分解纖維素的微生物的分離[精制資料]
纖維素:棉花棉花是自然是自然界中纖維素界中纖維素含量最高的含量最高的天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物;纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì),植物每年產(chǎn)生的纖維素超過70億噸;分布植物的根、莖、葉中;1 1、在、在草食性動物等的消化道內(nèi)草食性動物等的消化道內(nèi),也,也共生有分解纖維素共生有分解纖維素的微生物的微生物,其原理也是產(chǎn)生纖維素酶而分解纖維素,其原理也是產(chǎn)生纖維素酶而分解纖維素,而人沒有分解纖維素的能力。而人沒有分解纖維素的能力。2 2、農(nóng)作物秸稈農(nóng)作物秸稈:米秸、麥秸、稻草、草、木屑米秸、麥秸、稻草、草、木屑米秸、麥秸、稻草、草、木屑米秸、麥秸、稻草、草、木屑 等富等富含大量的纖維素,被利用的機(jī)會很少、效率低;含大量的纖維素,被利用的機(jī)會很少、效率低;纖維素生物燃料:最有希望替代石油能源 科學(xué)家正致力于研究,怎樣將科學(xué)家正致力于研究,怎樣將農(nóng)業(yè)廢棄物、木材及生長更為迅農(nóng)業(yè)廢棄物、木材及生長更為迅速的草本植物,速的草本植物,轉(zhuǎn)化為種類繁多轉(zhuǎn)化為種類繁多的生物燃料的生物燃料(甚至是航空燃油)。(甚至是航空燃油)。課題課題3分解纖維素的微生物的分離分解纖維素的微生物的分離(一一)纖維素與纖維素酶纖維素與纖維素酶纖維素纖維素:一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物,一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物,廣泛地存在于植物的根、莖、葉等器官中。廣泛地存在于植物的根、莖、葉等器官中。纖維素酶纖維素酶:由微生物分泌的一種復(fù)合酶,包括由微生物分泌的一種復(fù)合酶,包括C C1 1酶酶、C Cx x酶和葡萄糖苷酶,由于它們的酶和葡萄糖苷酶,由于它們的協(xié)同作用協(xié)同作用,最終將纖維素分,最終將纖維素分解成葡萄糖。解成葡萄糖。纖維素纖維素C C C C1 1 1 1酶酶C C C Cx x x x酶酶纖維二糖纖維二糖葡萄糖葡萄糖苷苷 酶酶葡萄糖葡萄糖取二支取二支20mL20mL的試管的試管實驗:實驗:纖維素酶分解纖維素的實驗纖維素酶分解纖維素的實驗各加入一張濾紙條各加入一張濾紙條各加入各加入10mL0.1mol/L10mL0.1mol/L的醋酸的醋酸 醋酸鈉緩沖液醋酸鈉緩沖液甲甲 乙乙在甲試管中加入在甲試管中加入1mL1mL蒸餾水,蒸餾水,乙試管加入乙試管加入1mL1mL纖維素酶纖維素酶將試管放在將試管放在140r/min140r/min的搖床上振蕩的搖床上振蕩1h1h結(jié)果:乙試管的濾紙條消失結(jié)果:乙試管的濾紙條消失 討論討論:乙試管的濾紙條為什么會消失?甲試管的作用是什么?乙試管的濾紙條為什么會消失?甲試管的作用是什么?剛果紅染色法剛果紅染色法 剛果紅能剛果紅能與像纖維素的多糖形成紅色復(fù)合物與像纖維素的多糖形成紅色復(fù)合物,而而不與不與水解后的水解后的纖維二糖和葡萄糖纖維二糖和葡萄糖發(fā)生該反應(yīng)。發(fā)生該反應(yīng)。(二二)纖維素分解菌的篩選纖維素分解菌的篩選 用用加入剛果紅的纖維素培養(yǎng)基加入剛果紅的纖維素培養(yǎng)基去培養(yǎng)微生物去培養(yǎng)微生物時,如果培養(yǎng)基中出現(xiàn)時,如果培養(yǎng)基中出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈時以菌落為中心的透明圈時,可說明該菌落可說明該菌落是纖維素分解菌是纖維素分解菌,因為它已將被剛,因為它已將被剛 果紅果紅 染成紅色的纖維素分解了。染成紅色的纖維素分解了。一、實一、實 驗驗 設(shè)設(shè) 計計 請你根據(jù)實驗流程圖和提供的三個資料以及請你根據(jù)實驗流程圖和提供的三個資料以及“操作提示操作提示”,在思考有關(guān)問題的基礎(chǔ)上,設(shè)計出一,在思考有關(guān)問題的基礎(chǔ)上,設(shè)計出一個詳細(xì)的實驗方案。個詳細(xì)的實驗方案。土壤取樣土壤取樣選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)梯度稀釋梯度稀釋 將樣品將樣品涂布在鑒別涂布在鑒別纖纖 維素分解菌的維素分解菌的培養(yǎng)基培養(yǎng)基上上 篩選產(chǎn)生篩選產(chǎn)生透透 明圈的明圈的菌落菌落*取樣環(huán)境取樣環(huán)境1 1、土壤取樣:、土壤取樣:富含纖維素富含纖維素的環(huán)境(樹林中多年落葉形成的環(huán)境(樹林中多年落葉形成的腐殖土,多年積累的枯枝敗葉等)的腐殖土,多年積累的枯枝敗葉等)操作步驟操作步驟討論討論:如果找不到合適的環(huán)境,可以將濾紙如果找不到合適的環(huán)境,可以將濾紙埋在土壤中,將濾紙埋在土壤中有什么作用?埋在土壤中,將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋在土壤中多深?你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋在土壤中多深?將濾紙埋在土壤中能將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對集中使纖維素分解菌相對集中,實際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一實際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將濾紙埋于般應(yīng)將濾紙埋于深約深約10cm10cm左右的土壤中。左右的土壤中。2 2、選擇培養(yǎng)、選擇培養(yǎng) 增加纖維素分解菌的濃度增加纖維素分解菌的濃度,以確保能夠從,以確保能夠從樣品中分離所需要的微生物。樣品中分離所需要的微生物。目的:目的:制備選擇培養(yǎng)基制備選擇培養(yǎng)基操作:操作:P29 培養(yǎng)基成分分析培養(yǎng)基成分分析培養(yǎng)基組成培養(yǎng)基組成提供主要的營養(yǎng)物質(zhì)提供主要的營養(yǎng)物質(zhì)纖維素粉纖維素粉 5g碳源(能源)碳源(能源)NaNO3 1g氮源、無機(jī)鹽氮源、無機(jī)鹽KCl 0.5g Na2HPO47H2O 1.2gKH2PO4 0.9g MgSO4 7H2O 0.5g無機(jī)鹽無機(jī)鹽酵母膏酵母膏 0.5g生長因子、碳源、氮源生長因子、碳源、氮源水解酵素水解酵素 0.5g氮素、生長因子氮素、生長因子溶解后,蒸餾水定容至溶解后,蒸餾水定容至1000mL水水提示:提示:自變量為培養(yǎng)基的種類,即自變量為培養(yǎng)基的種類,即完全培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基。