2019高考生物 核心考點特色突破 專題18 現(xiàn)代生物科技專題.doc

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專題18　現(xiàn)代生物科技專題 ◢考點概述 本專題知識是歷年高考的必考內(nèi)容，其中基因工程是當(dāng)前生命科學(xué)研究的熱點和前沿之一，基因診斷、基因治療、基因產(chǎn)品在人們生活中的出現(xiàn)日漸頻繁?；蚬こ痰脑?、技術(shù)與應(yīng)用是選修三的重要考點，且經(jīng)常與胚胎工程、微生物的培養(yǎng)、克隆技術(shù)、組織培養(yǎng)等知識進行綜合考查。動物細胞培養(yǎng)及應(yīng)用、植物組織培養(yǎng)與植物體細胞雜交在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用也是重要的考點?；蚬こ桃疾榛蚬こ趟玫降墓ぞ摺⒒蚬こ痰牟僮鬟^程、及基因工程的應(yīng)用分析；從考查形式上看，這部分因為是選考，所以一般以非選擇題形式出現(xiàn)，從命題趨勢上看，可以與基因診斷、基因治療、基因產(chǎn)品等生命科學(xué)的熱點和研究前沿結(jié)合，還可以與胚胎工程、微生物培養(yǎng)、克隆技術(shù)、組織培養(yǎng)等知識綜合考查。細胞工程主要集中在植物細胞的全能性、植物組織培養(yǎng)、植物體細胞雜交、動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合、單克隆抗體的制備及應(yīng)用等內(nèi)容上。從考查形式上看，多以非選擇題形式出現(xiàn)，注重與工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和醫(yī)學(xué)實踐的應(yīng)用及科技發(fā)展聯(lián)系在一起考查?？寺〖夹g(shù)、細胞工程、胚胎干細胞在生產(chǎn)、生活及醫(yī)療上的應(yīng)用等問題頻頻出現(xiàn)在近年的高考試題中。從考查形式看經(jīng)常以流程圖為載體，考查對各種生物技術(shù)及過程中相關(guān)概念的表達，試題考查內(nèi)容較淺，記憶性知識點較多。 ◢考點精講 【要點梳理】 1．基因工程的概念 （1）供體：提供目的基因。 （2）操作環(huán)境：體外。 （3）操作水平：分子水平。 （4）原理：基因重組。 （5）受體：表達目的基因。 （6）本質(zhì)：性狀在受體體內(nèi)的表達。 （7）優(yōu)點：克服遠緣雜交不親和的障礙，定向改造生物的遺傳性狀。 2．DNA重組技術(shù)的基本工具 （1）限制性核酸內(nèi)切酶（簡稱：限制酶） ①來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。 ②作用：識別特定的核苷酸序列并切開特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。 ③結(jié)果：產(chǎn)生黏性末端或平末端。 （2）DNA連接酶 ①種類：按來源可分為E?coli DNA連接酶和T4DNA連接酶。 ②作用：將雙鏈DNA片段“縫合”起來，恢復(fù)被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵。 ③DNA連接酶和限制酶的關(guān)系 （3）載體 ①種類：質(zhì)粒、λ噬菌體的衍生物、動植物病毒等。 ②質(zhì)粒的特點：能自我復(fù)制；有一個至多個限制酶切割位點；有特殊的標記基因。 3．基因工程的操作過程 （1）基因工程的操作步驟 ①獲取目的基因—a．從基因文庫中獲??；b．利用PCR技術(shù)擴增c．通過化學(xué)方法人工合成。 ②基因表達載體的構(gòu)建—a．目的基因；b．啟動子；c．終止子；d．標記基因。 ③將目的基因?qū)胧荏w細胞—a．植物：農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法；b．動物：顯微注射技術(shù)；c．微生物：感受態(tài)細胞法。 ④目的基因的檢測與鑒定—a．利用DNA分子雜交技術(shù)檢測目的基因的有無；b．