w-第2章 第3節(jié) 細胞融合與單克隆抗體 導學案10 打印

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1、 知識改變命運，學習成就未來 執(zhí)筆人：王國禮 高二生物選修3 導學提綱10 第三節(jié) 動物細胞工程 導學案2 ——細胞融合和單克隆抗體 【課前預習】 1．誘導動物細胞融合的方法有哪些？ 2．制備單克隆抗體時選擇的兩個親本細胞分別是什么？請說明理由。 【創(chuàng)設(shè)情境】 我們知道，運用植物體細胞雜交技術(shù)，可以跨越植物種間生殖隔離的屏障，培育出新的作物類型。那么，能不能采用類似的方法，讓不同種動物的

2、體細胞進行雜交呢？ 【預習新課】 一、動物細胞融合： 1、概念：動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞結(jié)合形成一個細胞的過程。融合后形成的具有原來兩個或多個細胞遺傳信息的單核細胞，稱為雜交細胞。 2、誘導融合的方法：動物細胞融合的方法主要有 法、 法和 法。在細胞融合后，還應該對融合的細胞進行 。 3、動物細胞融合的意義：克服了 ，成為研究細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物生物新品種培育的重要手段。 4、應用：動物細胞融合技術(shù)最重要的用途是制備

3、 。 【拓展】動物細胞融合與植物體細胞雜交的比較： 比較項目 細胞融合的原理 細胞融合的方法 誘導手段 用途 植物體細胞雜交 細胞膜的流動性 用纖維素酶、果膠酶去除細胞壁后誘導原生質(zhì)體融合 離心、電刺激、振動、聚乙二醇（PEG）誘導 克服遠源雜交不親和，獲得雜種植株 動物細胞融合 細胞膜的流動性 用胰蛋白酶使細胞分散后誘導細胞融合 除應用植物細胞雜交手段外，還有用滅活病毒誘導 制備單克隆抗體 二、 單克隆抗體的制備： 醫(yī)學上傳統(tǒng)抗體的制備：從人的血液中提取，但提取的抗體是多種抗體的混合物。這種混合抗體，不能專一性地對抗某一種病原體，因此治療效

4、果差。 制備化學性質(zhì)單一的抗體的原理： 單個效應B細胞能產(chǎn)生化學性質(zhì)單一的抗體，但在體外培養(yǎng)條件下，效應B細胞不能無限增殖，因此產(chǎn)生的抗體的量非常有限。 在體外培養(yǎng)的骨髓瘤細胞具有無限增殖的特點，但不能產(chǎn)生抗體 1、制備單克隆抗體時選擇的兩個親本細胞分別是什么？ 2、制備原理： ① 細胞 能產(chǎn)生特異性強抗體，在體外不能無限繁殖 細胞 不產(chǎn)生專一性強抗體，體外能無限繁殖 ② 利用 使兩種細胞融合。 注入小鼠 細胞融合 分離 抗原注入小鼠體內(nèi)

5、 骨髓瘤細胞 細胞培養(yǎng) 選擇培養(yǎng)細胞 培養(yǎng)基 體內(nèi)培養(yǎng) 體外培養(yǎng) 從腹水提取 從培養(yǎng)液提取 3.制備過程： 思考：雜交瘤細胞有什么特點？ 【分析】給小鼠注射特定的抗原蛋白是為了使小鼠獲得相應的免疫反應，從而獲得相應的效應B淋巴細胞；誘導動物細胞融合以后，在相應的培養(yǎng)基上至少存在 種類型的細胞，即： 。因此，要對融合后的細胞進行篩選。篩選出既可以

6、 ，又可以 的雜交瘤細胞，將之在培養(yǎng)基上進行克隆。 4. 單克隆抗體的優(yōu)點： 。 ☆應抓住三個一，即“一種誘導細胞融合的新方法——滅活的病毒；一種新細胞——雜交瘤細胞；一種優(yōu)勢——單克隆抗體的特異性強、靈敏度高的抗體）。 5．單克隆抗體的作用： 作為診斷試劑：準確識別各種 物質(zhì)的細微差異，并跟一定 發(fā)生特異性結(jié)合，具有準確、高效、簡易、快速的優(yōu)點。 用于治療疾病和運載藥物：主要用于治療 ，可制成“

