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1、項目項目DNA連接酶連接酶DNA聚合酶聚合酶作用實質作用實質都是催化兩個核苷酸之間形成都是催化兩個核苷酸之間形成_是否需模板是否需模板_作用過程作用過程在兩個在兩個DNA片段之間片段之間形成磷酸二酯鍵形成磷酸二酯鍵將將_加到已加到已存在的核酸片段上，形存在的核酸片段上，形成磷酸二酯鍵成磷酸二酯鍵作用結果作用結果將存在的將存在的DNA片段連片段連接成重組接成重組DNA分子分子合成新的合成新的_磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵不需要不需要需要需要單個核苷酸單個核苷酸DNA分子分子便于重組便于重組DNA的鑒定和選擇的鑒定和選擇具有特殊的標記基因具有特殊的標記基因可攜帶多個或多種外源基因可攜帶多個或多種外源基因有
2、一個至多個限制性核酸有一個至多個限制性核酸內切酶切割位點內切酶切割位點目的基因穩(wěn)定存在且數(shù)量可擴大目的基因穩(wěn)定存在且數(shù)量可擴大穩(wěn)定并能復制穩(wěn)定并能復制適應性適應性條件條件形成單個形成單個脫氧核苷脫氧核苷酸酸形成新的形成新的DNA分子分子形成重組形成重組DNA分子分子形成粘性形成粘性末端或平末端或平末端末端作用作用結果結果切割磷酸切割磷酸二酯鍵二酯鍵形成磷酸形成磷酸二酯鍵二酯鍵形成磷酸形成磷酸二酯鍵二酯鍵切割磷酸切割磷酸二酯鍵二酯鍵作用作用部位部位DNA 分子分子 脫氧核苷脫氧核苷酸酸DNA分子分子片段片段DNA分子分子作用作用底物底物DNA酶酶DNA聚合聚合酶酶DNA連接連接酶酶限制性核限制性
3、核酸內切酶酸內切酶比較比較項目項目Ca2處理細胞處理細胞感受態(tài)細胞感受態(tài)細胞重重組表達載體與感組表達載體與感受態(tài)細胞混合受態(tài)細胞混合感受態(tài)細胞吸收感受態(tài)細胞吸收DNA分子分子將含有目的基因將含有目的基因的表達載體提純的表達載體提純取卵取卵(受精卵受精卵)顯微注射顯微注射受精受精卵發(fā)育卵發(fā)育獲得具獲得具有新性狀的動物有新性狀的動物將目的基因插入到將目的基因插入到Ti質粒的質粒的TDNA上上農桿菌農桿菌導入植物細導入植物細胞胞整合到受體細胞整合到受體細胞的染色體的染色體DNA上上表達表達轉化轉化過程過程原核細胞原核細胞受精卵受精卵體細胞體細胞受體受體細胞細胞感受態(tài)細胞法感受態(tài)細胞法顯微注射技術顯微注射技術農桿菌轉化法農桿菌轉化法常用常用方法方法微生物細胞微生物細胞動物細胞動物細胞植物細胞植物細胞生物生物種類種類
高考生物一輪復習 第一講 基因工程課件 浙教版選修3