利用分子雜交技術(shù)檢測目的基因的轉(zhuǎn)錄；c．利用抗原—抗體雜交技術(shù)檢測目的基因的翻譯；d．利用個體生物學(xué)水平的鑒定檢測重組性狀的表達。 （3）受精過程 ①精子穿越放射冠和透明帶：頂體反應(yīng)使頂體內(nèi)的酶釋放出來并溶解放射冠內(nèi)的卵丘細胞之間的物質(zhì)，透明帶反應(yīng)是防止多精入卵的第一道屏障。 ②精子進入卵細胞膜：卵細胞膜反應(yīng)是防止多精入卵的第二道屏障。 ③原核的形成：雄原核形成和雌原核形成。 ④合子形成：雌雄原核融合形成合子，即受精卵形成。 16．早期胚胎發(fā)育 （1）卵裂期 ①細胞分裂方式：有絲分裂； ②細胞數(shù)量增多，胚胎總體積不增加或略有縮小。 （2）桑椹胚 ①細胞數(shù)目為32個左右； ②細胞都具有全能性。 （3）囊胚 ①內(nèi)細胞團：發(fā)育為胎兒的各種組織； ②滋養(yǎng)層細胞：發(fā)育成胎膜和胎盤。 （4）原腸胚 ①外胚層：內(nèi)細胞團表層的細胞； ②內(nèi)胚層：內(nèi)細胞團下方的細胞。 17．體外受精 （1）卵母細胞的采集和培養(yǎng) ①超數(shù)排卵法：用促性腺激素處理后沖卵； ②直接采集法：從屠宰場已屠宰母畜的卵巢中采集或直接從活體動物的卵巢中吸取。 （2）精子的采集和獲能 ①采集：假陰道法、手握法、電刺激法； ②獲能：培養(yǎng)法、化學(xué)誘導(dǎo)法。 （3）受精：獲能的精子和培養(yǎng)成熟的卵子在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫饔谩? 18．胚胎的早期培養(yǎng) （1）目的：檢查受精狀況和受精卵的發(fā)育能力。 （2）培養(yǎng)液成分巧記 兩“鹽”：無機鹽和有機鹽；兩“素”：維生素和激素；兩“酸”：氨基酸和核苷酸另有水和血清等。 （3）胚胎處理：向受體移植或冷凍保存。 19．胚胎工程的應(yīng)用及前景 （1）胚胎移植 ①地位：胚胎工程其他技術(shù)的最后一道工序。 ②過程 ③意義：充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個體的繁殖潛能。 （2）胚胎分割 ①材料：發(fā)育良好，形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。 ②實質(zhì)：胚胎分割可增加動物后代，其實質(zhì)是動物的無性生殖即克隆。 ③分割要求：對囊胚分割時，要注意將內(nèi)細胞團均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進一步發(fā)育。 （3）胚胎干細胞 ①來源：早期胚胎或原始性腺。 ②特點：形態(tài)上，體積小、核大、核仁明顯；功能上具有發(fā)育的全能性；體外培養(yǎng)條件下可以增殖而不分化。 20．生態(tài)工程的基本原理 （1）物質(zhì)循環(huán)再生原理：物質(zhì)在生態(tài)系統(tǒng)中循環(huán)往復(fù)、分層分級利用。 （2）物種多樣性原理：物種繁多而復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)具有較高的抵抗力穩(wěn)定性。 （3）協(xié)調(diào)與平衡原理：處理好生物與環(huán)境的協(xié)調(diào)與平衡，需要考慮環(huán)境承載力。 （4）整體性原理：進行生態(tài)工程建設(shè)時，不但要考慮到自然生態(tài)系統(tǒng)的規(guī)律，更重要的是，還要考慮到經(jīng)濟和社會等系統(tǒng)的影響力。 （5）系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理：包括系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)決定功能原理和系統(tǒng)整體性原理。 【方法突破】 1．基因表達載體中啟動子、終止子的來源 （1）如果目的基因是從自然界中已有的物種中分離出來的，在構(gòu)建基因表達載體時，不需要在質(zhì)粒上目的基因的前后端接上特定的啟動子、終止子，因為目的基因中已含有啟動子、終止子。 （2）如果目的基因是通過人工方法合成的，或通過cDNA文庫獲得的，則目的基因是不含啟動子和終止子的。若只將基因的編碼序列導(dǎo)入受體生物中，目的基因沒有啟動子、終止子，是無法轉(zhuǎn)錄的，因此，在構(gòu)建基因表達載體時，需要在與質(zhì)粒結(jié)合之前，在目的基因的前后端接上特定的啟動子、終止子。 2．載體上標記基因的標記原理 載體上的標記基因一般是一些抗生素的抗性基因。目的基因要轉(zhuǎn)入的受體細胞沒有抵抗相關(guān)抗生素的能力。當(dāng)含有抗生素抗性基因的載體進入受體細胞后，抗性基因在受體細胞內(nèi)表達，使受體細胞能夠抵抗相應(yīng)抗生素，所以在受體細胞的培養(yǎng)體系中加入該種抗生素就可以只保留轉(zhuǎn)入載體的受體細胞。 3．植物體細胞雜交過程中雜種細胞類型及檢測方法 （1）誘導(dǎo)產(chǎn)物（假設(shè)用于雜交的兩種植物細胞分別為A、B）： ①未融合的細胞：A和B。 ②兩兩融合的細胞：AA、BB和AB。 ③多細胞融合體。 （2）檢測方法：對誘導(dǎo)產(chǎn)物中的細胞進行植物組織培養(yǎng)，然后根據(jù)得到的植物性狀進行判斷。 ①若只表現(xiàn)出一種植物的性狀，說明是未融合細胞。 ②若得到的是具有兩種親本性狀的植物，說明是雜種植株。 ③若得到的是具有兩種親本性狀的植物，且一種植物的性狀得到加強，則是多細胞融合體。 ④若只表現(xiàn)出一種植物的性狀且效果得到加強，則是同種細胞融合的結(jié)果。 4．制備單克隆抗體過程中兩次篩選的方法及目的 （1）第一次篩選是因為誘導(dǎo)融合后得到多種雜交細胞，另外還有未融合的細胞。用特定的選擇培養(yǎng)基篩選：未融合的細胞和同種細胞融合后形成的細胞（“BB”細胞、“瘤瘤”細胞）都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞（“B瘤”細胞）才能生長。 （2）第二次篩選是由于小鼠在生活中還受到其他抗原的刺激，所以經(jīng)選擇性培養(yǎng)獲得的雜交瘤細胞中有能產(chǎn)生其他抗體的細胞。篩選的方法是用多孔培養(yǎng)皿培養(yǎng)，在每個孔只有一個雜交瘤細胞的情況下開始克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選得到能產(chǎn)生特異性抗體的細胞群。 5．卵裂期胚胎發(fā)育過程中物質(zhì)和體積變化的規(guī)律 （1）有機物：胚胎沒有和母體建立聯(lián)系，沒有從母體獲取有機物，而一直呼吸消耗，有機物總量減少。 （2）細胞體積：胚胎總體積不變或略有縮小，但細胞數(shù)目增多，所以每個細胞體積減小。 （3）細胞中DNA含量：伴隨細胞分裂，細胞數(shù)目增多，總DNA含量增多，但每個細胞中核DNA含量保持相對穩(wěn)定。 6．關(guān)于生態(tài)工程的幾個問題 （1）生態(tài)工程建設(shè)的目的：遵循自然界物質(zhì)循環(huán)的規(guī)律，充分發(fā)揮資源的生產(chǎn)潛力，防止環(huán)境污染，使經(jīng)濟效益和生態(tài)效益同步發(fā)展。 （2）生態(tài)工程的特點：具有少消耗、多效益、可持續(xù)的特點。 （3）生態(tài)工程的理解：涉及的學(xué)科知識包括生態(tài)學(xué)和系統(tǒng)學(xué)；運用到的技術(shù)手段或方法有系統(tǒng)設(shè)計、調(diào)控和技術(shù)組裝；最終目的是促進人類社會和自然環(huán)境的和諧發(fā)展。 （4）生態(tài)工程的主要任務(wù)：對已被破壞的生態(tài)環(huán)境（或受損的生態(tài)系統(tǒng)）進行修復(fù)，對造成環(huán)境污染和破壞的生產(chǎn)方式進行改善，并提高生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)力。 7．農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的設(shè)計原則 （1）應(yīng)當(dāng)能夠體現(xiàn)生態(tài)學(xué)原理與現(xiàn)代農(nóng)業(yè)技術(shù)相結(jié)合的原則。 （2）應(yīng)當(dāng)能夠構(gòu)成一個合理的生產(chǎn)結(jié)構(gòu)。 （3）應(yīng)當(dāng)體現(xiàn)充分利用自然界的物質(zhì)和能量資源的原則。 （4）應(yīng)當(dāng)體現(xiàn)減少環(huán)境污染的原則。 （5）應(yīng)當(dāng)充分考慮經(jīng)濟、社會和生態(tài)的綜合效益。 （6）所設(shè)計的農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)，從理論上看應(yīng)當(dāng)能夠?qū)崿F(xiàn)良性循環(huán)。 ◢考點精練 1．（天津市靜海區(qū)2019屆高三上學(xué)期三校聯(lián)考生物試題）基因工程操作的核心步驟是（　?。? A．獲取目的基因 B．構(gòu)建基因表達載體 C．將目的基因?qū)胧荏w細胞 D．目的基因的檢測和鑒定 【答案】B 【解析】基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲??；②基因表達載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)胧荏w細胞；④目的基因的檢測與表達。其中，構(gòu)建基因表達載體是基因工程的核心步驟，綜上分析，B正確，ACD錯誤。 2．（廣西壯族自治區(qū)河池市高級中學(xué)2019屆高三上學(xué)期第二次月考生物試題）質(zhì)粒是細菌中的有機分子，下列對其描述，正確的是（　　） A．質(zhì)粒完全水解后最多可產(chǎn)生4種化合物 B．質(zhì)粒能夠自主復(fù)制 C．質(zhì)粒中含有兩個游離的磷酸基團 D．質(zhì)粒是基因工程的工具酶 【答案】B 【解析】質(zhì)粒是一種具有自主復(fù)制能力的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子，不含游離的磷酸基團，完全水解后最多可產(chǎn)生6種化合物：脫氧核糖、磷酸、4種含氮的堿基，A、C錯誤，B正確；質(zhì)粒是基因工程的工具——載體，不是工具酶，D錯誤。 3．（福建省三明市第一中學(xué)2019屆高三上學(xué)期第一次月考生物試題）下圖是胚胎發(fā)育過程中某階段示意圖，下列有關(guān)敘述錯誤的是（　?。? 　　　　　　 A．圖中②將發(fā)育為胎膜和胎盤等結(jié)構(gòu) B．圖中③可發(fā)育成胎兒的各種組織 C．高等哺乳動物細胞分化開始于桑椹期，終止于生命結(jié)束 D．胚胎從①中伸展出來的過程發(fā)生于囊胚期 【答案】C 【解析】圖示為胚胎發(fā)育過程中的囊胚階段，其中②所示的滋養(yǎng)層細胞將發(fā)育為胎膜和胎盤等結(jié)構(gòu)，A正確；③所示的內(nèi)細胞團細胞將來發(fā)育成胎兒的各種組織，B正確；高等哺乳動物細胞分化開始于囊胚期，終止于生命結(jié)束，C錯誤；胚胎從①所示的透明帶中伸展出來的過程發(fā)生于囊胚期，D正確。 4．（天津市第一中學(xué)2019屆高三上學(xué)期第一次月考生物試題）下圖示為人體抗胃癌單克隆抗體的制備過程。下列有關(guān)敘述錯誤的是（　?。? A．甲是能與人體抗胃癌抗體特異性結(jié)合的抗原 B．細胞融合獲得乙的原理和植物原生質(zhì)體融合的原理都是細胞膜的流動性 C．用特定選擇培養(yǎng)基對乙篩選，融合細胞均能生長，未融合細胞均不能生長 D．丙需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，多次篩選后可獲得能分泌所需抗體的丁 【答案】C 5．（天津市靜?？h第一中學(xué)2019屆高三9月學(xué)生學(xué)業(yè)能力調(diào)研生物試題）下列關(guān)于胚胎工程的敘述，錯誤的是（　?。? A．精子獲能方法有培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法 B．防止多精入卵受精的兩道屏障有透明帶反應(yīng)和頂體反應(yīng) C．