廣東海洋大學(xué)微生物學(xué)考試.doc

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緒論 ---劉曉良 科赫氏法則：1.在每一病例中都出現(xiàn)相同的微生物，且在健康者體內(nèi)不存在；2.要從寄主分離出這樣的微生物并在培養(yǎng)基中得到純培養(yǎng);3.用這種微生物的純培養(yǎng)接種健康而敏感的寄主，同樣的疾病會(huì)重復(fù)發(fā)生；4.從試驗(yàn)發(fā)病的寄主中能再度分離培養(yǎng)出這種微生物來(lái)。 曲頸瓶實(shí)驗(yàn)：巴斯德設(shè)計(jì)了一個(gè)既可允許空氣自由進(jìn)入容器又可阻止容器內(nèi)肉湯“自然發(fā)生”生命（腐敗）的簡(jiǎn)便、巧妙的曲頸瓶，通過(guò)實(shí)驗(yàn)證實(shí)了肉湯腐敗產(chǎn)生大量細(xì)菌的原因只有接種了來(lái)自空氣中的微生物“胚種”。 試述微生物的多樣性。 ①.物種的多樣性。②.生理代謝類(lèi)型的多樣性。微生物分解初級(jí)有機(jī)物的能力、微生物有最多樣的產(chǎn)能方式、生物固氮作用、合成次生代謝產(chǎn)物等各種復(fù)雜有機(jī)物的能力、對(duì)復(fù)雜有機(jī)分子集團(tuán)的生物轉(zhuǎn)化能力、分解有毒和劇毒物質(zhì)的能力、抵抗極端環(huán)境的能力③.代謝產(chǎn)物的多樣性。④遺傳基因的多樣性,⑤生態(tài)類(lèi)型的多樣性。 微生物有哪五大共性？ 體積小，面積大。體積小面積大最基本，因?yàn)橐粋€(gè)小體積大面積系統(tǒng)，必然有一個(gè)巨大的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)吸收面、代謝廢物的排泄面和環(huán)境信息的交換面，并由此而產(chǎn)生其余4 個(gè)共性；②.吸收多，轉(zhuǎn)化快。為微生物的高速生長(zhǎng)繁殖和合成大量代謝產(chǎn)物提供了充分的物質(zhì)基礎(chǔ)；③.生長(zhǎng)旺，繁殖快。但由于營(yíng)養(yǎng)、空間和代謝產(chǎn)物等條件的限制，微生物的幾何級(jí)數(shù)分裂速度充其量只能維持?jǐn)?shù)小時(shí)而已；④.適應(yīng)強(qiáng)，易變異。微生物有極其靈活的適應(yīng)性或代謝調(diào)節(jié)機(jī)制。由于繁殖快，雖然其變異頻率十分低，也可在短時(shí)間產(chǎn)生大量變異的后代；⑤.分布廣，種類(lèi)多。分布廣：土壤、空氣、海洋、人體腸道。種類(lèi)多：微生物的生理代謝類(lèi)型多，代謝產(chǎn)物種類(lèi)繁多。微生物因其體積小、重量輕和數(shù)量多等原因，可以到處傳播。而且微生物的種類(lèi)多造就物種的多樣性、生理代謝類(lèi)型的多樣性、代謝產(chǎn)物的多樣性、遺傳基因的多樣性和生態(tài)類(lèi)型的多樣性。 第一章 原核生物的形態(tài)、構(gòu)造和功能 革蘭氏染色法：通過(guò)結(jié)晶紫液初染和碘液媒染后，在細(xì)菌的細(xì)胞壁以內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。由于革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)和組成成分不同，因此再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染后，就能辨別G+菌和G-菌，這種方法叫做革蘭氏染色法。 肽聚糖：又稱(chēng)黏肽，是真菌細(xì)胞壁中的特有成分。 缺壁細(xì)胞：自然進(jìn)化和實(shí)驗(yàn)室菌種自發(fā)突變形成缺細(xì)胞壁、人為抑制新生細(xì)胞壁的合成或?qū)ΜF(xiàn)有細(xì)胞壁進(jìn)行酶解得到的細(xì)胞。 L型細(xì)胞：實(shí)驗(yàn)室或宿主體內(nèi)通過(guò)自發(fā)突變而形成的遺傳性穩(wěn)定的細(xì)胞壁缺損菌株。 異染粒：可用美藍(lán)或甲苯胺藍(lán)染成紅紫色的一種細(xì)胞內(nèi)含物。 羧酶體：是存在于一些自養(yǎng)細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的多角形或六角形內(nèi)含物，主要起CO2的固定作用。 糖被：包被于某些細(xì)菌細(xì)胞壁外的一層厚度不定的透明膠狀物質(zhì)。 莢膜：指在細(xì)胞壁上有固定層次的糖被組成部分。 基內(nèi)菌絲：當(dāng)放線菌的孢子落在固體基質(zhì)表面并發(fā)芽后，就不斷伸長(zhǎng)、分枝并以放射狀向基質(zhì)表面和內(nèi)層擴(kuò)展，形成大量色淺、較細(xì)的具有吸收營(yíng)養(yǎng)和排泄代謝廢物功能的基內(nèi)菌絲。 試圖示G+和G-細(xì)菌細(xì)胞壁的主要構(gòu)造，并簡(jiǎn)要說(shuō)明其異同。 G+細(xì)菌與G-細(xì)菌的細(xì)胞壁都含肽聚糖和磷壁酸；不同的是含量的區(qū)別：如下表 成分 占細(xì)胞壁干重的比例/% G+細(xì)菌 G-細(xì)菌 肽聚糖 含量很高90% 含量很低（5～20） 磷壁酸 含量較高（﹤30） 無(wú) 類(lèi)脂質(zhì) 一般無(wú)（﹤2） 含量較高（約20） 蛋白質(zhì) 無(wú) 含量較高 一：G+菌和G-菌都含有肽聚糖，但肽聚糖的構(gòu)造不同，G+有肽橋，而G-因含有m-DAP，故沒(méi)有特殊的肽橋，肽聚糖網(wǎng)套稀疏。 二：G+菌細(xì)胞壁的主要成分是肽聚糖和磷壁酸，含少量或不含脂質(zhì)和蛋白質(zhì)，肽聚糖層厚，且層次多，而G-菌的主要成分則是脂質(zhì)和蛋白質(zhì)，肽聚糖層薄且層次少。 三：G-菌細(xì)胞壁層次則相對(duì)于G+菌多，成分也復(fù)雜，機(jī)械強(qiáng)度弱于G+。 革蘭氏染色機(jī)制、步驟及注意事項(xiàng)： 1、革蘭氏染色的機(jī)制：通過(guò)結(jié)晶紫液初染和碘液媒染后，在細(xì)菌的細(xì)胞壁以內(nèi)可形成不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物。 G﹢菌：細(xì)胞壁厚，肽聚糖網(wǎng)狀分子形成一種透性障，當(dāng)乙醇脫色時(shí)，肽聚糖脫水而孔障縮小，故保留結(jié)晶紫-碘復(fù)合物在細(xì)胞膜上。呈紫色。Gˉ菌：肽聚糖層薄，交聯(lián)松散，乙醇脫色不能使其結(jié)構(gòu)收縮，其脂含量高，乙醇將脂溶解，縫隙加大，結(jié)晶紫-碘復(fù)合物溶出細(xì)胞壁，番紅復(fù)染后呈紅色。 由于革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽(yáng)性菌的細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)和組成成分不同，因此再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染后，就能辨別G+菌和G-菌。 步驟： 初染：加草酸銨結(jié)晶紫一滴，約一分鐘，水洗。 媒染：滴加碘液沖去殘水，并覆蓋約一分鐘，水洗。 