動(dòng)物墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)方法 編制說明

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編制說明 項(xiàng)目名稱：動(dòng)物墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)方法 項(xiàng)目編號(hào)： 內(nèi)質(zhì)監(jiān)標(biāo)函（2018）154號(hào)-107號(hào) 編制單位： 呼和浩特海關(guān) 編制時(shí)間： 2018.6-2019.12 一、 工作簡(jiǎn)況 本標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)《關(guān)于下達(dá)2018年第一批內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂項(xiàng)目計(jì)劃的通知》[內(nèi)質(zhì)監(jiān)標(biāo)函（2018）154號(hào)]，本標(biāo)準(zhǔn)是由呼和浩特海關(guān)提出并歸口，項(xiàng)目計(jì)劃編號(hào)為107號(hào)。呼和浩特海關(guān)牽頭成立由相關(guān)領(lǐng)域的專業(yè)技術(shù)人員和具有標(biāo)準(zhǔn)化專業(yè)知識(shí)的人員組成的標(biāo)準(zhǔn)起草組。起草組在充分調(diào)查研究、綜合分析和試驗(yàn)驗(yàn)證的基礎(chǔ)上，起草標(biāo)準(zhǔn)初稿和編制說明，并廣泛征求意見。對(duì)意見進(jìn)行匯總整理，修改完善標(biāo)準(zhǔn)初稿，形成地方標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿。 第一起草單位：中華人民共和國(guó)呼和浩特海關(guān)；第二起草單位：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)；第三起草單位：鄂爾多斯市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心；第四起草單位：內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院。主要起草人：趙治國(guó)、郭曉宇、張曉東、敖威華、王海艷、崔強(qiáng)、陳林軍、延涵、李軍燕、羅曉平。 二、標(biāo)準(zhǔn)制定的背景及意義 動(dòng)物墊料與動(dòng)物關(guān)系密切。近年來隨著生物科學(xué)研究的飛速發(fā)展，動(dòng)物作為其研究中不可缺少的重要組成部分，備受各國(guó)政府的重視和科學(xué)家的關(guān)注。墊料是為動(dòng)物營(yíng)造舒適的人工環(huán)境，進(jìn)行環(huán)境控制的基礎(chǔ)條件和必要材料，是對(duì)動(dòng)物產(chǎn)生直接作用和影響的環(huán)境因素。動(dòng)物墊料與動(dòng)物健康、福利息息相關(guān)，同時(shí)也對(duì)養(yǎng)殖業(yè)、動(dòng)物及其相關(guān)科研方面甚至社會(huì)經(jīng)濟(jì)發(fā)展有十分重大的影響。因此，墊料的質(zhì)量評(píng)定與控制非常必要。 我國(guó)動(dòng)物墊料標(biāo)準(zhǔn)化、商品化尚處于初級(jí)階段。歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家早已實(shí)行墊料商品化生產(chǎn)，有專業(yè)的工廠，并且各道工序的質(zhì)量要求非常嚴(yán)格。但我國(guó)對(duì)動(dòng)物墊料的研究還處于初級(jí)階段，與墊料相關(guān)的文獻(xiàn)報(bào)道甚少，墊料生產(chǎn)監(jiān)管環(huán)節(jié)薄弱，檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)缺乏。近年來我國(guó)政府及從業(yè)人員逐漸認(rèn)識(shí)到動(dòng)物墊料中存在的問題，開始對(duì)墊料質(zhì)量評(píng)價(jià)方面的問題進(jìn)行改進(jìn)。因此要想使動(dòng)物的質(zhì)量管理與國(guó)際接軌，動(dòng)物墊料生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)化就顯得至關(guān)重要。 我國(guó)動(dòng)物墊料標(biāo)準(zhǔn)化和質(zhì)量管理相對(duì)滯后，影響相關(guān)行業(yè)發(fā)展。我國(guó)對(duì)動(dòng)物墊料的研究才剛剛起步，現(xiàn)行的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物相關(guān)管理?xiàng)l例中，對(duì)動(dòng)物墊料的標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)定幾乎空白，稀數(shù)資料對(duì)于墊料的規(guī)定只有：應(yīng)選用吸濕性好、塵埃少、無異味、無毒性、無油脂的材料；須經(jīng)消毒、滅菌后方可使用。如此籠統(tǒng)的規(guī)定在一定程度上制約了我國(guó)動(dòng)物墊料標(biāo)準(zhǔn)不能緊跟國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)限制了藥品、生物制品、動(dòng)物等產(chǎn)品的出口，還使科研論文將不能被同行接受。