《三葉青扦插繁殖技術(shù)規(guī)程》征求意見稿編制說明

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廣西地方標(biāo)準(zhǔn)《 三葉青扦插繁殖技術(shù)規(guī)程 》 （征求意見稿）編制說明 一、 任務(wù)來源 （一） 任務(wù)來源與項(xiàng)目編號(hào) 本標(biāo)準(zhǔn)是廣西壯族自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局下達(dá)的 2016 年 第 六 批廣西地方標(biāo)準(zhǔn)制定（修訂）項(xiàng)目計(jì)劃 （桂質(zhì)監(jiān)函 [2016] 324 號(hào)文） ，項(xiàng)目編號(hào)為 2016廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)提出， 廣西衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)歸口 ，廣西壯族自治區(qū)藥用植物園負(fù)責(zé)起草。 （ 二 ） 參與起草單位 廣西壯族自治區(qū)藥用植物園。 （ 三 ） 主要起草人員名單及 職務(wù)或 職稱 二 、 編制 標(biāo)準(zhǔn)意義 三葉青 (為葡萄科崖爬藤屬植物，其塊根稱為蛇附子。異名：有角烏蘞莓、石老鼠、石猴子、石抱子、搜夾風(fēng)、三葉扁藤、絲研 制 人 員 姓名 職務(wù) /職稱 現(xiàn)從事 專 業(yè) 所 在單位 項(xiàng) 目 負(fù)責(zé)人 付金娥 副 研究員 藥用植物育種栽培 廣西壯族自治區(qū)藥用植物園 主 要 參 加 人 員 韋樹根 副研究員 藥用植物遺傳改良 廣西壯族自治區(qū)藥用植物園 黎潁菁 農(nóng)藝師 藥用植物栽培 廣西壯族自治區(qū)綠色食品辦 公室 胡鳳云 助理研究員 植物保護(hù) 廣西壯族自治區(qū)藥用植物園 白隆華 研究員 藥用植物栽培 廣西壯族自治區(qū)藥用植物園 童婷婷 研究實(shí)習(xí)員 植物保護(hù) 廣西壯族自治區(qū)藥用植物園 楊沛奕 研究實(shí)習(xí)員 中藥學(xué) 廣西壯族自治區(qū)藥用植物園 1 線吊金鐘、金絲吊葫蘆、金線吊馬鈴薯等 [1]。三葉青主要分布在長江以南地區(qū)，生于陰濕山坡、山溝或溪谷旁林下，以塊根或全草人藥，為民間常用的中草藥，具有 抗病毒、 抗癌抗腫瘤 [2抗炎、鎮(zhèn)痛與解熱 [4]、保肝 [5活血祛風(fēng)之功效 ，且毒副作用小，是西藥無法代替的“植物抗生素”。臨床上已廣泛用于抗癌及抗艾滋病毒、抗腫瘤 、血液病、心腦血管 等疾病。近年來，我國有多 個(gè)中藥廠都在使用三葉青作原料生產(chǎn)中成藥，如三葉青膠囊、三葉青沖劑、三葉青茶等 ， 并且其需求量呈 日益增長趨勢(shì) ，加上毀壞性采收和無序管理，迫使 三葉青 野生資源遭受毀滅性的破壞 ， 其野生產(chǎn)量 遠(yuǎn)遠(yuǎn)滿足不了市場(chǎng)需求。 廣西作為三葉青的主產(chǎn)地之一，是三葉青系列中成藥的主要來源地。 韋樹根等對(duì)廣西三葉青的資源狀況進(jìn)行了調(diào)查研究，發(fā)現(xiàn)廣西三葉青的野生資源已瀕臨滅絕 [7]。 由于三葉青生物學(xué)特性的特殊性，基本不產(chǎn)種子或產(chǎn)種極少，其種苗一般采用種署繁殖 、組織培養(yǎng)繁殖和 扦插繁殖；三葉青種署繁殖成本較高，且繁殖種苗 數(shù)量 有限； 組織培養(yǎng)繁殖是目前 報(bào)道最多的方法 [8但該方法僅限于實(shí)驗(yàn)室，還未發(fā)現(xiàn)有大田種植的組培苗的報(bào)道； 三葉青扦插繁殖技術(shù)已有報(bào)道，吉慶勇等 [11]研究發(fā)現(xiàn)，采用 2 1000 0 10天后統(tǒng)計(jì) 成活率 ，成活率可高達(dá) 99%，說明三葉青可以 用扦插的方法進(jìn)行繁殖，且該方法是目前三葉青種植行業(yè) 普遍采用的繁殖方法 。三葉青扦插繁殖 技術(shù) ，具有繁殖成活率高， 簡(jiǎn)便易行、 用時(shí)短 、環(huán)境污染較小等優(yōu)點(diǎn)。 