脫色：將載玻片上面的水甩凈，并襯以白背景，用95％酒精滴洗至流出酒精剛剛不出現(xiàn)紫色時(shí)為止，約20—30秒鐘，立即用水沖凈酒精。 復(fù)染：用番紅液染1－2分鐘，水洗。 鏡檢：干燥后，置油鏡觀察。革蘭氏陰性菌呈紅色，革蘭氏陽(yáng)性菌呈紫色。 3、注意事項(xiàng)：1、革蘭氏染色成敗的關(guān)鍵是酒精脫色 2、染色過(guò)程勿使染色液干涸3、選用幼齡的細(xì)菌。 拴菌實(shí)驗(yàn)P29 試對(duì)G-細(xì)菌的鞭毛和螺旋體的周質(zhì)鞭毛在結(jié)構(gòu)、著生方式和運(yùn)動(dòng)特點(diǎn)等方面作一比較。 結(jié)構(gòu) 著生方式 運(yùn)動(dòng)特點(diǎn) G-細(xì)菌的鞭毛 基體（有L環(huán)、P環(huán)、S-M環(huán)、C環(huán)），鉤形鞘，鞭毛絲 周生 直線運(yùn)動(dòng)，運(yùn)動(dòng)速度慢 螺旋體的周質(zhì)鞭毛 基體，鉤形鞘，鞭毛絲 螺旋方式纏繞在螺旋體細(xì)胞的表面 快速旋轉(zhuǎn) 如何初步判斷并進(jìn)一步驗(yàn)證某一細(xì)菌是否長(zhǎng)有鞭毛？長(zhǎng)有何種鞭毛以及鞭毛是如何著生的？ 初步判斷：觀察其菌落邊緣是否光滑，若較粗糙，可能有鞭毛。 驗(yàn)證：電鏡觀察；鞭毛染色法，在光學(xué)顯微鏡下觀察；半固體穿刺培養(yǎng)；從培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)判斷；對(duì)細(xì)菌在其懸滴標(biāo)本或水浸片的運(yùn)動(dòng)特點(diǎn)觀察。 弧菌、螺菌類(lèi)普遍著生鞭毛；在桿菌中，假單細(xì)胞菌都長(zhǎng)有端生鞭毛，其余的都有周生鞭毛或不長(zhǎng)鞭毛；球菌一般無(wú)鞭毛，僅個(gè)別屬才長(zhǎng)有鞭毛。 鞭毛的著生方式一般有：一端生；兩端生；周生；側(cè)生。 什么是菌落？試討論微生物的細(xì)胞形態(tài)與菌落形態(tài)間的相關(guān)性及其內(nèi)在原因。 菌落即單個(gè)微生物在適宜的固體培養(yǎng)基表面或內(nèi)部生長(zhǎng)、繁殖到一定程度可以形成肉眼可見(jiàn)的、 有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞生長(zhǎng)群體。 因不同形態(tài)、生理類(lèi)型的細(xì)菌，在其菌落形態(tài)、構(gòu)造等特征上也有許多明顯的反映，故細(xì)菌的細(xì)胞形態(tài)與菌落形態(tài)間存在明顯的相關(guān)性現(xiàn)象，如，無(wú)鞭毛、不能運(yùn)動(dòng)的細(xì)菌尤其是球菌通常都形成較小、較厚、邊緣圓整的半球狀菌落；長(zhǎng)有鞭毛、運(yùn)動(dòng)能力強(qiáng)的細(xì)菌一般形成而平坦、邊緣多缺刻、不規(guī)則的菌落；有糖被的細(xì)菌，會(huì)長(zhǎng)出大型、透明、蛋清狀的菌落；有芽孢的細(xì)菌往往長(zhǎng)出外觀粗糙、“干燥”、不透明且表面多褶的菌落等等。 （相關(guān)性：細(xì)菌的菌落有其自己的特征，一般呈現(xiàn)濕潤(rùn)、較光滑、較粘稠、較透明，易挑取、質(zhì)地均勻以及菌落正反面或邊緣與中央部位的顏色一致等。其原因是細(xì)菌屬于單細(xì)胞生物，一個(gè)菌落內(nèi)無(wú)數(shù)細(xì)胞并沒(méi)有形態(tài)、功能的分化，細(xì)胞內(nèi)充滿著毛細(xì)管狀態(tài)的水等。而不同形態(tài)、生理類(lèi)型的細(xì)菌，在其菌落形態(tài)、構(gòu)造等特征上也有明顯的反應(yīng)） 第二章 真核微生物的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能 單細(xì)胞蛋白：也叫微生物蛋白，是用許多工農(nóng)業(yè)廢料及石油廢料人工培養(yǎng)的微生物菌體。其所含的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)極為豐富。 溶酶體：是由一種由單層膜包裹，內(nèi)含多種酸性水解酶的小球形，囊泡狀細(xì)胞器，主要功能是細(xì)胞內(nèi)的消化作用，消化自身死亡蛋白質(zhì)和外來(lái)異物。 假菌絲：酵母菌進(jìn)行出芽生殖時(shí)，子母細(xì)胞不立即分離而以狹小的面積相連，則稱(chēng)這種藕節(jié)狀的細(xì)胞串為假菌絲。 假根：是根霉屬等低等真菌匍匐絲與固體基質(zhì)接觸處分化出來(lái)的根狀結(jié)構(gòu)，具有固著和吸取養(yǎng)料等功能。 吸器：真菌菌絲某處生出特殊形態(tài)的菌絲體或菌絲的變態(tài)物，伸入寄主體內(nèi)吸取養(yǎng)分，這些變態(tài)物叫吸器。 附著胞：許多寄生于植物的真菌在其芽管或老菌絲頂端會(huì)發(fā)生膨大，分泌黏狀物，借以牢固地黏附在宿主的表面，此即附著胞。在其上再形成纖細(xì)的針狀感染菌絲，以侵入宿主的角質(zhì)表皮而吸取養(yǎng)料。 子實(shí)體：在氣生菌絲里面或上面可產(chǎn)無(wú)性或有性孢子，有一定形狀和結(jié)構(gòu)的任何菌絲體組織。 鎖狀聯(lián)合：形成喙?fàn)钔黄鸲B合兩個(gè)細(xì)胞的方式不斷使雙核細(xì)胞分裂，從而使菌絲尖端不斷向前延伸。 試列表比較真核生物和原核生物的10個(gè)主要差別。 比較項(xiàng)目 真核生物 原核生物 細(xì)胞大小 較大（通常直徑＞2μm） 較?。ㄍǔＶ睆剑?μm） 如有壁，其主要成分 纖維素、幾丁質(zhì)等 多數(shù)為肽聚糖 細(xì)胞器 有 無(wú) 鞭毛結(jié)構(gòu) 如有，則粗而復(fù)雜 如有，則細(xì)而簡(jiǎn)單 細(xì)胞膜含呼吸或光合成分 無(wú) 有 核膜 有 無(wú) 染色體數(shù) 一般大于1 一般為1 氧化磷酸化部位 線粒體 細(xì)胞膜 光合作用部位 葉綠體 細(xì)胞膜 繁殖方式 有性、無(wú)性等多種 一般為無(wú)性（二等分裂） 原核生物與真核生物的鞭毛差異。 對(duì)于結(jié)構(gòu)：細(xì)菌鞭毛包括三個(gè)部分：基體，鉤型鞘，鞭毛絲。其中基體含4個(gè)盤(pán)狀物，從外到內(nèi)分別為L(zhǎng)環(huán)P環(huán)S環(huán)M環(huán)，其中SM環(huán)連在一起，相當(dāng)于馬達(dá)轉(zhuǎn)子，他的外側(cè)有Mot蛋白包圍作為定子。Mot蛋白蛋白中的跨膜質(zhì)子通道引導(dǎo)膜外質(zhì)子流入膜內(nèi)，從而驅(qū)動(dòng)SM環(huán)快速旋轉(zhuǎn)。鉤型鞘用于連接鞭毛絲和基體，它可以360旋轉(zhuǎn)，使鞭毛加大運(yùn)動(dòng)幅度。鞭毛絲由鞭毛蛋白構(gòu)成，含有中央孔道，鞭毛蛋白通過(guò)中央孔道在其游離端（頂部）進(jìn)行裝配成鞭毛絲。 真核細(xì)胞的鞭毛主要由鞭桿和基體組成，當(dāng)然也有連接他們的結(jié)構(gòu)。其中鞭桿呈“9+2”型，即中央有兩個(gè)中央微管（完全微管13個(gè)亞基圍繞成），外圍繞一圈9個(gè)微管二聯(lián)體，其中A管為完全微管，B管則是由10個(gè)亞基圍繞成，另外3個(gè)亞基共用A管的。A亞纖維上還有兩條動(dòng)力蛋白壁，主要通過(guò)Ca+激活的ATP酶參與參與使鞭毛彎曲運(yùn)動(dòng)。