因此要想提高相關(guān)學(xué)科競(jìng)爭(zhēng)力，就必須加強(qiáng)墊料標(biāo)準(zhǔn)化和質(zhì)量管理，從動(dòng)物墊料微生物指標(biāo)監(jiān)測(cè)入手。 我國(guó)動(dòng)物墊料微生物檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)幾乎空白，亟待建立相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。近年來，我國(guó)政府及從業(yè)人員逐漸認(rèn)識(shí)到動(dòng)物墊料對(duì)動(dòng)物健康及下游產(chǎn)業(yè)的重大意義，墊料相關(guān)研究報(bào)道逐年增多，積累了一定的理論基礎(chǔ)。但目前，我國(guó)尚未對(duì)國(guó)內(nèi)墊料質(zhì)量建立統(tǒng)一評(píng)價(jià)體系、風(fēng)險(xiǎn)分析、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)及配套法規(guī)。其中，墊料中微生物特別是致病微生物的含量對(duì)動(dòng)物健康、福利和產(chǎn)品等影響重大，但目前動(dòng)物墊料中微生物檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)屬于空白，亟待建立科學(xué)完善的動(dòng)物墊料微生物檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，該工作將對(duì)國(guó)內(nèi)墊料建立統(tǒng)一質(zhì)量評(píng)價(jià)體系、風(fēng)險(xiǎn)分析及產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)等有力促進(jìn)。 動(dòng)物墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌對(duì)動(dòng)物的危害極大。動(dòng)物墊料單核細(xì)胞增生李斯特氏菌是影響動(dòng)物健康和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的國(guó)際公認(rèn)的重要環(huán)境因素之一，因此動(dòng)物墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的檢測(cè)十分重要。該菌廣泛存在于自然界中，在4℃的環(huán)境中仍可生長(zhǎng)繁殖，已知牛、羊等40多種哺乳動(dòng)物與20多種禽類可被該菌感染，可從魚類、蜱類、蠅類及甲殼動(dòng)物分離該菌并可引起多種動(dòng)物發(fā)病，是反芻動(dòng)物腦炎及流產(chǎn)的常見原因。同樣，該菌對(duì)公共衛(wèi)生意義重大，WHO將其列為21世紀(jì)四大食源性致病菌之一。1%～5%的正常人及10%～20%的屠宰場(chǎng)工作人員為無癥狀腸道帶菌，病菌由消化道排出，廣泛污染泥土、水及周圍環(huán)境。該菌感染能引起人畜李斯特氏菌病，感染后主要表現(xiàn)為敗血癥、腦膜炎和單核細(xì)胞增多。2014年7月，國(guó)家風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中心開展的單增李斯特氏菌(L. monocytogenes)感染病例監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，監(jiān)測(cè)病例數(shù)7534人，陽性病例14人。 建立動(dòng)物墊料單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，保障動(dòng)物健康急不可待。動(dòng)物墊料與動(dòng)物糞便直接接觸，容易滋生細(xì)菌，從而威脅動(dòng)物的健康與福利，并且對(duì)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展與國(guó)際間動(dòng)物及產(chǎn)品貿(mào)易帶來巨大的影響，甚至威脅到人類社會(huì)的生產(chǎn)與生活。但是對(duì)于動(dòng)物墊料單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)幾乎空白，還沒有統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)和方法，所以建立動(dòng)物墊料單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)已刻不容緩。 本實(shí)驗(yàn)室具有多年微生物檢測(cè)的經(jīng)驗(yàn)，本方法的開發(fā)和應(yīng)用，在檢測(cè)技術(shù)方面填補(bǔ)我區(qū)的空白、彌補(bǔ)了自治區(qū)沒有現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)的不足，能夠使動(dòng)物墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的檢測(cè)更加高效、準(zhǔn)確、安全。本方法的開發(fā)和應(yīng)用將會(huì)使我區(qū)在動(dòng)物墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的檢測(cè)先進(jìn)性方面達(dá)到國(guó)內(nèi)領(lǐng)先水平，為我區(qū)動(dòng)物墊料質(zhì)量安全管理部門更快更好的管控提供可靠保障。