反芻動(dòng)物糞中阿克醇濃度測(cè)定方法編制說明

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1、《反芻動(dòng)物糞中阿克醇濃度測(cè)定方法》編制說明 一、工作簡(jiǎn)況 ⒈ 任務(wù)來源：任務(wù)來源：原內(nèi)蒙古質(zhì)監(jiān)局《關(guān)于下達(dá)2018年第二批內(nèi)蒙古自治區(qū)地方標(biāo)準(zhǔn)制修訂項(xiàng)目計(jì)劃的通知》（內(nèi)質(zhì)監(jiān)標(biāo)函〔2018〕154號(hào)） ⒉ 起草單位：內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院 ⒊ 起草人：孫海洲、張春華、李勝利、桑丹、張崇志、金鹿、珊丹、凌樹禮、任曉萍、伶俐。 二、制定標(biāo)準(zhǔn)的目的和意義 隨著全球氣候變暖形勢(shì)的日益嚴(yán)峻,人們?cè)絹碓疥P(guān)注溫室氣體的排放問題。溫室氣體的排放問題已成為全球關(guān)注的焦點(diǎn)，研究降低反芻動(dòng)物甲烷排放的技術(shù)措施，成為畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展的關(guān)鍵。目前測(cè)定甲烷排放量的技術(shù)主要有：六氟化硫（SF6）示蹤法、呼吸代謝

2、箱技術(shù)、體外產(chǎn)氣法、CO2示蹤技術(shù)、模型化方法、微氣象測(cè)定技術(shù)、生物指示物法、呼吸代謝箱技術(shù)等，但現(xiàn)有方法存在著技術(shù)設(shè)備復(fù)雜等不足，開發(fā)簡(jiǎn)便快捷的測(cè)定反芻動(dòng)物內(nèi)源甲烷排放量的技術(shù)，對(duì)于準(zhǔn)確測(cè)定反芻動(dòng)物內(nèi)源甲烷排放量、篩選有效的減排技術(shù)措施具有重要意義。本項(xiàng)目團(tuán)隊(duì)前期通過測(cè)定反芻動(dòng)物糞中古細(xì)菌膜脂成分阿克醇（archaeol）濃度，建立了阿克醇與動(dòng)物甲烷產(chǎn)量的相關(guān)關(guān)系。因此，通過糞中阿克醇含量的測(cè)定可以很好預(yù)測(cè)反芻動(dòng)物內(nèi)源甲烷產(chǎn)量。為了提高生產(chǎn)實(shí)際中測(cè)定反芻動(dòng)物內(nèi)源甲烷排放量的準(zhǔn)確性，由內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院動(dòng)物營養(yǎng)與飼料研究所制定和起草了“反芻動(dòng)物糞中阿克醇濃度測(cè)定方法”標(biāo)準(zhǔn)，為更加便捷和準(zhǔn)

3、確反映溫室氣體的排放問題提供指導(dǎo)，對(duì)畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展提供可靠依據(jù)。 三、主要起草過程 1.標(biāo)準(zhǔn)的制定過程 本標(biāo)準(zhǔn)由內(nèi)蒙古自治區(qū)農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院的科研工作人員，在執(zhí)行內(nèi)蒙古農(nóng)牧業(yè)科學(xué)院青年創(chuàng)新基金“內(nèi)蒙古白絨山羊糞中阿克醇濃度、內(nèi)源甲烷排放量及瘤胃內(nèi)產(chǎn)甲烷菌總數(shù)間相關(guān)性研究”（2016-2018）等項(xiàng)目的過程中，通過采集反芻動(dòng)物糞樣烘干等前處理制備好，在大量查閱國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)和已有的前期工作的基礎(chǔ)之上，使用熱電DSQ單四級(jí)桿氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用分析儀，利用六氟化硫（SF6）示蹤法和呼吸面罩測(cè)定了奶牛、絨山羊和細(xì)毛羊的甲烷產(chǎn)量，并同時(shí)采集了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物相應(yīng)的糞便，進(jìn)行了各動(dòng)物糞便中阿克醇濃度的測(cè)定，最終

4、建立了各自物種甲烷產(chǎn)量與糞便中阿克醇濃度的回歸公式。在實(shí)驗(yàn)過程中通過對(duì)測(cè)定方法不斷優(yōu)化，最終制定出“反芻動(dòng)物糞中阿克醇濃度測(cè)定方法”標(biāo)準(zhǔn)。 2. 工作過程 2018年4月開始查閱國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，與本實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行對(duì)照，2018年6月份到2019年9月期間通過長時(shí)間的摸索份采集內(nèi)蒙古地區(qū)奶牛、絨山羊和細(xì)毛羊三種主要反芻動(dòng)物，根據(jù)實(shí)施方案的具體要求，開展以下幾方面的研究工作：一是組織實(shí)驗(yàn)室相關(guān)人員對(duì)采集的樣本進(jìn)行阿克醇含量的測(cè)定；二是依據(jù)測(cè)定結(jié)果來判斷該方法的可重復(fù)性和準(zhǔn)確度的高低；三是將測(cè)得的結(jié)果與國外相關(guān)研究結(jié)果和方法進(jìn)行比較。本研究中建立起的關(guān)于反芻動(dòng)物糞中阿克醇濃度的測(cè)定方法，是反映瘤胃