同時(shí)在相鄰二聯(lián)體微管之間還存在連絲蛋白，在二聯(lián)體微管與中央微管之間存在放射輻條?；w結(jié)構(gòu)與鞭桿類(lèi)似，不過(guò)它是“9+0”型，即沒(méi)有中央微管，且外圍是9個(gè)三聯(lián)體微管。 對(duì)于運(yùn)動(dòng)機(jī)制：細(xì)菌鞭毛是利用質(zhì)子流進(jìn)行旋轉(zhuǎn)驅(qū)動(dòng)，即“旋轉(zhuǎn)論”；而真核細(xì)胞的鞭毛是“揮鞭論”。 試對(duì)酵母菌的繁殖方式作一表解。 試以表解法介紹霉菌的營(yíng)養(yǎng)菌絲和氣生菌絲各可分化成哪些特化構(gòu)造，并簡(jiǎn)要說(shuō)明他們的功能。 特化結(jié)構(gòu) 功能 營(yíng)養(yǎng)菌絲 假根 固著和吸取養(yǎng)料 匍匐菌絲 延伸 吸器 吸取宿主細(xì)胞內(nèi)的養(yǎng)料 附著胞 牢固地黏附在宿主的表面 附著枝 將菌絲附著于宿主體上 菌核 不良的外界條件下，保存數(shù)年的生命 菌索 促進(jìn)菌體蔓延和抵御不良環(huán)境 菌環(huán)和菌網(wǎng) 捕捉線蟲(chóng)或其他微生物，吸其養(yǎng)料 氣生菌絲 結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單的子實(shí)體 分生孢子頭、孢子囊 產(chǎn)無(wú)性孢子 擔(dān)子 產(chǎn)有性孢子 結(jié)構(gòu)復(fù)雜的子實(shí)體 分生孢子器、分生孢子座、分生孢子盤(pán) 產(chǎn)無(wú)性孢子 子囊果（閉囊殼、子囊殼、子囊盤(pán)） 產(chǎn)有性孢子 試列表比較真菌孢子的類(lèi)型、主要特點(diǎn)和代表種屬。 孢子名稱(chēng) 染色體倍數(shù) 外形 數(shù)量 外或內(nèi)生 其他特點(diǎn) 實(shí)例 無(wú)性孢子 游動(dòng)孢子 n 圓、梨、腎形 多 內(nèi) 有鞭毛，能游動(dòng) 壺菌 孢囊孢子 近圓形 多 內(nèi) 水生型有鞭毛 根霉，毛霉 分生孢子 極多樣 極多 外 少數(shù)為多細(xì)胞 曲霉，青霉 芽孢子 柱形 多 外 各孢子同時(shí)形成 白地霉 厚垣孢子 近圓形 少 外 在菌絲頂或中間形成 總狀毛霉 芽孢子 近圓形 較多 外 在酵母細(xì)胞上出芽形成 假絲酵母 擲孢子 鐮、豆、腎形 少 外 成熟時(shí)從母細(xì)胞射出 擲孢酵母 有性孢子 卵孢子 2n 近圓形 1至幾 內(nèi) 厚壁，休眠 德氏腐霉 接合孢子 2n 近圓形 1 內(nèi) 厚壁，休眠，大，深色 根霉，毛霉 子囊孢子 n 多樣 一般8 內(nèi) 長(zhǎng)在各種子囊內(nèi) 脈孢菌，紅曲 擔(dān)孢子 n 近圓形 一般4 外 長(zhǎng)在特有的擔(dān)子上 蘑菇，香菇 試列表比較四大類(lèi)微生物的細(xì)胞形態(tài)和菌落特征。 單細(xì)胞微生物 菌絲狀微生物 細(xì)菌 酵母菌 放線菌 霉菌 主要特征 菌落 含水狀態(tài) 很濕或較濕 較濕 干燥或較干燥 干燥 外觀形態(tài) 小而凸起或大而平坦 大而凸起 小而緊密 大而疏松或大而致密 細(xì)胞 相互關(guān)系 單個(gè)分散或有一定排列方式 單個(gè)分散或假絲狀 絲狀交織 絲狀交織 形態(tài)特征 小而均勻，個(gè)別有芽孢 大而分化 細(xì)而均勻 粗而分化 參考特征 菌落透明度 透明或稍透明 稍透明 不透明 不透明 菌落與培養(yǎng)基結(jié)合程度 不結(jié)合 不結(jié)合 牢固結(jié)合 較牢固結(jié)合 菌落顏色 多樣 單調(diào)，一般呈乳脂或礦燭色，少數(shù)紅色或黑色 十分多樣 十分多樣 菌落正反面顏色的差別 相同 相同 一般不同 一般不同 菌落邊緣 一般看不到細(xì)胞 可見(jiàn)球狀，卵圓狀或假絲狀細(xì)胞 有時(shí)可見(jiàn)細(xì)絲狀細(xì)胞 可見(jiàn)粗絲狀細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng)速度 一般很快 較快 慢 一般較快 氣味 一般有臭味 多帶酒香味 常帶泥腥味 往往有霉味 第3章 病毒和亞病毒因子 噬菌斑：在雙層平板固體培養(yǎng)基上，釋放出的噬菌體引起平板上的菌苔點(diǎn)性感染，在感染點(diǎn)上進(jìn)行反復(fù)的侵染裂解形成透明斑，稱(chēng)噬菌斑。 烈性噬菌體：噬菌體侵入細(xì)菌后，在細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行復(fù)制，產(chǎn)生大量新的噬菌體粒子，并導(dǎo)致宿主迅速裂解的噬菌體。 裂解性周期：烈性噬菌體所經(jīng)歷的繁殖過(guò)程。 自外裂解：指大量噬菌體吸附在同一宿主細(xì)胞表面并釋放眾多的溶菌酶，最終因外在的原因而導(dǎo)致細(xì)胞裂解。 噬菌斑形成單位（pfu）：每毫升試樣中所含有的具侵染性的噬菌體粒子數(shù)。 一步生長(zhǎng)曲線：以培養(yǎng)時(shí)間為橫坐標(biāo)，噬菌斑數(shù)為縱坐標(biāo)所繪制的，定量描述烈性噬菌體生長(zhǎng)規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線，稱(chēng)為一步生長(zhǎng)曲線。 裂解量：平均每一宿主細(xì)胞裂解后產(chǎn)生的子代噬菌體數(shù)。 溶源性：溫和噬菌體侵入相應(yīng)宿主細(xì)胞后，由于前者的基因組整合到后者的基因組上，并隨后者的復(fù)制而進(jìn)行同步復(fù)制，因此，溫和噬菌體的侵入并不引起宿主細(xì)胞裂解，此即溶源性。 溶源菌：凡能引起溶源性的噬菌體的宿主細(xì)菌。 溫和噬菌體：凡能引起溶源性的噬菌體叫溫和噬菌體。 前噬菌體：整合在宿主基因組上的溫和噬菌體的核酸稱(chēng)之為前噬菌體 溶源性周期：整合到宿主的核基因組上，以前噬菌體形式長(zhǎng)期潛伏。 試圖示并簡(jiǎn)介病毒的典型構(gòu)造。 （1）病毒的核心為核酸（2）病毒的衣殼為蛋白質(zhì)，包圍在核心周?chē)?）核心和衣殼合稱(chēng)核衣殼（4）病毒的包膜為一層含蛋白質(zhì)或糖蛋白的類(lèi)脂雙層膜，覆蓋著核衣殼。 什么是效價(jià)，測(cè)定噬菌體效價(jià)的方法有幾種？最常用的是什么方法，其優(yōu)點(diǎn)如何？ 效價(jià)表示每毫升試樣中所含有的具有侵染性的噬菌體粒子數(shù)。 測(cè)定方法：雙層平板法、電鏡直接記數(shù)法、液體稀釋法、玻片快速測(cè)定法和單層平板法。 最常用的是雙層平板法。用雙層平板法測(cè)出的效價(jià)比用電鏡直接記數(shù)得到的效價(jià)低。前者是計(jì)有感染力的噬菌體粒子，后者是計(jì)噬菌體的總數(shù)。 病毒粒有哪幾種對(duì)稱(chēng)體制？各種對(duì)稱(chēng)體制又有幾種特殊外形？試各舉一例。 簡(jiǎn)述用雙層瓊脂平板法測(cè)定噬菌體效價(jià)的基本原理和主要操作步驟。 基本原理：加了底層培養(yǎng)基后，彌補(bǔ)培養(yǎng)皿底部不平的缺陷；使所有的噬菌斑都位于近乎同一平面上，因而大小一致、邊緣清晰且無(wú)重疊現(xiàn)象；又因上層培養(yǎng)基中瓊脂較稀，故可形成形態(tài)較大、特征較明顯以及便于觀察和計(jì)數(shù)的噬菌斑。 