微生物檢驗質(zhì)量控制課件

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1、,單擊此處編輯母版標(biāo)題樣式,單擊此處編輯母版文本樣式,第二級,第三級,第四級,第五級,#,微生物檢驗的質(zhì)量控制,溫州醫(yī)學(xué)院檢驗醫(yī)學(xué)院溫州醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院,周鐵麗,微生物檢驗的質(zhì)量控制溫州醫(yī)學(xué)院檢驗醫(yī)學(xué)院溫州醫(yī)學(xué)院附屬第,1,微生物檢驗的質(zhì)量控制,質(zhì)量控制（Quality control）,是臨床微生物學(xué)實驗室為了保證檢驗結(jié)果實事求是地反映客觀存在而建立的操作程序體系。,室內(nèi)質(zhì)量控制,室內(nèi)質(zhì)量控制是由實驗室內(nèi)部制定并實施的，是質(zhì)量保證的核心和基礎(chǔ)。,室間質(zhì)量控制評價,室間質(zhì)量控制評價是由實驗室外部的組織或機構(gòu)對實驗室進(jìn)行的質(zhì)量評價。,微生物檢驗的質(zhì)量控制質(zhì)量控制（Quality control

2、,2,檢驗前的質(zhì)量保證,檢驗前程序：又叫分析前期。,指從臨床醫(yī)生開醫(yī)囑開始，到分析檢驗程序啟動時終止的步驟。,包 括,檢驗申請,標(biāo)本的采集、運送與接收,檢驗前的質(zhì)量保證 ,3,微生物檢驗中的質(zhì)量保證,人員的組織與管理,規(guī)范的操作規(guī)程,試劑,培養(yǎng)基,設(shè)備,檢驗過程,微生物檢驗中的質(zhì)量保證 人員的組織與管理,4,試劑、培養(yǎng)基的質(zhì)量控制,有效期,外觀,性能測試,保存,試劑、培養(yǎng)基的質(zhì)量控制有效期,5,各種試劑的監(jiān)控菌種試劑,“x+v”因子試劑條,流感嗜血桿菌,副流感嗜血桿菌,嗜沫嗜血桿菌,硝酸鹽還原試劑,大腸埃希菌,醋酸鈣不動桿菌,每批，以后每次,靛基質(zhì)試劑,大腸埃希菌,產(chǎn)氣腸桿菌,每批，以后每天,

3、甲基紅試劑,大腸埃希菌,產(chǎn)氣腸桿菌,每批，以后每周,V-P試劑,產(chǎn)氣腸桿菌,大腸埃希菌,每批，以后每周,各種試劑的監(jiān)控菌種試劑“x+v”因子試劑條流感嗜血桿菌,6,常用試驗、染液的推薦菌株,試驗名稱,陽性對照菌,陰性對照菌,血漿凝固酶試驗,金黃色葡萄球菌,表皮葡萄球菌,觸酶試驗,金黃色葡萄球菌,肺炎鏈球菌,氧化酶試驗,銅綠假單胞菌,大腸埃希菌,桿菌肽試驗,A群鏈球菌,B群鏈球菌,奧普托欣試驗,肺炎鏈球菌,草綠色鏈球菌,革蘭染液,金黃色葡萄球菌,大腸埃希菌,抗酸染液,結(jié)核分枝桿菌,混合非抗酸菌,常用試驗、染液的推薦菌株 試驗名稱陽性對照菌陰性對照菌血漿凝,7,測定各種培養(yǎng)基性能的菌種,培養(yǎng)基 質(zhì)

4、控菌株 判定標(biāo)準(zhǔn),羊血瓊脂平板,金黃色葡萄球菌ATCC25923,生長,生長試驗,大腸埃希菌ATCC25922,生長,溶血反應(yīng),肺炎鏈球菌ATCC19615,生長，溶血,化膿性鏈球菌ATCC6305,生長，溶血,桿菌肽敏感（紙片法）,化膿性鏈球菌ATCC6305,10mm，敏感,B群鏈球菌,10mm，耐藥,Optochin敏感（紙片法）,肺炎鏈球菌,1518mm，敏感,涎鏈球菌,15mm，耐藥,測定各種培養(yǎng)基性能的菌種 培養(yǎng)基,8,測定各種培養(yǎng)基性能的菌種,巧克平板,生長試驗,淋病奈瑟菌,腦膜炎奈瑟菌,流感嗜血桿菌,肺炎鏈球菌,生長,SS平板,鼠傷寒沙門菌,傷寒沙門菌,福志賀菌,大腸埃希菌,腸