因此，加強(qiáng)動(dòng)物墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的檢測(cè)對(duì)確保全區(qū)農(nóng)業(yè)持續(xù)、健康發(fā)展具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。 三、主要起草過程 2018.06-2018.09 地標(biāo)前期基礎(chǔ)工作：收集動(dòng)物墊料樣本，查閱單核細(xì)胞增生李斯特氏菌資料，檢索單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)的相關(guān)文獻(xiàn)及標(biāo)準(zhǔn)。 2018.10-2019.09 前期實(shí)驗(yàn)條件的摸索：包括前處理方法的優(yōu)化、對(duì)照，不同墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的檢出率，最終確定實(shí)驗(yàn)方案，編寫編制說明。 2019.10-2019.11 驗(yàn)證單位進(jìn)行驗(yàn)證。 2019.12 編寫地標(biāo)并定初稿。 四、現(xiàn)行法律、法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系 本標(biāo)準(zhǔn)遵循GB/T 1.1-2009 《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫》和GB/T 20001.4-2015 《標(biāo)準(zhǔn)編寫規(guī)則 第4部分：試驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)》的規(guī)則編寫。還參照相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)編寫指南的要求。 在編制本標(biāo)準(zhǔn)的過程中參考了以下標(biāo)準(zhǔn)：ISO 11290-1:2017 《Microbiology of the food chain-Horizontal method for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes and of Listeria spp. Part 1: Detection method》、 AOAC Official Method 993.12《Listeria monocytogenes in Milk and Dairy Products》、FDA Bacteriological Analytical Manual Chapter 10《Detection ofListeria monocytogenesin Foods and Environmental Samples, and Enumeration ofListeria monocytogenesin Foods》、GB 14925-2010《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境及設(shè)施》、GB 4789.30-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)》、GB/T 33682 基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜鑒別微生物方法通則、GB/T 22429《食品中沙門氏菌、腸出血性大腸埃希氏菌O157及單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的快速篩選檢驗(yàn) 酶聯(lián)免疫法》、NY/T 1902-2010《飼料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌的微生物學(xué)檢驗(yàn)》。綜合參考了國(guó)內(nèi)外與單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)相關(guān)的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，力求該標(biāo)準(zhǔn)能夠高效準(zhǔn)確的檢測(cè)墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌，同時(shí)兼顧標(biāo)準(zhǔn)的廣泛應(yīng)用。 本標(biāo)準(zhǔn)完全符合現(xiàn)行法律法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，不存在任何與現(xiàn)行法律法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)相違背之處。相關(guān)強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)2項(xiàng)：GB 14925-2010 《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 環(huán)境及設(shè)施》，本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)設(shè)備和環(huán)境的技術(shù)要求及檢測(cè)方法，同時(shí)規(guī)定了墊料、飲水和籠具的原則要求。但針對(duì)墊料該標(biāo)準(zhǔn)僅規(guī)定了“墊料的材質(zhì)應(yīng)符合動(dòng)物的健康和福利要求，應(yīng)滿足吸濕性好、塵埃少、無異味、無毒性、無油脂、耐高溫、耐高壓等條件；墊料必須經(jīng)滅菌處理后方可使用” 。