主要步驟：預(yù)先分別配制含2%和1%瓊脂的底層培養(yǎng)基和上層培養(yǎng)基。先用底層培養(yǎng)基在培養(yǎng)皿上澆一層平板，待凝固后，再把預(yù)先融化并冷卻到45℃以下，加有較濃的敏感宿主和一定體積待測(cè)噬菌體樣品上層培養(yǎng)基，在試管中搖勻后，立即倒在底層培養(yǎng)基上鋪平待凝，然后在37℃下保溫。一般經(jīng)10余小時(shí)后即可對(duì)噬菌斑計(jì)數(shù)。 何謂一步生長(zhǎng)曲線？它分幾期，各期有何特點(diǎn)？ 定量描述烈性噬菌體生長(zhǎng)規(guī)律的實(shí)驗(yàn)曲線，稱(chēng)為一步生長(zhǎng)曲線。 1潛伏期：細(xì)胞內(nèi)已經(jīng)開(kāi)始裝配噬菌體粒子并可用電鏡觀察到 2裂解期：宿主細(xì)胞迅速裂解溶液中噬菌體粒子急劇增多。 3平穩(wěn)期：感染后的宿主細(xì)胞已全部裂解，溶液中的噬菌體效價(jià)達(dá)到最高點(diǎn)。 什么是溶源菌，它有何特點(diǎn)？如何檢出溶源菌？ 溶源菌是一類(lèi)能與溫和噬菌體長(zhǎng)期共存，一般不會(huì)出現(xiàn)有害影響的宿主細(xì)胞。 特點(diǎn)：自發(fā)裂解，誘發(fā)裂解，免疫性，重復(fù)性，溶源轉(zhuǎn)變 將少數(shù)的溶源菌與大量的敏感性指示菌相混合，再與瓊脂性培養(yǎng)基混合后制一個(gè)平板，經(jīng)培養(yǎng)后溶源菌就長(zhǎng)成菌落。由于溶源菌在細(xì)胞分裂過(guò)程中有極少數(shù)個(gè)體會(huì)引起自發(fā)裂解，其釋放的噬菌體可不斷侵染溶源性細(xì)菌菌落周?chē)闹甘揪?，于是就形成一個(gè)個(gè)中央有溶源菌的小菌落，四周有透明圈圍著這種獨(dú)特噬菌體。 第四章 營(yíng)養(yǎng)：生物體從外部環(huán)境中攝取對(duì)其生命活動(dòng)必需的能量和物質(zhì)，以滿足正常生長(zhǎng)和繁殖需要的一種最基本的生理功能。 營(yíng)養(yǎng)物：具有營(yíng)養(yǎng)功能的物質(zhì)，還包括非常規(guī)物質(zhì)形式的光輻射能在內(nèi)。 碳源：一切能滿足微生物生長(zhǎng)繁殖所需碳元素的營(yíng)養(yǎng)源。 碳源譜：若把所有微生物當(dāng)做一整體來(lái)考慮，其可利用的碳源范圍。 能源：能為微生物生命活動(dòng)提供最初能量來(lái)源的營(yíng)養(yǎng)物或輻射能。 單功能營(yíng)養(yǎng)物：只能做一種營(yíng)養(yǎng)要素功能的營(yíng)養(yǎng)物。 雙功能營(yíng)養(yǎng)物：可同時(shí)兼有兩種營(yíng)養(yǎng)要素功能的營(yíng)養(yǎng)物。 單純擴(kuò)散、促進(jìn)擴(kuò)散、主動(dòng)運(yùn)送、基團(tuán)移位P92—93 三功能營(yíng)養(yǎng)物、光能無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)型、光能有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型、化能無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)型、化能有機(jī)營(yíng)養(yǎng)型（看一下） 培養(yǎng)基：P96 第5章 微生物的新陳代謝 呼吸：又稱(chēng)好氧呼吸，是一種最普遍又重要的生物氧化或產(chǎn)能方式。P114 發(fā)酵：它指在無(wú)氧等外源氫受體的條件下，底物脫氫后所產(chǎn)生的還原力【H】未經(jīng)呼吸鏈而直接交某一內(nèi)源性中間代謝物接受，以實(shí)現(xiàn)底物水平磷酸化產(chǎn)能的一類(lèi)生物氧化反應(yīng)。P117 同型酒精發(fā)酵：即由EMP途徑代謝產(chǎn)生的丙酮酸經(jīng)過(guò)脫羧放出CO2，同時(shí)生成乙醛，乙醛接受糖酵解過(guò)程中釋放的NADH+H+被還原成乙醇。這是一個(gè)低效的產(chǎn)能過(guò)程，大量能量仍然貯存于乙醇中。 異型酒精發(fā)酵：一些細(xì)菌能夠通過(guò)HMP途徑進(jìn)行異型乳酸發(fā)酵產(chǎn)生乳酸、乙醇和CO2等。 Stickaland反應(yīng)：以一種氨基酸作底物脫氫（即氫供體），而以另一種氨基酸作氫受體而實(shí)現(xiàn)生物氧化產(chǎn)能的獨(dú)特發(fā)酵類(lèi)型。P122 “Park”核苷酸：即UDP-N-乙酰胞壁酸五肽。首先是谷氨酸作為氨的供體，乙酰CoA提供乙酰基，構(gòu)成NAG-1-P，隨后由UTP活化形成UDP-NAG。如果是同PEP起反應(yīng)則形成UDP-NAM。隨后一個(gè)五肽化合物連接到細(xì)胞壁的乳?；?，形成UDP-NAM-五肽，合成“Park”核苷酸。P142 細(xì)菌萜醇：是一種含11個(gè)異戊二烯單位的C55類(lèi)異戊二烯醇，它可通過(guò)2個(gè)磷酸基與N-乙酰胞壁酸分子相接，使糖的中間代謝產(chǎn)物呈現(xiàn)出很強(qiáng)的疏水性，從而使它能順利通過(guò)疏水性很強(qiáng)的細(xì)胞膜而轉(zhuǎn)移到膜外。P143 青霉素為何只能抑制代謝旺盛的細(xì)菌?其抑制機(jī)制如何？ 青霉素和轉(zhuǎn)肽酶兩者可以相互競(jìng)爭(zhēng)轉(zhuǎn)肽酶的活力中心。轉(zhuǎn)肽酶一旦被青霉素結(jié)合，前后2個(gè)肽聚糖單體間不能形成肽橋，因此合成的肽聚糖是缺乏機(jī)械強(qiáng)度的“次品”，由此產(chǎn)生了原生質(zhì)體或球狀體之類(lèi)的細(xì)胞壁缺損細(xì)菌，當(dāng)它們處于不利的環(huán)境下時(shí)，極易裂解死亡。 因?yàn)榍嗝顾氐淖饔脵C(jī)制是抑制肽聚糖分子中肽橋的生物合成，因此對(duì)處于生長(zhǎng)繁殖旺盛階段的細(xì)菌具有明顯的抑制作用，相反，對(duì)處于生長(zhǎng)停滯狀態(tài)的休止細(xì)胞，卻無(wú)抑制作用。 試列表比較呼吸、無(wú)氧呼吸和發(fā)酵的特點(diǎn)。 Stickland反應(yīng)存在于哪些微生物中？反應(yīng)的生化機(jī)制如何？ 多見(jiàn)于厭氧梭菌中，如：生孢梭菌、肉毒梭菌和斯氏梭菌等 試用簡(jiǎn)圖（不用分子式）描繪肽聚糖合成的3個(gè)階段，并指出其中有哪些代謝抑制劑及其作用部位。 抑制因子 抑制部位 環(huán)絲氨酸 細(xì)胞質(zhì)中Park核苷酸過(guò)程中合成D-丙胺酰-D-丙氨酸兩步反應(yīng) 萬(wàn)古霉素 細(xì)胞膜上由太聚糖類(lèi)脂到磷酸類(lèi)脂的過(guò)程 桿菌肽 細(xì)胞膜上由二磷酸類(lèi)脂脫P(yáng)i生成一磷酸類(lèi)脂的過(guò)程 青霉素 細(xì)胞膜外轉(zhuǎn)肽酶的轉(zhuǎn)肽作用過(guò)程 第6章 微生物的生長(zhǎng)及其控制 平板菌落計(jì)數(shù)法：可用澆注平板、涂布平板或滾管法等方法進(jìn)行。此法適用于各種好氧菌或厭氧菌。