但 由于尚 無三葉青扦插繁殖技術(shù)規(guī)范，生 產(chǎn)出的 扦插苗 質(zhì)量 參差 不 齊 ， 其 藥材質(zhì)量也不穩(wěn)定。 因此 ，為了更好 指導(dǎo)三 葉青扦插繁殖 ， 提高 其成活率 ， 壯大 廣西三葉青 種苗 產(chǎn)業(yè) ，促進(jìn)區(qū)域經(jīng)濟(jì)發(fā)展，提高農(nóng)民收入，必要對(duì) 三葉青 扦插 繁殖 技術(shù)作進(jìn)一步研究，并對(duì) 扦插 繁殖技術(shù) 的 各個(gè)環(huán)節(jié)作出規(guī)范。 經(jīng)查閱《中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)批準(zhǔn)發(fā)布公告》、《中華人民共和國地方標(biāo)準(zhǔn)備案公告》，目前中藥材三葉青扦插 繁殖技術(shù) 規(guī)范無國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和地方標(biāo)準(zhǔn)。因此，本標(biāo)準(zhǔn)的制定為提供 成活率高、操作性強(qiáng) 的 三葉青種苗繁殖技術(shù) 提供 技術(shù) 指導(dǎo)，對(duì) 三葉青 種質(zhì)資源保存和可持續(xù)利用具有重要意義。 三 、 標(biāo)準(zhǔn) 編制 起草及研究 過程 （一） 標(biāo)準(zhǔn)前期工作 1、 前期 技術(shù) 研究工作。 2 廣西 壯族 自治區(qū) 藥用植物園在 廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳科技研究計(jì)劃課題“廣西瀕危珍稀中藥材三葉青種質(zhì)資源評(píng)價(jià)及繁育技術(shù)研究（重 2012116） 和 南寧市科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目“廣西瀕危珍稀中藥材三葉青種質(zhì)資源評(píng)價(jià)及繁育技術(shù)研究（ 20133165）等 課題資助下 ，對(duì)三葉青 資源進(jìn)行了系統(tǒng)的調(diào)查、評(píng)價(jià)及繁育等方面的研究，取得了一定的成果 ，收集了 10多份 三葉青 種質(zhì)資源，建立了 1畝種質(zhì) 資源 圃和 種苗繁育生產(chǎn)示范基地 5畝 ， 篩選出總黃酮、游離氨基酸含量高、長勢(shì)旺盛、結(jié)薯早、適合于廣地地方發(fā)展的 1個(gè)優(yōu)良種質(zhì)類型。共發(fā)表了“ 微波消解 — 紫外分光光法測(cè)定三葉青中游離氨基酸含量” [12]、 三葉青藥材中微量元素的分析 [13]、 廣西瀕危珍稀中藥材三葉青資源調(diào)查研究 [7]、藥用植物三葉青研究進(jìn)展 [14]等多篇文章，并申請(qǐng)國家發(fā)明專利 2項(xiàng)，分別為“一種 快速測(cè)定三葉青中硒含量的方法 （ 申請(qǐng)?zhí)枮?已經(jīng)進(jìn)入二審狀態(tài) ）和一種打破三葉青種子休眠的方法（ 授權(quán)號(hào)為 前期研究項(xiàng)目 已取得了突破性進(jìn)展，為本標(biāo)準(zhǔn)的制定 奠定 良好基礎(chǔ) 。此外，本研究組還 開展 三葉青扦插繁育的品種選擇、苗圃地準(zhǔn)備、扦插、苗期管理、出圃、檔案管理 的 關(guān)鍵技術(shù)研究，試 驗(yàn)結(jié)果為《 三葉青扦插繁殖技術(shù)規(guī)程 》 地方 標(biāo)準(zhǔn) 的制定提供了大量翔實(shí)的數(shù)據(jù)和實(shí)際應(yīng)用驗(yàn)證資料。 2、標(biāo)準(zhǔn)編制前期工作。 標(biāo)準(zhǔn)主管部門廣西壯族自治區(qū)質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局下達(dá)2016年第 六 批廣西地 方標(biāo)準(zhǔn)制定（修訂）計(jì)劃項(xiàng)目 （桂質(zhì)監(jiān)函 [2016]324號(hào)文）后，我們及時(shí)成立了以廣西壯族自治區(qū)藥用植物園 付金娥 為主持人， 韋樹根、 黎潁菁、韋榮昌、 白隆華、 胡鳳云、童婷婷 為組員的標(biāo)準(zhǔn)編制小組，及時(shí)部署了工作方案和小組成員調(diào)研、編制工作時(shí)間安排表。 