完全培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基。可用可用完全培養(yǎng)基做對照完全培養(yǎng)基做對照,或?qū)⒗w維素改為葡萄糖?;?qū)⒗w維素改為葡萄糖。A A A A、旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基?為什么?、旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基?為什么?、旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基?為什么?、旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基?為什么?是是是是液體液體液體液體培養(yǎng)基,原因是配方中培養(yǎng)基,原因是配方中培養(yǎng)基,原因是配方中培養(yǎng)基,原因是配方中無凝固劑無凝固劑無凝固劑無凝固劑(瓊脂)(瓊脂)(瓊脂)(瓊脂)B B B B、這個培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用?如果具有,、這個培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用?如果具有,、這個培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用?如果具有,、這個培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用?如果具有,是如何進(jìn)行選擇的?是如何進(jìn)行選擇的?是如何進(jìn)行選擇的?是如何進(jìn)行選擇的?有有選擇作用,本配方中選擇作用,本配方中纖維素作為主要碳源纖維素作為主要碳源,只有能,只有能分解纖維素的微生物可以大量繁殖。分解纖維素的微生物可以大量繁殖。C C C C、你能否設(shè)計一個對照實驗,說明選擇培養(yǎng)基的作用、你能否設(shè)計一個對照實驗,說明選擇培養(yǎng)基的作用、你能否設(shè)計一個對照實驗,說明選擇培養(yǎng)基的作用、你能否設(shè)計一個對照實驗,說明選擇培養(yǎng)基的作用 說明:說明:分析分析“纖維素分解菌的選擇纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基配方培養(yǎng)基配方”可知,該配方中的可知,該配方中的酵母膏也酵母膏也能夠提供少量的碳源能夠提供少量的碳源,因此其他微生物也,因此其他微生物也能在該培養(yǎng)基中生長繁殖。但因酵母膏的能在該培養(yǎng)基中生長繁殖。但因酵母膏的含量極少,因此,只有以纖維素為碳源的含量極少,因此,只有以纖維素為碳源的微生物才能大量繁殖。微生物才能大量繁殖。在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠能夠適應(yīng)適應(yīng)該營養(yǎng)條件該營養(yǎng)條件的微生物的微生物得到得到迅速迅速繁殖繁殖,而那些,而那些不適應(yīng)不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被生物的繁殖被抑制抑制,因此可以起到,因此可以起到“濃濃縮縮”的作用。的作用。為什么選擇培養(yǎng)能夠為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮濃縮”所需微生物?所需微生物?按照課題按照課題1 1的稀釋操作方法,將選擇培養(yǎng)后的稀釋操作方法,將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋的培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋10101 110107 7倍。倍。3.3.梯度稀釋梯度稀釋1011021031041051064.4.將樣品涂布到將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上的培養(yǎng)基上(1 1)制備)制備鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基P29P29(2 2)涂布平板:)涂布平板:將稀釋度為將稀釋度為10104 410106 6的菌懸液各取的菌懸液各取0.1ml0.1ml涂布到平板培養(yǎng)基上,涂布到平板培養(yǎng)基上,3030倒置培養(yǎng)倒置培養(yǎng)。培養(yǎng)基組成培養(yǎng)基組成提供的主要營養(yǎng)物質(zhì)提供的主要營養(yǎng)物質(zhì)CMC-Na 510g碳源碳源酵母膏酵母膏 1g碳源、氮源、生長因子碳源、氮源、生長因子KH2PO4 0.25g無機(jī)鹽無機(jī)鹽土豆汁土豆汁 100mL碳源、生長因子碳源、生長因子瓊脂瓊脂 15g凝固劑凝固劑上述物質(zhì)溶解后,加蒸餾上述物質(zhì)溶解后,加蒸餾水定容至水定容至1000mL氫元素、氧元素氫元素、氧元素鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基(水溶性羧甲基水溶性羧甲基纖維素鈉纖維素鈉)方法一:先方法一:先 ,再加入剛果紅進(jìn),再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)。行顏色反應(yīng)。方法二:在方法二:在 時就加入剛果紅。時就加入剛果紅。培養(yǎng)微生物培養(yǎng)微生物倒平板倒平板5.剛果紅染色法剛果紅染色法 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落挑選產(chǎn)生透明圈的菌落即為分解纖維素的菌落。即為分解纖維素的菌落。這兩種方法各有哪些優(yōu)點與不足?這兩種方法各有哪些優(yōu)點與不足?染色法染色法染色法染色法優(yōu)優(yōu)優(yōu)優(yōu)點點點點缺點缺點缺點缺點方法一方法一方法一方法一方法二方法二方法二方法二有透明圈的有透明圈的基基本本是能分解纖是能分解纖維素的微生物維素的微生物操作繁瑣操作繁瑣剛果紅會使菌落之間發(fā)生剛果紅會使菌落之間發(fā)生混雜混雜操作簡便不操作簡便不存在菌落混存在菌落混雜問題雜問題1.1.產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生淀粉酶的微生物也也產(chǎn)生產(chǎn)生模糊透明圈模糊透明圈2.2.有些微生物能降解色素有些微生物能降解色素,形成形成明顯的透明圈明顯的透明圈。方法一中方法一中NaCl溶液的作用?溶液的作用?思考:思考:漂洗作用漂洗作用,洗去與纖維素結(jié)合不牢的剛果紅,洗去與纖維素結(jié)合不牢的剛果紅,以免出現(xiàn)的透明圈不夠清晰以免出現(xiàn)的透明圈不夠清晰。用這方法可以判斷酶。