血型鑒定常見的疑難問題分析及處理PPT課件

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2020 3 4 1 血型鑒定常見的疑難問題分析及處理 2020 3 4 2 概述 隨著輸血醫(yī)學(xué)的發(fā)展 輸血安全問題日益引起各方面的關(guān)注 輸血安全主要體現(xiàn)在兩方面內(nèi)容 一是經(jīng)血傳播疾病問題 二是血液免疫學(xué)方面的問題即血型血清方面的問題 2020 3 4 3 概述 血型血清學(xué)不同于一般的臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn) 有其自身特點(diǎn) 一般臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的工作流程十分明了 即接受臨床醫(yī)生的申請(qǐng) 按各項(xiàng)檢驗(yàn)的操作規(guī)程完成其申請(qǐng)內(nèi)容并反饋結(jié)果 而血型血清學(xué)方面的檢查則與此有很大的不同 臨床醫(yī)生及各醫(yī)院輸血科向血站和血液中心血型參比實(shí)驗(yàn)室提出的檢測(cè)申請(qǐng)不外有以下幾種情況 2020 3 4 4 血型參比實(shí)驗(yàn)室涉及的檢測(cè)內(nèi)容 血型鑒定困難交叉配血困難輸血反應(yīng)原因分析其它 如母嬰血型不合新生兒溶血病檢測(cè) coombs試驗(yàn) 血小板抗體檢測(cè)等 2020 3 4 5 ABO血型常規(guī)定型方法 玻片法 紙片法試管法微量板法微柱凝集法 2020 3 4 6 疑難血型鑒定常用的輔助實(shí)驗(yàn) 吸收試驗(yàn)放散試驗(yàn) 常用熱放散 DTT 二硫蘇糖醇 處理自身凝集紅細(xì)胞唾液血型物質(zhì)測(cè)定 中和試驗(yàn) 分子生物學(xué)技術(shù)進(jìn)行基因型檢測(cè) 2020 3 4 7 血型血清學(xué)的工作特點(diǎn) 鑒定技術(shù)因不同情況而異 沒有一個(gè)固定的格式 因此在試驗(yàn)過程中隨時(shí)分析試驗(yàn)結(jié)果 選擇最有效的方案 程序 是必要的 血型參比實(shí)驗(yàn)室必須全面分析病歷情況 有選擇的運(yùn)用相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)手段來解決問題 另外在接受檢測(cè)申請(qǐng)時(shí) 還應(yīng)詳細(xì)了解患者的既往史 性別 年齡 民族 臨床診斷及臨床癥狀和患者的輸血史和用藥史 如女性已婚患者還應(yīng)詢問其妊娠史 這些都對(duì)解決問題至關(guān)重要 2020 3 4 8 血型血清學(xué)的工作特點(diǎn) 例如 對(duì)于白血病患者 應(yīng)考慮到由于疾病原因而引起血型抗原減弱的可能性 對(duì)消化系統(tǒng)的疾病的患者應(yīng)考慮到由于產(chǎn)生 類B物質(zhì) 而導(dǎo)致血型鑒定錯(cuò)誤的可能性 對(duì)于多次輸血的患者應(yīng)考慮其體內(nèi)產(chǎn)生免疫性抗體的可能性 等等 2020 3 4 9 疑難血型鑒定 共同特點(diǎn) 正反定型不 2020 3 4 10 ABO血型正反定型不符及其原因 1 技術(shù)和管理錯(cuò)誤2 正定型 紅細(xì)胞自身相關(guān)問題3 反定型 血清自身相關(guān)問題 2020 3 4 11 一 技術(shù)和管理錯(cuò)誤 1 標(biāo)本或試劑搞錯(cuò) 造成假陽性或假陰性結(jié)果 2 器材不潔產(chǎn)生假陽性結(jié)果 3 試劑污染或失效產(chǎn)生假陽性或假陰性結(jié)果 4 