5、球菌,生長，黑色菌落中心,生長，無色透明菌落,生長，無色透明菌落,部分抑制生長，紅色混濁菌落,部分抑制生長,測定各種培養(yǎng)基性能的菌種巧克平板淋病奈瑟菌 生長S,9,測定各種培養(yǎng)基性能的菌種,麥康凱平板,大腸埃希菌生長，,紅色混濁菌落,傷寒沙門菌生長，,無色透明菌落,中國藍(lán)瓊脂,大腸埃希菌,生長，藍(lán)色菌落,傷寒沙門菌,生長，無色菌落,營養(yǎng)瓊脂,金黃色葡萄球菌,大量生長,福志賀菌,大量生長,厭氧血平板,脆弱擬桿菌,生長,產(chǎn)氣莢膜梭菌,生長，溶血,堿性蛋白胨水,霍亂弧菌,大量生長,大腸埃希菌,抑制生長,測定各種培養(yǎng)基性能的菌種麥康凱平板 大腸埃希菌生長，紅,10,測定各種培養(yǎng)基性能的菌種,彎曲菌瓊脂

6、,空腸彎曲菌,生長,大腸埃希菌,部分抑制,TCBS平板,霍亂弧菌,生長，黃色菌落,副溶血性弧菌,生長，藍(lán)綠色菌落,沙保弱瓊脂,白色念珠菌,生長,大腸埃希菌,部分或完全抑制,需氧血液增菌液,肺炎鏈球菌,生長,化膿性鏈球菌,銅綠假單胞菌,白色念珠菌,厭氧血液增菌液,脆弱擬桿菌,生長,測定各種培養(yǎng)基性能的菌種彎曲菌瓊脂 空腸彎曲菌,11,各種鑒別培養(yǎng)基的測試菌種,培養(yǎng)基 陽性對照菌 陰性對照菌,賴氨酸脫羧酶,遲緩愛德華菌,費枸櫞酸桿菌,鳥氨酸脫羧酶,產(chǎn)氣腸桿菌,費枸櫞酸桿菌,精氨酸雙水解酶,陰溝腸桿菌,普通變形桿菌,蛋白胨水（靛基質(zhì)）,大腸埃希菌,陰溝腸桿菌,各種鑒別培養(yǎng)基的測試菌種 培養(yǎng)基 陽性對

7、照菌,12,各種鑒別培養(yǎng)基的測試菌種,培養(yǎng)基 陽性對照菌 陰性對照菌,MR,大腸埃希菌,陰溝腸桿菌,V-P,陰溝腸桿菌,大腸埃希菌,枸櫞酸鹽（西蒙氏）,產(chǎn)氣腸桿菌,遲緩愛德華菌,苯丙氨酸脫氨酶,雷極變形桿菌,費枸櫞酸桿菌,O-F試驗管,銅綠假單胞菌（氧化型）,洛菲不動桿菌（不利用）,大腸埃希菌（發(fā)酵型）,硝酸鹽還原,大腸埃希菌,洛菲不動桿菌,各種鑒別培養(yǎng)基的測試菌種 培養(yǎng)基 陽性對,13,各種鑒別培養(yǎng)基的測試菌種,培養(yǎng)基 陽性對照菌 陰性對照菌,膽汁-七葉苷,糞腸球菌,化膿性鏈球菌,脫氧核糖核酸瓊脂,粘質(zhì)沙雷菌,表皮葡萄球菌,氰化鉀肉湯,產(chǎn)氣腸桿菌,遲緩愛德華菌,丙二酸鹽,產(chǎn)氣腸桿菌,遲緩愛德

8、華菌,尿素瓊脂,雷極變形桿菌（快）,大腸埃希菌,肺炎克雷白菌（慢）,半固體瓊脂動力試驗,大腸埃希菌,肺炎克雷白菌,各種鑒別培養(yǎng)基的測試菌種培養(yǎng)基 陽性對照菌,14,儀器設(shè)備的質(zhì)量控制,設(shè)備 控制范圍 備注,高壓滅菌器,121,定期用嗜熱芽胞桿菌測試（每月）,孵育箱,35 1,定期加水,水浴箱,370.5,定期加水、清潔內(nèi)壁,冰箱,4 2,定期清潔內(nèi)部,CO,2,箱,5-10%,淋病奈瑟氏菌檢測效果,厭氧箱,美蘭或銅綠假單胞菌測試厭氧條件,生物安全柜,更換濾網(wǎng)，紫外線消毒性能檢測（每三個月）,血液培養(yǎng)儀,培養(yǎng)瓶進(jìn)行少量生長試驗；瓶位定期校正,微生物鑒定儀,探測部位定期清潔；鑒定卡、條、板測試,儀

