高中生物《植物組織培養(yǎng)技術(shù)》課件25（26張PPT）（蘇教版選修1）

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歡迎進入生物課堂 植物組織培養(yǎng)的基本技術(shù) 一 植物組織培養(yǎng)實驗室的結(jié)構(gòu)及設(shè)計要求 完整的植物組織培養(yǎng)室通常包括洗滌室 化學(xué)實驗室 接種室 培養(yǎng)室 細胞學(xué)實驗室等部分 可以根據(jù)實際需要和條件進行設(shè)計 但從功能上至少包括化學(xué)實驗室或準(zhǔn)備室 接種室以及培養(yǎng)室三部分 并且按順序排列 在化學(xué)實驗室與接種室之間應(yīng)留有緩沖空間 實驗室結(jié)構(gòu) 儀器設(shè)備及操作技術(shù) 一 化學(xué)實驗室 準(zhǔn)備室 1 主要功能 用于培養(yǎng)器皿的清洗 培養(yǎng)基的配制 分裝和滅菌 試管苗的出瓶及整理等工作 2 主要儀器設(shè)備及用品 冰箱 天平 高壓滅菌鍋 pH計 干燥箱 實驗臺 水槽 涼干架 藥品柜 離心機 水浴鍋 微波爐 電爐 磁力攪拌器 蠕動泵 移液器 各種玻璃器皿 燒杯 量筒 容量瓶 試劑瓶 三角瓶等 及培養(yǎng)基分裝用品等 百分之一天平 千分之一天平 萬分之一天平 各種型號的高壓滅菌鍋 移液器 二 接種室 無菌操作室 1 功能 植物材料的滅菌 接種以及培養(yǎng)物的繼代轉(zhuǎn)接等 接種室要求保持潔凈 與化學(xué)實驗室之間應(yīng)設(shè)置緩沖室 2 儀器設(shè)備及用品 超凈工作臺 紫外燈 小推車 擱架 磁盤 接種工具 各種鑷子 解剖刀 手術(shù)剪 普通剪刀接種針 酒精燈 手持噴霧器 細菌過濾器等 等 超凈工作臺 三 培養(yǎng)室 1 功能 主要用于植物材料的培養(yǎng) 要求室內(nèi)潔凈并能保持一定的溫度 光照以及濕度以適合植物材料的生長和分化 2 儀器設(shè)備及用品 培養(yǎng)架及燈管 搖床 振蕩器 空調(diào) 自動定時器 加濕及除濕器 光照培養(yǎng)箱 溫濕度計燈等 培養(yǎng)架 光照培養(yǎng)箱 恒溫振蕩器 多用振蕩器 四 細胞學(xué)實驗室 1 功能 主要用于培養(yǎng)材料的顯微觀察及照相等 2 儀式設(shè)備及用品 體視顯微鏡 普通顯微鏡 倒置顯微鏡 熒光顯微鏡 配套顯微照相裝置 普通相機或數(shù)碼相機 切片機及配套制片及染色用品等 體視顯微鏡 普通光學(xué)顯微鏡 倒置顯微鏡 倒置熒光顯微鏡 二 實驗室基本操作 一 洗滌 1 普通器皿 采用洗衣粉 洗潔精等中性洗滌劑洗滌 2 難清洗器皿及移液管等 用水清洗后再用重鉻酸鉀洗液浸泡 最后清水沖洗 或用超聲波儀清洗 二 滅菌 1 器具滅菌 培養(yǎng)皿 解剖刀 鑷子等用品 1 干熱滅菌 鋁箔包好后 放于恒溫干燥箱內(nèi) 150 保溫2小時 成本較高 2 高壓蒸汽滅菌 高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi)120 15 20分鐘 3 灼燒滅菌 接種時 解剖刀及鑷子等浸入95 乙醇 然后取出在酒精燈火焰上灼燒殺菌 2 培養(yǎng)基滅菌 采用高壓蒸汽滅菌 120 15 20分鐘 培養(yǎng)基體積越大 滅菌時間越長 3 不耐高溫化合物 采用過濾滅菌 如IAA等 4 外植體的表面滅菌 采用70 75 乙醇 10 30秒 有效氯1 的次氯酸鈉 5 30分鐘 0 1 0 2 的氯化汞 2 15分鐘 等 殺菌劑中加入幾滴吐溫 20或80 Tween 20或80 效果較好 三 無菌操作 1 保持接種室的無污染環(huán)境 定期熏蒸或噴霧處理 進行消毒 接種前打開超凈工作臺及紫外燈照射20 30分鐘 關(guān)閉紫外等燈后使氣體散出后開始操作 2 保持超凈工作臺的潔凈 接種前用70 乙醇擦拭臺面或用噴壺噴霧 操作前 將手和手臂用70 乙醇消毒 所需試驗用品用乙醇擦拭后放入超凈工作臺 3 點燃酒精燈 進行操作 接種材料前后 灼燒瓶口 工具要灼燒徹底 防止交叉污染 4 保持培養(yǎng)室的潔凈 發(fā)現(xiàn)污染及時挑出 并在滅菌后清洗 以減少污染源 5 操作中穿工作服 戴口罩 工作帽 出入接種室換拖鞋以保持接種室的潔凈 20050912 同學(xué)們 來學(xué)校和回家的路上要注意安全 同學(xué)們 來學(xué)校和回家的路上要注意安全