用這方法可以判斷酶活力的大小,實際上剛果紅是結(jié)合到培養(yǎng)基的多糖活力的大小,實際上剛果紅是結(jié)合到培養(yǎng)基的多糖底物,但分解纖維素的細(xì)菌可以產(chǎn)生纖維素酶,能底物,但分解纖維素的細(xì)菌可以產(chǎn)生纖維素酶,能分解這個多糖底物成為單糖,這樣剛果紅就不能結(jié)分解這個多糖底物成為單糖,這樣剛果紅就不能結(jié)合上去了,氯化鈉溶液就可以使結(jié)合不牢的剛果紅合上去了,氯化鈉溶液就可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去,這樣就留下大大小小的透明圈,大的透明圈洗去,這樣就留下大大小小的透明圈,大的透明圈當(dāng)然分解纖維素的能力就強(qiáng)!當(dāng)然分解纖維素的能力就強(qiáng)!土壤土壤取樣取樣選擇選擇培養(yǎng)培養(yǎng)梯度梯度稀釋稀釋將樣品涂將樣品涂布到布到鑒別鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基挑選挑選菌落菌落什么什么樣的樣的環(huán)境環(huán)境取樣取樣?培養(yǎng)的培養(yǎng)的目的目的?選擇培養(yǎng)基的選擇培養(yǎng)基的特點特點?挑選什挑選什么樣的么樣的菌落菌落?鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基特點特點?如何鑒別如何鑒別?根據(jù)根據(jù):微生物:微生物對生存環(huán)境的對生存環(huán)境的要求,到相應(yīng)要求,到相應(yīng)環(huán)境中去找;環(huán)境中去找;增加纖維素分解菌增加纖維素分解菌濃度,濃度,確保能夠從確保能夠從樣品中分離到纖維樣品中分離到纖維素分解菌;素分解菌;液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基是固體是固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基剛果紅剛果紅染色法染色法實驗回顧實驗回顧挑選挑選有有透明圈透明圈的的菌落菌落 在在產(chǎn)生明顯的透明圈產(chǎn)生明顯的透明圈的菌落,挑的菌落,挑取并取并接種接種到纖維素分解菌的到纖維素分解菌的選擇培選擇培養(yǎng)基養(yǎng)基上,在上,在30300 0C C 37370 0C C培養(yǎng),可獲培養(yǎng),可獲得得純化培養(yǎng)純化培養(yǎng)。純化培養(yǎng)純化培養(yǎng)四、結(jié)果分析與評價 1.1.培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落出菌落 對照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長則說明對照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長則說明培養(yǎng)基制作合格。培養(yǎng)基制作合格。如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落,則說明可能獲得如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落,則說明可能獲得了分解纖維素的微生物。了分解纖維素的微生物。2.2.分離的結(jié)果是否一致分離的結(jié)果是否一致 由于在土壤中細(xì)菌的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌由于在土壤中細(xì)菌的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌的數(shù)量,因此最容易分離得到的是細(xì)菌。但由于所取土的數(shù)量,因此最容易分離得到的是細(xì)菌。但由于所取土樣的環(huán)境不同,不同同學(xué)也可能得到真菌和放線菌等不樣的環(huán)境不同,不同同學(xué)也可能得到真菌和放線菌等不同的分離結(jié)果。同的分離結(jié)果。為了確定分離得到的是纖維素分解菌,為了確定分離得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行還需要進(jìn)行_實驗,纖維素酶的實驗,纖維素酶的發(fā)酵方法有發(fā)酵方法有_ _ 發(fā)酵和發(fā)酵和_ _ 發(fā)酵。纖發(fā)酵。纖維素酶測定方法是對纖維素酶分解濾紙等纖維素酶測定方法是對纖維素酶分解濾紙等纖維素所產(chǎn)生的維素所產(chǎn)生的_ _ 含量進(jìn)行定量測定。含量進(jìn)行定量測定。發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶 液體液體 固體固體 葡萄糖葡萄糖 五、課題延伸思考:本實驗課題思考:本實驗課題2 2中的實驗流程有哪些異同?中的實驗流程有哪些異同?課題課題2 2將土樣梯度將土樣梯度稀釋液直接涂布稀釋液直接涂布在以尿素為在以尿素為唯一氮源的唯一氮源的選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基上,上,分離并統(tǒng)計分離并統(tǒng)計菌落。菌落。本課題本課題先選擇培養(yǎng)先選擇培養(yǎng),使使纖維素分解菌得到纖維素分解菌得到增殖增殖后,再后,再稀釋涂布在鑒別培養(yǎng)基稀釋涂布在鑒別培養(yǎng)基上,上,挑選挑選菌落。菌落。土壤土壤取樣取樣選擇選擇培養(yǎng)培養(yǎng)梯度梯度稀釋稀釋將樣品涂將樣品涂布到布到鑒別鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基挑選挑選菌落菌落什么什么樣的樣的環(huán)境環(huán)境取樣取樣?培養(yǎng)的目的培養(yǎng)的目的?選擇培養(yǎng)基的選擇培養(yǎng)基的特點特點?挑選什挑選什么樣的么樣的菌落菌落?鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基的特點的特點?如何鑒別如何鑒別?根據(jù)根據(jù):微生物:微生物對生存環(huán)境的對生存環(huán)境的要求,到相應(yīng)要求,到相應(yīng)環(huán)境中去找;環(huán)境中去找;目的:目的:增加纖維素增加纖維素分解菌的濃度,分解菌的濃度,以以確保能夠從樣品中確保能夠從樣品中分離到所需要的微分離到所需要的微生物;生物;剛果紅染色法剛果紅染色法分解分解纖維纖維素的素的微生微生物的物的分離分離纖維素酶纖維素酶種類、作用、催化活力種類、作用、催化活力剛果紅染色剛果紅染色篩選原理篩選原理實實驗驗設(shè)設(shè)計計土壤取樣土壤取樣選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)涂布培養(yǎng)涂布培養(yǎng)純化培養(yǎng)純化培養(yǎng)前置染色法前置染色法后置染色法后置染色法富含纖維素土壤富含纖維素土壤增大分解菌含量增大分解菌含量染色鑒別染色鑒別分離出分解菌分離出分解菌課堂總結(jié)DNA重組技術(shù)重組技術(shù)下列不屬于微生物的是下列不屬于微生物的是 ()A藍(lán)藻和蘑菇藍(lán)藻和蘑菇 B葫蘆蘚和鐵線蕨葫蘆蘚和鐵線蕨 C噬菌體和黃曲霉噬菌體和黃曲霉 D放線菌和變形蟲放線菌和變形蟲【解析解析】病毒、原核生物病毒、原核生物(例如細(xì)菌、放線菌、例如細(xì)菌、放線菌、支原體、藍(lán)藻支原體、藍(lán)藻)、真核類的藻類和真菌及原生、真核類的藻類和真菌及原生動物都是微生物。