GB 4789.30-2016《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)》。本地標(biāo)適用于墊料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)，明確規(guī)定了不同類別墊料取樣方法，標(biāo)準(zhǔn)中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌鑒定過程增加了新的鑒定手段，確保檢測(cè)結(jié)果更加準(zhǔn)確。 5、 主要內(nèi)容及檢測(cè)方法的確定 5.1 取樣方法的確定及優(yōu)化 根據(jù)動(dòng)物墊料的物理性狀將其分為顆粒狀/粉末狀墊料和平面狀墊料，針對(duì)不同性狀的墊料采取不同的取樣方法。 5.1.1 顆粒狀或粉末墊料樣品取樣方法 國(guó)內(nèi)外食品和飼料中單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)法中常用的取樣方法為稱取法，本標(biāo)準(zhǔn)中針對(duì)顆粒狀或粉末墊料樣品（木屑、玉米芯、秸稈、紙屑等）參考通用做法采用稱取25 g的方法進(jìn)行取樣。 5.1.2 平面墊料樣品取樣方法 針對(duì)平面墊料（膠墊、托盤等）采用表面涂抹取樣法，無菌操作將涂抹25 cm2-100 cm2平面樣品的棉拭子置入裝有 25 mL-100 mL 磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌容器中，混勻作為原液。 5.2 稀釋液和培養(yǎng)基的選擇 5.2.1 預(yù)增菌稀釋液的選擇 國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)和資料中用到的預(yù)增菌稀釋液主要有：緩沖李斯特氏菌增菌肉湯(BLEB)、Fraser增菌肉湯、胰酪胨大豆酵母浸膏肉湯（TSB-YE）、UVM肉湯、李氏增菌肉湯（LB）等液體培養(yǎng)基，除UVM肉湯抑制非目標(biāo)菌的作用稍差一點(diǎn)，其它幾種增菌液效果差異不明顯。墊料中營(yíng)養(yǎng)成分不豐富，存在的單核細(xì)胞增生李斯特氏菌容易以亞損傷狀態(tài)存在，如果用抑菌作用太強(qiáng)的液體培養(yǎng)基進(jìn)行一步增菌，容易導(dǎo)致目標(biāo)菌死亡，因此，本方法選擇使用 Fraser肉湯基礎(chǔ)，分別添加了不同量的吖啶黃素、萘啶酮酸（具有抑菌作用）制成Half Fraser肉湯和Fraser肉湯，進(jìn)行2步液體增菌，同時(shí)抑制非目標(biāo)菌增殖。另外，該增菌液添加了七葉苷和檸檬酸鐵銨，李斯特氏菌可以水解七葉苷，與培養(yǎng)基中的鐵離子反應(yīng)，使培養(yǎng)基變黑，可直觀的從培養(yǎng)液的顏色就可以判斷是否有李斯特氏菌的生長(zhǎng)。 5.2.2 分離培養(yǎng)基 國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)常用的分離培養(yǎng)基為：牛津瓊脂（OXA）、PALCAM 瓊脂、單核細(xì)胞增生李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基和胰酪胨大豆酵母浸膏瓊脂（TSA-YE），前3種培養(yǎng)基均具有較好的選擇性，也是國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)常用的分離培養(yǎng)基，但單核細(xì)胞增生李斯特氏菌在OXA瓊脂和顯色培養(yǎng)基上的形態(tài)更易識(shí)別，TSA-YE培養(yǎng)基常用于該菌純培養(yǎng)。因此，本標(biāo)準(zhǔn)選用OXA瓊脂和單核細(xì)胞增生李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基用于分離培養(yǎng)，TSA-YE培養(yǎng)基用于純化培養(yǎng)。 5.3 典型或可疑菌落的鑒定 本標(biāo)準(zhǔn)對(duì)典型或可疑菌落的鑒定過程，參考了國(guó)內(nèi)外單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)和藥典等成熟做法，綜合了溶血試驗(yàn)、生化試驗(yàn)及輔助設(shè)備鑒定等必要鑒定過程，在傳統(tǒng)鑒定方法基礎(chǔ)上，將全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)鑒定法和飛行時(shí)間質(zhì)譜鑒定法增加到標(biāo)準(zhǔn)中，做到了與國(guó)際接軌，縮短檢測(cè)時(shí)間，增加檢測(cè)通量，提升檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確率，減少檢測(cè)人員工作量。 5.4 培養(yǎng)時(shí)間和溫度 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌在4 ℃~45 ℃均能生長(zhǎng)，最適生長(zhǎng)溫度30 ℃~37 ℃，國(guó)內(nèi)外多數(shù)標(biāo)準(zhǔn)均采用30 ℃1 ℃預(yù)增菌，在36 ℃1 ℃進(jìn)行選擇性瓊脂平板培養(yǎng)。本標(biāo)準(zhǔn)將繼續(xù)采用以上培養(yǎng)溫度對(duì)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌進(jìn)行檢測(cè)培養(yǎng)。本標(biāo)準(zhǔn)各種培養(yǎng)基培養(yǎng)時(shí)間也與國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)常用時(shí)間相統(tǒng)一。 