7、 ”，也有少量用于治療其它疾病。 【經(jīng)典例題剖析】 例1、動物細胞融合的目的中最重要的是 A.克服遠源雜交不親和 B.制備單克隆抗體 C.培育新物種 D.生產(chǎn)雜種細胞 例2、能使動物細胞融合的特有的誘導因子是 A.離心 B.滅活的病毒 C.電刺激不 D.振動 例3科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交細胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，與骨髓瘤細胞融合的是 A.經(jīng)過免疫的B淋巴細胞 B.不經(jīng)過免疫的T淋巴細胞 C.經(jīng)過免疫的T淋巴細胞 D.不經(jīng)過免疫的B淋巴細胞

8、 例4、右圖為細胞融合的簡略過程，請據(jù)圖回答： （1）若A、B是植物細胞，在細胞融合之前已用 _______ ______ 處理，除去了 _______ ；由A、B到細胞C的過程中，常用的物理方法是 ____________________ 。融合完成的標志是________ 。 （2）若A、B是植物細胞，則形成的D細胞還要應用 _________ _____ 技術(shù)把D培養(yǎng)成植株。 （3）若A、B是動物細胞，一般取自 _____ ，然后用 使其分散開來；由A、B到C的過程中，常用的不同于植物細胞融合

9、的手段是 _________ ，所形成的D稱為 __________ ，A、B融合為C的過程說明了細胞膜具有 。 （4）若該過程是制備單克隆抗體，A為小鼠效應B細胞，那么，在獲得此細胞之前，小鼠已經(jīng)被注射了 。注射后小鼠身體發(fā)生了相應的免疫反應，生成了 _______ ________________________________________，圖中B為 ____________ 。 （5）若該過程仍是制備單克隆抗體，在A、B到C的過程中，所形成的C有 種，用來培養(yǎng)的D細胞應該是

10、 _____________ 。從中選擇出它的方法是 ___________ 培養(yǎng)，獲得D后，常用的培養(yǎng)方法是培養(yǎng)液中培養(yǎng)和 _________________________ 。 【基礎(chǔ)試題訓練】 一、選擇題 1．動物細胞融合和植物原生質(zhì)融合決定于 （　 ） 　　A.細胞膜的流動性 B．細胞膜的選擇透過性 C.細胞質(zhì)的流動性　 D．細胞質(zhì)酶的活性 2．只能使動物細胞融合的常用誘導方法是 （ ） A．PEG　　B．滅活的病毒 　C．電刺激 D．離心 3．科學家用小鼠骨髓瘤細胞與某種細胞融合，得到雜交細胞，經(jīng)培養(yǎng)可產(chǎn)生大量的單克隆抗體，

11、與骨髓瘤細胞融合的是 （ ） A．經(jīng)過免疫的B淋巴細胞 B．不經(jīng)過免疫的T淋巴細胞 C．經(jīng)過免疫的T淋巴細胞 D．不經(jīng)過免疫的B淋巴細胞 4．（2004年，全國）用動物細胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體，下列實驗步驟中錯誤的是（ ） A．將抗原注入小鼠體內(nèi)，獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞 B．用纖維素酶處理B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞 C．用聚乙二醇作誘導劑，促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合 D．篩選雜交資金積累細胞，并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細胞群，培養(yǎng)后提取單克隆抗體 5．研究單克隆抗體治療癌癥的思路是 （ ） A．利用單克隆抗體

12、特異性地對抗癌細胞 B．以單克隆抗體作抗癌藥物殺死癌細胞 C．抗癌物質(zhì)在克隆細胞中大量合成 D．單克隆抗體攜帶抗癌藥物特異性地與癌細胞結(jié)合 6．單克隆抗體是由下列哪種細胞產(chǎn)生的 （ ） A．B淋巴細胞 　B．T淋巴細胞 C．骨髓瘤細胞 D．雜交瘤細胞 7．單克隆抗體和血清抗體相比，其優(yōu)越性在于 （ ） A、單克隆抗體能夠制成“生物導彈” B、單克隆抗體能夠在體外制備 C、單克隆抗體比血清抗體的特異性強、免疫活性高 D、單克隆抗體制備過程簡單 8.動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的是