而一般多細(xì)胞的植物與動物動物都是微生物。而一般多細(xì)胞的植物與動物不屬于微生物,如葫蘆蘚是苔蘚植物,鐵線蕨不屬于微生物,如葫蘆蘚是苔蘚植物,鐵線蕨是蕨類植物,都屬于多細(xì)胞高等植物。是蕨類植物,都屬于多細(xì)胞高等植物?!敬鸢复鸢浮緽微生物營養(yǎng)物質(zhì)微生物營養(yǎng)物質(zhì)有關(guān)微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中,正確的是(有關(guān)微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中,正確的是()A是碳源的物質(zhì)不可能同時是氮源是碳源的物質(zhì)不可能同時是氮源 B凡碳源都提供能量凡碳源都提供能量C除水以外的無機(jī)物只提供無機(jī)鹽除水以外的無機(jī)物只提供無機(jī)鹽 D無機(jī)氮源也能提供能量無機(jī)氮源也能提供能量【解析解析】不同的微生物,所需營養(yǎng)物質(zhì)有較大差別,要針對微不同的微生物,所需營養(yǎng)物質(zhì)有較大差別,要針對微生物的具體情況具體分析。對于生物的具體情況具體分析。對于A、B選項,它的表述是不完選項,它的表述是不完整的。有的碳源只能是碳源,如整的。有的碳源只能是碳源,如CO2;有的碳源可同時是氮源,;有的碳源可同時是氮源,如如NH4HCO3;有的碳源同時是能源,如葡萄糖;有的碳源同;有的碳源同時是能源,如葡萄糖;有的碳源同時是氮源,還是能源,如蛋白胨。對于時是氮源,還是能源,如蛋白胨。對于C選項,除水以外的無選項,除水以外的無機(jī)物種類繁多,功能也多樣。如機(jī)物種類繁多,功能也多樣。如CO2可作自養(yǎng)型微生物的碳源;可作自養(yǎng)型微生物的碳源;NaHCO3可作自養(yǎng)型微生物的碳源和無機(jī)鹽;而可作自養(yǎng)型微生物的碳源和無機(jī)鹽;而NaCl則只能提則只能提供無機(jī)鹽。對于供無機(jī)鹽。對于D選項,無機(jī)氮源提供能量的情況還是存在的,選項,無機(jī)氮源提供能量的情況還是存在的,如如NH3可為硝化細(xì)菌提供能量和氮源??蔀橄趸?xì)菌提供能量和氮源。【答案答案】D微生物與病毒的關(guān)系微生物與病毒的關(guān)系關(guān)于病毒增殖的敘述中,正確的是(關(guān)于病毒增殖的敘述中,正確的是()A病毒侵入宿主細(xì)胞后,合成一種蛋白質(zhì)病毒侵入宿主細(xì)胞后,合成一種蛋白質(zhì) B病毒的繁殖只在宿主的活細(xì)胞中進(jìn)行病毒的繁殖只在宿主的活細(xì)胞中進(jìn)行C病毒的繁殖以核衣殼為單位病毒的繁殖以核衣殼為單位 D在普通的培養(yǎng)基上能培養(yǎng)病毒在普通的培養(yǎng)基上能培養(yǎng)病毒【解析解析】解答此題需從以下幾方面入手分析:首先,病毒是解答此題需從以下幾方面入手分析:首先,病毒是營寄生方式生活,必須生活在活的細(xì)胞內(nèi),不能獨立生活,營寄生方式生活,必須生活在活的細(xì)胞內(nèi),不能獨立生活,所以在普通的培養(yǎng)基上不能生活。第二,繁殖時,病毒的核所以在普通的培養(yǎng)基上不能生活。第二,繁殖時,病毒的核酸進(jìn)入宿主細(xì)胞,利用宿主的成分合成子代個體,除了核衣酸進(jìn)入宿主細(xì)胞,利用宿主的成分合成子代個體,除了核衣殼,還應(yīng)包括該病毒的其他結(jié)構(gòu)。合成的蛋白質(zhì)不只是一種,殼,還應(yīng)包括該病毒的其他結(jié)構(gòu)。合成的蛋白質(zhì)不只是一種,應(yīng)該是多種,包括多種結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)及物質(zhì)合成時所需的多種應(yīng)該是多種,包括多種結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)及物質(zhì)合成時所需的多種酶。酶?!敬鸢复鸢浮緽培養(yǎng)基的種類培養(yǎng)基的種類要從多種細(xì)菌中分離某種細(xì)菌,培養(yǎng)基要用(要從多種細(xì)菌中分離某種細(xì)菌,培養(yǎng)基要用()A加入青霉素的培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基 B加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基 C固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基 D液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基【解析解析】微生物的分離需使用固體培養(yǎng)基,由于某微生物的分離需使用固體培養(yǎng)基,由于某種細(xì)菌的種類不明,所以難以使用選擇培養(yǎng)基,如種細(xì)菌的種類不明,所以難以使用選擇培養(yǎng)基,如加入青霉素的培養(yǎng)基可以分離到酵母菌和霉菌,加加入青霉素的培養(yǎng)基可以分離到酵母菌和霉菌,加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基可以分離到金黃色葡萄球菌。入高濃度食鹽的培養(yǎng)基可以分離到金黃色葡萄球菌?!敬鸢复鸢浮緾微生物的計數(shù)微生物的計數(shù)產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是(產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是()A一個細(xì)菌,液體培養(yǎng)基一個細(xì)菌,液體培養(yǎng)基 B許多細(xì)菌,液體培養(yǎng)基許多細(xì)菌,液體培養(yǎng)基C一個細(xì)菌,固體培養(yǎng)基一個細(xì)菌,固體培養(yǎng)基 D許多細(xì)菌,固體培養(yǎng)基許多細(xì)菌,固體培養(yǎng)基【解析解析】菌落是一個或幾個細(xì)菌的子細(xì)胞群體,在菌落是一個或幾個細(xì)菌的子細(xì)胞群體,在固體培養(yǎng)基上,有一定的形態(tài)結(jié)構(gòu),肉眼可見,菌固體培養(yǎng)基上,有一定的形態(tài)結(jié)構(gòu),肉眼可見,菌落可作為菌種鑒別的重要依據(jù),而多種細(xì)菌形成的落可作為菌種鑒別的重要依據(jù),而多種細(xì)菌形成的菌落,就不可能有比較標(biāo)準(zhǔn)的形態(tài)。菌落,就不可能有比較標(biāo)準(zhǔn)的形態(tài)。【答案答案】C