其主要操作是把稀釋后的一定量菌樣通過(guò)澆注瓊脂培養(yǎng)基或瓊脂平板上涂布的方法，讓其內(nèi)的微生物單細(xì)胞一一分散在瓊脂平板上（內(nèi)），待培養(yǎng)后，每一活細(xì)胞就形成一個(gè)單菌落，根據(jù)每皿上形成的cfu數(shù)乘上稀釋度就可推算菌樣的含菌數(shù)。P152 cfu（菌落形成單位）：把稀釋后的一定量菌樣通過(guò)澆注或涂布的方法，讓微生物單細(xì)胞一一分散在瓊脂平板上（內(nèi)），待培養(yǎng)后，每一個(gè)活細(xì)胞形成一個(gè)單菌落。 生長(zhǎng)速率常數(shù)：每小時(shí)細(xì)胞分裂的次數(shù)。 代時(shí)：生長(zhǎng)速率常數(shù)的倒數(shù)。細(xì)胞分裂一次所需的時(shí)間。 連續(xù)培養(yǎng)：微生物接種到培養(yǎng)基里以后的整個(gè)生長(zhǎng)期間，微生物能持續(xù)地以比較恒定的生長(zhǎng)速率常數(shù)進(jìn)行生長(zhǎng)，從而導(dǎo)致微生物的生長(zhǎng)過(guò)程能“不斷”地進(jìn)行下去的一種培養(yǎng)方法。 單批培養(yǎng)：將細(xì)胞和培養(yǎng)液一次性裝入反應(yīng)器內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，細(xì)胞不斷生長(zhǎng)，同時(shí)產(chǎn)物也不斷形成，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的培養(yǎng)后，終止培養(yǎng)。 生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn)：微生物最低生長(zhǎng)溫度、最適生長(zhǎng)溫度和最高生長(zhǎng)溫度。 滅菌：采用強(qiáng)烈的理化因素使任何物體內(nèi)外部的一切微生物永遠(yuǎn)喪失其生長(zhǎng)繁殖能力的措施。 消毒：采用較溫和的理化因素，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體或動(dòng)、植物有害的病原菌，而對(duì)被消毒的對(duì)象基本無(wú)害的措施。 微生物的生長(zhǎng)與繁殖間的關(guān)系如何？研究它們的生長(zhǎng)繁殖有何理論與實(shí)踐意義？ 如果同化（合成）作用的速度超過(guò)了異化（分解）作用，則其原生質(zhì)的總量（重量、體積、大小）就不斷增加，于是出現(xiàn)了個(gè)體細(xì)胞的生長(zhǎng)。 如果這是一種平衡生長(zhǎng)，即各種細(xì)胞組分是按恰當(dāng)比例增長(zhǎng)時(shí)，則達(dá)到一定程度后就會(huì)引起個(gè)體數(shù)目的增加，對(duì)單細(xì)胞的微生物來(lái)說(shuō)，這就是繁殖。 隨著群體中各個(gè)個(gè)體的進(jìn)一步生長(zhǎng)、繁殖，就引起了這一群體的生長(zhǎng)。 個(gè)體生長(zhǎng)→個(gè)體繁殖→群體生長(zhǎng) 群體生長(zhǎng)=個(gè)體生長(zhǎng)+個(gè)體繁殖 意義：微生物的生長(zhǎng)繁殖是其在內(nèi)外各種環(huán)境因素相互作用下生理、代謝等狀態(tài)的綜合反映，因此，有關(guān)生長(zhǎng)繁殖的數(shù)據(jù)就可作為研究多種生理、生化和遺傳等問(wèn)題的重要指標(biāo)；同時(shí)，微生物在生產(chǎn)實(shí)踐上的各種應(yīng)用或是人類(lèi)對(duì)致病、霉腐等有害微生物的防治，也都與它們的生長(zhǎng)繁殖或抑制緊密相關(guān)。 平板菌落計(jì)數(shù)法有何優(yōu)缺點(diǎn)？試對(duì)澆注平板法和涂布平板法作一比較。 優(yōu)點(diǎn)：最為常用，適用于各種好氧菌或厭氧菌。 缺點(diǎn)：操作較繁瑣且要求操作者技術(shù)熟練。 澆注平板法（平板劃線法）：可以觀察菌落特征，對(duì)混合菌進(jìn)行分離。但不能計(jì)數(shù)。一般用于菌種分離提純。 涂布平板法：可以計(jì)數(shù)，可以觀察菌落特征。但吸收量少，較麻煩。一般用于平板培養(yǎng)基的回收率計(jì)數(shù)。 （比較內(nèi)容來(lái)源于百度。。。。。。） 延滯期有何特點(diǎn)？實(shí)踐上如何縮短它？ 特點(diǎn)：①生長(zhǎng)速率常數(shù)為零；②細(xì)胞形態(tài)變大或增長(zhǎng)，許多桿菌可長(zhǎng)成絲狀；③細(xì)胞內(nèi)的RNA尤其是rRNA含量增高，原生質(zhì)呈嗜堿性；④合成代謝十分活躍，核糖體、酶類(lèi)和ATP的合成加速，易產(chǎn)生各種誘導(dǎo)酶；⑤對(duì)外界不良條件如NaCl溶液濃度、溫度和抗生素等理、化因素反應(yīng)敏感。 影響因素（除菌種外）： 1 接種齡 指接種物或種子的生長(zhǎng)年齡，亦即它生長(zhǎng)到生長(zhǎng)曲線上哪一階段時(shí)用來(lái)作種子。以指數(shù)期接種齡的種子接種，則子代培養(yǎng)物的延滯期就短；反之，如以延滯期或衰亡期的種子接種，則子代培養(yǎng)物的延滯期就長(zhǎng)；如果以穩(wěn)定期的種子接種，則延滯期居中。 2 接種量 接種量大，則延滯期短，反之則長(zhǎng)。 3 培養(yǎng)及成分 接種到營(yíng)養(yǎng)豐富的天然培養(yǎng)基中的微生物，要比接種到營(yíng)養(yǎng)單調(diào)的組合培養(yǎng)基中的延滯期短。 4 種子損傷度 若用于接種的細(xì)胞曾被加熱、輻射或有毒物質(zhì)損傷過(guò)，就會(huì)因修復(fù)損傷而延長(zhǎng)延滯期。 指數(shù)期有何特點(diǎn)？處于此期的微生物有何應(yīng)用？ 特點(diǎn)：①生長(zhǎng)速率常數(shù)R最大，因而細(xì)胞每分裂一次所需時(shí)間——代時(shí)或原生質(zhì)增加一倍所需的倍增時(shí)間最短；②細(xì)胞進(jìn)行平衡生長(zhǎng)，故菌體各部分的成分十分均勻；③酶系活躍，代謝旺盛。 指數(shù)期尤其是處于指數(shù)期中期的微生物因其具有整個(gè)群體的生理特征較一致、細(xì)胞各成分平衡增長(zhǎng)和生長(zhǎng)速率恒定等優(yōu)點(diǎn)，故是用作代謝、生理和酶學(xué)等研究的良好材料，是增殖噬菌體的最適宿主，也是發(fā)酵工業(yè)中用作種子的最佳材料。 穩(wěn)定期有何特點(diǎn)？穩(wěn)定期到來(lái)的原因有哪些？ 特點(diǎn)：生長(zhǎng)速率常數(shù)R為零，即處于新繁殖的細(xì)胞數(shù)與衰亡的細(xì)胞數(shù)相等，或正生長(zhǎng)與負(fù)生長(zhǎng)相等的動(dòng)態(tài)平衡之中。這時(shí)的菌體產(chǎn)量達(dá)到最高點(diǎn)，而且菌體產(chǎn)量與營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗間呈現(xiàn)出有規(guī)律的比例關(guān)系。 穩(wěn)定期到來(lái)的原因：①營(yíng)養(yǎng)物尤其是生長(zhǎng)限制因子的耗盡；②營(yíng)養(yǎng)物的比例失調(diào)；③酸、醇、毒素或H2O2等有害代謝產(chǎn)物的累積；④pH、氧化還原電勢(shì)等物理化學(xué)條件越來(lái)越不適宜。 