9、器設(shè)備的質(zhì)量控制設(shè)備 控制范圍,15,標(biāo)本檢驗過程的質(zhì)量控制,選擇合理的檢驗項目,選擇適當(dāng)?shù)臉?biāo)本,正確書寫檢驗申清單,標(biāo)本檢驗過程的質(zhì)量控制選擇合理的檢驗項目,16,直接診斷,直接發(fā)現(xiàn)病原體,-膿、腦脊液、胸腹水等無菌部位標(biāo)本,確定標(biāo)本是否合格，并推測病原體,-痰液標(biāo)本,發(fā)現(xiàn)病原體并進(jìn)行初步計數(shù),-尿液標(biāo)本,為培養(yǎng)基和培養(yǎng)方法的選擇提供信息,直接診斷 直接發(fā)現(xiàn)病原體,17,病原菌的分離培養(yǎng),呼吸道標(biāo)本,接種血瓊脂平板、巧克力平板、麥康復(fù)凱平板和沙保弱瓊脂，并將巧克力血平板置5%-10%CO,2,35環(huán)境中培養(yǎng)。,糞便標(biāo)本,接種SS平板、麥康凱平板或中國藍(lán)平板,血液培養(yǎng),在血液增菌培養(yǎng)期間，應(yīng)至

10、少在24h48h盲目翻種一次，以后有可疑細(xì)菌生長即刻翻種，盡早發(fā)現(xiàn)病原菌。,病原菌的分離培養(yǎng) ,18,病原菌的鑒定,菌落形態(tài)觀察-涂片染色鏡檢-生化鑒定-血清學(xué)試驗,-,氧化酶試驗不應(yīng)在糖類發(fā)酵選擇性平板上進(jìn)行，以免假陰性結(jié)果出現(xiàn)。,-,在腸道選擇性平板上應(yīng)挑取菌落進(jìn)行生化反應(yīng)，生化反應(yīng)符合，血清學(xué)凝集陽性者可確認(rèn)報告。,不能從選擇性平板上挑取菌落進(jìn)行血清學(xué)凝集，會因為交叉抗原的存在或抗原的丟失而導(dǎo)致假陽性或假陰性。,每次血清凝集試驗時，應(yīng)用生理鹽水作對照。防止粗糙型菌落造成的假凝集,病原菌的鑒定 菌落形態(tài)觀察-涂片染色鏡檢-生化鑒定-,19,藥敏試驗的質(zhì)量控制要點,培養(yǎng)基,紙片,菌量,操作,

11、孵育：,時間、溫度、平板放置,結(jié)果判斷,質(zhì)控菌株,藥敏試驗的質(zhì)量控制要點培養(yǎng)基,20,紙片擴散法的質(zhì)控菌株,金黃色葡萄球菌ATCC25923,大腸埃希菌ATCC25922,大腸埃希菌ATCC35218（用于內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合制劑）,銅綠假單胞菌ATCC27853,糞腸球菌ATCC29212,流感嗜血桿菌（用于HTM培養(yǎng)基）ATCC49247、49766,淋病奈瑟菌（用于GC瓊脂）ATCC49226,肺炎鏈球菌（用于5%羊血MH瓊脂）ATCC49619,紙片擴散法的質(zhì)控菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923,21,失控的常見的原因,-質(zhì)控結(jié)果記錄錯誤,-量取抑菌環(huán)直徑時讀數(shù)錯誤,-標(biāo)準(zhǔn)菌株被污染或