5、中產(chǎn)甲烷古細(xì)菌數(shù)量的直接指標(biāo)，與個(gè)體甲烷排放量存在直接關(guān)系，本技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)可以為草食家畜低碳減排技術(shù)和日糧高效利用提供一定的理論依據(jù)。 四、標(biāo)準(zhǔn)編制原則和依據(jù) （一）標(biāo)準(zhǔn)編制原則 本標(biāo)準(zhǔn)嚴(yán)格按照GB/T1.1-2009標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第一部分標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則進(jìn)行編寫的。在制定本標(biāo)準(zhǔn)的過程中，汲取國內(nèi)外同類標(biāo)準(zhǔn)先進(jìn)生產(chǎn)技術(shù)及編制的先進(jìn)經(jīng)驗(yàn)和方法，力求以實(shí)事求是的原則使本標(biāo)準(zhǔn)具有較強(qiáng)的科學(xué)性、先進(jìn)性、可靠性和可操作性。 （二）主要技術(shù)內(nèi)容確定的依據(jù) 在進(jìn)行大量試驗(yàn)研究的基礎(chǔ)上，結(jié)合國外反芻動(dòng)物內(nèi)源甲烷排放量的測(cè)定方法，對(duì)實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備、化學(xué)試劑的純度規(guī)格、測(cè)定方法及操作規(guī)程，都做了具體要求。

6、 五、技術(shù)規(guī)范的編寫說明 為了確保起草好本標(biāo)準(zhǔn)，工作人員首先確定了本標(biāo)準(zhǔn)中所涉及的技術(shù)內(nèi)容不僅具有科學(xué)性、先進(jìn)性、實(shí)用性，而且要更具有精確性和可操作性。因此在編寫內(nèi)容的安排上選用氣質(zhì)聯(lián)用分析儀作為阿克醇含量的測(cè)定裝置，并充分考慮了測(cè)定的準(zhǔn)確性，選用總脂的提取、去除極性頭基團(tuán)和分餾脂質(zhì)等步驟進(jìn)行分離純化。該方法的建立可為反芻動(dòng)物糞中阿克醇濃度測(cè)定的準(zhǔn)確性測(cè)定提供技術(shù)保障，這正是編寫本標(biāo)準(zhǔn)需要預(yù)期達(dá)到的目的。 本標(biāo)準(zhǔn)以多年實(shí)驗(yàn)研究工作為基礎(chǔ)并借鑒了國內(nèi)外測(cè)定反芻動(dòng)物糞中阿克醇濃度含量方法的實(shí)用技術(shù)和先進(jìn)成果編制而成，在具體技術(shù)操作方面以廣大專業(yè)科研測(cè)試者的工作人員為主體，技術(shù)部門輔助協(xié)作共同

7、實(shí)施。 六、標(biāo)準(zhǔn)主要內(nèi)容的說明 本標(biāo)準(zhǔn)的主要內(nèi)容由三個(gè)部分組成，即1.范圍；2.名詞術(shù)語解釋；3. 反芻動(dòng)物糞中阿克醇濃度的測(cè)定方法，下面重點(diǎn)予以說明。 1． 對(duì)范圍的描述 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了反芻動(dòng)物糞中阿克醇濃度的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于奶牛、綿羊、山羊等反芻動(dòng)物糞中阿克醇濃度的測(cè)定。 2． 對(duì)名詞術(shù)語解釋的描述 名詞及術(shù)語的解釋主要針對(duì)阿克醇的解釋，目的是讓測(cè)試的工作人員對(duì)阿克醇概念有一個(gè)正確的認(rèn)識(shí)和了解。 3． 對(duì)反芻動(dòng)物糞中阿克醇濃度的測(cè)定方法的描述 本標(biāo)準(zhǔn)中主要規(guī)定了反芻動(dòng)物糞中阿克醇濃度的測(cè)定方法。 七、 貫徹實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)的要求及措施 本標(biāo)準(zhǔn)在經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后，建議作為推薦

8、性標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布實(shí)施?！皹?biāo)準(zhǔn)”在執(zhí)行的過程中還需要不斷的完善和健全。 八、 專家意見采納情況 本標(biāo)準(zhǔn)在撰寫完成后，送給相關(guān)行業(yè)專家征求意見。征求意見后，按照專家意見進(jìn)行了修改完善。英文標(biāo)題修改為“Test method of for archaeol in ruminant”，將“內(nèi)蒙古自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局”已改為“內(nèi)蒙古自治區(qū)市場(chǎng)監(jiān)督管理局”，將“阿克醇（2,3-diphytanyl-O-sn-glycerol，1,2-雙植烷酸甘油）為產(chǎn)甲烷古細(xì)菌膜脂的基本結(jié)構(gòu)，C20和C40的植烷醇與甘油通過醚鍵結(jié)合，是一種具有前景的產(chǎn)甲烷菌豐度的替代標(biāo)記物?！币迅臑椤鞍⒖舜迹?,3-diphytanyl

9、-O-sn-glycerol，1,2-雙植烷酸甘油）為反芻動(dòng)物瘤胃中產(chǎn)甲烷菌膜脂質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)，通過測(cè)定糞中阿克醇含量即可測(cè)算甲烷產(chǎn)量。已刪除3.3 相對(duì)相差 Relative Difference條款。4.修改為試劑和材料，4.1,4.2 條款修改為：“如無特別說明，所用試劑均為色譜純?cè)噭?，水為GB/T 6682規(guī)定的一級(jí)水”。已刪除條款號(hào)4.1,4.2。緩沖液、甲醇和氯仿按4:10:5的體積比配制而成的方法已標(biāo)明。5.1已修改為5.1氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀，配有電子轟擊源（EI源）。已刪除5.9條款。6測(cè)定步驟已改為6 樣品處理，采用6.1條款內(nèi)容。6.2 以后的條款單獨(dú)為7測(cè)定步驟條款。封面ICS 65.020.30、B 40已修改。按照標(biāo)準(zhǔn)編寫的規(guī)范要求已修改書寫格式。