精卵發(fā)生中包含有絲分裂 D．卵子只有到了減數(shù)第二次分裂中期才能受精 【答案】B 【解析】精子獲能處理的方法有培養(yǎng)法和化學(xué)誘導(dǎo)法兩種，A正確；防止多精入卵受精的兩道屏障是透明帶反應(yīng)和卵黃膜封閉作用，B錯誤；精子和卵子的發(fā)生過程中性原細胞都進行了有絲分裂和減數(shù)分裂，C正確；卵子只有到了減數(shù)第二次分裂中期才能與獲能的精子完成受精，D正確。 6．（天津市靜?？h第一中學(xué)2019屆高三9月學(xué)生學(xué)業(yè)能力調(diào)研生物試題）有關(guān)生物技術(shù)的敘述不正確的是（　　） A．植物組織培養(yǎng)過程發(fā)生基因選擇性表達 B．顯微注射目的基因表達載體利用了細胞膜流動性原理 C．PCR技術(shù)可以擴增目的基因 D．體內(nèi)、體外培養(yǎng)雜交瘤細胞均可獲得單克隆抗體 【答案】B 【解析】植物組織培養(yǎng)過程發(fā)生基因選擇性表達，A正確；顯微注射目的基因表達載體利用了基因重組原理，B錯誤；PCR技術(shù)可以擴增目的基因，C正確；體內(nèi)、體外培養(yǎng)雜交瘤細胞均可獲得單克隆抗體，D正確。 7．（天津市第一中學(xué)2019屆高三上學(xué)期第一次月考生物試題）從基因型為 Aa 的綠色植物某器官中獲取組織，顯微觀察如下圖。下列對該圖所示細胞的敘述正確的是（ ） 　　　　　　　　　　　 A．若將 X 細胞離體培養(yǎng)成完整植株，此過程要涉及纖維素酶和果膠酶 B．若將 Y 細胞離體培養(yǎng)成幼苗后用秋水仙素處理，目的是使其發(fā)生染色體結(jié)構(gòu)變異 C．X 與 Y 兩個細胞融合后，發(fā)育成基因型為 AAaa 的植株是不可育的 D．如果 X 與 Y 細胞所含蛋白質(zhì)種類有明顯差異，其根本原因是信使 RNA 的不同 【答案】D 【解析】植物細胞經(jīng)離體培養(yǎng)成完整植株，此過程不需要纖維素酶和果膠酶，進行植物細胞融合時則需要纖維素酶和果膠酶處理植物細胞，去除細胞壁，A錯誤；將幼苗用秋水仙素處理的主要目的是誘導(dǎo)染色體數(shù)目加倍，B錯誤；X與Y兩個細胞進行雜交，形成雜種細胞，發(fā)育成基因型為AAaa的雜種植株為四倍體是可育的，C錯誤；如果X與Y細胞所含蛋白質(zhì)種類有明顯差異，其根本原因是基因的選擇性表達形成不同的信使RNA，從而指導(dǎo)合成了不同的蛋白質(zhì)，D正確。 8．（福建省三明市第一中學(xué)2019屆高三上學(xué)期第一次月考生物試題）2018年3月14日物理學(xué)家霍金去世，他曾經(jīng)患有肌肉萎縮性側(cè)索硬化癥即“漸凍癥”。有研究表明，該病是由于突變的基因使神經(jīng)元合成了某種毒蛋白，從而阻礙了軸突內(nèi)營養(yǎng)物質(zhì)的流動；也有最新研究結(jié)果表明，利用誘導(dǎo)多功能干細胞（IPS細胞）制作前驅(qū)細胞，然后移植給漸凍癥實驗鼠，能延長其壽命。下列相關(guān)描述錯誤的是（　?。? A．將控制合成破壞運動神經(jīng)元的毒蛋白基因替換，可以起到一定的治療作用 B．植入神經(jīng)干細胞，使受損的運動功能得到恢復(fù)，也可以起到一定的治療作用 C．誘導(dǎo)多功能干細胞分化的實質(zhì)是基因的選擇性表達，細胞種類增多 D．誘導(dǎo)多功能干細胞分化成的多種細胞中的核遺傳物質(zhì)不完全相同 【答案】D 9．（天津市靜海縣第一中學(xué)2019屆高三9月學(xué)生學(xué)業(yè)能力調(diào)研生物試題）下列關(guān)于動物細胞工程的敘述，正確的是（　?。? A．乳腺細胞比乳腺癌細胞更容易進行離體培養(yǎng) B．細胞核移植主要在同種動物、同種組織的細胞之間進行 C．滅活病毒可使細胞相互凝聚并使細胞融合 D．培養(yǎng)動物細胞的培養(yǎng)液中含維生素、激素等多種能源物質(zhì) 【答案】C 【解析】癌細胞具有無限增殖的能力，因此乳腺癌細胞比乳腺細胞更容易進行離體培養(yǎng)，A錯誤；細胞核移植可以在不同動物的不同組織間進行，B錯誤；滅活病毒可誘導(dǎo)動物細胞融合，C正確；維生素、激素等不是能源物質(zhì)，D錯誤。 