標(biāo)準(zhǔn)起草工作小組在前期研究工作以及實(shí)地調(diào)研的基礎(chǔ)上，對(duì) 三葉青扦插繁殖 技術(shù) 進(jìn)行 系統(tǒng)總結(jié)，查閱了大量的國內(nèi)外文獻(xiàn)資料，確定了標(biāo)準(zhǔn)的主要技術(shù)內(nèi)容，形成了標(biāo)準(zhǔn)的基本構(gòu)架。 編制過程中，在廣泛調(diào)查和試驗(yàn)研究的同時(shí) ， 還咨詢了相關(guān)權(quán)威專家，力爭(zhēng)編制工作科學(xué)、嚴(yán)謹(jǐn)，方法、技術(shù)路線正確。 （二）標(biāo)準(zhǔn)研究過程 1、前期研究發(fā)現(xiàn)，影響 扦插苗生產(chǎn) 因素有 插穗生長年限 、 扦插基質(zhì) 和 生根粉的濃度 等。 插穗 成熟 程度高低對(duì)扦插苗生產(chǎn)影響較大 ， 2生的帶芽枝條作為插穗 ，生根率最高 ， 生長勢(shì)較強(qiáng)；用一定濃度的 根粉 1 號(hào) 進(jìn) 3 行生根處理，有利于提高生根率；扦插苗的管護(hù)如光 照 強(qiáng)度 、水分等對(duì)扦插苗的存活率 均 有 較大影響 。 編制小組對(duì) 如 何提高 扦插苗 生根 率 、 存活 率 進(jìn)行了多次的試驗(yàn)，解決了 生根率和 存活 率低 等技術(shù)難題。 2、標(biāo)準(zhǔn)編制項(xiàng)目下達(dá)后，按照廣西區(qū)質(zhì)監(jiān)局關(guān)于編制標(biāo)準(zhǔn)工作的要求，編制小組于項(xiàng)目實(shí)施期間， 通過 多 種 渠道 對(duì) 業(yè) 內(nèi) 專家 進(jìn)行咨詢 ，確保標(biāo)準(zhǔn)的可靠性。 3、編制小組根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的格式和編寫方法，按照 標(biāo)準(zhǔn)編寫格式規(guī)定《 三葉青扦插繁殖 技術(shù)規(guī)程 》廣西地方標(biāo)準(zhǔn) “征求 意見 稿 ”。 4、 編制小組 根據(jù) 專家 們 對(duì)本標(biāo)準(zhǔn)意見征求稿 所 提出的修改意見和建議，進(jìn)行了了認(rèn)真分析和研究， 形成 《 三葉青扦插繁殖 技術(shù)規(guī)程》廣西地方標(biāo)準(zhǔn) “征求意 見稿 ”。 四 、 標(biāo)準(zhǔn) 編制原則 、 依據(jù) 1、 制定本標(biāo)準(zhǔn)目的是 規(guī)范和統(tǒng)一廣西區(qū)內(nèi)三葉青扦插苗的生產(chǎn) ， 以 提高 桑寄生種苗的質(zhì)量，并促進(jìn)其在廣西的推廣應(yīng)用 2、 本標(biāo)準(zhǔn)的格式和編寫方法執(zhí)行 規(guī)定。 3、 本標(biāo)準(zhǔn)的制定力求科學(xué)、準(zhǔn)確、系統(tǒng) 、適度、可行 ， 實(shí)現(xiàn)優(yōu)質(zhì)、安全、高效的目標(biāo)，通過充分聽取各方意見，確保標(biāo)準(zhǔn)可以作為政府部門監(jiān)督、指導(dǎo)生產(chǎn)的依據(jù)，在實(shí)際應(yīng)用上切實(shí)可行， 內(nèi)容與當(dāng)前 三葉青扦插繁殖技術(shù) 的實(shí)際和社會(huì)經(jīng)濟(jì)狀況緊密結(jié)合，可操作性強(qiáng)。 五 、 標(biāo)準(zhǔn) 主要技術(shù)內(nèi)容 （一）范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了 三葉青扦插繁育的 品種選擇、苗圃地準(zhǔn)備、扦插、苗期管理、出圃、檔案管理。 適用于 三葉青的扦插繁殖 。 （二）規(guī)范性引用文件 本標(biāo)準(zhǔn)引用文件包括： 285 農(nóng)藥安全使用標(biāo)準(zhǔn) [15] 5569 農(nóng)業(yè)植物調(diào)運(yùn)檢疫規(guī)程 [16] 8321（所有部分） 農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則 [17] 496 肥料合理使用準(zhǔn)則 通則 [18] 4 532 無公害中藥材 產(chǎn)地環(huán)境條件 [19] （ 三 ） 主要技術(shù)內(nèi)容 1、扦插品種來源 扦插品種為 三葉青 2、 產(chǎn)地環(huán)境 根據(jù) 無公害中藥材 對(duì) 產(chǎn)地環(huán)境 條件 的 要求 ，規(guī)定產(chǎn)地環(huán)境應(yīng)符合 532（無公害中藥材 產(chǎn)地環(huán)境要求） 規(guī)定。 宜選擇背風(fēng)向陽、土質(zhì)疏松肥沃、排水良好、 3、扦插生產(chǎn) 技術(shù) 起草工作小組 在 上述前期幾個(gè)項(xiàng)目 的 資助下，針對(duì) 三葉青 扦插 繁殖技術(shù) 環(huán)節(jié)進(jìn)行了系統(tǒng)的試驗(yàn)驗(yàn)證， 為確定 各項(xiàng) 主要技術(shù)指標(biāo)提供了科學(xué)依據(jù)。 （ 1） 選擇 1年生、 2年生、 3年生及多年生 健壯、無病蟲害、莖粗不小于 0.2 藤 條 作為插穗。 將枝條剪成具 2個(gè)～ 3個(gè) 腋芽 、長 15 30 除葉片及葉柄。插穗上端剪為平口，下端于距芽體 4剪成斜形，切口斜形與芽體相背，要求截面 光 滑。 每 50段 藤 條整齊捆成一扎。 然后將藤條用清水處理后扦插于 壤 土中 ， 深約 為整個(gè)插穗的 2/3，插后壓緊，澆水保濕， 40指標(biāo) 。不同年份插 穗對(duì)扦插枝生長的影響 見表 1。 表 1 不同年份插穗對(duì)扦插 苗 生長的影響 插穗 年份 扦穗株數(shù)/株 生根株數(shù) /株 平均生根數(shù) /條 平均根長 /均梢數(shù) /條 平均梢長 /活率 /% 1 a 100 30 0 2 a 100 68 7 3 a 100 70 0 多年生 100 69 6 由表 1 可以看出， 2~3 年生插穗和多年生插穗扦插苗的生活率比較高， 1 年生插穗成活率比較低，僅有 30%。考慮到時(shí)間、勞力、經(jīng)濟(jì)等方面的原因，故選擇以 2~3 年生藤條作為插穗。 （ 2）將插穗用 多菌靈溶液浸泡 20 行消毒。 （ 3）扦插基質(zhì)選擇。選擇壤 土和河沙最為基質(zhì)，篩選適合三葉青扦插繁殖的基質(zhì)。結(jié) 果見表 2。 5 表 2 不同基質(zhì)對(duì)三葉青扦插苗生長的影響 基質(zhì) 扦穗株數(shù)/株 生根株數(shù) /株 平均生根數(shù) /條 平均根長 /均梢數(shù) /條 平均梢長 /活率 /% 河沙 100 53 0 壤 土 100 72 9 （ 4） 將 2~3 年生 插穗基部用 不同濃度的 根粉 1 號(hào) 或 液 進(jìn)行浸泡時(shí)間處理 ，浸泡液面高于切口 1～ 1.5 泡時(shí)間為 10s，扦插黃土中 。 試驗(yàn)結(jié)果表明 1 000 的 根粉 1 號(hào) 溶液的浸泡 10s 效果較佳。 結(jié)果見表 3和 表 4。 表 3 不同濃度 三葉青 扦插 苗 生長的影響 處理 () 扦穗株數(shù) （株） 生根株數(shù) （株） 平均生根數(shù)（條） 平均根長 （ 平均梢數(shù) （條） 平均梢長 （ 成活率 （ %） 對(duì)照 100 70 0 200 100 75 5 400 100 79 9 600 100 85 5 800 100 94 3 1000 100 99 7 表 4 不同濃度 三葉青扦插 苗 生長的影響 處理 () 扦穗株數(shù) （株） 生根株數(shù) （株） 平均生根數(shù)（條） 平均根長 （ 平均梢數(shù) （條） 平均梢長 （ 成活率 （ %） 對(duì)照 100 70 0 200 100 84 9 400 100 89 4 600 100 73 0 800 100 74 9 1000 100 63 6 由表 3 和表 4 可知， 從總體來說以 1 000 的 根粉 1 號(hào)溶液的浸泡 10s 效果較佳，三葉青扦插苗成活率可達(dá) 97% （ 5）扦插后控制溫度 在 25℃ ~30℃， 濕度控制在 75%以上， 遮蔭率在 70％以上。 