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纖維素
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纖維素:棉花棉花是自然是自然界中纖維素界中纖維素含量最高的含量最高的天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物;纖維素是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì),植物每年產(chǎn)生的纖維素超過70億噸;分布植物的根、莖、葉中;1 1、在、在草食性動物等的消化道內(nèi)草食性動物等的消化道內(nèi),也,也共生有分解纖維素共生有分解纖維素的微生物的微生物,其原理也是產(chǎn)生纖維素酶而分解纖維素,其原理也是產(chǎn)生纖維素酶而分解纖維素,而人沒有分解纖維素的能力。而人沒有分解纖維素的能力。2 2、農(nóng)作物秸稈農(nóng)作物秸稈:米秸、麥秸、稻草、草、木屑米秸、麥秸、稻草、草、木屑米秸、麥秸、稻草、草、木屑米秸、麥秸、稻草、草、木屑 等富等富含大量的纖維素,被利用的機(jī)會很少、效率低;含大量的纖維素,被利用的機(jī)會很少、效率低;纖維素生物燃料:最有希望替代石油能源 科學(xué)家正致力于研究,怎樣將科學(xué)家正致力于研究,怎樣將農(nóng)業(yè)廢棄物、木材及生長更為迅農(nóng)業(yè)廢棄物、木材及生長更為迅速的草本植物,速的草本植物,轉(zhuǎn)化為種類繁多轉(zhuǎn)化為種類繁多的生物燃料的生物燃料(甚至是航空燃油)。(甚至是航空燃油)。課題課題3分解纖維素的微生物的分離分解纖維素的微生物的分離(一一)纖維素與纖維素酶纖維素與纖維素酶纖維素纖維素:一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物,一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物,廣泛地存在于植物的根、莖、葉等器官中。廣泛地存在于植物的根、莖、葉等器官中。纖維素酶纖維素酶:由微生物分泌的一種復(fù)合酶,包括由微生物分泌的一種復(fù)合酶,包括C C1 1酶酶、C Cx x酶和葡萄糖苷酶,由于它們的酶和葡萄糖苷酶,由于它們的協(xié)同作用協(xié)同作用,最終將纖維素分,最終將纖維素分解成葡萄糖。解成葡萄糖。纖維素纖維素C C C C1 1 1 1酶酶C C C Cx x x x酶酶纖維二糖纖維二糖葡萄糖葡萄糖苷苷 酶酶葡萄糖葡萄糖取二支取二支20mL20mL的試管的試管實驗:實驗:纖維素酶分解纖維素的實驗纖維素酶分解纖維素的實驗各加入一張濾紙條各加入一張濾紙條各加入各加入10mL0.1mol/L10mL0.1mol/L的醋酸的醋酸 醋酸鈉緩沖液醋酸鈉緩沖液甲甲 乙乙在甲試管中加入在甲試管中加入1mL1mL蒸餾水,蒸餾水,乙試管加入乙試管加入1mL1mL纖維素酶纖維素酶將試管放在將試管放在140r/min140r/min的搖床上振蕩的搖床上振蕩1h1h結(jié)果:乙試管的濾紙條消失結(jié)果:乙試管的濾紙條消失 討論討論:乙試管的濾紙條為什么會消失?甲試管的作用是什么?乙試管的濾紙條為什么會消失?甲試管的作用是什么?剛果紅染色法剛果紅染色法 剛果紅能剛果紅能與像纖維素的多糖形成紅色復(fù)合物與像纖維素的多糖形成紅色復(fù)合物,而而不與不與水解后的水解后的纖維二糖和葡萄糖纖維二糖和葡萄糖發(fā)生該反應(yīng)。發(fā)生該反應(yīng)。(二二)纖維素分解菌的篩選纖維素分解菌的篩選 用用加入剛果紅的纖維素培養(yǎng)基加入剛果紅的纖維素培養(yǎng)基去培養(yǎng)微生物去培養(yǎng)微生物時,如果培養(yǎng)基中出現(xiàn)時,如果培養(yǎng)基中出現(xiàn)以菌落為中心的透明圈時以菌落為中心的透明圈時,可說明該菌落可說明該菌落是纖維素分解菌是纖維素分解菌,因為它已將被剛,因為它已將被剛 果紅果紅 染成紅色的纖維素分解了。染成紅色的纖維素分解了。一、實一、實 驗驗 設(shè)設(shè) 計計 請你根據(jù)實驗流程圖和提供的三個資料以及請你根據(jù)實驗流程圖和提供的三個資料以及“操作提示操作提示”,在思考有關(guān)問題的基礎(chǔ)上,設(shè)計出一,在思考有關(guān)問題的基礎(chǔ)上,設(shè)計出一個詳細(xì)的實驗方案。個詳細(xì)的實驗方案。土壤取樣土壤取樣選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)梯度稀釋梯度稀釋 將樣品將樣品涂布在鑒別涂布在鑒別纖纖 維素分解菌的維素分解菌的培養(yǎng)基培養(yǎng)基上上 篩選產(chǎn)生篩選產(chǎn)生透透 明圈的明圈的菌落菌落*取樣環(huán)境取樣環(huán)境1 1、土壤取樣:、土壤取樣:富含纖維素富含纖維素的環(huán)境(樹林中多年落葉形成的環(huán)境(樹林中多年落葉形成的腐殖土,多年積累的枯枝敗葉等)的腐殖土,多年積累的枯枝敗葉等)操作步驟操作步驟討論討論:如果找不到合適的環(huán)境,可以將濾紙如果找不到合適的環(huán)境,可以將濾紙埋在土壤中,將濾紙埋在土壤中有什么作用?埋在土壤中,將濾紙埋在土壤中有什么作用?你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋在土壤中多深?你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋在土壤中多深?將濾紙埋在土壤中能將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解菌相對集中使纖維素分解菌相對集中,實際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一實際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將濾紙埋于般應(yīng)將濾紙埋于深約深約10cm10cm左右的土壤中。左右的土壤中。2 2、選擇培養(yǎng)、選擇培養(yǎng) 增加纖維素分解菌的濃度增加纖維素分解菌的濃度,以確保能夠從,以確保能夠從樣品中分離所需要的微生物。樣品中分離所需要的微生物。目的:目的:制備選擇培養(yǎng)基制備選擇培養(yǎng)基操作:操作:P29 培養(yǎng)基成分分析培養(yǎng)基成分分析培養(yǎng)基組成培養(yǎng)基組成提供主要的營養(yǎng)物質(zhì)提供主要的營養(yǎng)物質(zhì)纖維素粉纖維素粉 5g碳源(能源)碳源(能源)NaNO3 1g氮源、無機(jī)鹽氮源、無機(jī)鹽KCl 0.5g Na2HPO47H2O 1.2gKH2PO4 0.9g MgSO4 7H2O 0.5g無機(jī)鹽無機(jī)鹽酵母膏酵母膏 0.5g生長因子、碳源、氮源生長因子、碳源、氮源水解酵素水解酵素 0.5g氮素、生長因子氮素、生長因子溶解后,蒸餾水定容至溶解后,蒸餾水定容至1000mL水水提示:提示:自變量為培養(yǎng)基的種類,即自變量為培養(yǎng)基的種類,即完全培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基。