13、（　 ） ① 誘導融合的方法完全相同 ②所用的技術(shù)手段不相同 ② 所采用的原理完全相同 ④都能形成雜種細胞 A.①② B.①③ C.②④ D.③④ 9．動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是 （　 ） 　　A.動物細胞融合　　B.單克隆抗體　　C.胚胎移植　　D.動物細胞培養(yǎng) 10.“生物導彈”是指 （ ） A、單克隆抗體 B、帶有特定藥物的單克隆抗體 C、雜交細胞 D、B淋巴細胞 11、單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導融合后，要用特定培

14、養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活．增殖的細胞是 ①B淋巴細胞 ②小鼠骨髓瘤細胞 ③B淋巴細胞自身融合細胞 ④小鼠骨髓瘤細胞自身融合細胞 ⑤雜交瘤細胞 A．①②③④ B．①③⑤ C．②④ D．①③ 12、下圖是單克隆抗體制備過程示意圖，其中1過程注射的物質(zhì)和A細胞的名稱為 （ ） A、抗體、T淋巴細胞 B、抗原、T淋巴細胞 C、抗體、B淋巴細胞 D、抗原、效應B淋巴細胞 13.（多選）下列關(guān)于單克隆抗體的制備和應用的敘述中，正確的是 （　 ） A．B淋巴細胞與骨髓瘤細胞的融合，一般

15、不需要滅活的仙臺病毒或聚乙二醇誘導 B．融合后形成的雜交瘤細胞既能無限增殖，又能產(chǎn)生單克隆抗體 C．體外培養(yǎng)時，一個效應B淋巴細胞可以產(chǎn)生抗體，但不能無限增殖 D．單克隆抗體與常規(guī)抗體相比，特異性強，靈敏度高，優(yōu)越性明顯 14．（多選）1975年米爾斯坦和柯勒成功地獲得了單克隆抗體。下列細胞中與單克隆抗體的制備有關(guān)的是 A.效應B細胞 B．T淋巴細胞　　C.骨髓瘤細胞 　　 D．雜交瘤細胞 二、 非選擇題 1、下圖是單克隆抗體制備過程示意圖，據(jù)圖回答： （1）圖中A過程是從小鼠的脾臟中取得___________細胞，該細胞能夠產(chǎn)

16、生_________。從小鼠體內(nèi)提取分離該細胞之前，應給小鼠注射_____________類物質(zhì)。 （2）B過程是一個_____________過程，該過程的進行需要滅活的_____________或_____________的誘導。 （3）單克隆抗體在疾病的診斷、治療和預防方面，與常規(guī)抗體相比，其特點是_________________。 2、下圖是單克隆抗體制備流程階段示意圖。 ⑴ 技術(shù)是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。 ⑵根據(jù)培養(yǎng)基的用途分類，圖中 HAT 培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。 ⑶單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是

17、 。 ⑷動物細胞融合除了采用植物細胞原生質(zhì)體融合常用的誘導劑外，還可以采用 。 ⑸選出的雜交瘤細胞既具備骨髓瘤細胞的 特點，又具備淋巴細胞的 特點。 ⑹淋巴細胞是由動物體骨髓中的 細胞分化、發(fā)育而來。 ⑺雜交瘤細胞從培養(yǎng)基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是 。 受精作用、原生質(zhì)體融合、動物細胞融合 ? ? 受精作用 原生質(zhì)體融合 動物細跑融合 ?不 ?同 ?點 ? 細胞類型不同 精子與卵細胞 體細胞 體細胞 細胞來源不同 來自同一生物個體 一般來自不同種的生物個體 一般來自不同種的生物個體 染色體數(shù)目變化不同 2N 2N+2N不一定是2N×2 2N+2N不一定是2N×2 融合條件不同 不需人工誘導 需人工誘導 需人工誘導 同 都有兩個細胞融合成一個細胞，并且融合成這個細胞的遺傳物質(zhì)都是由原來的兩個細胞決定的 4