10．（湖北省沙市中學(xué)2019屆高三上學(xué)期能力測試（一）理綜生物試題）L病毒侵染小鼠的腦膜細胞，引起腦膜炎，L蛋白是L病毒的抗原蛋白?？蒲腥藛T將兩只轉(zhuǎn)基因小鼠進行雜交，讓能表達L蛋白和L蛋白受體的子代小鼠感染L病毒，會引起嚴重的糖尿病，如圖所示。據(jù)此作出的分析，不正確的是（　?。? 　　　 A．作為親本的兩只轉(zhuǎn)基因小鼠均為雜合子 B．轉(zhuǎn)入基因的遺傳一定不遵循自由組合定律 C．L病毒侵染的細胞可被效應(yīng)T細胞裂解 D．小鼠患糖尿病的原因是胰島B細胞被殺傷 【答案】B 【解析】分析圖解可知，導(dǎo)入目的基因的個體均相當(dāng)于雜合子，L蛋白基因用A表示，L蛋白受體基因用B表示，則轉(zhuǎn)L蛋白基因小鼠基因型可以表示為Aabb，轉(zhuǎn)L蛋白受體基因小鼠可表示為aaBb。這兩個個體雜交結(jié)果為25%AaBb（L蛋白、L蛋白受體）、25%Aabb（L蛋白）、25%aaBb（L蛋白受體）、25%aabb（無）．相當(dāng)于每對基因進行測交，在遵循基因自由組合定律的前提下，雜交子代比例方為1:1:1:1。由分析可知，兩個親本小鼠均導(dǎo)入了一個目的基因，均可以表示為雜合子，A正確。兩個親本雜交，若兩對基因分別分析得出的比例相乘，結(jié)果和實際情況相符，則兩對基因一定遵循基因的自由組合定律。根據(jù)雜交結(jié)果分析可知B錯誤。L病毒侵染的細胞可被效應(yīng)T細胞識別為靶細胞，通過接觸使之裂解，釋放病原體，C正確?；继悄虿〉脑蚴且葝uB細胞表面有病毒抗原基因表達的L蛋白，因此被抗體攻擊殺傷，D正確。 11．（江西省上饒中學(xué)2019屆高三上學(xué)期開學(xué)檢測生物試題）如圖所示為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法示意圖。請回答以下問題： （1）圖中①過程用到的工具酶的特點是_________________________________。下列所示的黏性末端是由_______種限制性核酸內(nèi)切酶作用產(chǎn)生的。 　　　　 （2）圖中②過程用到的工具酶是___________，該過程是基因工程最核心的步驟，即____________。 （3）圖中④過程的原理是___________。 （4）檢驗基因工程是否成功。首先應(yīng)檢測___________，這是外源基因能否在真核細胞內(nèi)___________的關(guān)鍵；其次，利用___________法檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的mRNA；最后，利用抗原－抗體雜交法檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。 【答案】（1）能識別特定的脫氧核苷酸序列并且在特定位點切割DNA分子　　4 （2）DNA連接酶　　基因表達載體的構(gòu)建　　 （3）植物細胞的全能性　　 （4）轉(zhuǎn)基因生物的染色體上是否插入外源基因　　穩(wěn)定遺傳　　分子雜交 【解析】（1）圖中①過程所用的酶為限制酶，其特點是能識別特定的脫氧核苷酸序列并且在特定位點切割DNA分子。圖中四個黏性末端各不相同，根據(jù)限制酶的特異性可知，這四種黏性末端是由四種不同的限制酶切割形成的。 （2）圖中②過程是將黏性末端連接，形成重組質(zhì)粒，需要DNA連接酶，基因工程的核心步驟是基因表達載體的構(gòu)建。 （3）圖中④過程是利用植物組織培養(yǎng)將外植體培養(yǎng)成植株的過程，原理是植物細胞具有全能性。 （4）該生態(tài)農(nóng)業(yè)園建設(shè)主要依據(jù)的生態(tài)工程原理有物質(zhì)循環(huán)再生原理、物種多樣性原理、協(xié)調(diào)與平衡原理、整體性、系統(tǒng)學(xué)和工程學(xué)原理等。 （5）生態(tài)工程的主要任務(wù)是對受損的生態(tài)系統(tǒng)（生態(tài)環(huán)境）進行修復(fù)和重建，對造成環(huán)境污染和破壞的生產(chǎn)方式進行改善，并提高生態(tài)系統(tǒng)的生產(chǎn)力。