什么是高密度培養(yǎng)？如何保證好氧菌或兼性厭氧菌獲得高密度生長(zhǎng)？ 微生物的高密度培養(yǎng)有時(shí)也稱(chēng)高密度發(fā)酵，一般是指微生物在液體培養(yǎng)條件下細(xì)胞群體密度超過(guò)常規(guī)培養(yǎng)10倍以上時(shí)的生長(zhǎng)狀態(tài)或培養(yǎng)技術(shù)。 ①選取最佳培養(yǎng)基成分和各成分含量；②適時(shí)補(bǔ)料；③提高溶解氧的濃度；④防治有害代謝產(chǎn)物的生成；⑤保持合適的pH。 第7章 微生物的遺傳變異和育種 飾變：指外表的修飾性改變，意即一種不涉及遺傳物質(zhì)結(jié)構(gòu)改變而只發(fā)生在轉(zhuǎn)錄、翻譯水平上的表型變化。 大腸桿菌素：大腸桿菌分泌的一類(lèi)細(xì)菌素，對(duì)于其他不能分泌特異性大腸桿菌素免疫蛋白的近緣細(xì)菌具有殺滅作用，在一般認(rèn)為有調(diào)節(jié)菌群數(shù)量的作用。 營(yíng)養(yǎng)缺陷型：野生型菌株經(jīng)誘變劑處理后，由于發(fā)生了喪失酶合成能力的突變，因而只能在加有該酶合成產(chǎn)物的培養(yǎng)基中才能生長(zhǎng)，這類(lèi)突變菌株稱(chēng)為營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株，或簡(jiǎn)稱(chēng)營(yíng)養(yǎng)缺陷型。 變量實(shí)驗(yàn)、涂布試驗(yàn)、影印平板試驗(yàn) 影印平板試驗(yàn)：通過(guò)固體培養(yǎng)基表面“蓋印章”的接種方式，達(dá)到在一系列培養(yǎng)皿平板的相同位置上出現(xiàn)相同遺傳型菌落的接種和培養(yǎng)方法。 埃姆斯試驗(yàn)：利用細(xì)菌營(yíng)養(yǎng)缺陷型的回復(fù)突變來(lái)檢測(cè)環(huán)境或食品中是否存在化學(xué)致癌劑的簡(jiǎn)便有效方法。 基本培養(yǎng)基：僅能滿足某種微生物的野生型菌株生長(zhǎng)所需要的最低成分的組合培養(yǎng)基，稱(chēng)基本培養(yǎng)基。 完全培養(yǎng)基：凡可滿足某微生物一切營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株?duì)I養(yǎng)需要的天然或半組合培養(yǎng)基，稱(chēng)完全培養(yǎng)基。 補(bǔ)充培養(yǎng)基：凡只能滿足相應(yīng)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型突變株生長(zhǎng)需要的組合或半組合培養(yǎng)基，稱(chēng)補(bǔ)充培養(yǎng)基。 野生型：基因或生物體在自然界中常見(jiàn)的或非突變型的形式。 原養(yǎng)型：一般指營(yíng)養(yǎng)缺陷性突變株經(jīng)回復(fù)突變或重組后產(chǎn)生的菌株，其營(yíng)養(yǎng)要求在表型上與野生型相同，遺傳型均用[A+B+]來(lái)表示。 生長(zhǎng)譜法：是指在混有供試菌的基本培養(yǎng)基平板表面點(diǎn)加微量營(yíng)養(yǎng)物，視某營(yíng)養(yǎng)物的周?chē)蟹耖L(zhǎng)菌來(lái)確定該供試菌的營(yíng)養(yǎng)要求的一種快速、直觀的方法。 轉(zhuǎn)化：P217 感受態(tài)：是指受體細(xì)胞最容易接受外源DNA片段并能實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化的一種生理狀態(tài)。 轉(zhuǎn)導(dǎo)：通過(guò)缺陷噬菌體的媒介，把供體細(xì)胞中的小片段DNA攜帶到受體細(xì)胞中，通過(guò)交換與整合，使后者獲得前者部分遺傳性狀的現(xiàn)象。 普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)、完全轉(zhuǎn)導(dǎo)P219 缺陷噬菌體：能完成侵入但不能完成噬菌體正常生活史的噬菌體。 普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)（完全轉(zhuǎn)導(dǎo)）：通過(guò)極少數(shù)完整缺陷噬菌體對(duì)供體菌基因組上任何小片段DNA進(jìn)行“誤包”，而將其遺傳性狀傳遞給受體菌的現(xiàn)象。 局限轉(zhuǎn)導(dǎo)：指通過(guò)部分缺陷的溫和噬菌體把供體菌的少數(shù)特定基因攜帶到受體菌中，并與后者的基因組整合、重組，形成局限轉(zhuǎn)導(dǎo)子的現(xiàn)象。 溶源轉(zhuǎn)變：當(dāng)正常的溫和噬菌體感染其宿主而使其發(fā)生溶源化時(shí)，因噬菌體基因整合到宿主的核基因組上，而使宿主獲得了除免疫性外的新遺傳性狀的現(xiàn)象。 準(zhǔn)性生殖：是一種類(lèi)似于有性生殖，但比它更為原始的兩性生殖方式，這是一種在同種而不同菌株的體細(xì)胞間發(fā)生的融合，他可不借減數(shù)分裂而導(dǎo)致低頻率基因重組并產(chǎn)生重組子。 衰退：P231 復(fù)壯：狹義的復(fù)壯僅是一種消極的措施，指的是在菌種已發(fā)生衰退的情況下，通過(guò)純種分離和測(cè)定典型形狀、生產(chǎn)性能等指標(biāo)，從已衰退的群體中篩選出少數(shù)尚未退化的個(gè)體，已達(dá)到恢復(fù)原菌株固定有性狀的相應(yīng)措施；而廣義的復(fù)壯則應(yīng)是一項(xiàng)積極的措施，即在菌種的典型特征或生產(chǎn)性狀尚未衰退前，就經(jīng)常有意識(shí)地采取純種分離和生產(chǎn)性狀的測(cè)定工作，以期從中選擇到自發(fā)的正變個(gè)體。 誘變育種的基本步驟有哪些？關(guān)鍵是什么？何故？ 出發(fā)菌株→培養(yǎng)液→細(xì)胞或孢子懸液→誘變處理→平板分離→ 初篩→ 復(fù)篩→保藏及擴(kuò)大試驗(yàn) 關(guān)鍵是出發(fā)菌株的選擇和誘變方法的選擇。因?yàn)檫@些都決定誘變的效果和方向。 試以梯度平板法來(lái)說(shuō)明定向培育抗藥性菌株的原理，并說(shuō)明為何不能把定向培育說(shuō)成是“定向變異”。 梯度平板是一種含有某藥物的梯度濃度的瓊脂培養(yǎng)基平板，它由含藥物的上半個(gè)斜面和不含藥物的下半個(gè)斜面分兩次澆合而成。通過(guò)制備瓊脂表面存在藥物濃度的平板→在其上涂布誘變處理后的細(xì)胞懸液→經(jīng)培養(yǎng)后再?gòu)纳线x取抗藥性菌落等步驟，就可定向篩選到相應(yīng)抗藥性突變株。在篩選抗代謝藥物的抗性菌株以取得相應(yīng)代謝物的高產(chǎn)菌株方面，此法能達(dá)到定向培養(yǎng)的效果。 定向變異就是按照人的意愿通過(guò)一定的技術(shù)手段(主要是基因工程)讓生物朝人的需要進(jìn)行的變異。但是在定向培養(yǎng)中的變異是不定向的，是不可人為控制的。（實(shí)在編不下去...） 試用表解法概括一下篩選營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的主要步驟和方法。 