完全培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基??捎每捎猛耆囵B(yǎng)基做對照完全培養(yǎng)基做對照,或?qū)⒗w維素改為葡萄糖。或?qū)⒗w維素改為葡萄糖。A A A A、旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基?為什么?、旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基?為什么?、旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基?為什么?、旁欄中的配方是液體培養(yǎng)基還是固體培養(yǎng)基?為什么?是是是是液體液體液體液體培養(yǎng)基,原因是配方中培養(yǎng)基,原因是配方中培養(yǎng)基,原因是配方中培養(yǎng)基,原因是配方中無凝固劑無凝固劑無凝固劑無凝固劑(瓊脂)(瓊脂)(瓊脂)(瓊脂)B B B B、這個培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用?如果具有,、這個培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用?如果具有,、這個培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用?如果具有,、這個培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用?如果具有,是如何進(jìn)行選擇的?是如何進(jìn)行選擇的?是如何進(jìn)行選擇的?是如何進(jìn)行選擇的?有有選擇作用,本配方中選擇作用,本配方中纖維素作為主要碳源纖維素作為主要碳源,只有能,只有能分解纖維素的微生物可以大量繁殖。分解纖維素的微生物可以大量繁殖。C C C C、你能否設(shè)計一個對照實驗,說明選擇培養(yǎng)基的作用、你能否設(shè)計一個對照實驗,說明選擇培養(yǎng)基的作用、你能否設(shè)計一個對照實驗,說明選擇培養(yǎng)基的作用、你能否設(shè)計一個對照實驗,說明選擇培養(yǎng)基的作用 說明:說明:分析分析“纖維素分解菌的選擇纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基配方培養(yǎng)基配方”可知,該配方中的可知,該配方中的酵母膏也酵母膏也能夠提供少量的碳源能夠提供少量的碳源,因此其他微生物也,因此其他微生物也能在該培養(yǎng)基中生長繁殖。但因酵母膏的能在該培養(yǎng)基中生長繁殖。但因酵母膏的含量極少,因此,只有以纖維素為碳源的含量極少,因此,只有以纖維素為碳源的微生物才能大量繁殖。微生物才能大量繁殖。在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些在選擇培養(yǎng)的條件下,可以使那些能夠能夠適應(yīng)適應(yīng)該營養(yǎng)條件該營養(yǎng)條件的微生物的微生物得到得到迅速迅速繁殖繁殖,而那些,而那些不適應(yīng)不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被生物的繁殖被抑制抑制,因此可以起到,因此可以起到“濃濃縮縮”的作用。的作用。為什么選擇培養(yǎng)能夠為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮濃縮”所需微生物?所需微生物?按照課題按照課題1 1的稀釋操作方法,將選擇培養(yǎng)后的稀釋操作方法,將選擇培養(yǎng)后的培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋的培養(yǎng)基進(jìn)行等比稀釋10101 110107 7倍。倍。3.3.梯度稀釋梯度稀釋1011021031041051064.4.將樣品涂布到將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上的培養(yǎng)基上(1 1)制備)制備鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基P29P29(2 2)涂布平板:)涂布平板:將稀釋度為將稀釋度為10104 410106 6的菌懸液各取的菌懸液各取0.1ml0.1ml涂布到平板培養(yǎng)基上,涂布到平板培養(yǎng)基上,3030倒置培養(yǎng)倒置培養(yǎng)。培養(yǎng)基組成培養(yǎng)基組成提供的主要營養(yǎng)物質(zhì)提供的主要營養(yǎng)物質(zhì)CMC-Na 510g碳源碳源酵母膏酵母膏 1g碳源、氮源、生長因子碳源、氮源、生長因子KH2PO4 0.25g無機(jī)鹽無機(jī)鹽土豆汁土豆汁 100mL碳源、生長因子碳源、生長因子瓊脂瓊脂 15g凝固劑凝固劑上述物質(zhì)溶解后,加蒸餾上述物質(zhì)溶解后,加蒸餾水定容至水定容至1000mL氫元素、氧元素氫元素、氧元素鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基(水溶性羧甲基水溶性羧甲基纖維素鈉纖維素鈉)方法一:先方法一:先 ,再加入剛果紅進(jìn),再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)。行顏色反應(yīng)。方法二:在方法二:在 時就加入剛果紅。時就加入剛果紅。培養(yǎng)微生物培養(yǎng)微生物倒平板倒平板5.剛果紅染色法剛果紅染色法 挑選產(chǎn)生透明圈的菌落挑選產(chǎn)生透明圈的菌落即為分解纖維素的菌落。即為分解纖維素的菌落。這兩種方法各有哪些優(yōu)點與不足?這兩種方法各有哪些優(yōu)點與不足?染色法染色法染色法染色法優(yōu)優(yōu)優(yōu)優(yōu)點點點點缺點缺點缺點缺點方法一方法一方法一方法一方法二方法二方法二方法二有透明圈的有透明圈的基基本本是能分解纖是能分解纖維素的微生物維素的微生物操作繁瑣操作繁瑣剛果紅會使菌落之間發(fā)生剛果紅會使菌落之間發(fā)生混雜混雜操作簡便不操作簡便不存在菌落混存在菌落混雜問題雜問題1.1.產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生淀粉酶的微生物也也產(chǎn)生產(chǎn)生模糊透明圈模糊透明圈2.2.有些微生物能降解色素有些微生物能降解色素,形成形成明顯的透明圈明顯的透明圈。方法一中方法一中NaCl溶液的作用?溶液的作用?思考:思考:漂洗作用漂洗作用,洗去與纖維素結(jié)合不牢的剛果紅,洗去與纖維素結(jié)合不牢的剛果紅,以免出現(xiàn)的透明圈不夠清晰以免出現(xiàn)的透明圈不夠清晰。