離心過度或不足 產(chǎn)生假陽性或假陰性結(jié)果 2020 3 4 12 一 技術(shù)和管理錯(cuò)誤 5 陽性反應(yīng)產(chǎn)生溶血現(xiàn)象未能識(shí)別 導(dǎo)致假陰性結(jié)果 6 漏加試劑 產(chǎn)生假陰性結(jié)果 7 結(jié)果記錄或判斷錯(cuò)誤 產(chǎn)生假陽性或假陰性結(jié)果 8 細(xì)胞與血清比例不適當(dāng) 產(chǎn)生假陽性或假陰性結(jié)果 2020 3 4 13 二 正定型 紅細(xì)胞自身相關(guān)問題 1 紅細(xì)胞致敏直接抗球蛋白試驗(yàn)陽性的紅細(xì)胞 如自身免疫性溶血性貧血患者的紅細(xì)胞 在含高蛋白介質(zhì)的試劑中可發(fā)生凝集 產(chǎn)生假陽性結(jié)果 2 異?；蛐虯BO亞型的弱抗原常規(guī)方法難以檢出 產(chǎn)生假陰性結(jié)果 3 Cis AB型 順式AB型 指從父母的一方同時(shí)得到A和B基因在一條染色體上 而另一條染色體上是從父母中另一方來的O基因 順式AB細(xì)胞的B抗原較弱 類似B3亞型 2020 3 4 14 二 正定型 紅細(xì)胞自身相關(guān)問題 4 嵌合體血型體內(nèi)有兩群紅細(xì)胞 定型時(shí)顯示 混合外觀凝集 現(xiàn)象 也可見于ABO不同型的骨髓移植術(shù)后 真正的嵌合體非常少見 可出現(xiàn)于雙胞胎 在胚胎期由于血管的吻合使得2個(gè)胎兒的血液發(fā)生混合 2種血液都被機(jī)體認(rèn)做自我 不產(chǎn)生抗體 人工嵌合狀態(tài)可出現(xiàn)于輸血后 如O型紅細(xì)胞輸給A或B型人 骨髓移植術(shù)后 交換輸血及母體 胎兒出血 2020 3 4 15 二 正定型 紅細(xì)胞自身相關(guān)問題 5 疾病因素導(dǎo)致抗原減弱常見的如白血病 何杰金病 10號(hào)染色體轉(zhuǎn)位 紅細(xì)胞系統(tǒng)極度增生如海洋性貧血等病人ABO血型抗原可受到暫時(shí)抑制 抗原減弱檢出困難 紅細(xì)胞ABO抗原減弱與病程有關(guān) 病情緩解時(shí)抗原性會(huì)恢復(fù) 6 紅細(xì)胞多凝集現(xiàn)象當(dāng)病人感染細(xì)菌或病毒后 病毒或細(xì)菌產(chǎn)生的酶使紅細(xì)胞上掩蔽的T抗原暴露激活 由于正常人血清中都含有抗 T抗體 因此可與正常人血清產(chǎn)生凝集反應(yīng) 正定型試驗(yàn)假陽性 2020 3 4 16 二 正定型 紅細(xì)胞自身相關(guān)問題 7 獲得性類B由于革蘭氏陰性桿菌的作用 紅細(xì)胞可獲得 類B 的活性 腸梗阻 結(jié)腸 直腸癌或其他下消化道疾病時(shí)腸壁通透性增加 細(xì)菌多糖入血 使A型患者出現(xiàn)獲得性類B現(xiàn)象 8 可溶性血型物質(zhì)增多胃或胰腺惡性腫瘤患者血清中可能含有過多的可溶性血型物質(zhì) 這些物質(zhì)中和抗A B 血清從而影響正定型結(jié)果 2020 3 4 17 二 正定型 紅細(xì)胞自身相關(guān)問題 9 紅細(xì)胞發(fā)生自凝現(xiàn)象患者血清中的高效價(jià)自身冷凝集素使紅細(xì)胞發(fā)生凝集 10 近期輸血曾異型輸血 使病人血液標(biāo)本成為不同型別的紅細(xì)胞混合物 定型時(shí)顯示 混合外觀凝集 現(xiàn)象 2020 3 4 18 三 反定型 血清自身相關(guān)問題 1 血漿置換治療后近期內(nèi)進(jìn)行大量的血漿置換治療 影響抗體效價(jià) 造成反定型困難 2 異常的血漿蛋白病人血漿中異常的白蛋白 球蛋白比例和高濃度的纖維蛋白原等能導(dǎo)致緡錢狀形成 造成假凝集現(xiàn)象 多見于如多發(fā)性骨髓瘤 