6 （ 6） 三葉青植株抗病性強(qiáng)，基本無病害。但如果扦插圃出現(xiàn)大面積積水，可 能 引發(fā)三葉青根腐病、霉菌病和葉斑病 [20]。 根腐病。 根腐病主要是由木賊鐮孢病原引起，表現(xiàn)癥狀為三葉青植株根部發(fā)黑腐爛，導(dǎo)致整株死亡。防治根腐病措施：發(fā)病初期可以使用 50％甲基托布津可溶性粉劑 800～ 1000 倍液噴灑。 霉菌病。 在潮濕的環(huán)境中，由于三葉青生長過于旺盛或者種植密度過大， 容易造成三葉青間不通風(fēng)，葉片下表面 容易出現(xiàn)白色菌絲團(tuán)，嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致三葉青成片死亡。防治霉菌病措施：發(fā)病初期及時(shí)剪除病葉，并用 50%多菌靈可溶性粉劑 600～ 1000 倍液噴灑葉片。連續(xù)噴灑 3 次。 葉斑病 。 初期三葉青葉片表面 產(chǎn)生圓形或不規(guī)則深褐色病斑 ， 病斑不斷擴(kuò)大嚴(yán)重時(shí)導(dǎo)致全株葉片枯死 。 防治葉斑病措施 ： 用 65％代森鋅 500～ 600 倍液或1:1:150 波爾多液防治。 4、出圃 、 包裝和運(yùn)輸 一般為 出圃 時(shí)間為育苗 2 個(gè) ～ 3 月后， 最 佳 時(shí)間為 次年 3 月～ 4 月 。出圃前一天傍晚苗床需澆透水，起苗時(shí)，人工將苗輕輕拔起，盡量挑健壯的苗，剪去過長根系統(tǒng)，并注意防曬保濕。 出圃時(shí)需在明顯處掛標(biāo)簽，注明品種名稱、級(jí)別、數(shù)量、出圃日期，如一車同時(shí)裝運(yùn)兩個(gè)品種，應(yīng)按品種先后裝車，并做出明顯區(qū)別標(biāo)志。填寫標(biāo)簽時(shí)應(yīng)該用不脫色的記號(hào)筆填寫。 若長途運(yùn)輸，要采用 濕 布 覆蓋，用沾泥漿、吸濕劑等措施確保根部不失水，并需符合 《 5569 農(nóng)業(yè)植物調(diào)運(yùn)檢疫規(guī)程 》 [16]的要求。 5、 檔案 記錄 檔案 是 生產(chǎn)單位 在 三葉青 扦插 扦插繁殖 全過程中形成的產(chǎn)物，是 生產(chǎn)單位 實(shí)施 三葉青扦插繁殖技術(shù) 的依據(jù)和憑證，是 藥材 質(zhì)量溯源的重要文件。 因此， 需 對(duì)品種選擇、苗圃地準(zhǔn)備、扦插、苗期管理、出圃、檔案管理 等各生產(chǎn)環(huán)節(jié)所采取的措施進(jìn)行詳細(xì)記錄，建立生產(chǎn)檔案。 六 、與現(xiàn)行法律 法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)關(guān)系 本標(biāo)準(zhǔn)（征求意見稿）制定是遵循《中華人民共和國標(biāo)準(zhǔn)化法》等國家相關(guān)的法規(guī)和強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合地方實(shí)際情況制定出來的 ，因此，與現(xiàn)行法律、法規(guī)及強(qiáng)制性標(biāo)準(zhǔn)無沖突。 7 七 、 實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)的要求和建議 標(biāo)準(zhǔn)必須是在遵循法律法規(guī)及國家相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的前提下，綜合 三葉青 生產(chǎn)企業(yè)的實(shí)際要求制定，標(biāo)準(zhǔn)必須具有法律依據(jù)及可操作性。 八 、 參考文獻(xiàn) [1]國家中藥管理局《中華本草》編委會(huì)．中華本草．第 ．上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社， 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