用這方法可以判斷酶。用這方法可以判斷酶活力的大小,實際上剛果紅是結(jié)合到培養(yǎng)基的多糖活力的大小,實際上剛果紅是結(jié)合到培養(yǎng)基的多糖底物,但分解纖維素的細(xì)菌可以產(chǎn)生纖維素酶,能底物,但分解纖維素的細(xì)菌可以產(chǎn)生纖維素酶,能分解這個多糖底物成為單糖,這樣剛果紅就不能結(jié)分解這個多糖底物成為單糖,這樣剛果紅就不能結(jié)合上去了,氯化鈉溶液就可以使結(jié)合不牢的剛果紅合上去了,氯化鈉溶液就可以使結(jié)合不牢的剛果紅洗去,這樣就留下大大小小的透明圈,大的透明圈洗去,這樣就留下大大小小的透明圈,大的透明圈當(dāng)然分解纖維素的能力就強(qiáng)!當(dāng)然分解纖維素的能力就強(qiáng)!土壤土壤取樣取樣選擇選擇培養(yǎng)培養(yǎng)梯度梯度稀釋稀釋將樣品涂將樣品涂布到布到鑒別鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基挑選挑選菌落菌落什么什么樣的樣的環(huán)境環(huán)境取樣取樣?培養(yǎng)的培養(yǎng)的目的目的?選擇培養(yǎng)基的選擇培養(yǎng)基的特點特點?挑選什挑選什么樣的么樣的菌落菌落?鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基特點特點?如何鑒別如何鑒別?根據(jù)根據(jù):微生物:微生物對生存環(huán)境的對生存環(huán)境的要求,到相應(yīng)要求,到相應(yīng)環(huán)境中去找;環(huán)境中去找;增加纖維素分解菌增加纖維素分解菌濃度,濃度,確保能夠從確保能夠從樣品中分離到纖維樣品中分離到纖維素分解菌;素分解菌;液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基是固體是固體培養(yǎng)基培養(yǎng)基剛果紅剛果紅染色法染色法實驗回顧實驗回顧挑選挑選有有透明圈透明圈的的菌落菌落 在在產(chǎn)生明顯的透明圈產(chǎn)生明顯的透明圈的菌落,挑的菌落,挑取并取并接種接種到纖維素分解菌的到纖維素分解菌的選擇培選擇培養(yǎng)基養(yǎng)基上,在上,在30300 0C C 37370 0C C培養(yǎng),可獲培養(yǎng),可獲得得純化培養(yǎng)純化培養(yǎng)。純化培養(yǎng)純化培養(yǎng)四、結(jié)果分析與評價 1.1.培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選培養(yǎng)基的制作是否合格以及選擇培養(yǎng)基是否篩選出菌落出菌落 對照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長則說明對照的培養(yǎng)基在培養(yǎng)過程中沒有菌落生長則說明培養(yǎng)基制作合格。培養(yǎng)基制作合格。如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落,則說明可能獲得如果觀察到產(chǎn)生透明圈的菌落,則說明可能獲得了分解纖維素的微生物。了分解纖維素的微生物。2.2.分離的結(jié)果是否一致分離的結(jié)果是否一致 由于在土壤中細(xì)菌的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌由于在土壤中細(xì)菌的數(shù)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于真菌和放線菌的數(shù)量,因此最容易分離得到的是細(xì)菌。但由于所取土的數(shù)量,因此最容易分離得到的是細(xì)菌。但由于所取土樣的環(huán)境不同,不同同學(xué)也可能得到真菌和放線菌等不樣的環(huán)境不同,不同同學(xué)也可能得到真菌和放線菌等不同的分離結(jié)果。同的分離結(jié)果。為了確定分離得到的是纖維素分解菌,為了確定分離得到的是纖維素分解菌,還需要進(jìn)行還需要進(jìn)行_實驗,纖維素酶的實驗,纖維素酶的發(fā)酵方法有發(fā)酵方法有_ _ 發(fā)酵和發(fā)酵和_ _ 發(fā)酵。纖發(fā)酵。纖維素酶測定方法是對纖維素酶分解濾紙等纖維素酶測定方法是對纖維素酶分解濾紙等纖維素所產(chǎn)生的維素所產(chǎn)生的_ _ 含量進(jìn)行定量測定。含量進(jìn)行定量測定。發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶 液體液體 固體固體 葡萄糖葡萄糖 五、課題延伸思考:本實驗課題思考:本實驗課題2 2中的實驗流程有哪些異同?中的實驗流程有哪些異同?課題課題2 2將土樣梯度將土樣梯度稀釋液直接涂布稀釋液直接涂布在以尿素為在以尿素為唯一氮源的唯一氮源的選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基上,上,分離并統(tǒng)計分離并統(tǒng)計菌落。菌落。本課題本課題先選擇培養(yǎng)先選擇培養(yǎng),使使纖維素分解菌得到纖維素分解菌得到增殖增殖后,再后,再稀釋涂布在鑒別培養(yǎng)基稀釋涂布在鑒別培養(yǎng)基上,上,挑選挑選菌落。菌落。土壤土壤取樣取樣選擇選擇培養(yǎng)培養(yǎng)梯度梯度稀釋稀釋將樣品涂將樣品涂布到布到鑒別鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基挑選挑選菌落菌落什么什么樣的樣的環(huán)境環(huán)境取樣取樣?培養(yǎng)的目的培養(yǎng)的目的?選擇培養(yǎng)基的選擇培養(yǎng)基的特點特點?挑選什挑選什么樣的么樣的菌落菌落?鑒別培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基的特點的特點?如何鑒別如何鑒別?根據(jù)根據(jù):微生物:微生物對生存環(huán)境的對生存環(huán)境的要求,到相應(yīng)要求,到相應(yīng)環(huán)境中去找;環(huán)境中去找;目的:目的:增加纖維素增加纖維素分解菌的濃度,分解菌的濃度,以以確保能夠從樣品中確保能夠從樣品中分離到所需要的微分離到所需要的微生物;生物;剛果紅染色法剛果紅染色法分解分解纖維纖維素的素的微生微生物的物的分離分離纖維素酶纖維素酶種類、作用、催化活力種類、作用、催化活力剛果紅染色剛果紅染色篩選原理篩選原理實實驗驗設(shè)設(shè)計計土壤取樣土壤取樣選擇培養(yǎng)選擇培養(yǎng)涂布培養(yǎng)涂布培養(yǎng)純化培養(yǎng)純化培養(yǎng)前置染色法前置染色法后置染色法后置染色法富含纖維素土壤富含纖維素土壤增大分解菌含量增大分解菌含量染色鑒別染色鑒別分離出分解菌分離出分解菌課堂總結(jié)DNA重組技術(shù)重組技術(shù)下列不屬于微生物的是下列不屬于微生物的是 ()A藍(lán)藻和蘑菇藍(lán)藻和蘑菇 B葫蘆蘚和鐵線蕨葫蘆蘚和鐵線蕨 C噬菌體和黃曲霉噬菌體和黃曲霉 D放線菌和變形蟲放線菌和變形蟲【解析解析】病毒、原核生物病毒、原核生物(例如細(xì)菌、放線菌、例如細(xì)菌、放線菌、支原體、藍(lán)藻支原體、藍(lán)藻)、真核類的藻類和真菌及原生、真核類的藻類和真菌及原生動物都是微生物。