篩選步驟如下： 1） 誘變劑處理，與一般誘變處理相同； 2） 淘汰野生型：通過(guò)抗生素法或菌絲過(guò)濾法就可淘汰為數(shù)眾多的野生型菌株，從而達(dá)到濃縮極少數(shù)營(yíng)養(yǎng)缺陷型的目的； 3） 檢出缺陷型：有夾層培養(yǎng)法，限量補(bǔ)充培養(yǎng)法，逐個(gè)檢出法，影印平版法； 4） 鑒定缺陷型，可借生長(zhǎng)譜法進(jìn)行。 抗生素法和菌絲過(guò)濾法為何能“濃縮”營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株？ 抗生素法有青霉素法和制霉菌法等數(shù)種。青霉素法適用于細(xì)菌，原理是青霉素能抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的生物合成，因而可殺死能正常生長(zhǎng)繁殖的野生型細(xì)菌，但無(wú)法殺死正處于休止?fàn)顟B(tài)的營(yíng)養(yǎng)缺陷型細(xì)菌，從而達(dá)到“濃縮”后者的目的。制霉菌法適用真菌，原理是制霉菌能與真菌細(xì)胞膜上甾醇作用，從而引起膜的損傷。因?yàn)樗荒軞⑺郎L(zhǎng)繁殖著的酵母菌或霉菌等真菌，故也可用于淘汰相應(yīng)的野生型菌株和“濃縮”營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株。 菌絲過(guò)濾法適用于進(jìn)行絲狀生長(zhǎng)的真菌和放線菌，原理是在基本培養(yǎng)基中，野生型菌株的孢子能發(fā)芽成菌絲，而營(yíng)養(yǎng)缺陷型的孢子則不能。因此，將誘變劑處理后的大量孢子放在基本培養(yǎng)基上培養(yǎng)一段時(shí)間后，再用濾孔較大的擦鏡紙過(guò)濾。如此重復(fù)數(shù)遍后，就可去除大部分野生型菌株，從而達(dá)到了“濃縮”營(yíng)養(yǎng)缺陷型的目的。 什么叫準(zhǔn)性生殖？試以蕁麻青霉為例，說(shuō)明利用準(zhǔn)性生殖進(jìn)行半知菌類(lèi)真菌雜交育種的一般操作。 準(zhǔn)性生殖是一種在同種而不同菌株的體細(xì)胞間發(fā)生的融合，它可不借減數(shù)分裂而導(dǎo)致低頻率基因重組并產(chǎn)生重組子。 1） 選擇親本。即選擇來(lái)自不同菌株的合適的營(yíng)養(yǎng)缺陷型作為準(zhǔn)性雜交的親本。2）強(qiáng)制異合。即用人為的方法強(qiáng)制兩個(gè)營(yíng)養(yǎng)缺陷型的親本菌株形成互補(bǔ)的異核體。3）移單菌落。將平板上長(zhǎng)出的單菌落移種到基本培養(yǎng)基[ — ]的斜面上。4）驗(yàn)穩(wěn)定性。指設(shè)法檢驗(yàn)獲得的菌株究竟是一種不穩(wěn)定的異核體，還是穩(wěn)定的雜合二倍體。5）促進(jìn)變異。6）選出良種。 第八章 微生物的生態(tài) 正常菌落：生活在健康動(dòng)物各部位、數(shù)量大、種類(lèi)較穩(wěn)定、一般能發(fā)揮有益作用的微生物種群。 條件致病菌：某種特定條件下可致病的細(xì)菌。 共生：指兩種生物共居在一起，相互分工合作、相依為命，甚至形成獨(dú)特結(jié)構(gòu)，達(dá)到難分難解、合二為一的極其緊密的一種相互關(guān)系。 寄生：一般指一種小型生物生活在另一種較大型生物的體內(nèi)（包括細(xì)胞內(nèi)）或體表，從中奪取營(yíng)養(yǎng)并進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖，同時(shí)使后者蒙受損害甚至被殺死的一種相互關(guān)系。 拮抗：又稱(chēng)抗生，指由某種生物所產(chǎn)生的特定代謝產(chǎn)物可抑制他種生物的生長(zhǎng)發(fā)育甚至殺死它們的一種相互關(guān)系。 捕食：指一種大型的生物直接捕捉、吞食另一種小型生物以滿足其營(yíng)養(yǎng)需要的相互關(guān)系。 混菌培養(yǎng)（混合培養(yǎng)）:將兩種或數(shù)種微生物混在一起培養(yǎng)，以獲得更好效果的培養(yǎng)方法。 生化需氧量（BOD）：指1L污水或待測(cè)水樣中所含的一部分易氧化的有機(jī)物，當(dāng)微生物對(duì)其氧化、分解時(shí)，所消耗的水中溶解氧毫克數(shù)（其單位為mg/L）。 化學(xué)需氧量（COD）：指1L污水中所含的有機(jī)物在強(qiáng)氧化劑將它氧化后，所消耗氧的毫克數(shù)（其單位為mg/L）。 一杯清水，一杯自來(lái)水放在陽(yáng)臺(tái)上，兩者微生物的變化？ 最初，微生物數(shù)量較少，主要是清水型水生微生物，當(dāng)中以化能自養(yǎng)微生物和光能自養(yǎng)微生物為主。 然后，水型水生微生物數(shù)量上升后下降，而腐敗型水生微生物數(shù)量上升。 最終，變成主要是敗型水生微生物為主，有各種腸道桿菌、芽孢桿菌、弧菌和螺菌等 清水最初基本無(wú)微生物，然后微生物數(shù)量上升，其中主要是清水型水生微生物，再然后...（請(qǐng)自行改良） 第9章 傳染與免疫 外毒素：指在病原細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中不斷向外界環(huán)境分泌的一類(lèi)毒性蛋白質(zhì)，有的屬于酶，有的屬于酶原，有的屬于毒蛋白。 類(lèi)毒素：若用0.3%~0.4%甲醛溶液對(duì)外毒素進(jìn)行脫毒處理，可獲得失去毒性但仍保留其原有免疫原性（抗原性）的生物品。 內(nèi)毒素：是G-細(xì)菌細(xì)胞壁外層的組分之一，其化學(xué)成分是脂多糖。 補(bǔ)體：存在于正常人體或高等動(dòng)物血清中的一組非特異性血清蛋白。 干擾素：是高等動(dòng)物細(xì)胞在病毒或dsRNA等干擾素誘生劑的刺激下，所產(chǎn)生的一種具有高活性、廣譜抗病毒等功能的特異性糖蛋白。 免疫應(yīng)答：一類(lèi)發(fā)生在活生物體內(nèi)的特異性免疫的系列反應(yīng)過(guò)程。 細(xì)胞免疫：指機(jī)體在抗原刺激下，依賴胸腺的T細(xì)胞發(fā)生增殖、分化，進(jìn)而直接攻擊靶細(xì)胞或間接地釋放淋巴因子的免疫作用。 體液免疫：指機(jī)體受抗原刺激后，B細(xì)胞進(jìn)行增殖并分化為漿細(xì)胞，由它合成抗體并釋放到體液中以發(fā)揮其免疫作用。 胸腺依賴性抗原（TD抗原）：包括血細(xì)胞、血清成分、細(xì)菌細(xì)胞核其他可溶性蛋白等在內(nèi)的多數(shù)抗原。 非胸腺依賴性抗原（TI抗原）：指它在刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體時(shí)，不需要T細(xì)胞輔助的抗原或是對(duì)T細(xì)胞依賴程度很低的抗原。（包括一些多糖類(lèi)、脂類(lèi)和核酸類(lèi)抗原，例如細(xì)菌莢膜多糖、LPS或聚鞭毛蛋白等，它們一半僅引起機(jī)體產(chǎn)生體液免疫中的初次應(yīng)答，而不引起再次應(yīng)答。） T細(xì)胞表面標(biāo)志：包括表面受體和表面抗原兩類(lèi)。 抗原：是一類(lèi)能誘惑機(jī)體發(fā)生免疫應(yīng)答并能與相應(yīng)抗體或T淋巴細(xì)胞受體發(fā)生特異性免疫反應(yīng)的大分子物質(zhì)。 半抗原：缺乏免疫原性而有免疫反應(yīng)性的抗原物質(zhì)。 