5.5 其他 本標(biāo)準(zhǔn)增加了單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)過程中回避人員及相關(guān)生物安全措施，確保檢測(cè)工作中不造成人員感染，避免環(huán)境污染。 六、方法驗(yàn)證 為驗(yàn)證本方法的有效性和適用性，選擇5家不同行業(yè)的檢測(cè)機(jī)構(gòu)對(duì)本方法進(jìn)行驗(yàn)證，驗(yàn)證內(nèi)容為方法的適用性、準(zhǔn)確度、檢出率及相關(guān)樣品的檢測(cè)，結(jié)果顯示該方法穩(wěn)定可靠，符合相關(guān)要求。 七、結(jié)論 綜上所述，本標(biāo)準(zhǔn)在制定過程中所涉及到的各項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)均經(jīng)過方法學(xué)的驗(yàn)證，并切實(shí)可行，完全達(dá)到了編制標(biāo)準(zhǔn)的要求。 八、重大意見分歧的處理依據(jù)和結(jié)果 未發(fā)生。 九、國(guó)內(nèi)外情況簡(jiǎn)要說明 國(guó)內(nèi)尚沒有建立統(tǒng)一的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法。檢索國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)1項(xiàng)和地方標(biāo)準(zhǔn)3項(xiàng)：GB 14925-2010 《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 環(huán)境及設(shè)施》、江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)DB32/T 2129-2012 《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 墊料》、北京市地方標(biāo)準(zhǔn)DB11/T 1126-2014《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 墊料》和河北省地方標(biāo)準(zhǔn)DB13/T 2547-2017《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 墊料》。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道尚未發(fā)現(xiàn)內(nèi)蒙古自治區(qū)內(nèi)有相關(guān)單位從事這項(xiàng)研究。 10、 標(biāo)準(zhǔn)草稿征求意見情況匯總表 序號(hào) 意見 提出單位/專家 采納 不采納（說明原因） 1 建議在標(biāo)準(zhǔn)適當(dāng)位置增加“單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)流程圖”。 包頭海關(guān)技術(shù)中心（原包頭出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心）/張鵬翔 采納 2 建議將新型“飛行時(shí)間質(zhì)譜法”加入到標(biāo)準(zhǔn)。 赤峰海關(guān)技術(shù)中心（原赤峰出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心）/曹旭 采納 3 無修改建議。 二連浩特海關(guān)技術(shù)中心（原二連浩特出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心）/楊帆 4 無修改建議。 滿洲里海關(guān)技術(shù)中心（原滿洲里出入境檢驗(yàn)檢疫局技術(shù)中心）/楊東來 參考文獻(xiàn)： [1] GB/T 1.1-2009 標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則 第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則 [2] GB/T 20001.4-2015 標(biāo)準(zhǔn)編寫規(guī)則 第4部分：試驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn) [3] GB 14925-2010 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 環(huán)境及設(shè)施 [4] GB 4789.30-2016 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn) [5] SN/T 3872-2014 出口食品中四種致病菌檢測(cè)方法 MALDI-TOF-MS法 [6] SN/T 2552.12-2010 乳及乳制品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)方法 第12部分：?jiǎn)魏思?xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)與計(jì)數(shù) [7] 食品安全地方標(biāo)準(zhǔn) 阪崎腸桿菌和單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢測(cè)，DBS13/ 003-2015. 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