巨球蛋白血癥 何杰金淋巴瘤 嚴(yán)重的肝病等患者 3 高分子聚合物的影響血漿增容劑 葡聚糖 PVP等 也會(huì)引起緡錢狀凝集導(dǎo)致假陽性結(jié)果 2020 3 4 19 三 反定型 血清自身相關(guān)問題 4 不規(guī)則抗體或自身冷凝集素的存在受檢者血漿中含有ABO血型抗體以外的IgM類不規(guī)則抗體與試劑A B O細(xì)胞上的相應(yīng)抗原起反應(yīng) 5 低丙種球蛋白血癥低丙種球蛋白血癥病例 如白血病 淋巴瘤及使用免疫抑制劑的患者 先天丙種球蛋白缺乏的患者 免疫缺陷的患者 可能會(huì)因免疫球蛋白水平全面下降使血清定型時(shí)不見凝集或僅見弱凝集反應(yīng) 2020 3 4 20 三 反定型 血清自身相關(guān)問題 6 年齡因素在未產(chǎn)生自己抗體的嬰兒 由母親被動(dòng)獲得抗體的嬰兒 或抗體水平下降的老人 試驗(yàn)時(shí)可出現(xiàn)不見凝集或僅見弱凝集反應(yīng)等異常結(jié)果 7 骨髓移植術(shù)后ABO不同型骨髓移植患者術(shù)后 8 纖維蛋白原的影響使用血漿或凝固不完全的血清會(huì)形成很小的纖維蛋白凝集包裹的紅細(xì)胞凝塊 2020 3 4 21 小結(jié) 一 一 紅細(xì)胞抗原增多 額外的反應(yīng) 的原因紅細(xì)胞致敏 直接抗人球蛋白試驗(yàn)陽性 紅細(xì)胞多凝集現(xiàn)象紅細(xì)胞發(fā)生自凝現(xiàn)象獲得性類B其它 近期異型輸血 嵌合體血型二 紅細(xì)胞抗原減弱的原因異?；蛐?ABO亞型等 Cis AB型 順式AB型 疾病因素導(dǎo)致抗原減弱 常見于白血型等血液病患者 可溶性血型物質(zhì)增多 常見于胃或胰腺惡性腫瘤患者 2020 3 4 22 小結(jié) 二 三 血型抗體增多 額外的反應(yīng) 的原因異常的血漿蛋白 串錢狀假凝集 多見于如多發(fā)性骨髓瘤 巨球蛋白血癥 何杰金淋巴瘤 嚴(yán)重的肝病等患者 高分子聚合物的影響 血漿增容劑 葡聚糖 PVP等 也會(huì)引起緡錢狀凝集導(dǎo)致假陽性結(jié)果 不規(guī)則抗體或自身冷凝集素的存在纖維蛋白原的影響 2020 3 4 23 小結(jié) 三 四 血型抗體減弱的原因血漿置換治療后低丙種球蛋白血癥年齡因素 嬰兒 老年人抗體水平低 骨髓移植術(shù)后 2020 3 4 24 正反定型不符一般處理程序 一 詢問 查閱病史患者的年齡患者的病史患者的近期輸血史患者的近期用藥史患者是否進(jìn)行了骨髓移植患者以前的血型患者是否進(jìn)行過血漿置換術(shù) 2020 3 4 25 正反定型不符一般處理程序 二 使用試管法重做試驗(yàn)并判斷可能的原因試管法定型的優(yōu)點(diǎn)1 可以反復(fù)離心看結(jié)果 2 可以隨意延長抗原抗體反應(yīng)時(shí)間 可以改變反應(yīng)溫度 4 37 孵育 有利于弱抗原 抗體的檢出或排除冷凝集素的干擾 3 可以觀察紅細(xì)胞混合外觀現(xiàn)象 4 可以觀察紅細(xì)胞溶血現(xiàn)象 2020 3 4 26 ABO定型常見問題的解決方法 ABO亞型 正定 抗 A 抗 B 抗 AB 抗 A1 抗 H 反定 A1c A2c Bc Oc 自身對(duì)照 正反定型在不同溫度下反應(yīng)并比較凝集強(qiáng)度的變化 吸收放散試驗(yàn) 唾液血型物質(zhì)檢測(cè) 有條件者可作家系調(diào)查或PCR檢測(cè)血型基因 2020 3 4 27 2020 3 4 28 ABO定型常見問題的解決方法 A B抗原減弱 延長孵育時(shí)間 4 孵育 酶處理紅細(xì)胞 吸收放散試驗(yàn) 唾液血型物質(zhì)檢測(cè) 既往血型調(diào)查 2020 3 4 29 ABO定型常見問題的解決方法 