抗原決定簇：位于抗原表面可決定抗原性的特異性的特定化學(xué)基團(tuán)，亦即指構(gòu)成抗原的免疫原性所必需的最少亞單位數(shù)。 初次免疫應(yīng)答、再次免疫應(yīng)答P306 抗原結(jié)合價(jià)：凡能與抗體相結(jié)合的抗原決定簇的總數(shù)。 免疫交叉反應(yīng)：在細(xì)菌細(xì)胞中存在多種抗原，由于甲、乙兩菌存在共同抗原而引起的甲菌抗原（或抗體）與乙菌抗體（或抗原）間發(fā)生較弱的免疫反應(yīng)的現(xiàn)象。 克隆選擇學(xué)說(shuō)：澳大利亞免疫學(xué)家F.M.伯內(nèi)特于1957年提出的抗體形成理論。（1）在高等動(dòng)物體內(nèi)，天生存在著大量具有不同抗原受體的免疫細(xì)胞克隆每細(xì)胞表面僅一種特異性抗原受體，它的存在受遺傳基因控制。（2）某一特定抗原進(jìn)入機(jī)體，就可與相應(yīng)淋巴細(xì)胞表面上唯一的一個(gè)與其相應(yīng)的特異性受體發(fā)生結(jié)合。（3）生物處于胚胎期時(shí)，若某一淋巴細(xì)胞克隆接觸相應(yīng)抗原(不論外來(lái)抗原或自身抗原)，則它會(huì)被消除、排除或受抑制（失活），形成禁忌細(xì)胞，它們對(duì)機(jī)體自身抗原物質(zhì)不發(fā)生免疫應(yīng)答，即處于天然耐受狀態(tài)。（4）禁忌克隆可復(fù)活或發(fā)生突變，從而又可成為能與自身抗原成分起免疫應(yīng)答的克隆。 免疫耐受性：當(dāng)生物處于胚胎期時(shí)，若某一淋巴細(xì)胞克隆接觸相應(yīng)抗原(不論外來(lái)抗原或自身抗原)，則它會(huì)被消除、排除或受抑制（失活），形成禁忌細(xì)胞，它們對(duì)機(jī)體自身抗原物質(zhì)不發(fā)生免疫應(yīng)答，即處于天然耐受狀態(tài)。 什么是免疫應(yīng)答？由TD抗原和TI抗原引起的免疫應(yīng)答反應(yīng)有何不同？試加以說(shuō)明。 免疫應(yīng)答是指一類(lèi)發(fā)生在活生物體內(nèi)的特異性免疫的系列反應(yīng)過(guò)程。這是一個(gè)從抗原的刺激開(kāi)始，經(jīng)過(guò)抗原特異性淋巴細(xì)胞對(duì)抗原的識(shí)別（感應(yīng)），使淋巴細(xì)胞發(fā)生活化、增殖、分化等一系列變化，最終表現(xiàn)出相應(yīng)的體液免疫或（和）細(xì)胞免疫效應(yīng)。 產(chǎn)生TD抗體需要何種免疫細(xì)胞參與？試說(shuō)明其過(guò)程。 需要3中免疫細(xì)胞的參與，他們分別是： 1） 抗原遞呈細(xì)胞，主要是巨噬細(xì)胞，能有效攝取、處理、遞呈抗原和激活T細(xì)胞；2）T細(xì)胞，在抗體形成過(guò)程中能特異性地識(shí)別抗原，輔助B細(xì)胞，促使B細(xì)胞活化和進(jìn)一步分化成漿細(xì)胞以產(chǎn)生抗體。3）B細(xì)胞，是產(chǎn)生抗體的效應(yīng)細(xì)胞，也能特異識(shí)別抗原。 什么是免疫分子？試以MHC蛋白為例作圖， 說(shuō)明它在免疫應(yīng)答中的功能。 免疫分子主要指抗原和抗體。 什么是Burnet抗體形成的克隆選擇學(xué)說(shuō)？試圖示并簡(jiǎn)要說(shuō)明之。 克隆選擇學(xué)說(shuō)的要點(diǎn)是：其要點(diǎn)為： 1） 在高等動(dòng)物體內(nèi)，天生存在著大量具有不同抗原受體的免疫細(xì)胞克隆每細(xì)胞表面僅一種特異性抗原受體，它的存在受遺傳基因控制。 2） 某一特定抗原進(jìn)入機(jī)體，就可與相應(yīng)淋巴細(xì)胞表面上唯一的一個(gè)與其相應(yīng)的特異性受體發(fā)生結(jié)合。由此從無(wú)數(shù)免疫細(xì)胞克隆中選擇出一個(gè)與之相對(duì)應(yīng)的克隆，促使這一克隆發(fā)生活化、增殖和分化，最終變成能分泌大量相應(yīng)抗體的漿細(xì)胞和記憶細(xì)胞的過(guò)程。 3） 當(dāng)生物處于胚胎期時(shí)，若某一淋巴細(xì)胞克隆接觸相應(yīng)抗原(不論外來(lái)抗原或自身抗原)，則它會(huì)被消除、排除或受抑制（失活），形成禁忌細(xì)胞，它們對(duì)機(jī)體自身抗原物質(zhì)不發(fā)生免疫應(yīng)答，即處于天然耐受狀態(tài)，這就稱(chēng)免疫耐受性的原因。 4）禁忌克隆可復(fù)活或發(fā)生突變，從而又可成為能與自身抗原成分起免疫應(yīng)答的克隆。 第十章 微生物的分類(lèi)和鑒定 種：是生物分類(lèi)中基本的分類(lèi)單元和分類(lèi)等級(jí)。微生物的種可以看作是：具有高度相似、親緣關(guān)系極其接近、與同屬內(nèi)的其他物種有著明顯差異的菌株的總稱(chēng)。 模式種：微生物中，一個(gè)種只能用該種內(nèi)的一個(gè)典型菌株當(dāng)作它的具體代表，故此典型菌株就是該種的模式種或模式活標(biāo)本。 菌株：從自然界中分離得到的任何一種微生物的純培養(yǎng)物都可以稱(chēng)為微生物的一個(gè)菌株；用實(shí)驗(yàn)方法（如通過(guò)誘變）所獲得的某一菌株的變異型，也可以稱(chēng)為一個(gè)新的菌株，以便與原來(lái)的菌株相區(qū)別。菌株是微生物分類(lèi)和研究工作中最基礎(chǔ)的操作實(shí)體。 三域?qū)W說(shuō)：20世紀(jì)70年代末由于美國(guó)伊利諾斯大學(xué)C．R．Woose等人對(duì)大量微生物和其它生物進(jìn)行16S和18S rRNA寡核苷酸測(cè)序,并比較其同源性水平后,提出了一個(gè)與以往各種界級(jí)分類(lèi)不同的新系統(tǒng)，稱(chēng)為三域?qū)W說(shuō)。包括細(xì)菌域、古生菌域和真核生物域。 什么是學(xué)名？用雙名法和三名法表達(dá)學(xué)名有何差別？ 學(xué)名是某一菌種的科學(xué)名稱(chēng)，是按“國(guó)際命名法規(guī)”進(jìn)行命名并受?chē)?guó)際學(xué)術(shù)界公認(rèn)的通用正式名稱(chēng)。 雙名法（屬名大寫(xiě)，種名加詞小寫(xiě)）： 學(xué)名=屬名+種名加詞+（首次定名人）+現(xiàn)名定名人+現(xiàn)名定名年份 排斜體字 排正體字（一般省略） 三名法：學(xué)名=屬名+種名加詞+符號(hào)subsp或var+亞種或變種名的加詞 排斜體 排正體（可省略） 排斜體（不可省略） 何謂三域?qū)W說(shuō)？提出此學(xué)說(shuō)的依據(jù)何在？它在目前還存在何種挑戰(zhàn)？ 20世紀(jì)70年代末由于美國(guó)伊利諾斯大學(xué)C．R．Woose等人對(duì)大量微生物和其它生物進(jìn)行16S和18S rRNA寡核苷酸測(cè)序,并比較其同源性水平后,提出了一個(gè)與以往各種界級(jí)分類(lèi)不同的新系統(tǒng)，稱(chēng)為三域?qū)W說(shuō)。包括：細(xì)菌域、古生菌域和真核生物域。 挑戰(zhàn)：1）有些學(xué)者認(rèn)為6S和18S rRNA的分子進(jìn)化很難代表整個(gè)基因組的分子進(jìn)化。2）已知有許多真核生物的基因組和它們表達(dá)的功能蛋白更接近于細(xì)菌而非接近于古生菌等。