12、其它改變,-接種的菌懸液太濃或過淡,-0.5管麥?zhǔn)蠞岫葮?biāo)準(zhǔn)管未搖勻或已過期失效,-孵育溫度或氣體環(huán)境不正確,-MH培養(yǎng)基質(zhì)量有無問題,-含藥紙片失效,失控的常見的原因-質(zhì)控結(jié)果記錄錯誤,22,檢驗后的質(zhì)量保證,檢驗后程序：也稱分析后期。,指檢驗后全部過程。,包 括,檢驗結(jié)果的評審與報告,-報告時間、分級報告、危急值報告及記錄,標(biāo)本的處置,-感染性廢棄物,檢驗后的質(zhì)量保證 檢驗后程序：也稱分析后期。,23,菌種保存方法,培養(yǎng)基保存法,快速冷凍法,冷凍干燥法,菌種保存方法培養(yǎng)基保存法,24,菌種保管,定期轉(zhuǎn)種,制備記錄卡,專人負(fù)責(zé),菌種保管定期轉(zhuǎn)種,25,室內(nèi)全面質(zhì)量控制,全面實施各項質(zhì)量控制內(nèi)容

13、,對人員要及時進(jìn)行培訓(xùn)和考核,嚴(yán)格審核標(biāo)本和結(jié)果報告,在日常標(biāo)本中摻入模擬標(biāo)本，進(jìn)行盲點試驗,發(fā)現(xiàn)誤差，應(yīng)及時找出原因，進(jìn)行改進(jìn),室內(nèi)全面質(zhì)量控制全面實施各項質(zhì)量控制內(nèi)容,26,室間質(zhì)量控制的實施,組織單位：,各級臨床檢驗中心和參考實驗室,工作任務(wù)：,定期或不定期地進(jìn)行熟練程度考核和盲點試驗檢查。,定期或不定期地舉辦各種學(xué)習(xí)班，提高各級技術(shù)人員的技術(shù)水平，學(xué)習(xí)新的知識。,提供或督促有關(guān)部門提供合格的標(biāo)準(zhǔn)化的試劑、抗血清、培養(yǎng)基等實驗必需品。,室間質(zhì)量控制的實施組織單位：各級臨床檢驗中心和參考實驗室,27,盲點質(zhì)量控制,-quality control blind unknown,方 法,質(zhì)控管

14、理機構(gòu)將模擬標(biāo)本混入臨床普通標(biāo)本，送入實驗室進(jìn)行常規(guī)測定。,評 價,質(zhì)控管理機構(gòu)負(fù)責(zé)收回和評價實驗結(jié)果，根據(jù)參加的規(guī)模和鑒定的正確數(shù)，計算鑒定正確率及所有參加實驗室的平均分，以及每個實驗室的得分。,盲點質(zhì)量控制方 法,28,謝 謝,謝 謝,29,安全生產(chǎn)日日好，員工生活步步高。,11月-24,11月-24,Thursday,November 21,2024,文明施工，安全生產(chǎn)。,20:21:16,20:21:16,20:21,11/21/2024 8:21:16 PM,質(zhì)量不光由生產(chǎn)者決定，更應(yīng)由顧客決定。,11月-24,20:21:16,20:21,Nov-24,21-Nov-24,抓好安全

15、生產(chǎn)促進(jìn)經(jīng)濟發(fā)展。,20:21:16,20:21:16,20:21,Thursday,November 21,2024,善待別人就是善待自已。,11月-24,11月-24,20:21:16,20:21:16,November 21,2024,疏忽一時，痛苦一世。,2024年11月21日,8:21 下午,11月-24,11月-24,安全生產(chǎn)你管我管，大家管才平安，事故隱患你查我查，人人查方安全。,21 十一月 2024,8:21:16 下午,20:21:16,11月-24,持續(xù)的質(zhì)量改進(jìn)是企業(yè)永恒的目標(biāo)。,十一月 24,8:21 下午,11月-24,20:21,November 21,2024,

16、精打細(xì)算降成本,千方百計提效益。,2024/11/21 20:21:16,20:21:16,21 November 2024,全力生產(chǎn)，注意安全。,8:21:16 下午,8:21 下午,20:21:16,11月-24,樹立安全觀念，堅持安全生產(chǎn)。,11月-24,11月-24,20:21,20:21:16,20:21:16,Nov-24,制造精良產(chǎn)品，培育優(yōu)秀人才。,2024/11/21 20:21:16,Thursday,November 21,2024,強化服務(wù)意識，倡導(dǎo)奉獻(xiàn)精神。,11月-24,2024/11/21 20:21:16,11月-24,謝謝大家！,安全生產(chǎn)日日好，員工生活步步高。9月-239月-23Frid,30,