而一般多細(xì)胞的植物與動物動物都是微生物。而一般多細(xì)胞的植物與動物不屬于微生物,如葫蘆蘚是苔蘚植物,鐵線蕨不屬于微生物,如葫蘆蘚是苔蘚植物,鐵線蕨是蕨類植物,都屬于多細(xì)胞高等植物。是蕨類植物,都屬于多細(xì)胞高等植物?!敬鸢复鸢浮緽微生物營養(yǎng)物質(zhì)微生物營養(yǎng)物質(zhì)有關(guān)微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中,正確的是(有關(guān)微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中,正確的是()A是碳源的物質(zhì)不可能同時是氮源是碳源的物質(zhì)不可能同時是氮源 B凡碳源都提供能量凡碳源都提供能量C除水以外的無機(jī)物只提供無機(jī)鹽除水以外的無機(jī)物只提供無機(jī)鹽 D無機(jī)氮源也能提供能量無機(jī)氮源也能提供能量【解析解析】不同的微生物,所需營養(yǎng)物質(zhì)有較大差別,要針對微不同的微生物,所需營養(yǎng)物質(zhì)有較大差別,要針對微生物的具體情況具體分析。對于生物的具體情況具體分析。對于A、B選項,它的表述是不完選項,它的表述是不完整的。有的碳源只能是碳源,如整的。有的碳源只能是碳源,如CO2;有的碳源可同時是氮源,;有的碳源可同時是氮源,如如NH4HCO3;有的碳源同時是能源,如葡萄糖;有的碳源同;有的碳源同時是能源,如葡萄糖;有的碳源同時是氮源,還是能源,如蛋白胨。對于時是氮源,還是能源,如蛋白胨。對于C選項,除水以外的無選項,除水以外的無機(jī)物種類繁多,功能也多樣。如機(jī)物種類繁多,功能也多樣。如CO2可作自養(yǎng)型微生物的碳源;可作自養(yǎng)型微生物的碳源;NaHCO3可作自養(yǎng)型微生物的碳源和無機(jī)鹽;而可作自養(yǎng)型微生物的碳源和無機(jī)鹽;而NaCl則只能提則只能提供無機(jī)鹽。對于供無機(jī)鹽。對于D選項,無機(jī)氮源提供能量的情況還是存在的,選項,無機(jī)氮源提供能量的情況還是存在的,如如NH3可為硝化細(xì)菌提供能量和氮源??蔀橄趸?xì)菌提供能量和氮源?!敬鸢复鸢浮緿微生物與病毒的關(guān)系微生物與病毒的關(guān)系關(guān)于病毒增殖的敘述中,正確的是(關(guān)于病毒增殖的敘述中,正確的是()A病毒侵入宿主細(xì)胞后,合成一種蛋白質(zhì)病毒侵入宿主細(xì)胞后,合成一種蛋白質(zhì) B病毒的繁殖只在宿主的活細(xì)胞中進(jìn)行病毒的繁殖只在宿主的活細(xì)胞中進(jìn)行C病毒的繁殖以核衣殼為單位病毒的繁殖以核衣殼為單位 D在普通的培養(yǎng)基上能培養(yǎng)病毒在普通的培養(yǎng)基上能培養(yǎng)病毒【解析解析】解答此題需從以下幾方面入手分析:首先,病毒是解答此題需從以下幾方面入手分析:首先,病毒是營寄生方式生活,必須生活在活的細(xì)胞內(nèi),不能獨立生活,營寄生方式生活,必須生活在活的細(xì)胞內(nèi),不能獨立生活,所以在普通的培養(yǎng)基上不能生活。第二,繁殖時,病毒的核所以在普通的培養(yǎng)基上不能生活。第二,繁殖時,病毒的核酸進(jìn)入宿主細(xì)胞,利用宿主的成分合成子代個體,除了核衣酸進(jìn)入宿主細(xì)胞,利用宿主的成分合成子代個體,除了核衣殼,還應(yīng)包括該病毒的其他結(jié)構(gòu)。合成的蛋白質(zhì)不只是一種,殼,還應(yīng)包括該病毒的其他結(jié)構(gòu)。合成的蛋白質(zhì)不只是一種,應(yīng)該是多種,包括多種結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)及物質(zhì)合成時所需的多種應(yīng)該是多種,包括多種結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)及物質(zhì)合成時所需的多種酶。酶?!敬鸢复鸢浮緽培養(yǎng)基的種類培養(yǎng)基的種類要從多種細(xì)菌中分離某種細(xì)菌,培養(yǎng)基要用(要從多種細(xì)菌中分離某種細(xì)菌,培養(yǎng)基要用()A加入青霉素的培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基 B加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基 C固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基 D液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基【解析解析】微生物的分離需使用固體培養(yǎng)基,由于某微生物的分離需使用固體培養(yǎng)基,由于某種細(xì)菌的種類不明,所以難以使用選擇培養(yǎng)基,如種細(xì)菌的種類不明,所以難以使用選擇培養(yǎng)基,如加入青霉素的培養(yǎng)基可以分離到酵母菌和霉菌,加加入青霉素的培養(yǎng)基可以分離到酵母菌和霉菌,加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基可以分離到金黃色葡萄球菌。入高濃度食鹽的培養(yǎng)基可以分離到金黃色葡萄球菌?!敬鸢复鸢浮緾微生物的計數(shù)微生物的計數(shù)產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是(產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是()A一個細(xì)菌,液體培養(yǎng)基一個細(xì)菌,液體培養(yǎng)基 B許多細(xì)菌,液體培養(yǎng)基許多細(xì)菌,液體培養(yǎng)基C一個細(xì)菌,固體培養(yǎng)基一個細(xì)菌,固體培養(yǎng)基 D許多細(xì)菌,固體培養(yǎng)基許多細(xì)菌,固體培養(yǎng)基【解析解析】菌落是一個或幾個細(xì)菌的子細(xì)胞群體,在菌落是一個或幾個細(xì)菌的子細(xì)胞群體,在固體培養(yǎng)基上,有一定的形態(tài)結(jié)構(gòu),肉眼可見,菌固體培養(yǎng)基上,有一定的形態(tài)結(jié)構(gòu),肉眼可見,菌落可作為菌種鑒別的重要依據(jù),而多種細(xì)菌形成的落可作為菌種鑒別的重要依據(jù),而多種細(xì)菌形成的菌落,就不可能有比較標(biāo)準(zhǔn)的形態(tài)。菌落,就不可能有比較標(biāo)準(zhǔn)的形態(tài)?!敬鸢复鸢浮緾
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