的顯色劑不少是有機弱酸 以HR表示 酸度提高則平衡傾向于生成HR 使R的實際濃度降低 不利于顯色反應(yīng)的進行 因此 顯色時溶液的酸度不能高于某一限度 此外 在不同的酸度下 R的濃度不同 有時可引起有色配合物配位數(shù)的改變 2 酸度對被測離子形態(tài)的影響當(dāng)被測離子是容易水解的金屬離子時 若酸度低于某一限度 被測離子形成羥基配合物 多核羥基配合物 堿式鹽或氫氧化物沉淀 不利于光度分析 3 對顯色劑顏色的影響許多有機顯色劑具有酸堿指示劑的性質(zhì) 隨著pH的改變 顯出不同的顏色 在選擇酸度時必須考慮這種情況 例如H2RH HRH R2 黃色 橙色 紅色 pH6 9 pH12 4 3 顯色時間有些顯色反應(yīng)能瞬間完成 且有色化合物的顏色很快達到穩(wěn)定狀態(tài) 在較長時間內(nèi)保持不變 有些顯色反應(yīng)雖能迅速完成 但由于空氣的氧化 光的照射或其他原因使有色化合物的顏色逐漸減退 有些顯色反應(yīng)需要一定時間才能完成 4 顯色溫度 1 對顯色反應(yīng)速度的影響 反應(yīng)速度常隨溫度的升高而加快 2 由于溫度的升高可能導(dǎo)致某些有色配合物發(fā)生分解或氧化還原反應(yīng) 因而會使有色配合物破壞而不利于光度測定 3 溫度升高會引起有色配合物離解度的增大 使其穩(wěn)定性降低而導(dǎo)致吸光度下降 4 溫度變化會使有色配合物的摩爾吸光系數(shù)改變 從而使吸光度發(fā)生改變 必須指出 在分析實踐中 并不是每一顯色反應(yīng)都同時存在上述四個方面的影響 通過繪制吸光度一溫度曲線可以確定反應(yīng)的適宜溫度 5 溶劑通常 水溶性有色配合物因加入適當(dāng)有機溶劑 使溶液的介電常數(shù)降低 使配合物離解度減小 或穩(wěn)定性增大 有時 可增大速度 4 6儀器測量誤差和測量條件 4 6 1儀器測量誤差在分光光度分析法中 使用任何光度計進行測量時 都會產(chǎn)生一定的誤差 這些誤差可能來自光源的電壓不穩(wěn)定 光電元件靈敏度的變化和儀器刻度讀數(shù)不準(zhǔn)確等 如果測量時透光率讀數(shù)的絕對誤差是 T 對于同一臺儀器 它基本上是常數(shù) 但由于吸光度與透光率之間是負(fù)對數(shù)關(guān)系 在不同A值時 同樣的 T的讀數(shù)誤差所引起的吸光度的絕對誤差 A是不同的 A值越大 由 T引起的 A也越大 根據(jù)朗伯 比耳定律 由 A引起的被測物質(zhì)濃度的誤差 c為 A k c再是根據(jù)吸收公式微分 可得 儀器測量誤差 T引起的濃度測量的相對誤差為 設(shè) T 0 01 計算不同T值與 c c的關(guān)系 可得到下圖 lnT 1lgT 0 434T 0 368這時誤差最小 動畫 4 6 2測量條件的選擇 除選擇適宜的顯色條件外 還應(yīng)當(dāng)選擇合適的測量條件 主要的測量條件包括入射光波長 吸光度范圍和空白溶液等 下面將分別討論 1 選擇入射光波長入射光的波長對測定結(jié)果的靈敏度和準(zhǔn)確度都有很大的影響 選擇時 應(yīng)先繪制有色溶液的光吸收曲線 然后選用該溶液的最大吸收波長來進行測量 如果試液中某種組分在同樣的波長也有吸收 則對測定有干擾 這時 可選另一靈敏度稍低 但能避免干擾的入射光波長 2 控制吸光度的范國由儀器測量誤差的討論中可知 為了使測定結(jié)果獲得較高的準(zhǔn)確度 應(yīng)該控制溶液的吸光度在一定的范圍內(nèi) 一般要求是0 15 0 8 控制吸光度范圍的方法是改變比色皿的厚度 也可以改變?nèi)芤旱臐舛然蛟嚇拥馁|(zhì)量 3 選擇適當(dāng)?shù)膮⒈热芤簠⒈热芤河址Q空白溶液 在光度分析法中 利用參比溶液調(diào)節(jié)儀器的吸光度零點 消除顯色溶液中其他有色物質(zhì)的干擾 抵消比色皿壁及溶液對入射光的反射和吸收的影響等 4 6 3共存離子的影響及其消除 1 共存離子與顯色劑生成有色化合物 使測定結(jié)果偏高 2 共存離子與被測組分或顯色劑生成無色化合物或發(fā)生其它反應(yīng) 降低了被測組分或顯色劑的濃度 使測定結(jié)果偏低 3 共存離子本身具有顏色 消除共存離子的干擾主要有以下幾種方法 1 加入適當(dāng)?shù)难诒蝿?使干擾離子形成無色的化合物 從而降低溶液中干擾離子的濃度 使干擾消除 2 控制顯色條件 消除干擾 一種顯色劑對不同金屬離子的顯色反應(yīng) 所要求的酸度常不相同 因此可以將溶液的酸度控制在適當(dāng)?shù)姆秶鷥?nèi) 便顯色劑只與被測組分反應(yīng)而不與干擾離子顯色 3 改變干擾離子的價態(tài) 有些干擾離子在某一價態(tài)時與顯色劑反應(yīng)生成有色化合物 而在另一價態(tài)則無此種反應(yīng) 在這種情況下 利用氧化還原反應(yīng)使干擾離子改變價態(tài) 以消除干擾 4 控制測量條件 如入射光的波長 空白溶液等 以消除某些干擾離子的影響 5 采用適當(dāng)?shù)姆蛛x方法將干擾離子分離 4 7分光光度法的應(yīng)用 2 7 1定性鑒定2 7 2定量測定微量成份分光光度法被廣泛的應(yīng)用在各個領(lǐng)域 環(huán)境 醫(yī)藥 石油等測定無機 有機微量成份 由于操作簡單 儀器廉價 一般說是常用的首選方法 1 磷鉬蘭法測定核酸中的磷 max 660nm 2 鐵的測定 pH控制在5 6 最大吸收在 max 512nm 1 1 104L mol 1 cm 1 4 7 3配合物的組成比的測定 1 摩爾比法 飽和法 2 等摩爾連續(xù)變化法 Job法 4 7 4光度滴定法 依據(jù)滴定過程中被滴定溶液的吸光度突變來確定滴定終點的方法 只要滴定溶液中被測物質(zhì) 滴定劑 產(chǎn)物任意物質(zhì)在紫外 可見有吸收都可作為判別依據(jù) 4 7 5差示分光光度法 普通分光光度法一般只適于測定微量組分 當(dāng)待測組分含量較高時 將產(chǎn)生較大的誤差 需采用差示法 即提高入射光強度 并采用濃度稍低于待測溶液濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比溶液 設(shè) 待測溶液濃度為cx 標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為cs cs cx 則 Ax bcxAs bcs A x s b cx cs b c測得的吸光度相當(dāng)于普通法中待測溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度之差 差示法測得的吸光度與 c呈直線關(guān)系 由標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得相應(yīng)的 c值 則待測溶液濃度cx cx cs c 接紫外部分