抗體減弱 延長孵育時(shí)間 4 孵育 酶處理試劑紅細(xì)胞 既往血型調(diào)查 免疫球蛋白水平測(cè)定 2020 3 4 30 ABO定型常見問題的解決方法 冷自身抗體 將血清和紅細(xì)胞分別在37孵育后再混合 用37 溫鹽水洗滌紅細(xì)胞 45 熱放散3分鐘 巰基試劑 DTT 處理紅細(xì)胞 自身吸收去除血清中的自身冷抗體 2020 3 4 31 ABO定型常見問題的解決方法 室溫反應(yīng)的同種抗體 用譜細(xì)胞做抗體鑒定 選擇沒有相應(yīng)抗原的A B細(xì)胞做反定型 2020 3 4 32 ABO定型常見問題的解決方法 獲得性B紅細(xì)胞 詢問病史 酸化抗 B血清 pH6 0 唾液型物質(zhì)檢測(cè) 家系調(diào)查證明沒有遺傳基礎(chǔ) 2020 3 4 33 ABO定型常見問題的解決方法 混合視野凝集 ABO亞型 A3 B3亞型等 ABO不同型輸血 非O型人近期輸入O型血 詢問近期輸血史 毛細(xì)管離心分離自身紅細(xì)胞等 ABO不同型骨髓移植術(shù)后 單合子的相嵌紅細(xì)胞 雙合子交移體紅細(xì)胞 2020 3 4 34 ABO定型常見問題的解決方法 致敏紅細(xì)胞造成的假陽性洗滌后的壓積受檢紅細(xì)胞于56 水浴放散10分鐘 直至直抗試驗(yàn)陽性結(jié)果明顯減弱或消失 再次洗滌放散后的細(xì)胞用于正定型試驗(yàn) 2020 3 4 35 ABO定型常見問題的解決方法 緡錢狀凝集 洗滌紅細(xì)胞 鹽水替代試驗(yàn) 前帶現(xiàn)象 稀釋血清后再做試驗(yàn) 2020 3 4 36 疑難血型舉例 2020 3 4 37 2020 3 4 38 2020 3 4 39 2020 3 4 40 2020 3 4 41 2020 3 4 42 2020 3 4 43 2020 3 4 44 2020 3 4 45 2020 3 4 46 2020 3 4 47 2020 3 4 48 ABO血型結(jié)果解釋與應(yīng)用 指導(dǎo)選擇血液 正常表達(dá)可分為 A B AB O 原則上同型輸血 特殊情況采用配合型輸血 以洗滌細(xì)胞為佳 患者輸血血型的選擇 2020 3 4 49 ABO血型結(jié)果解釋與應(yīng)用 ABO血型系統(tǒng)特殊表達(dá)的血型ABO血型亞型 亞型是指屬同一血型抗原 但抗原結(jié)構(gòu)和性能或抗原位點(diǎn)數(shù)有一定差異 如A1 A2 A3 B3 Ax Bx Am Bm Ael Bel 以及相應(yīng)的AB亞型如A3B AxB ABx ABel等 輸血時(shí)血型的選擇 除非患者血清中存在37 下有反應(yīng)活性的抗 A1 B1抗體 否則無必要同亞型輸血 一般采用同類抗原血型或O型洗滌細(xì)胞輸注則可 如A亞型輸A型血 B亞型輸B型血 AB亞型輸AB型血 2020 3 4 50 ABO血型結(jié)果解釋與應(yīng)用 ABO血型系統(tǒng)其它特殊表達(dá)的血型孟買型 以O(shè)h表示 此型特點(diǎn)是紅細(xì)胞上缺乏A B H抗原 血清中同時(shí)存在抗A 抗B和抗H 輸血時(shí)血型的選擇 首選同型血輸注 當(dāng)抗H在37 無活性時(shí)可輸配血相合的O型紅細(xì)胞 2020 3 4 51 ABO血型結(jié)果解釋與應(yīng)用 ABO血型系統(tǒng)其它特殊表達(dá)的血型類孟買型 特點(diǎn)是紅細(xì)胞上缺乏H抗原 可檢出微量的A或B抗原 血清中同時(shí)存在抗A 抗B和抗H 以Ah Bh ABh等表示 輸血時(shí)血型的選擇 首選同型血輸注 當(dāng)抗H在37 無活性時(shí)可輸配血相合的同類抗原血型血液 如Ah可輸注A型血 Bh可輸B型血 2020 3 4 52 謝謝